緒論、紫外-可見分光光度法

1、關(guān)于儀器分析為什么要學(xué)習(xí)儀器分析？為什么要學(xué)習(xí)儀器分析？專業(yè)基礎(chǔ)；專業(yè)基礎(chǔ)； 考證需要；考證需要；工作需要工作需要。儀器分析簡介儀器分析簡介 儀器分析是分析化學(xué)的一部分，分析化學(xué)包括儀器分析是分析化學(xué)的一部分，分析化學(xué)包括化學(xué)分析和儀器分析?；瘜W(xué)分析是指利用化學(xué)反應(yīng)化學(xué)分析和儀器分析?；瘜W(xué)分析是指利用化學(xué)反應(yīng)及化學(xué)計量關(guān)系來確定被測物質(zhì)含量的一類分析方及化學(xué)計量關(guān)系來確定被測物質(zhì)含量的一類分析方法，測定時使用化學(xué)試劑、天平以及玻璃器皿，如法，測定時使用化學(xué)試劑、天平以及玻璃器皿，如滴定管、吸量管、燒杯、漏斗、坩堝等等滴定管、吸量管、燒杯、漏斗、坩堝等等。 儀器分析是根據(jù)物質(zhì)的物理和化學(xué)等性質(zhì)來

2、獲儀器分析是根據(jù)物質(zhì)的物理和化學(xué)等性質(zhì)來獲得物質(zhì)的組成、含量、結(jié)構(gòu)以及相關(guān)的信息。儀器得物質(zhì)的組成、含量、結(jié)構(gòu)以及相關(guān)的信息。儀器分析測量時使用各種價格較貴的特殊儀器，故稱為分析測量時使用各種價格較貴的特殊儀器，故稱為儀器分析。儀器分析。儀器分析學(xué)習(xí)哪些內(nèi)容？儀器分析學(xué)習(xí)哪些內(nèi)容？紫外紫外-可見分光光度法可見分光光度法原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法電位分析法電位分析法氣相色譜分析法氣相色譜分析法自學(xué)高效液相色譜法、離子色譜法、紅外吸收等光譜法自學(xué)高效液相色譜法、離子色譜法、紅外吸收等光譜法2. 儀器分析怎么學(xué)？儀器分析怎么學(xué)？ 以理論學(xué)習(xí)為基礎(chǔ)，注重實驗操作。以理論學(xué)習(xí)為基礎(chǔ)，注重實驗操

3、作。認(rèn)真聽課，積極思考，課后復(fù)習(xí)，認(rèn)真完成作業(yè)。認(rèn)真聽課，積極思考，課后復(fù)習(xí)，認(rèn)真完成作業(yè)。預(yù)習(xí)實驗，認(rèn)真聽講解，仔細(xì)操作，及時詢問，獨立完成實驗預(yù)習(xí)實驗，認(rèn)真聽講解，仔細(xì)操作，及時詢問，獨立完成實驗報告。報告。關(guān)于儀器分析儀器分析教學(xué)要求與考查方儀器分析教學(xué)要求與考查方式式平時作業(yè)平時作業(yè)10%（不少于（不少于5次）次）實驗實驗30%（6-7次）次）期末考查期末考查60%（第（第20周）周）緒論緒論0.1 儀器分析法及其特點儀器分析法及其特點儀器分析法是以測量物質(zhì)的物理和物理化學(xué)性質(zhì)為儀器分析法是以測量物質(zhì)的物理和物理化學(xué)性質(zhì)為基礎(chǔ)的分析方法基礎(chǔ)的分析方法.由于這類方法通常要使用比較由于這類

4、方法通常要使用比較特殊的儀器特殊的儀器,因而稱之為因而稱之為“儀器分析儀器分析”。特點：特點：操作簡便而快速，特別是對于含量低的組分的操作簡便而快速，特別是對于含量低的組分的測定。測定。易于實現(xiàn)自動化和智能化。易于實現(xiàn)自動化和智能化。1. 能提供化學(xué)分析法難以勝任的物質(zhì)的結(jié)構(gòu)、組能提供化學(xué)分析法難以勝任的物質(zhì)的結(jié)構(gòu)、組分價態(tài)、元素在微區(qū)的空間分布等諸多信息。分價態(tài)、元素在微區(qū)的空間分布等諸多信息。局限性：局限性：準(zhǔn)確度不夠高，但對于低含量的組分已完全滿準(zhǔn)確度不夠高，但對于低含量的組分已完全滿足要求。足要求。1. 儀器分析之前，通常需要用化學(xué)法對試樣進(jìn)行儀器分析之前，通常需要用化學(xué)法對試樣進(jìn)行預(yù)

