微生物藥物學(xué)

1、微生物藥物學(xué)重點(diǎn)抗生素的定義（Waksman ，1942）：抗生素是微生物在其代謝過(guò)程中所產(chǎn)生的、具有抑制它種微生物生長(zhǎng)及活動(dòng)甚至殺滅它種微生物性能的化學(xué)物質(zhì)?？股氐囊话愣x：“抗生素”是在低微濃度下有選擇地抑制或影響它種生物機(jī)能的、是在微生物生命過(guò)程中產(chǎn)生的具有生物活性的次級(jí)代謝產(chǎn)物及其衍生物。抗生素與抗菌藥物的區(qū)別：1.完全通過(guò)化學(xué)合成方法制備的磺胺類、氟喹諾酮類和惡唑烷酮類等抗細(xì)菌藥物，以及像酮康唑類抗真菌藥物被稱之為抗菌藥物，而不屬于抗生素的范疇。2.而對(duì)于像磷霉素和氯霉素這些原來(lái)是來(lái)源于微生物的次級(jí)代謝產(chǎn)物，但由于結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單而用化學(xué)合成的方法代替微生物發(fā)酵法來(lái)生產(chǎn)制備的品種，以及像源

2、于微生物次級(jí)代謝產(chǎn)物硫霉素，后完全用化學(xué)合成方法制備的一系列碳青霉烯類-內(nèi)酰胺抗生素等，通常將其歸納在抗生素的范疇。微生物藥物：由微生物（包括重組微生物）在其生命活動(dòng)過(guò)程中產(chǎn)生的、在低微濃度下具有生理活性的次級(jí)代謝產(chǎn)物及其衍生物。初級(jí)代謝產(chǎn)物與次級(jí)代謝產(chǎn)物作為藥物的差別1.初級(jí)代謝和次級(jí)代謝是完全不同的兩個(gè)代謝系統(tǒng)；2.初級(jí)代謝物和次級(jí)代謝物的理化特性有著很大的區(qū)別，后者為小分子物質(zhì)，其分子量小于3000，且化學(xué)結(jié)構(gòu)多樣性；3.次級(jí)代謝物對(duì)產(chǎn)生它的微生物的作用不明顯或沒(méi)有作用4.初級(jí)代謝物作為藥物使用時(shí)盡管也有藥理活性作用，但一般往往沒(méi)有確定的作用靶點(diǎn)且更多的是作為輔助或營(yíng)養(yǎng)藥物，而次級(jí)代謝物

3、具有確切的作用靶點(diǎn)和明顯的治療效果。廣義的天然藥物強(qiáng)調(diào)“來(lái)源于各種生物體的化合物”，可以是初級(jí)代謝產(chǎn)物也可以是次級(jí)代謝產(chǎn)物；而化學(xué)合成藥物一般是指通過(guò)化學(xué)方法合成的小分子化合物。天然藥物分類生物制品；生化藥物；抗生素；微生物藥物；植物藥物；中草藥；基因工程藥物；生物技術(shù)藥物等微生物藥學(xué)研究的內(nèi)容：微生物藥學(xué)是藥學(xué)的一個(gè)分支，它與生化藥學(xué)一起構(gòu)成微生物與生化藥學(xué)二級(jí)學(xué)科。微生物藥學(xué)的研究?jī)?nèi)容包括：微生物藥物生物合成的代謝調(diào)控、產(chǎn)物的分離純化、作用機(jī)制和耐藥機(jī)制的研究、產(chǎn)生菌的菌種選育及尋找新微生物藥物的方法和途徑等。微生物產(chǎn)生拮抗作用的可能原因1、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被消耗。2、培養(yǎng)基的理化性質(zhì)被改變。3、

