生物安全柜的選擇使用及維護實用教案

1、目目 的的掌握生物安全柜的使用和維護掌握生物安全柜的使用和維護熟悉熟悉(shx)生物安全柜的檢測方法生物安全柜的檢測方法第1頁/共42頁第一頁，共42頁。需要需要(xyo)解決的六個問題解決的六個問題第2頁/共42頁第二頁，共42頁。選擇選擇(xunz)生物安全柜的理由生物安全柜的理由u工作對象具有生物危害工作對象具有生物危害u原代培養(yǎng)物、菌毒種以及原代培養(yǎng)物、菌毒種以及(yj)診斷性標(biāo)本等診斷性標(biāo)本等 -具具有潛在感染性的實驗材料有潛在感染性的實驗材料u屬于人間傳染的病原微生物名屬于人間傳染的病原微生物名錄中第一、二、三和四類微生錄中第一、二、三和四類微生物物第3頁/共42頁第三頁，共42頁

2、。人間傳染人間傳染(chunrn)的病原的病原微生物名錄微生物名錄第4頁/共42頁第四頁，共42頁。類與級對應(yīng)類與級對應(yīng)(duyng)表表-GB19489-2004實驗室生物安全通用(tngyng)要求第一類 第二類第三類第四類第5頁/共42頁第五頁，共42頁。選擇生物選擇生物(shngw)安全柜的理由安全柜的理由u容易產(chǎn)生氣溶膠的工作行為容易產(chǎn)生氣溶膠的工作行為u 對液體或半流體進行搖動、傾注或攪對液體或半流體進行搖動、傾注或攪拌操作時，拌操作時，u 將液體滴加到固體表面上或另一種液將液體滴加到固體表面上或另一種液體中時，體中時，u 在對瓊脂板劃線接種、用吸管接種細(xì)在對瓊脂板劃線接種、用吸管

3、接種細(xì)胞培養(yǎng)瓶，胞培養(yǎng)瓶，u 采用多道加樣器將感染性試劑的混懸采用多道加樣器將感染性試劑的混懸液轉(zhuǎn)移到微量培養(yǎng)板中，液轉(zhuǎn)移到微量培養(yǎng)板中，u 對感染性物質(zhì)進行勻漿及渦旋振蕩，對感染性物質(zhì)進行勻漿及渦旋振蕩，u 對感染性液體進行離心對感染性液體進行離心(lxn)，u 進行動物操作時。進行動物操作時。第6頁/共42頁第六頁，共42頁。選擇選擇(xunz)生物安全柜的理由生物安全柜的理由u生物安全柜能夠阻止工作中所產(chǎn)生的生物安全柜能夠阻止工作中所產(chǎn)生的氣溶膠對外環(huán)境或者氣溶膠對外環(huán)境或者(huzh)操作者操作者本身產(chǎn)生危害，還可以減少樣本之間本身產(chǎn)生危害，還可以減少樣本之間由于氣溶膠產(chǎn)生的交叉污染。

4、由于氣溶膠產(chǎn)生的交叉污染。第7頁/共42頁第七頁，共42頁。生物安全柜基本生物安全柜基本(jbn)工作原理工作原理l定向定向(dn xin)氣流：氣流：l 風(fēng)幕風(fēng)幕lHEPA濾器：濾器：l 一種一次性使用，一種一次性使用，l框架內(nèi)有多重褶迭框架內(nèi)有多重褶迭l的干性過濾材料的過濾器，對的干性過濾材料的過濾器，對0.3微米氣溶微米氣溶膠的過濾效膠的過濾效l能達到能達到99.97%。l 保證排出氣體和內(nèi)循環(huán)氣體的無菌狀態(tài)。保證排出氣體和內(nèi)循環(huán)氣體的無菌狀態(tài)。第8頁/共42頁第八頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的選擇安全柜的選擇要素：要素：樣品的生物危害樣品的生物危害第一第一(dy)、二、三

5、和四類病、二、三和四類病原微生物原微生物保護樣品保護樣品I級生物安全柜不保護樣品級生物安全柜不保護樣品其他其他是否涉及到揮發(fā)性、放射性是否涉及到揮發(fā)性、放射性核素或化學(xué)品核素或化學(xué)品第9頁/共42頁第九頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的選擇（一）安全柜的選擇（一）生物安全柜生物安全柜進風(fēng)面速率進風(fēng)面速率（m/s）氣流百分?jǐn)?shù)氣流百分?jǐn)?shù)排風(fēng)系統(tǒng)排風(fēng)系統(tǒng)重新循環(huán)重新循環(huán)部分部分排出部分排出部分 I 級級0.360100硬管硬管級級A1型型0.380.517030排到房間或套管排到房間或套管連接處連接處外排風(fēng)型外排風(fēng)型級級A2型型0.517030套管連接處套管連接處級級B1型型0.51307