5、處理，進(jìn)行儀器分析一般都要用化學(xué)法對試預(yù)處理，進(jìn)行儀器分析一般都要用化學(xué)法對試樣進(jìn)行定量工作曲線校準(zhǔn)，而很多標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)卻樣進(jìn)行定量工作曲線校準(zhǔn)，而很多標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)卻需要用化學(xué)分析法進(jìn)行準(zhǔn)確含量的測定。所以，需要用化學(xué)分析法進(jìn)行準(zhǔn)確含量的測定。所以，化學(xué)分析方法與儀器分析方法不可分隔?；瘜W(xué)分析方法與儀器分析方法不可分隔。0.2 儀器分析基本內(nèi)容和分類儀器分析基本內(nèi)容和分類光學(xué)分析法：利用物質(zhì)的光學(xué)分析法：利用物質(zhì)的光光化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行分析的一類方化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行分析的一類方法?？煞譃樵游展庾V法、紫外及可見吸收光譜法，法?？煞譃樵游展庾V法、紫外及可見吸收光譜法，紅外吸收光譜法、核磁共振波譜法。紅外吸收光

6、譜法、核磁共振波譜法。電化學(xué)分析法：利用物質(zhì)的電化學(xué)分析法：利用物質(zhì)的電電化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行分析的一類化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行分析的一類方法。方法。 電導(dǎo)法，電位滴定法，電位分析法，庫侖分析法。電導(dǎo)法，電位滴定法，電位分析法，庫侖分析法。色色譜分析法：利用物質(zhì)在兩相間的分配不同進(jìn)行分離分譜分析法：利用物質(zhì)在兩相間的分配不同進(jìn)行分離分析，可分為氣相色譜法，高效液相色譜法，離子色譜法。析，可分為氣相色譜法，高效液相色譜法，離子色譜法。其他分析法：質(zhì)荷比，質(zhì)譜法。其他分析法：質(zhì)荷比，質(zhì)譜法。分析儀器的組成儀器分析測定時使用各種類型的分析儀器。分析儀器自動化程度越高，儀器越復(fù)雜，然而不管分析儀器如何復(fù)雜，一般它們均由信

7、號發(fā)生器、檢測器、信號處理器和讀出裝置四個基本部分組成.0.3 發(fā)展中的儀器分析發(fā)展中的儀器分析方法的創(chuàng)新方法的創(chuàng)新. 靈敏度靈敏度,選擇性和準(zhǔn)確度在不斷的選擇性和準(zhǔn)確度在不斷的提高提高.選擇性檢測技術(shù)和多組分同時分析技術(shù)成選擇性檢測技術(shù)和多組分同時分析技術(shù)成為當(dāng)前研究的主要課題為當(dāng)前研究的主要課題.分析儀器的智能化分析儀器的智能化.新型動態(tài)分析檢測和非破壞性檢測新型動態(tài)分析檢測和非破壞性檢測多種方法的聯(lián)合使用多種方法的聯(lián)合使用1. 擴(kuò)展時空多維信息擴(kuò)展時空多維信息.1紫外紫外-可見分光光度法可見分光光度法比色分析法：利用比較待測溶液的本身的顏色比色分析法：利用比較待測溶液的本身的顏色或加入試