4、微生物產(chǎn)生的酶的作用。4、產(chǎn)生毒物或抗生素。5、空間的爭(zhēng)奪。 1929年，F(xiàn)leming偶爾發(fā)現(xiàn)音符型青霉菌對(duì)葡萄球菌有拮抗作用；1941年，美國(guó)政府邀請(qǐng)Chain和Florey到美國(guó)幫助開(kāi)發(fā)青霉素的生產(chǎn)；鏈霉素發(fā)現(xiàn)者Worksman；繼Fleming和Waksman后，在抗生素研究領(lǐng)域中作出卓越貢獻(xiàn)的第三位科學(xué)家，微生物來(lái)源酶抑制劑篩選的先驅(qū)梅澤濱夫Hamao Umezawa?；瘜W(xué)修飾的目的：1）擴(kuò)展抗菌譜的修飾（氨芐西林與阿莫西林）2）增強(qiáng)抗菌活性的修飾（天然頭孢菌素C、頭霉素、頭菌素）3）克服耐藥性的修飾（降低底物對(duì)酶的結(jié)構(gòu)適應(yīng)性；消除鈍化酶作用基團(tuán)；增辟新作用點(diǎn)）（甲氧西林、萘夫西林）

5、4）改善藥物動(dòng)力學(xué)性能的修飾（增強(qiáng)穩(wěn)定性的修飾；改善吸收提高血藥濃度的修飾；延緩消除半衰期的修飾）（四環(huán)素；紅霉素；頭孢菌素；）5）降低毒副反應(yīng)的修飾（氨芐西林）6）適應(yīng)制劑需要的修飾（紅霉素）抗生素的結(jié)構(gòu)修飾的重要性抗生素結(jié)構(gòu)的適當(dāng)修飾，可擴(kuò)展天然抗生素的抗菌譜、增強(qiáng)抗菌活性、克服耐藥性、改善藥物動(dòng)力學(xué)性能與降低毒副反應(yīng)，但不是所有抗生素經(jīng)過(guò)修飾都能如愿地得到良好的修飾物。有些天然抗生素僅經(jīng)過(guò)微小的修飾，即全然喪失抗菌活性，而在眾多的修飾物中性能都不如原天然物的實(shí)例亦不罕見(jiàn)。在篩選新抗生素困難重重的今天，對(duì)獲得的天然物進(jìn)行適當(dāng)?shù)男揎検潜匾摹ふ椅⑸锼幬锏幕就緩胶头椒ó?dāng)前尋找新微生物藥物

6、的主要途徑（重要）1、建立新的篩選模型尋找微生物新藥：從微生物代謝產(chǎn)物中尋找小分子量的酶抑制劑、免疫調(diào)節(jié)劑和受體拮抗劑或激活劑等生物活性物質(zhì)，利用新的篩選模型，從已知的微生物次級(jí)代謝產(chǎn)物來(lái)篩選以上這些物質(zhì)。2、擴(kuò)大微生物來(lái)源尋找微生物新藥：從海洋微生物、稀有放線菌和在極端環(huán)境下生長(zhǎng)的微生物的次級(jí)代謝產(chǎn)物中來(lái)篩選新的生理活性物質(zhì)。3、以微生物來(lái)源的生理活性物質(zhì)為先導(dǎo)化合物，進(jìn)行化學(xué)改造尋找效果更好的微生物藥物：根據(jù)藥物的構(gòu)效關(guān)系以及體內(nèi)代謝的特性，對(duì)已知次級(jí)代謝產(chǎn)物進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造的目的，主要是篩選相對(duì)于母體化合物具有如下特點(diǎn)的微生物新藥：擴(kuò)大抗菌譜或作用范圍、克服細(xì)菌的耐性或改善藥物對(duì)作用靶的敏感