6、0硬管硬管級級B2型型0.510100硬管硬管III級級不適用不適用0100硬管硬管第10頁/共42頁第十頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的選擇（二）安全柜的選擇（二）生物安全柜生物安全柜保護類型保護類型保護對象保護對象 I 級級第二、三和四類病原微生物；第二、三和四類病原微生物；揮發(fā)放射性核素?fù)]發(fā)放射性核素/化學(xué)品化學(xué)品操作者，環(huán)境操作者，環(huán)境級級A1型型第二、三和四類病原微生物第二、三和四類病原微生物操作者，環(huán)境和樣品操作者，環(huán)境和樣品外排風(fēng)型外排風(fēng)型級級A2型型第二、三和四類病原微生物；第二、三和四類病原微生物；痕量揮發(fā)放射性核素痕量揮發(fā)放射性核素/化學(xué)品化學(xué)品操作者，環(huán)境和樣

7、品操作者，環(huán)境和樣品級級B1型型第二、三和四類病原微生物；第二、三和四類病原微生物；少量揮發(fā)放射性核素少量揮發(fā)放射性核素/化學(xué)品化學(xué)品操作者，環(huán)境和樣品操作者，環(huán)境和樣品級級B2型型第二、三和四類病原微生物；第二、三和四類病原微生物；揮發(fā)放射性核素?fù)]發(fā)放射性核素/化學(xué)品化學(xué)品操作者，環(huán)境和樣品操作者，環(huán)境和樣品III級級第一、二、三和四類病原微生第一、二、三和四類病原微生物；揮發(fā)放射性核素物；揮發(fā)放射性核素/化學(xué)品化學(xué)品操作者，環(huán)境和樣品操作者，環(huán)境和樣品第11頁/共42頁第十一頁，共42頁。II級級A2型生物型生物(shngw)安全柜安全柜室內(nèi)空氣污染的空氣HEPA 濾過的空氣正壓污染空氣第

8、12頁/共42頁第十二頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的選擇（三）安全柜的選擇（三）l生物安全柜的寬度：工作需要；生物安全柜的寬度：工作需要；空間空間l費用：安全柜本身費用：安全柜本身(bnshn)；運輸費用；附件費用（支架，紫運輸費用；附件費用（支架，紫外燈，椅子等）；排風(fēng)和送風(fēng)系外燈，椅子等）；排風(fēng)和送風(fēng)系統(tǒng)：統(tǒng)： 風(fēng)機和管道（風(fēng)機和管道（II級級B2）l認(rèn)證：認(rèn)證：l NSF 49 美國美國l EN12469 歐歐洲洲l YY05692005 中國中國第13頁/共42頁第十三頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜放置安全柜放置l 五個遠(yuǎn)離點（氣流）五個遠(yuǎn)離點（氣流）l 門門

9、l 風(fēng)扇風(fēng)扇l 空調(diào)空調(diào)l 開著的窗戶開著的窗戶l 人員活動頻繁的區(qū)域人員活動頻繁的區(qū)域(qy)l 擺放要求擺放要求l 穩(wěn)固的平臺或支架穩(wěn)固的平臺或支架l 兩側(cè)、后面和上端留兩側(cè)、后面和上端留30cmAir Register設(shè)備首選位置候選位置工 作 臺設(shè)備視頻(shpn)第14頁/共42頁第十四頁，共42頁。反面反面(fnmin)教材(jioci)第15頁/共42頁第十五頁，共42頁。生物安全柜的使用生物安全柜的使用(shyng)要求要求個人防護要求個人防護要求柜內(nèi)物品的擺放柜內(nèi)物品的擺放紫外燈紫外燈明火明火工作前準(zhǔn)備工作前準(zhǔn)備(zhnbi)工作中操作及溢出處理工作中操作及溢出處理工作結(jié)束后

10、處理工作結(jié)束后處理第16頁/共42頁第十六頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用個人防護要求：個人防護要求： 在使用在使用(shyng)生物安全柜時生物安全柜時必須穿個人防護服，戴手套必須穿個人防護服，戴手套（手套應(yīng)套在隔離衣的外面）（手套應(yīng)套在隔離衣的外面）最好帶口罩和帽子，根據(jù)需要帶防最好帶口罩和帽子，根據(jù)需要帶防護眼罩或者面罩。護眼罩或者面罩。視頻(shpn)第17頁/共42頁第十七頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用生物安全柜內(nèi)物品擺放生物安全柜內(nèi)物品擺放(bi fn)原原則則按照從潔凈區(qū)到污染區(qū)的方向擺放按照從潔凈區(qū)到污染區(qū)的方向擺放(b