8、劑后呈現(xiàn)的顏色的深淺來測定溶液中或加入試劑后呈現(xiàn)的顏色的深淺來測定溶液中待測物質(zhì)的濃度的方法就稱為比色分析法待測物質(zhì)的濃度的方法就稱為比色分析法分光光度法：應(yīng)用分光光度計，根據(jù)物質(zhì)對不分光光度法：應(yīng)用分光光度計，根據(jù)物質(zhì)對不同波長的單色光的吸收程度不同而對物質(zhì)進(jìn)行同波長的單色光的吸收程度不同而對物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法稱為分光光度法。定性和定量分析的方法稱為分光光度法。特點：靈敏度高；具有相當(dāng)?shù)臏?zhǔn)確度；設(shè)備和特點：靈敏度高；具有相當(dāng)?shù)臏?zhǔn)確度；設(shè)備和操作簡單，價格低廉，分析速度快；應(yīng)用廣泛。操作簡單，價格低廉，分析速度快；應(yīng)用廣泛。分光光度計1紫外紫外-可見分光光度法可見分光光度法 1.1

9、基本原理基本原理 1.1.1 光的基本特性光的基本特性: 波粒二象性波粒二象性. 光是一種電磁波，具有波動性和離子光是一種電磁波，具有波動性和離子性。性。 電磁波譜：將各種電磁波（光）按其電磁波譜：將各種電磁波（光）按其波長或頻率大小順序排列畫成的圖表，波長或頻率大小順序排列畫成的圖表，則稱該圖表為電磁波譜。則稱該圖表為電磁波譜。單色光單色光 ：具有同一波長的光。：具有同一波長的光。 復(fù)合光：含有多種波長的光，如白復(fù)合光：含有多種波長的光，如白光。光。紫外光：波長小于紫外光：波長小于400nm的光的光 可見光可見光 ：能被肉眼感覺到的光：能被肉眼感覺到的光400780nm紅外光：波長大于紅外光

10、：波長大于780nm的光的光互補(bǔ)光：按一定強(qiáng)度混合可得到白互補(bǔ)光：按一定強(qiáng)度混合可得到白光，如綠色光與紫色光，藍(lán)色光與黃光，如綠色光與紫色光，藍(lán)色光與黃色光。色光。 1.1.2 物質(zhì)對光的選擇性吸收物質(zhì)對光的選擇性吸收 1.1.2.1 物質(zhì)顏色的產(chǎn)生物質(zhì)顏色的產(chǎn)生 白光通過某透明溶液時顏色變化出白光通過某透明溶液時顏色變化出現(xiàn)三種情況現(xiàn)三種情況: 無色無色, 黑色黑色, 互補(bǔ)色互補(bǔ)色.KMnO4K2CrO41.1.2.2 物質(zhì)的吸收光譜曲線物質(zhì)的吸收光譜曲線光吸收曲線光吸收曲線吸光度波長/nm 1.1.3 光吸收定律光吸收定律 1.1.3.1 朗伯朗伯-比爾定律比爾定律 A=Kbc A為吸光度

11、為吸光度, K 為比例常數(shù)為比例常數(shù), b為溶為溶液液層厚度液液層厚度(光程長度光程長度), c為溶液為溶液濃度濃度. 透射比透射比 0trbc百分透射比: T= tr / 0透射比倒數(shù): 1/T= 0 / tr 吸光度: lg (0 / tr) =A光吸收越多，透射比越小，吸光度越大。 1.1.3.2吸光系數(shù)吸光系數(shù) A=Kbc 其中其中, K 為吸光系數(shù)為吸光系數(shù) 摩爾吸光系數(shù)摩爾吸光系數(shù) A= bc 1.1.3.3吸光度的加和性吸光度的加和性 A總總= A1+A2+ An 1.1.3.4 偏離光吸收定律的主要因素偏離光吸收定律的主要因素 入射光的非單色性入射光的非單色性 溶液的化學(xué)因素溶

12、液的化學(xué)因素 比爾定律的局限性比爾定律的局限性1.2紫外可見分光光度計 1.2.1 儀器的基本組成部件儀器的基本組成部件光源光源單色器單色器樣品吸收池樣品吸收池檢測器檢測器信號顯示系統(tǒng)信號顯示系統(tǒng) 1.2.1.1 光源光源 可見光光源可見光光源: 鎢燈、鎢燈、 鹵鎢燈鹵鎢燈 紫外光光源紫外光光源: 氫、氘、氙放電燈等氫、氘、氙放電燈等 1.2.1.2 單色器單色器 單色器單色器狹 縫色散元件透鏡系統(tǒng)棱 鏡反射光柵 1.2.1.3 吸收池吸收池 比色皿比色皿 玻璃吸收池、石英吸收池玻璃吸收池、石英吸收池 使用注意事項使用注意事項： 1.2.1.4 檢測器檢測器 常用檢測器常用檢測器:光電池、光電