7、性、改進(jìn)對(duì)細(xì)胞的通透性、改善化學(xué)和代謝的穩(wěn)定性、提高血漿和組織濃度、增強(qiáng)與宿主免疫系統(tǒng)的協(xié)調(diào)作用、能夠制備成合適給藥方式的結(jié)構(gòu)狀態(tài)，以及減少毒副作用等。4、應(yīng)用次級(jí)代謝產(chǎn)物的生物合成原理，“創(chuàng)造”微生物新藥：根據(jù)已知次級(jí)代謝產(chǎn)物的生物合成機(jī)理，通過(guò)改變培養(yǎng)基成分、控制發(fā)酵條件進(jìn)行定向生物合成來(lái)尋找新的次級(jí)代謝產(chǎn)物；或是通過(guò)對(duì)已知抗生素產(chǎn)生菌進(jìn)行誘變處理，使一些原先沉默的基因得以激活、或阻斷某些生物合成途徑中的某些基因而產(chǎn)生新的生物活性物質(zhì)。5、利用基因工程技術(shù)構(gòu)建能產(chǎn)生微生物新藥的基因工程菌：隨著對(duì)微生物次級(jí)代謝產(chǎn)物生物合成途徑和代謝調(diào)控機(jī)制的深入了解，最終人類能夠“理性化”地構(gòu)建產(chǎn)生所需目的

8、產(chǎn)物的基因工程菌。前體（precursor）：即在微生物培養(yǎng)過(guò)程中，外源添加的某一化學(xué)物質(zhì)，通過(guò)微生物的代謝，能夠?qū)⑵湔w地或部分地整合到某一特定的次級(jí)代謝產(chǎn)物的分子中去的化合物，如苯乙酸或苯乙酰胺及苯氧乙酸等）。微生物的次級(jí)代謝：微生物在一定生長(zhǎng)時(shí)期（一般是穩(wěn)定生長(zhǎng)期），以初級(jí)代謝產(chǎn)物為前體，合成一些對(duì)微生物的生命活動(dòng)沒(méi)有明確功能物質(zhì)的過(guò)程。微生物次級(jí)代謝的特征：1.次級(jí)代謝產(chǎn)物一般不在產(chǎn)生菌的生長(zhǎng)期產(chǎn)生，而在隨后的生產(chǎn)期形成；2. 次級(jí)代謝以初級(jí)代謝產(chǎn)物為前體，并受初級(jí)代謝的調(diào)節(jié)；3.次級(jí)代謝酶的專一性低；4.種類繁多，結(jié)構(gòu)特殊，含有不常見(jiàn)的化合物和化學(xué)鍵；如：抗生素、毒素、色素、生物堿。

9、5.次級(jí)代謝產(chǎn)物的合成具有菌株特異性；一種微生物的不同菌株可以產(chǎn)生分子結(jié)構(gòu)迥異的次級(jí)代謝物；不同種類的微生物也能產(chǎn)生同一種次級(jí)代謝物； 6.次級(jí)代謝產(chǎn)物的合成比生長(zhǎng)對(duì)環(huán)境因素更敏感。如菌體生 長(zhǎng)，磷酸鹽濃度0.3300mmol/L；產(chǎn)物合成，磷酸鹽濃度 0.110mmol/L；7.次級(jí)代謝酶在細(xì)胞中具有特定的位置和結(jié)構(gòu)；8. 由生長(zhǎng)期向生產(chǎn)期過(guò)渡時(shí)，菌體形態(tài)會(huì)有所變化；9.次級(jí)代謝產(chǎn)物的合成過(guò)程是一類由多基因（基因簇）控制的代謝過(guò)程；這些基因不僅位于微生物的染色體中也位于質(zhì)粒中，且后者的基因在次級(jí)代謝產(chǎn)物的合成過(guò)程中往往起主導(dǎo)作用。微生物次生代謝產(chǎn)物固有特性：1.特異性的微生物產(chǎn)生菌2.生理活

