氣質(zhì)聯(lián)用儀法

1、氣質(zhì)聯(lián)用儀法GC-MS測定檀香籽精油揮發(fā)性成分1實驗試劑與儀器1.1實驗試劑迷迭香精油1.2實驗儀器氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀：安捷倫7890A/5975C-GC/MSD2實驗方法與原理2.1 儀器根本原理和應(yīng)用范圍質(zhì)譜法可以進(jìn)行有效的定性分析,但對復(fù)雜有機(jī)化合物的分析就顯得無能為力；而色譜法對有機(jī)化合物是一種有效的別離分析方法,特別適合于進(jìn)行有機(jī)化合物的定量分析,但定性分析那么比擬困難.因此,這兩者的有效結(jié)合必將為化學(xué)家及生物化學(xué)家提供一個進(jìn)行復(fù)雜有機(jī)化合物高效的定性、定量分析工具.像這種將兩種或兩種以上方法結(jié)合起來的技術(shù)稱之為聯(lián)用技術(shù),將氣相色譜儀和質(zhì)譜儀聯(lián)合起來使用的儀器叫做氣-質(zhì)聯(lián)用儀.氣質(zhì)聯(lián)

2、用儀是利用試樣中各組份在氣相和固定液兩相間的分配系數(shù)不同,當(dāng)汽化后的試樣被載氣帶入色譜柱中運(yùn)行時,組份就在其中的兩相間進(jìn)行反復(fù)屢次分配,由于固定相對各組份的吸附或溶解水平不同,因此各組份在色譜柱中的運(yùn)行速度就不同,經(jīng)過一定的柱長后,便彼此別離,按順序離開色譜柱進(jìn)入檢測器質(zhì)譜儀,產(chǎn)生的離子流訊號經(jīng)放大后,在記錄器上描繪出各組份的色譜峰.氣質(zhì)聯(lián)用儀的工作過程是高純載氣由高壓鋼瓶中流出,經(jīng)減壓閥降壓到所需壓力后,通過凈化枯燥管使載氣凈化,再經(jīng)穩(wěn)壓閥和轉(zhuǎn)子流量計后,以穩(wěn)定的壓力、恒定的速度流經(jīng)氣化室與氣化的樣品混合,將樣品氣體帶入色譜柱中進(jìn)行別離.別離后的各組分隨著載氣先后流入檢測器質(zhì)譜儀,然后載氣放

3、空.檢測器將物質(zhì)的濃度或質(zhì)量的變化轉(zhuǎn)變?yōu)橐欢ǖ碾娦盘?經(jīng)放大后在記錄儀上記錄下來,就得到色譜流出曲線.根據(jù)色譜流出曲線上得到的每個峰的保存時間,可以進(jìn)行定性分析,根據(jù)峰面積或峰高的大小,可以進(jìn)行定量分析.2.2 定性分析原理將待測物質(zhì)的譜圖與譜庫中的譜圖比照定性.2.3 定量分析原理相對定量方法峰面積歸一法：由氣質(zhì)聯(lián)用儀得到的總離子色譜圖或質(zhì)量色譜圖,其色譜峰面積與相應(yīng)組分含量成正比,可對某一組分進(jìn)行相對定量.絕對定量法標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)定法：配制一組適宜濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品,在最正確測定條件下,由低濃度到高濃度依次測定它們的吸光度A,以吸光度A對濃度C作圖得A-C標(biāo)準(zhǔn)曲線.在相同的測定條件下,測定未知樣品

4、的吸光度,從A-C標(biāo)準(zhǔn)曲線上用內(nèi)插法求出未知樣品中被測元素的濃度.3、實驗步驟3.1 香精油提取索氏提取檀香種子油脂,經(jīng)甲酯化處理后上GC-MS檢測脂肪酸組成.3.2 使用GC-MS勺步驟順序3.2.1 開、關(guān)機(jī)順序開機(jī)：通氮氣-開電源-設(shè)置溫度柱箱、汽化-加熱-通空氣、氫氣-點火-調(diào)準(zhǔn)基線-進(jìn)樣關(guān)機(jī)：關(guān)氫氣、空氣-關(guān)掉加熱器-通者氮氣降溫至室溫-關(guān)電源-關(guān)氮氣3.2.2 溫度設(shè)定1柱溫設(shè)定范圍：-99C399C、進(jìn)樣器溫度設(shè)定范圍：099C2了解溫度設(shè)定情況3監(jiān)測實際溫度4設(shè)定溫度的啟動和停止3.2.3檢測器1 選擇檢測器,2 設(shè)置檢測器量程3 .2.4分析當(dāng)柱溫箱、汽化室溫度設(shè)定好后,按S