13、管、光電倍光電池、光電管、光電倍增管等。增管等。透明金屬膜金屬集電極半導(dǎo)體基體光電管1.2.2紫外-可見分光光度計的類型按使用波長分按使用波長分: 可見分光光度計可見分光光度計 400780nm 紫外可見分光光度計紫外可見分光光度計 2001000 nm按光路按光路: 單光束分光光度計單光束分光光度計 雙光束分光光度計雙光束分光光度計按波長數(shù)按波長數(shù):單波長分光光度計單波長分光光度計雙波長分光光度計雙波長分光光度計1.2.2.1單光束分光光度計單光束分光光度計(721 722)特點：結(jié)構(gòu)簡單、價格低，適用于定量分析。不足之處是誤差較大。特點：結(jié)構(gòu)簡單、價格低，適用于定量分析。不足之處是誤差較大

14、。一束光 1.2.2.2 雙光束分光光度計雙光束分光光度計特點：能連續(xù)改變波長，特點：能連續(xù)改變波長，自動比較樣品及參比溶液自動比較樣品及參比溶液的透光強(qiáng)度，自動消除光的透光強(qiáng)度，自動消除光源強(qiáng)度所引起的誤差。源強(qiáng)度所引起的誤差。 1.2.2.3 雙波長分光光度計雙波長分光光度計 1 2特點：不僅能測定高濃度試樣、多組特點：不僅能測定高濃度試樣、多組分試樣，并能測定渾濁試樣。日本島分試樣，并能測定渾濁試樣。日本島津津UV-300 UV3651.2.3常用紫外常用紫外-可見分光光度計的使用可見分光光度計的使用1.2.3.1 721型可見分型可見分光光度計光光度計調(diào)節(jié)器：調(diào)節(jié)器： 選擇波長選擇波長

15、電位器：調(diào)電位器：調(diào)0%T電位器：調(diào)電位器：調(diào)吸收池拉桿：將吸吸收池拉桿：將吸收池送入光路收池送入光路靈敏度選擇鈕靈敏度選擇鈕 ：調(diào)：調(diào)靈敏度靈敏度 電源開關(guān)：提供電源開關(guān)：提供穩(wěn)壓電源穩(wěn)壓電源吸收池暗箱蓋：接吸收池暗箱蓋：接光路閘門，只有調(diào)光路閘門，只有調(diào)和測量和測量時才關(guān)暗箱蓋。時才關(guān)暗箱蓋。顯示電表：標(biāo)有透顯示電表：標(biāo)有透射比和吸光度，射比和吸光度，測量時通常讀取吸測量時通常讀取吸光度的數(shù)值。光度的數(shù)值。使用方法：使用方法：接通電源開關(guān)，打開樣品室暗箱蓋，使電表接通電源開關(guān)，打開樣品室暗箱蓋，使電表指針處于指針處于“”位。預(yù)熱分鐘，再選擇位。預(yù)熱分鐘，再選擇波長和靈敏度檔，調(diào)波長和靈敏度

16、檔，調(diào)蓋上樣品室蓋，拉動吸收池拉桿，使參比溶蓋上樣品室蓋，拉動吸收池拉桿，使參比溶液池置于光路上，調(diào)節(jié)液池置于光路上，調(diào)節(jié)“”調(diào)節(jié)器，調(diào)節(jié)器，使電表指針指在。使電表指針指在。重復(fù)開蓋調(diào)零、關(guān)蓋調(diào)重復(fù)開蓋調(diào)零、關(guān)蓋調(diào)T100%關(guān)蓋、拉桿、讀數(shù)后開蓋關(guān)蓋、拉桿、讀數(shù)后開蓋清洗吸收池清洗吸收池關(guān)電關(guān)電實驗一、分光光度計的使用及光吸收曲線的繪制 儀器分析課件實驗一 分光光度計的使用.doc1.3 可見分光光度法實驗技術(shù)可見分光光度法實驗技術(shù)1.3.1 樣品的制備樣品的制備光譜分析通常是在溶液中進(jìn)行，固體樣品要轉(zhuǎn)光譜分析通常是在溶液中進(jìn)行，固體樣品要轉(zhuǎn)變?yōu)槿芤?。如變?yōu)槿芤骸Ｈ鏚MnO4水溶液水溶液無機(jī)試

