菌落總數(shù)和大腸菌群

1、菌落總數(shù)和大腸菌群微微 生生 物物 檢檢 驗驗 流流 程程 圖圖 無菌取樣 樣品均質 樣液稀釋菌落總數(shù)的測定菌落總數(shù)的測定 菌落總數(shù)是指食品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下培養(yǎng)后，所得1g或1mL檢樣中所含細菌菌落的總數(shù) 菌落總數(shù)的檢驗程序菌落總數(shù)的檢驗程序 樣品的處理和稀釋樣品的處理和稀釋充分振搖或研磨25g或25ml檢樣225mL稀釋液含有玻璃珠的滅菌玻璃瓶或乳缽1:10稀釋液。1ml1ml1ml9ml水1:1009ml水1:10009ml水1:10000倒平板熔化已滅菌的培養(yǎng)基并冷卻至45左右倒平板，每種培養(yǎng)基每個稀釋度各三只平板。 培養(yǎng)及計數(shù)培養(yǎng)及計數(shù)培養(yǎng)條件：倒置于371溫箱內(nèi)培養(yǎng)482h

2、。計數(shù)時間：到達規(guī)定培養(yǎng)時間，應立即計數(shù)。如果不能立即計數(shù)，應將平板放置于0-4，但不得超過24h。計平皿中菌落數(shù)：肉眼觀察，必要時用放大鏡檢查。記下各平板的菌落總數(shù)，求出同稀釋度的各平板平均菌落數(shù)。 大腸桿菌的檢測大腸桿菌的生物學特性大腸桿菌的生物學特性 大腸埃希氏菌習慣稱為大腸桿菌，分類于腸桿菌科，歸屬于埃希氏菌屬。 大腸桿菌為人和動物腸道中的常居菌，一般多不致病，在一定條件下可引起腸道外感染。 大腸桿菌的檢驗方法大腸桿菌的檢驗方法 檢驗程序檢驗程序乳糖發(fā)酵試驗乳糖發(fā)酵試驗分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)證實試驗證實試驗樣品稀釋后，選樣品稀釋后，選擇三個稀釋度，擇三個稀釋度，每個稀釋度接種每個稀釋度接種三

3、管乳糖膽鹽發(fā)三管乳糖膽鹽發(fā)酵管。酵管。361培培養(yǎng)養(yǎng)482h，觀察，觀察是否產(chǎn)氣。是否產(chǎn)氣。 將產(chǎn)氣發(fā)酵管培將產(chǎn)氣發(fā)酵管培養(yǎng)物轉種于伊紅養(yǎng)物轉種于伊紅美藍瓊脂平板上，美藍瓊脂平板上，361培養(yǎng)培養(yǎng)18-24h，觀察菌落形，觀察菌落形態(tài)。態(tài)。挑取平板上的可挑取平板上的可疑菌落，進行革疑菌落，進行革蘭氏染色觀察。蘭氏染色觀察。同時接種乳糖發(fā)同時接種乳糖發(fā)酵管酵管361培養(yǎng)培養(yǎng)242h，觀察產(chǎn)，觀察產(chǎn)氣情況。氣情況。 根據(jù)證實為根據(jù)證實為大腸桿菌陽大腸桿菌陽性的管數(shù)，性的管數(shù)，查查MPN表，表，報告每報告每100ml（g）大腸菌群的大腸菌群的MPN值。值。 取產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管取產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管中培養(yǎng)

4、液在伊紅美蘭中培養(yǎng)液在伊紅美蘭平板上進行劃線平板上進行劃線取有核心和帶金取有核心和帶金屬光澤的深紫色屬光澤的深紫色菌落進行革蘭氏菌落進行革蘭氏染色染色乳糖蛋白胨培養(yǎng)液乳糖蛋白胨培養(yǎng)液鏡檢（鏡檢（革蘭氏陰性菌革蘭氏陰性菌）37 培養(yǎng)培養(yǎng)48h證實產(chǎn)氣證實產(chǎn)氣（陽性）（陽性）結果與否結果與否37 培養(yǎng)培養(yǎng)24h37培養(yǎng)培養(yǎng)24h 乳糖膽鹽發(fā)酵管大腸桿菌（右管）產(chǎn)酸產(chǎn)氣 伊紅美藍平板分離分離將乳糖發(fā)酵陽性的乳糖膽鹽發(fā)酵管和增菌液分別劃線接種麥康凱或伊紅美藍瓊脂平板；污染嚴重的檢樣，可將檢樣勻液直接劃線接種麥康凱或伊紅美藍平板，于361培養(yǎng)1824h，觀察菌落。不但要注意乳糖發(fā)酵的菌落，同時也要注意乳糖不發(fā)酵和遲緩發(fā)酵的菌落。大腸桿菌在伊紅美藍瓊大腸桿菌在伊紅美藍瓊脂平板上脂平板上 麥康凱瓊脂平板麥康凱瓊脂平板EMB平板 取其產(chǎn)氣管的培養(yǎng)物劃線接種于伊紅美藍(EMB)平板，361培養(yǎng)242h。 檢查平板上有無具黑色中心有光澤或無光澤的典型菌落。 如有典型菌落，則從每個平板上至少挑取2個典型菌落；