10、性的多樣性3.獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)第四章（#重要章節(jié)#主要掌握四種抗生素的作用機(jī)制和耐藥機(jī)制）-內(nèi)酰胺類抗生素（-lactams）：指化學(xué)結(jié)構(gòu)中具有-內(nèi)酰胺環(huán)的一大類抗生素，包括臨床最常用的青霉素與頭孢菌素，以及新發(fā)展的頭霉素類、硫霉素類、單環(huán)-內(nèi)酰胺類等其他非典型-內(nèi)酰胺類抗生素。此類抗生素具有殺菌活性強(qiáng)、毒性低、適應(yīng)癥廣及臨床療效好的優(yōu)點(diǎn)。-內(nèi)酰胺類抗生素作用機(jī)制：青霉素等-內(nèi)酰胺類抗生素則以它們的結(jié)構(gòu)與供體底物(D-丙氨酰-D-丙氨酸)結(jié)構(gòu)相似(二者都有高度反應(yīng)性的-C-N-鍵)而與轉(zhuǎn)肽酶起作用,從而干擾了正常的轉(zhuǎn)肽反應(yīng)。然后導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞壁不能正常合成，使細(xì)菌胞壁缺損，菌體膨脹裂解。-內(nèi)酰胺類

11、抗生素耐藥機(jī)制：1.細(xì)菌產(chǎn)生-內(nèi)酰胺酶（青霉素酶、頭孢菌素酶等）使易感抗生素水解而滅活；2.對(duì)革蘭陰性菌產(chǎn)生的-內(nèi)酰胺酶穩(wěn)定的廣譜青霉素和第二、三代頭孢菌素，其耐藥發(fā)生機(jī)制是由于抗生素與大量的-內(nèi)酰胺酶迅速、牢固結(jié)合，使其停留于胞膜外間隙中，因而不能進(jìn)入靶位發(fā)生抗菌作用。此種-內(nèi)酰胺酶的非水解機(jī)制又稱為“牽制機(jī)制”（trapping mechanism）；3.PBPs靶蛋白與抗生素親和力降低、PBPs增多或產(chǎn)生新的PBPs均可使抗生素失去抗菌作用。（與細(xì)菌細(xì)胞壁的合成、維持以及肽聚糖結(jié)構(gòu)特征的調(diào)節(jié)等有關(guān)的一組酶通常即被稱之為PBPs）4.細(xì)菌的細(xì)胞壁或外膜的通透性改變，使抗生素不能或很少進(jìn)入細(xì)

12、菌體內(nèi)到達(dá)作用靶位。5.藥物外排機(jī)制。細(xì)菌滲透性屏障是細(xì)菌對(duì)藥物產(chǎn)生耐藥性的普遍性機(jī)制（非特異性），而由PBPs-介導(dǎo)的和由-內(nèi)酰胺酶介導(dǎo)的耐藥機(jī)制是細(xì)菌對(duì)-內(nèi)酰胺藥物產(chǎn)生耐藥性的特有機(jī)制（特異性）?？朔?xì)菌對(duì)-內(nèi)酰胺抗生素產(chǎn)生耐藥性的對(duì)策一個(gè)好的-內(nèi)酰胺類抗生素，能夠有效地抑制粘肽的合成，則必須具備以下三個(gè)條件：1)有好的滲透性，使藥物能達(dá)到作用部位；2)對(duì)-內(nèi)酰胺酶穩(wěn)定，使-內(nèi)酰胺環(huán)不被酶解；3)對(duì)靶酶，即對(duì)青霉素結(jié)合蛋白有高的親和力，從而抑制PBPs的酶活力，使細(xì)菌生長(zhǎng)抑制或死亡?？死S酸對(duì)-內(nèi)酰胺酶的活性位點(diǎn)有高親和力，能與催化中心相結(jié)合，以競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑的方式發(fā)揮作用。隨后與酶分子中的