17、樣要轉(zhuǎn)變?yōu)樗芤?，不能溶于水的轉(zhuǎn)變無機(jī)試樣要轉(zhuǎn)變?yōu)樗芤?，不能溶于水的轉(zhuǎn)變?yōu)樗崛芤?，或采用為酸溶液，或采用熔融法熔融法。如銅用稀硝酸溶解。如銅用稀硝酸溶解。有機(jī)樣品用有機(jī)溶劑溶解或抽提后，配成適于有機(jī)樣品用有機(jī)溶劑溶解或抽提后，配成適于測定的濃度范圍。測定的濃度范圍。所用的溶劑應(yīng)在測定波長下沒有明顯的吸收，所用的溶劑應(yīng)在測定波長下沒有明顯的吸收，揮發(fā)性小，不易燃，無毒性，價格便宜揮發(fā)性小，不易燃，無毒性，價格便宜。1.3.2 顯色條件的選擇顯色條件的選擇許多物質(zhì)本身無色或顏色很淺，對可見光不產(chǎn)生吸許多物質(zhì)本身無色或顏色很淺，對可見光不產(chǎn)生吸收或吸收不大，必須事先通過適當(dāng)?shù)氖栈蛭詹淮螅仨毷孪?/p>

18、通過適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)處理化學(xué)處理，使該，使該物質(zhì)轉(zhuǎn)變成物質(zhì)轉(zhuǎn)變成有色化合物有色化合物，再進(jìn)行光度測定。，再進(jìn)行光度測定。將待測組分轉(zhuǎn)變成有色化合物的反應(yīng)稱為將待測組分轉(zhuǎn)變成有色化合物的反應(yīng)稱為顯色反應(yīng)顯色反應(yīng)。與待測組分形成有色化合物的試劑稱為與待測組分形成有色化合物的試劑稱為顯色劑顯色劑。1.3.2.1 顯色反應(yīng)與顯色劑顯色反應(yīng)與顯色劑顯色反應(yīng)可為氧化還原反應(yīng)，配位反應(yīng)，或兼顯色反應(yīng)可為氧化還原反應(yīng)，配位反應(yīng)，或兼有上述兩種反應(yīng)，配位反應(yīng)最為普遍。有上述兩種反應(yīng)，配位反應(yīng)最為普遍。同一種化合物可與多種顯色劑反應(yīng)生成不同有同一種化合物可與多種顯色劑反應(yīng)生成不同有色物質(zhì)。選擇原則是：色物質(zhì)。選擇原則是

19、：選擇性好選擇性好。一種顯色劑最好只與一種被測組分。一種顯色劑最好只與一種被測組分起顯色反應(yīng)。起顯色反應(yīng)。靈敏度高。靈敏度高。生成的有色化合物摩爾吸光系數(shù)大。生成的有色化合物摩爾吸光系數(shù)大。生成的化合物組成恒定，性質(zhì)穩(wěn)定。生成的化合物組成恒定，性質(zhì)穩(wěn)定。如果顯色劑有色，要求有色化合物與顯色劑之如果顯色劑有色，要求有色化合物與顯色劑之間的顏色差別大。間的顏色差別大。顯色條件易于控制。顯色條件易于控制。常用顯色劑：常用顯色劑：無機(jī)顯色劑：無機(jī)顯色劑： 鐵鐵硫氰酸鹽硫氰酸鹽： 鉬 鎢鎢 鈮鈮紅橙黃黃氨水：氨水：銅銅鈷鈷鎳鎳藍(lán)紅紫有機(jī)顯色劑：有機(jī)顯色劑：與金屬離子形成的配合物穩(wěn)定性、靈敏度和與金屬離子

