飲料中苯甲酸鈉急性毒性試驗

1、第六小組徐丹：資料文獻收集、撰寫實驗、討論雷維：資料文獻收集、撰寫實驗、討論陳果：PPT制作、討論龍囿秀：PPT制作、討論碳酸飲料中的苯甲酸鈉毒理學實驗設計苯甲酸鈉別名：安息香酸鈉化學式：C6H5CO2Na分子量：144理化性質:無色、無味片狀晶體化學結構:COONa食品工業(yè)用作食品防腐劑,用于醬油,醋,低鹽醬菜,果汁,果醬,果酒,罐頭食品,汽水,飲料糖漿,煙草等的防腐.醫(yī)藥工業(yè)用于制備安鈉咖鎮(zhèn)靜劑等藥物及用于中藥丸糖漿的防腐.制造染料工業(yè)的媒染劑,塑料工業(yè)的增塑劑以及用作香料工業(yè)的原料.作為化學試劑,用作血清膽紅素試驗的助溶劑.還用于防銹紙,乳膠漆,鞋油,膠水,織物的防腐和防霉. 1、實驗目

2、的 2、實驗原理 3、材料與方法 4、劑量設計與分組 5、操作步驟 6、實驗結果LD50 7、分析結果 8、文獻 實驗目地 1.掌握經(jīng)口染毒急性毒性實驗方法 2.求出苯甲酸鈉對大鼠的半數(shù)致死劑量（LD50）以初步估計苯甲酸鈉對人類毒害的危險性 3.觀察苯甲酸鈉對動物急性毒性作用機理及中毒反應特征、解剖大鼠研究其作用靶器官 4.闡明苯甲酸鈉的劑量反應關系并繪制量效反應關系曲線實驗原理 苯甲酸鈉親油性較大，易穿透細胞膜進入細胞體內，干擾細胞膜的通透性，抑制細胞膜對氨基酸的吸收；進入細胞體內電離酸化細胞內的堿儲，并抑制細胞的呼吸酶系的活性，阻止乙酰輔酶A縮合反應，從而起到食品防腐的目的。 苯甲酸鈉的

3、急性毒性較弱，但其在人體胃腸道的酸性環(huán)境下可轉化為毒性較強的苯甲酸，在人體代謝中通過CH6H5CO2H + OH- C6H5CO2- + H2O來調節(jié)人體PH，有可能引起胃腸功能減退，但人體在本身的代謝中可以產生這類物質，而多余的還要在肝臟中處理并排泄出去，增加了肝臟的負擔。材料與方法1.材料 1.1大鼠48只，雌雄各半(室溫，自由飲水攝食)，鼠籠，鼠糧 1.2受試化合物：苯甲酸鈉 1.3器材：灌胃針、酒精棉、100ml容量瓶若干、燒杯、分析天平2.方法 2.1選取大鼠隨機分組8-10只動物（雌雄各半） 2.2動物編號，稱重記錄 2.3大鼠經(jīng)口染毒劑量設計與分組 劑量設計：先查文獻中受試化合物

4、中受試化合物的LD50，以3倍之差的三個劑量組進行預實驗，每組3只動物，求出動物全活、全死劑量；在全活-全死劑量之間設56個劑量組，各組間距1.21.5等比級數(shù)設計劑量分組：查閱相關資料得到:口服- 大鼠LD50=4070mg/kg； 口服-小鼠LD50=2150mg/kg,將4070mg/kg安排在在第二組與第三組之間，設置1.5倍組距，分為4個劑量組，并計算出各劑量組濃度如下： 表1 苯甲酸鈉各劑量組濃度劑量組1234劑量（mg/kg）1808271360159157 根據(jù)1ml/100g的大鼠灌胃量，計算4個劑量組的灌胃藥物濃度，并配置出相應濃度的試液。表2 各劑量組含藥量計算方法：（以

5、1808mg/kg為例）1ml/100g 10ml/kg 1808mg/10ml 1.808g/10ml 1808mg/kg劑量組陰性對照1234陽性對照劑量（mg/kg）藥量（g/10ml）0018081.080827132.71360156.01591579.157LD100 步驟步驟 操作操作大鼠編號稱重、隨機分組計算灌胃量 大鼠灌胃觀察并記錄大鼠中毒反應癥狀死亡動物解剖觀察，記錄病理變化實驗結果及數(shù)據(jù)分析 急性毒性實驗原始記錄 中毒癥狀：主要表現(xiàn)為震顫、出汗、共濟失調、抽搐、畏光、呼吸緊促，死前表現(xiàn)為抽搐、呼吸困難，個別會出現(xiàn)口角出血。動物編號性別體重染毒量染毒時間體征及出現(xiàn)時間 死亡

6、時間73%82.1%78.42%表4 各劑量組大鼠死亡情況組別劑量（mg/kg）n死亡數(shù)pqpq陰性對照1234陽性對照01808271360159157LD100 p=pq=73%27%82.1%17.9%78.42%21.58%急性毒性分級標準級別大鼠口服LD50/(mg/kg)相當于人的致死劑量Mg/kgg/人極毒1500050000025001.計算LD50 按照寇式法， LD50值2.繪制劑量-反應關系曲線圖3.根據(jù)化學物經(jīng)口急性毒性分級標準 初步判斷出苯甲酸鈉的毒性級別，屬于 什么毒性物質。73%27%82.1%17.9%78.42%21.58%結果分析 按照寇式法，得出LD50，

7、根據(jù)化學物經(jīng)口急性毒性分級標準，初步判斷出苯甲酸鈉的毒性的級別。 經(jīng)文獻可知，中國規(guī)定苯甲酸鈉在飲料中的最大使用量為0.2g/kg，即一個60kg成年人每天喝一升飲料，苯甲酸鈉為200mg，假設每天攝入200mg苯甲酸鈉，若LD50大于成人每天攝入量的10倍，實驗就要進行第二階段；若LD50小于成人每天攝入量的10倍就只用做到急性毒性實驗?？尚行苑治觯?1、理論上可行 2、技術上可行 3、實驗上可行質量控制控制選擇偏倚 控制混雜偏倚分析討論優(yōu)點：操作簡單、實驗周期短、材料易得缺點：灌胃過程需要專業(yè)人員、缺乏重復 試驗， LD50的可信限范圍較大、不夠精確注意事項：1、設置陰性、陽性對照組2、灌胃防止損傷3、選健康大鼠4、在實驗設計中，應當嚴格遵守對照、隨機、重復和均衡四個基本原則參考文獻1、王思文,鞏江,高昂,趙婷,駱蓉芳,王芍,倪士峰,陳千良.防腐劑苯甲酸鈉的藥理及毒理學研究J. 安徽農業(yè)科學. 2010(30)2、好搜百科3、食品防腐劑苯甲酸鈉的毒理學研究實驗4、呂娜. 食品防腐劑苯甲酸鈉的急性毒性及致畸性試驗J. 毒理學雜志. 2006(05)5、苯甲酸鈉的國家標準2011（06）苯甲酸及其鈉鹽benzoic acid,sodium benzoate CNS 號17.001,17.002 INS 號