11、i fn)所有物品盡可能放在工作臺后部所有物品盡可能放在工作臺后部將廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤子以將廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤子以及吸濾瓶等體積較大的物品放在柜及吸濾瓶等體積較大的物品放在柜內(nèi)某一側(cè)內(nèi)某一側(cè)前進氣格柵不能被紙、儀器設(shè)備或者前進氣格柵不能被紙、儀器設(shè)備或者其他物品阻擋其他物品阻擋第18頁/共42頁第十八頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用潔凈區(qū)半污染區(qū)污染區(qū)第19頁/共42頁第十九頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用對紫外燈的三點要求：對紫外燈的三點要求：每周進行清潔，除去可能影響殺菌每周進行清潔，除去可能影響殺菌效果的灰塵和污垢效

12、果的灰塵和污垢每次生物安全柜的認(rèn)證，要檢查紫每次生物安全柜的認(rèn)證，要檢查紫外線強度，以確保有適當(dāng)?shù)墓獍l(fā)外線強度，以確保有適當(dāng)?shù)墓獍l(fā)射量射量房間中有人時一定要關(guān)閉紫外燈，房間中有人時一定要關(guān)閉紫外燈，以保護眼睛和皮膚以保護眼睛和皮膚(p f)，避，避免因不慎暴露而造成傷害免因不慎暴露而造成傷害第20頁/共42頁第二十頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用工作前需要準(zhǔn)備的內(nèi)容：工作前需要準(zhǔn)備的內(nèi)容： 首先紫外燈照射首先紫外燈照射30分鐘分鐘 關(guān)紫外燈，打開安全柜的日光燈和風(fēng)機關(guān)紫外燈，打開安全柜的日光燈和風(fēng)機(fn j)，用消毒劑對生物安全柜的內(nèi)，用消毒劑對生物安全柜的內(nèi)表面

13、進行消毒擦拭表面進行消毒擦拭 將實驗中需要用到的物品集中用消毒劑將實驗中需要用到的物品集中用消毒劑擦拭后放在臺面相應(yīng)位置上（切記勿阻擦拭后放在臺面相應(yīng)位置上（切記勿阻擋風(fēng)口?。躏L(fēng)口！）等待等待5min，凈化工作區(qū)的空氣污染物，凈化工作區(qū)的空氣污染物視頻(shpn)第21頁/共42頁第二十一頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用工作時操作工作時操作(cozu)規(guī)范：規(guī)范： 雙臂垂直緩慢進入前面的開口，在生物雙臂垂直緩慢進入前面的開口，在生物安全柜中等待大約一分鐘，以使安全安全柜中等待大約一分鐘，以使安全柜調(diào)整完畢后才可對物品進行處理。柜調(diào)整完畢后才可對物品進行處理。所有操

14、作所有操作(cozu)應(yīng)在離前窗應(yīng)在離前窗10cm以以外的工作區(qū)進行。外的工作區(qū)進行。廢棄物應(yīng)丟棄在生物安全柜內(nèi)的處理容廢棄物應(yīng)丟棄在生物安全柜內(nèi)的處理容器中器中視頻(shpn)第22頁/共42頁第二十二頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用操作時注意事項：操作時注意事項：避免胳膊在前開口處快速移動和頻繁避免胳膊在前開口處快速移動和頻繁進出。進出。盡量避免污染的物品進入潔凈區(qū)。盡量避免污染的物品進入潔凈區(qū)。在生物安全柜內(nèi)進行操作時，不能進在生物安全柜內(nèi)進行操作時，不能進行文字工作行文字工作(gngzu)。盡量減少操作者身后的人員活動。盡量減少操作者身后的人員活動。視頻(s

15、hpn)第23頁/共42頁第二十三頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用 溢出處理溢出處理(chl)： GB194892007實驗實驗室生物安全通用要求中生物安室生物安全通用要求中生物安全柜內(nèi)溢出時的處理全柜內(nèi)溢出時的處理(chl)方法方法滴狀溢出或體積不足滴狀溢出或體積不足1 mL 的，可的，可簡單地用消毒劑擦洗。簡單地用消毒劑擦洗。第24頁/共42頁第二十四頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用n 大量溢出，則要做特殊的處理：大量溢出，則要做特殊的處理：n 1、 使生物安全柜保持開啟使生物安全柜保持開啟(kiq)狀態(tài)。狀態(tài)。n 2、 在溢出物上覆