20、形成的配合物穩(wěn)定性、靈敏度和選擇性都比較高，種類也較多。選擇性都比較高，種類也較多?；腔畻钏幔夯腔畻钏幔篎e2+鄰菲羅啉：鄰菲羅啉：Fe2+ , Cu2+丁二酮肟：丁二酮肟：Ni結(jié)晶紫：結(jié)晶紫：Ca孔雀綠：孔雀綠：Ca二甲酚橙：二甲酚橙：Nb, Pb2+1.3.2.2 顯色條件的選擇顯色條件的選擇顯色劑用量：顯色劑用量：適當(dāng)過量。適當(dāng)過量。2. 溶液酸度：溶液酸度：通過實驗確定合適的酸度。通過實驗確定合適的酸度。酸度不同，生成的配合物顏色不同酸度不同，生成的配合物顏色不同酸度過高，降低配合物的穩(wěn)定性酸度過高，降低配合物的穩(wěn)定性酸度變化，顯色劑的顏色可能發(fā)生變化。酸度變化，顯色劑的顏色可能發(fā)

21、生變化。酸度過低，破壞有色配合物。酸度過低，破壞有色配合物。AAA3. 顯色溫度：顯色溫度：不同的顯色反應(yīng)對溫度要求不不同的顯色反應(yīng)對溫度要求不同，大多數(shù)在常溫下進(jìn)行。有些反應(yīng)必須在同，大多數(shù)在常溫下進(jìn)行。有些反應(yīng)必須在較高溫度下進(jìn)行。如硅鉬藍(lán)法測微量硅。較高溫度下進(jìn)行。如硅鉬藍(lán)法測微量硅。4. 顯色時間：顯色時間：包括顯色時間和穩(wěn)定時間。包括顯色時間和穩(wěn)定時間。ATT1T21.3.3 測量條件的選擇測量條件的選擇1.3.3.1 測定波長的選擇測定波長的選擇根據(jù)被測組分的吸收曲線，選擇最大吸收波長根據(jù)被測組分的吸收曲線，選擇最大吸收波長 max作為入射光波長，這樣靈敏度高，測量精度作為入射光波

22、長，這樣靈敏度高，測量精度高。當(dāng)有干擾存在時，可以選擇曲線中其他波長高。當(dāng)有干擾存在時，可以選擇曲線中其他波長進(jìn)行測定（曲線平坦處）。進(jìn)行測定（曲線平坦處）。A max噻菌靈光吸收曲線1.3.3.2 參比溶液的選擇參比溶液的選擇測量吸光度時，入射光的反射，以及溶劑、試劑測量吸光度時，入射光的反射，以及溶劑、試劑等對光的吸收會造成透射光通量的減弱。等對光的吸收會造成透射光通量的減弱。為使光能量的減弱僅與溶液中待測物質(zhì)的濃度有為使光能量的減弱僅與溶液中待測物質(zhì)的濃度有關(guān)，需要選擇合適組分的溶液作參比溶液。目的是關(guān)，需要選擇合適組分的溶液作參比溶液。目的是消除干擾，抵消吸收池和試劑對入射光的吸收。消

23、除干擾，抵消吸收池和試劑對入射光的吸收。參比溶液種類：參比溶液種類：溶劑參比：溶劑參比：當(dāng)試樣溶液中，僅有待測組分與顯當(dāng)試樣溶液中，僅有待測組分與顯色劑的反應(yīng)產(chǎn)物有吸收時，可采用溶劑作參比色劑的反應(yīng)產(chǎn)物有吸收時，可采用溶劑作參比溶液。溶液。(如氨水作顯色劑測定銅離子濃度如氨水作顯色劑測定銅離子濃度,用水作用水作參比參比.)試劑參比：試劑參比：如果顯色劑或其他試劑在測定波長如果顯色劑或其他試劑在測定波長有吸收，此時應(yīng)采用試劑參比溶液。按顯色反有吸收，此時應(yīng)采用試劑參比溶液。按顯色反應(yīng)相同條件，只是不加入試樣，同樣加入試劑應(yīng)相同條件，只是不加入試樣，同樣加入試劑和溶劑作為參比溶液。和溶劑作為參比溶

