草莓植物組織培養(yǎng)

1、草莓組織培養(yǎng)的影響因素淺析草莓組織培養(yǎng)的影響因素淺析 草莓作為一種經濟植物具有較高的應用價值草莓作為一種經濟植物具有較高的應用價值,利用植物組培得到草莓的脫毒茁利用植物組培得到草莓的脫毒茁,可以大大降低可以大大降低草莓種植過程中出現的品種老化和品質下降草莓種植過程中出現的品種老化和品質下降,明明顯提高經濟效益。顯提高經濟效益。 利用組培快繁技術還可從對草莓脫毒苗進行利用組培快繁技術還可從對草莓脫毒苗進行快速繁殖快速繁殖,出苗整齊出苗整齊,可進行周年生產可進行周年生產,不受季節(jié)不受季節(jié)限制限制,從而實現新品種的工廠化育苗。從而實現新品種的工廠化育苗。1 培養(yǎng)程序和培養(yǎng)基培養(yǎng)程序和培養(yǎng)基 5-6月

2、于晴天的下午在健壯、無病的草莓剛抽出的匍匐莖上取莖月于晴天的下午在健壯、無病的草莓剛抽出的匍匐莖上取莖尖，大小為尖，大小為03-04mm，作為組織培養(yǎng)的外植體。，作為組織培養(yǎng)的外植體。 用于草莓莖尖培養(yǎng)誘導芽分化的基本培養(yǎng)基為用于草莓莖尖培養(yǎng)誘導芽分化的基本培養(yǎng)基為MS，附加，附加6-BA05mg/L，NAA02mg/L，蔗糖，蔗糖30g/L，瓊脂粉，瓊脂粉65gL，pH值調至值調至58-60。 在草莓莖尖的擴大繁殖階段，采用在草莓莖尖的擴大繁殖階段，采用MS培養(yǎng)基附加培養(yǎng)基附加6-BA05mg/L、NAA001mg/L。 擴大繁殖主要是將叢生苗分塊即每擴大繁殖主要是將叢生苗分塊即每5-7株切

3、成一塊，轉入繼代培株切成一塊，轉入繼代培養(yǎng)基。在轉苗過程中，養(yǎng)基。在轉苗過程中，去掉原生葉片有利于新苗分化去掉原生葉片有利于新苗分化，在擴大繁殖在擴大繁殖中隨時清除愈傷組織，有利于新苗增殖和生長。中隨時清除愈傷組織，有利于新苗增殖和生長。 誘導生根培養(yǎng)基用誘導生根培養(yǎng)基用12MS附加不同濃度附加不同濃度IBA。 以以IBA01mg/L的濃度處理的生根率最高，的濃度處理的生根率最高，為為100，平均根條數為，平均根條數為24條。條。 不加不加IBA及及IBA濃度超過濃度超過02mg/L，多數，多數苗都是先于苗基切口處產生愈傷組織，隨后苗都是先于苗基切口處產生愈傷組織，隨后在愈傷組織上分化生根，致

4、使成活率大大降在愈傷組織上分化生根，致使成活率大大降低。低。 使用無土育苗基質，要求基質具有良好的保水保使用無土育苗基質，要求基質具有良好的保水保肥能力，透氣性能好，肥能力，透氣性能好，PH5.56.5，物理化學性質，物理化學性質穩(wěn)定，最好經過滅菌。穩(wěn)定，最好經過滅菌。 一般用一般用23種基質混合使用，如草炭、蛭石按體種基質混合使用，如草炭、蛭石按體積比積比21混合?；旌?。 在移苗前在移苗前1d，將混合好、已潤濕的基質裝入穴，將混合好、已潤濕的基質裝入穴盤，輕壓；用盤，輕壓；用1000倍的普力克澆透，以殺死基質倍的普力克澆透，以殺死基質中殘存的病原菌。第二天移苗時，基質含水量大約中殘存的病原菌

5、。第二天移苗時，基質含水量大約為為80%，即適合移苗。，即適合移苗。2操作技術要點及培養(yǎng)條件操作技術要點及培養(yǎng)條件 (1)滅菌與接種滅菌與接種 預處理預處理 滅菌徹底，常把接種材料先進行濕潤處理，使滅菌劑能順利地滲入材料?？捎枚喾N滅菌徹底，常把接種材料先進行濕潤處理，使滅菌劑能順利地滲入材料?？捎枚喾N濕潤劑，我們采用的是濕潤劑，我們采用的是75的酒精，濕潤的時間為半分鐘至的酒精，濕潤的時間為半分鐘至1分鐘。分鐘。 滅菌處理滅菌處理 在草莓組織培養(yǎng)中常用滅菌劑的種類很多。在草莓組織培養(yǎng)中常用滅菌劑的種類很多。用過次氯酸鈉用過次氯酸鈉10水溶液水溶液(含有含有效氯效氯04-05)，浸泡接種材料，浸