16、蓋浸有消毒劑的吸水材料，作用大約在溢出物上覆蓋浸有消毒劑的吸水材料，作用大約10分鐘以發(fā)揮消毒作分鐘以發(fā)揮消毒作用。用。n 3、 在安全柜內(nèi)對污染的手套消毒后，脫下手套。如果衣服已經(jīng)污染，也要在安全柜內(nèi)對污染的手套消毒后，脫下手套。如果衣服已經(jīng)污染，也要先脫下消毒。穿戴干凈的手套和衣服作如下進一步的清潔工作。先脫下消毒。穿戴干凈的手套和衣服作如下進一步的清潔工作。第25頁/共42頁第二十五頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用4、 用消毒劑噴灑或擦拭安全柜內(nèi)壁、工作表面以及前視窗的內(nèi)側(cè)。作用用消毒劑噴灑或擦拭安全柜內(nèi)壁、工作表面以及前視窗的內(nèi)側(cè)。作用20 min后，擦干消

17、毒劑并將擦拭物置于生物危害袋中。后，擦干消毒劑并將擦拭物置于生物危害袋中。5、 如果溢出情況需要浸泡如果溢出情況需要浸泡(jnpo)接液槽，則不得現(xiàn)場清理接液槽。應(yīng)報接液槽，則不得現(xiàn)場清理接液槽。應(yīng)報告實驗室主管后采用適當(dāng)?shù)臍怏w消毒方式。告實驗室主管后采用適當(dāng)?shù)臍怏w消毒方式。第26頁/共42頁第二十六頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用6、 將所有清理將所有清理(qngl)用物品以及防護服進行高壓消毒。用消毒肥皂和水用物品以及防護服進行高壓消毒。用消毒肥皂和水洗手和暴露皮膚。洗手和暴露皮膚。7、 立即通知實驗室主管。如果溢出物流入安全柜內(nèi)，可能需要對安全柜進立即通知實驗

18、室主管。如果溢出物流入安全柜內(nèi)，可能需要對安全柜進行更為廣泛的消毒處理。行更為廣泛的消毒處理。視頻(shpn)第27頁/共42頁第二十七頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用工作結(jié)束后的要求：工作結(jié)束后的要求：將安全柜繼續(xù)運行至少將安全柜繼續(xù)運行至少3min來完成來完成(wn chng)“凈化凈化”過程。過程。將柜內(nèi)物品移出前，應(yīng)使用有效的消將柜內(nèi)物品移出前，應(yīng)使用有效的消毒劑擦拭毒劑擦拭每天實驗結(jié)束后，對生物安全柜的內(nèi)每天實驗結(jié)束后，對生物安全柜的內(nèi)壁和臺面進行擦拭。壁和臺面進行擦拭。等待等待5分鐘后，關(guān)閉前窗，關(guān)燈，關(guān)分鐘后，關(guān)閉前窗，關(guān)燈，關(guān)風(fēng)機，紫外燈照射風(fēng)機，紫

19、外燈照射30分鐘。分鐘。視頻(shpn)第28頁/共42頁第二十八頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的維護安全柜的維護保持生物安全柜表面清潔和無污染狀保持生物安全柜表面清潔和無污染狀態(tài)態(tài)用用70%酒精或者合適的消毒劑擦拭內(nèi)酒精或者合適的消毒劑擦拭內(nèi)壁和工作臺面；壁和工作臺面；如果使用漂白劑等腐蝕性消毒劑后，如果使用漂白劑等腐蝕性消毒劑后，需要用無菌水再次進行擦拭除去需要用無菌水再次進行擦拭除去(ch q)殘余的消毒劑；殘余的消毒劑；定期抬起工作臺面對其下面的區(qū)域進定期抬起工作臺面對其下面的區(qū)域進行清潔；行清潔；消毒后，用玻璃清潔器對前窗玻璃和消毒后，用玻璃清潔器對前窗玻璃和紫外燈進行清

20、潔。紫外燈進行清潔。第29頁/共42頁第二十九頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的維護安全柜的維護l定期保養(yǎng)：定期保養(yǎng)：l用濕布擦拭內(nèi)壁和工作臺面；用濕布擦拭內(nèi)壁和工作臺面；l每年按需要更換紫外燈和日光每年按需要更換紫外燈和日光燈；燈；l每年至少認(rèn)證每年至少認(rèn)證(rnzhng)一一次次l 醫(yī)學(xué)實驗室醫(yī)學(xué)實驗室安全安全要求要求l YY0569-2005 生物安全柜生物安全柜l 實驗室生物安實驗室生物安全手冊（第三版，全手冊（第三版，2004）視頻(shpn)第30頁/共42頁第三十頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的維護安全柜的維護生物安全柜的污染清除生物安全柜的污染清除甲醛、過