24、液。(結(jié)晶紫測鈣結(jié)晶紫測鈣)水與結(jié)晶紫水與結(jié)晶紫,含鈣試液參比：試液參比：將試液與顯色溶液作相同處理，將試液與顯色溶液作相同處理，只是不加顯色劑。只是不加顯色劑。不加顯色劑2. 褪色參比：褪色參比：在顯色液中加褪色劑，使已顯在顯色液中加褪色劑，使已顯色的產(chǎn)物褪色，褪色后的溶液作參比溶液。色的產(chǎn)物褪色，褪色后的溶液作參比溶液。1.3.3.3 吸光度測量范圍的選擇吸光度測量范圍的選擇實踐證明只有當(dāng)待測溶液濃度控制在適當(dāng)?shù)姆秾嵺`證明只有當(dāng)待測溶液濃度控制在適當(dāng)?shù)姆秶鷥?nèi)，由儀器測量引起的相對誤差才比較小，圍內(nèi)，由儀器測量引起的相對誤差才比較小，而在而在A=0.434時，相對而言誤差達(dá)到最小。時，相對而

25、言誤差達(dá)到最小。實際工作中，一般將吸光度控制在實際工作中，一般將吸光度控制在0.20.8范圍。范圍。為了使測量的吸光度在測量的范圍內(nèi)，可以調(diào)為了使測量的吸光度在測量的范圍內(nèi)，可以調(diào)節(jié)被測溶液的濃度使用厚度不同的吸收池等方節(jié)被測溶液的濃度使用厚度不同的吸收池等方法來達(dá)到目的。法來達(dá)到目的。1.3.4 共存離子的干擾和消除方法共存離子的干擾和消除方法干擾離子的影響干擾離子的影響共存離子本身具有顏色，共存離子本身具有顏色， 如如Fe3+、Ni2+ 、 Co2+ 、 Cu2+ 、 Cr3+等的存在影響被測離子等的存在影響被測離子的測定。的測定。共存離子與顯色劑或被測組分反應(yīng)，使顯共存離子與顯色劑或被測

26、組分反應(yīng)，使顯色劑或被測組分的濃度降低，妨礙顯色反色劑或被測組分的濃度降低，妨礙顯色反應(yīng)的完成，導(dǎo)致結(jié)果偏高。應(yīng)的完成，導(dǎo)致結(jié)果偏高。共存離子與顯色劑反應(yīng)生成有色化合物或共存離子與顯色劑反應(yīng)生成有色化合物或沉淀，導(dǎo)致測量結(jié)果偏高。沉淀，導(dǎo)致測量結(jié)果偏高。2 2、干擾的消除方法：、干擾的消除方法：控制溶液的酸度：以磺基水楊酸測定控制溶液的酸度：以磺基水楊酸測定FeFe3+3+時，消除時，消除CuCu2+2+干擾。干擾。加入掩蔽劑掩蔽干擾離子。要求不產(chǎn)生新的干擾。加入掩蔽劑掩蔽干擾離子。要求不產(chǎn)生新的干擾。常用掩蔽劑：常用掩蔽劑：KCNKCN、NHNH4 4F F酒石酸、草酸、檸檬酸、酒石酸、草酸

27、、檸檬酸、抗壞血酸?？箟难?。改變干擾離子的價態(tài)以消除干擾。用鉻菁改變干擾離子的價態(tài)以消除干擾。用鉻菁S S顯色顯色AlAl3+3+時，消除時，消除FeFe3+3+干擾。干擾。選擇合適的入射光波長消除干擾。選擇合適的入射光波長消除干擾。選擇合適的參比溶液。選擇合適的參比溶液。分離干擾離子。分離干擾離子。1.3.5.1單組分樣品的分析單組分樣品的分析單組分樣品，在最大吸收波長處，選用適當(dāng)單組分樣品，在最大吸收波長處，選用適當(dāng)?shù)膮⒈热芤?，測量試樣的吸光度，用工作曲的參比溶液，測量試樣的吸光度，用工作曲線法或比較法求得分析結(jié)果。線法或比較法求得分析結(jié)果。工作曲線法（標(biāo)準(zhǔn)曲線法）：工作曲線法（標(biāo)準(zhǔn)曲線