5、TARTS,開始升溫到設(shè)定的溫度.當(dāng)柱室溫度到達(dá)所設(shè)定溫度土1C以內(nèi)時,READYT亮.但因溫度穩(wěn)定到達(dá)所設(shè)定值之前,會略有波動,REDAYT會閃爍一、二次,但很快就會穩(wěn)定.當(dāng)柱箱和汽化室溫度到達(dá)設(shè)定的溫度時,就可以進(jìn)樣分析了.分析條件：(1)氣相色譜條件：色譜柱DB-5,前進(jìn)樣口溫度：270C,升溫程序為：50C保持1分鐘,以5C/min速率升溫到200c保持3min,整個程序為34min,分流比為40:1.(2)質(zhì)譜條件：四級桿溫度：150C,離子源(EI):70ev,230S.4 .2.5數(shù)據(jù)處理所得譜圖經(jīng)譜庫檢索結(jié)合手工檢索,并查閱有關(guān)資料進(jìn)行精油組分定性4實驗結(jié)果豐度_GCMS_SM

6、TTIC:五班一組.Ddata.ms時間->編號保存時間tR/min化合物(Compound)分子式(MolecularFormular)質(zhì)量分?jǐn)?shù)RelativeContent/%120.940(Z)-十六烯酸甲酯Ci8H38O4S.Na0.10221.459十六烷酸甲酯Ci7H34O21.30324.67310,13-十八碳二烯酸甲酯C19H34O20.27424.847油酸甲酯C19H36.212.88524.906反-9-十八烯酸甲酯C19H36O20.36625.126反-13-十八碳烯酸甲酯C17H28.20.07725.261硬脂酸甲酯C19H38.21.43825.4679

7、-快十八酸甲酯C19H34O22.04925.554順式-十八碳烯酸C18H34.20.191025.655(Z,Z)-9,21-十八碳二烯酸甲酯C19H34O20.571127.3682,2,1庚烷C10H1645.841227.925花生四烯酸C20H32O21.241328.580Methl9,10-epoxyoctadecanoateC19H36O30.431428.761cis-11-Eicosenoicacid,methlesterC21H40O20.461528.809Methl8,10-octadecadiynoateC18H28.20.351628.987Methl10,12

8、-octadecadiynoateC18H28.21.481729.168C16H32.30.059-笠型1J±舐畋中即1829.5448,11-二十碳二烯酸甲酯C21H38O20.331930.791Naphthalene,decahydro-1,1-dimethyC21H38O20.102031.0871,3-Cyclododecadiene,(E,Z)-Methloctadeca-9-yn-11-trans-enoateC12H200.125實驗討論從檀香籽精油中共檢出20種成分,主要為酯類.通過色譜圖,可以看到本次實驗的別離度較高,能夠大致實現(xiàn)各種物質(zhì)的別離.含量最多的是27

9、.368分鐘出峰的Methloctadeca-9-yn-11-trans-enoate,占至U45.84%,其次是24.847分鐘出峰的油酸甲酯,占到12.88%.通過本次實驗,我們了解到氣質(zhì)聯(lián)用儀結(jié)合了質(zhì)譜法可以進(jìn)行定性分析、色譜法可以有效地定量分析的優(yōu)點,實現(xiàn)了能夠同時進(jìn)行定量與定性分析的特點.聽師兄介紹,本次實驗所用的方法是師姐進(jìn)行過優(yōu)化的,因此才可以實現(xiàn)方便快捷,且能夠?qū)⒚糠N物質(zhì)大致分開.我們也了解到,摸條件的過程是未知、漫長的.我也了解到GC-MS寸于進(jìn)樣有著很高的要求,進(jìn)樣量不能太小大于檢測限,也不能太大會使峰型拖尾,而且進(jìn)樣速度要快.而本次實驗得出的色譜圖,根本無拖尾,每個峰都非

10、常規(guī)那么.本次實驗中別離室通過程序升溫,使溫度逐漸上升,到達(dá)用最短時間獲得最正確別離的目的.在后期,在查詢物質(zhì)CAS號時,我發(fā)現(xiàn)許多物質(zhì)的中文名是無法查閱出來的可能是自己不太會查,因此感到比擬困惑.5.1 氣質(zhì)聯(lián)用的優(yōu)越性表達(dá)在哪里氣質(zhì)聯(lián)用儀結(jié)合了氣相色譜法和質(zhì)譜法分析的優(yōu)點,并互相彌補(bǔ)了各自的缺陷,可以進(jìn)行定性、定量分析.質(zhì)譜法可以進(jìn)行有效的定性分析,但無法分析過于復(fù)雜的有機(jī)化合物；而色譜法對有機(jī)化合物是一種有效的別離分析方法,特別適合于進(jìn)行有機(jī)化合物的定量分析,但定性分析那么比擬困難.因此,這兩者的有效結(jié)合必將為化學(xué)家及生物化學(xué)家提供一個進(jìn)行復(fù)雜有機(jī)化合物高效的定性、定量分析工具.5.2 氣相色譜的別離主要作用部位是什么如何實現(xiàn)的氣相色譜的別離主要在色譜柱上,色譜柱分為填充柱和毛細(xì)管柱.當(dāng)流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時,其與固定相發(fā)生相互作用.由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異,與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強(qiáng)弱不同,隨著流動相的移動,混合物在兩相間經(jīng)過反復(fù)屢次的分配平衡,使得各組分被周定