21、氧化氫熏蒸等方法甲醛、過氧化氫熏蒸等方法 應(yīng)由有資質(zhì)的專業(yè)人員來進行應(yīng)由有資質(zhì)的專業(yè)人員來進行在以下在以下(yxi)情況下需要進行熏蒸：情況下需要進行熏蒸：在檢查和維修之前在檢查和維修之前 在更換在更換HEPA濾器之前濾器之前在移動安全柜之前在移動安全柜之前 安全柜被嚴(yán)重安全柜被嚴(yán)重地污染地污染變換使用目的變換使用目的 長時間未用長時間未用需要熏蒸的其它時間需要熏蒸的其它時間第31頁/共42頁第三十一頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的檢測安全柜的檢測什么情況下需要檢測？什么情況下需要檢測？應(yīng)該應(yīng)該(ynggi)由什么人來進行由什么人來進行檢測？檢測？需要進行哪些內(nèi)容的檢測？需要進行哪

22、些內(nèi)容的檢測？第32頁/共42頁第三十二頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的檢測安全柜的檢測生物生物(shngw)安全柜的檢測的情安全柜的檢測的情況發(fā)生在：況發(fā)生在：最初的購買安裝完畢最初的購買安裝完畢年檢年檢移動移動修理修理第33頁/共42頁第三十三頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的檢測安全柜的檢測生物安全柜的檢測應(yīng)由有資質(zhì)的單位檢測生物安全柜的檢測應(yīng)由有資質(zhì)的單位檢測在美國必須有美國在美國必須有美國NSF授權(quán)的單位；沒有授權(quán)的單位；沒有NSF授權(quán)，也得有以下經(jīng)歷的：授權(quán)，也得有以下經(jīng)歷的： 有過檢測經(jīng)驗；參加過技術(shù)課程或者廠商培訓(xùn)會；參加過象有過檢測經(jīng)驗；參加過技術(shù)課程或

23、者廠商培訓(xùn)會；參加過象CETA水平的商水平的商業(yè)會議；檢測設(shè)備擁有的校準(zhǔn)證書業(yè)會議；檢測設(shè)備擁有的校準(zhǔn)證書(zhngsh)在我國有檢測資質(zhì)的單位：在我國有檢測資質(zhì)的單位： 國家食品藥品監(jiān)督管理局國家食品藥品監(jiān)督管理局 醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心和軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心和軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院第34頁/共42頁第三十四頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的檢測安全柜的檢測安全柜防護效果的評估涉及到以下內(nèi)容：安全柜防護效果的評估涉及到以下內(nèi)容：安全柜的完整性安全柜的完整性 人員、產(chǎn)品及交叉污染保護人員、產(chǎn)品及交叉污染保護HEPA過濾器的泄漏過濾器的泄漏 向下氣流的速度向下氣流的速度正面

24、氣流的速度正面氣流的速度 負(fù)壓換氣負(fù)壓換氣(hun q)次數(shù)次數(shù)氣流的煙霧模式氣流的煙霧模式 警報和互鎖系統(tǒng)警報和互鎖系統(tǒng)電氣安全電氣安全 光照度光照度還包括紫外線強度、噪聲水平、震動性、集液槽泄漏(xilu)、柜體穩(wěn)定性（包括柜體抗翻倒、柜體抗變形、工作臺面抗變形、柜體抗向前傾倒）、溫升、電機與風(fēng)機等性能的測試。第35頁/共42頁第三十五頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的檢測安全柜的檢測人員、產(chǎn)品和交叉污染保護測試人員、產(chǎn)品和交叉污染保護測試 下降氣流流速測試下降氣流流速測試 流入氣流流速測試流入氣流流速測試 工作舒適度有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)：噪音、照度和震動測試工作舒適度有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)：噪音、照度和震動測試 高效過濾器完整性測試高效過濾器完整性測試 柜體泄漏的測試柜體泄漏的測試氣流煙霧模式測試氣流煙霧模式測試 排溢槽泄露排溢槽泄露(xilu)柜體穩(wěn)定性柜體穩(wěn)定性其他各類測試其他各類測試 ：電機和風(fēng)機性能測試、工作區(qū)溫升：電機和風(fēng)機性能測試、工作區(qū)溫升測試、壓差測試。測試、壓差測試。第36頁/共42頁第三十六頁，共42頁。生物生物(shngw)安全柜的檢測安全柜的檢測出廠出廠(ch chng)檢驗檢驗型式檢驗型式檢驗安裝檢驗：安裝檢驗： 安全