28、法）：制作方法制作方法:配制四個以上濃度不同的待測組配制四個以上濃度不同的待測組分的標(biāo)準(zhǔn)溶液，以空白溶液為參比溶液，在分的標(biāo)準(zhǔn)溶液，以空白溶液為參比溶液，在選定的波長下，分別測定各標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光選定的波長下，分別測定各標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度。以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為度。以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪制曲線，此曲線即為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪制曲線，此曲線即為工作曲線。工作曲線。1.3.5 定量方法定量方法1. 工作曲線法（標(biāo)準(zhǔn)曲線法）：工作曲線法（標(biāo)準(zhǔn)曲線法）：標(biāo)準(zhǔn)溶液（ug/mL）13579吸光度A0.1140.2120.335 0.434 0.6700.10.50.

29、313579濃度A在測定樣品時，應(yīng)按相同的方法制備待測試液，在相在測定樣品時，應(yīng)按相同的方法制備待測試液，在相同測量條件下測量試液的吸光度，然后在工作曲線上查同測量條件下測量試液的吸光度，然后在工作曲線上查出待測試樣濃度。出待測試樣濃度。為了保證測定準(zhǔn)確度，要求標(biāo)樣與試樣溶液的組成保為了保證測定準(zhǔn)確度，要求標(biāo)樣與試樣溶液的組成保持一致，待測試液的濃度應(yīng)在工作曲線線性范圍內(nèi)，最持一致，待測試液的濃度應(yīng)在工作曲線線性范圍內(nèi)，最好在工作曲線中部。好在工作曲線中部。工作曲線應(yīng)定期校準(zhǔn)，如果實驗條件變動，工作曲線工作曲線應(yīng)定期校準(zhǔn)，如果實驗條件變動，工作曲線應(yīng)重新繪制。應(yīng)重新繪制。如果實驗條件不變，那么

30、每次測量只要帶一個標(biāo)樣，如果實驗條件不變，那么每次測量只要帶一個標(biāo)樣，校驗一下實驗條件是否符合，就可直接用此工作曲線測校驗一下實驗條件是否符合，就可直接用此工作曲線測量試樣的含量。量試樣的含量。 工作曲線法定量注意事項工作曲線法定量注意事項:這種方法是用一個已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液（這種方法是用一個已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液（Cs），），在一定條件下，測得其吸光度在一定條件下，測得其吸光度As，然后在相同條件，然后在相同條件下測得試液下測得試液CX的吸光度的吸光度AX ；試樣、標(biāo)準(zhǔn)溶液完全；試樣、標(biāo)準(zhǔn)溶液完全符合朗伯符合朗伯-比爾定律，則比爾定律，則使用這方法要求：使用這方法要求： CX與與Cs濃度應(yīng)接近，

31、且都符合濃度應(yīng)接近，且都符合吸收定律。比較法適于個別樣品的測定。吸收定律。比較法適于個別樣品的測定。2 比較法比較法 CX = AX AsCs（1）標(biāo)準(zhǔn)溶液對純水要求比較高，配制用水在沒有）標(biāo)準(zhǔn)溶液對純水要求比較高，配制用水在沒有注明其他要求時，應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的二級水的注明其他要求時，應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的二級水的規(guī)格。規(guī)格。（2）配制標(biāo)準(zhǔn)溶液所用試劑的純度應(yīng)在分析純以上。）配制標(biāo)準(zhǔn)溶液所用試劑的純度應(yīng)在分析純以上。（3）配制標(biāo)準(zhǔn)溶液所用試劑的濃度都比較低，常以）配制標(biāo)準(zhǔn)溶液所用試劑的濃度都比較低，常以ug/mL 或或mg/mL 表示。應(yīng)先配成比使用的濃度高表示。應(yīng)先配成比使用的濃度高13個數(shù)量級的濃溶液作為儲務(wù)液，臨用前再進(jìn)行稀個數(shù)量級的濃溶液作為儲務(wù)液，臨用前再進(jìn)行稀釋。為了保證一定的準(zhǔn)確度，稀釋倍數(shù)高時應(yīng)采取釋。為了保證一定的準(zhǔn)確度，稀釋倍數(shù)高時應(yīng)采取逐級稀釋的做