6、泡接種材料10-15分鐘；次氯酸鈣分鐘；次氯酸鈣(漂白粉漂白粉)，用其，用其飽和上清液，浸泡接種材料飽和上清液，浸泡接種材料15-30分鐘；過氧化氫分鐘；過氧化氫10-12水溶液浸泡水溶液浸泡10-20分鐘；新潔爾滅分鐘；新潔爾滅5-10水溶液，浸泡水溶液，浸泡10-15分鐘；升汞分鐘；升汞01水水溶液，浸泡溶液，浸泡8-10分鐘。其中前分鐘。其中前4種滅菌劑對接種材料比較安全，但因滅菌種滅菌劑對接種材料比較安全，但因滅菌時間較長，常常使接種材料的外層氧化變褐，以致影響培養(yǎng)效果。升汞有時間較長，常常使接種材料的外層氧化變褐，以致影響培養(yǎng)效果。升汞有很強的殺菌能力，但浸泡時間稍長會造成接種材料中

7、毒。因此，在草莓組很強的殺菌能力，但浸泡時間稍長會造成接種材料中毒。因此，在草莓組織培養(yǎng)中，如把握好時間，升汞是應用較多的滅菌劑。滅菌后的接種材料，織培養(yǎng)中，如把握好時間，升汞是應用較多的滅菌劑。滅菌后的接種材料，要用無菌水充分清洗，通常要換水要用無菌水充分清洗，通常要換水3-5次。次。 接種接種 以培養(yǎng)無病毒苗為主要目的的草莓組織培養(yǎng)，所接種的莖尖以培養(yǎng)無病毒苗為主要目的的草莓組織培養(yǎng)，所接種的莖尖材料很小，在接種時首先要求準確熟練地剝取莖尖生長點，并材料很小，在接種時首先要求準確熟練地剝取莖尖生長點，并使用固體培養(yǎng)基比較適宜，接種時應注意不能將整個莖尖埋入使用固體培養(yǎng)基比較適宜，接種時應注

8、意不能將整個莖尖埋入培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基須用培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基須用1-11大氣壓熱壓滅菌大氣壓熱壓滅菌20分鐘。分鐘。 從材料接種到生根苗長成，這期間的培養(yǎng)溫度一般應穩(wěn)定在從材料接種到生根苗長成，這期間的培養(yǎng)溫度一般應穩(wěn)定在252。每日光照。每日光照12小時，光強發(fā)小時，光強發(fā)2000Lx為宜。培養(yǎng)室溫度為宜。培養(yǎng)室溫度在在18-26范圍內，瓶苗可以正常生長及發(fā)根，范圍內，瓶苗可以正常生長及發(fā)根，但在但在28以上以上時，綠苗普遍變黃，生根率降低，根尖發(fā)黃老化，幼苗易產生時，綠苗普遍變黃，生根率降低，根尖發(fā)黃老化，幼苗易產生玻璃化現象。玻璃化現象。 對影響草莓組培繁殖系數的碳源因素進行了探對影響草莓組

9、培繁殖系數的碳源因素進行了探討研究。討研究。 結果顯示結果顯示:蔗糖和市售白砂糖為草莓組培快繁的蔗糖和市售白砂糖為草莓組培快繁的最佳碳源。最佳碳源。 恒溫培養(yǎng)恒溫培養(yǎng)26天天,繁殖系數均能達到繁殖系數均能達到15以上以上,從經濟從經濟角度考慮角度考慮,可以用白砂糖取代蔗糖可以用白砂糖取代蔗糖;用白砂糖作碳源用白砂糖作碳源,當濃度為當濃度為3時時,草莓脫毒組培苗的繁殖系數最高草莓脫毒組培苗的繁殖系數最高,長勢最好長勢最好。 用不同質量的有根或無根組培苗用不同質量的有根或無根組培苗(285.6mg、201.6mg、153.4mg)在在山皮土和合成土中進行扦插試驗結山皮土和合成土中進行扦插試驗結果表

10、明果表明,苗木質量越大苗木質量越大,成活率越高成活率越高;苗苗木質量相同時木質量相同時,在合成土中扦插成活在合成土中扦插成活率高率高.提高移栽成活率的關鍵提高移栽成活率的關鍵 選擇不定根直接生自莖基，根多且粗壯，葉片在選擇不定根直接生自莖基，根多且粗壯，葉片在3片以片以上，葉大、厚、深綠的生根苗，成活率普遍較高。上，葉大、厚、深綠的生根苗，成活率普遍較高。 栽培基質要用清水沖洗干凈，或用多菌靈或甲基托布津栽培基質要用清水沖洗干凈，或用多菌靈或甲基托布津摻拌滅菌，用煤渣作基質時，還要用摻拌滅菌，用煤渣作基質時，還要用02冰乙酸中和使冰乙酸中和使堿性降低。堿性降低。 移栽時采取移栽時采取“深栽淺埋深栽淺埋”。深栽就是在移栽時根要栽。深栽就是在移栽時根要栽得深，淺埋的標準是使小苗的根頸與土表平齊，或略高于得深，淺埋的標準是使小苗的根頸與土表平齊，或略高于土表。土表。 注意控制光照與溫度、濕度。小苗移栽后，放在溫室內注意控制光照與溫度、濕度。小苗移栽后，放在溫室內或塑料拱棚內培