13、絲氨酸的羥基發(fā)生反應(yīng)，通過(guò)-內(nèi)酰胺羰基和-內(nèi)酰胺環(huán)打開(kāi)而使酶?；?，從而抑制耐藥性。-內(nèi)酰胺酶抑制劑以下兩種：1.克拉維酸（clavulanic acid，棒酸）為氧青霉烷類廣譜-內(nèi)酰胺酶抑制劑，抗菌譜廣，但抗菌活性低。與多種-內(nèi)酰胺類抗菌素合用時(shí)，抗菌作用明顯增強(qiáng)。2、舒巴坦（sulbactam，青霉烷砜）為半合成-內(nèi)酰胺酶抑制劑，對(duì)金葡菌與革蘭陰性桿菌產(chǎn)生的-內(nèi)酰胺酶有很強(qiáng)且不可逆抑制作用，抗菌作用略強(qiáng)于克拉維酸，但需要與其他-內(nèi)酰胺類抗生素合用，有明顯抗菌協(xié)同作用。-內(nèi)酰胺類抗生素代表藥物：青霉素。氨基糖苷類抗生素：氨基糖苷類抗生素是由氨基糖與氨基環(huán)醇通過(guò)氧橋連接而成的苷類抗生素。有來(lái)自鏈

14、霉菌的鏈霉素等、來(lái)自小單孢菌的慶大霉素等天然氨基糖苷類，還有阿米卡星等半合成氨基糖苷類。氨基糖苷類抗生素作用機(jī)制：氨基糖苷類抗生素對(duì)于細(xì)菌的作用主要是抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成，此類藥物可影響細(xì)菌蛋白質(zhì)合成的全過(guò)程，妨礙初始復(fù)合物的合成，誘導(dǎo)細(xì)菌合成錯(cuò)誤蛋白以及阻抑已合成蛋白的釋放，從而導(dǎo)致細(xì)菌死亡。氨基糖苷類抗生素抑制蛋白質(zhì)合成起始過(guò)程的位點(diǎn)有三個(gè):一是特異性地抑制30S合成起始復(fù)合體的形成，如春日霉素；二是抑制70S合成起始復(fù)合體的形成和使fMet-tRNA從70S起始復(fù)合體上脫離，如鏈霉素、卡那霉素、新霉素、巴龍霉素、慶大霉素等； 三是這類抑制70S合成起始復(fù)合體的抗生素也能引起密碼錯(cuò)讀。氨基

15、糖苷類抗生素耐藥性機(jī)制1.細(xì)菌產(chǎn)生一種或多種有關(guān)的鈍化酶來(lái)修飾進(jìn)入胞內(nèi)的活性抗生素使之失去生物活性；2.氨基糖苷類抗生素的作用靶位核糖體或是與核糖體結(jié)合的核蛋白的氨基酸發(fā)生突變，而使進(jìn)入胞內(nèi)的活性抗生素不能與之結(jié)合或結(jié)合力下降。具有抗耐藥菌作用的新的氨基糖苷類抗生素的研究開(kāi)發(fā)應(yīng)用化學(xué)修飾的方法對(duì)那些易被各種鈍化酶作用的位點(diǎn)進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造，能夠得到一系列非常有效的新的氨基糖苷類抗生素。一、對(duì)鈍化酶作用位點(diǎn)進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾（一）克服磷酸轉(zhuǎn)移酶鈍化作用的新藥開(kāi)發(fā)（二）克服?；D(zhuǎn)移酶鈍化作用的新藥開(kāi)發(fā)（三）克服核苷轉(zhuǎn)移酶鈍化作用的1-N-取代的新藥開(kāi)發(fā)（四）制備改變手性結(jié)構(gòu)的衍生物（五）1-C取代衍生物（六

16、）鹵代衍生物（七）其它衍生物（取代從而降低鈍化酶的敏感性）二、應(yīng)用酶學(xué)方法研究開(kāi)發(fā)新的氨基糖苷類抗生素（一）磷酸轉(zhuǎn)移酶 （氨基脫去；酶自殺性底物；酶抑制劑）（二）核苷酰轉(zhuǎn)移酶（鈍化作用）三、基于核糖體結(jié)構(gòu)的新藥設(shè)計(jì)以30S核糖體特別是A位點(diǎn)作為抗生素作用的靶位，進(jìn)而有可能篩選和設(shè)計(jì)化合物，使之能有效地結(jié)合于細(xì)菌30S核糖體的A位點(diǎn)上，從而發(fā)現(xiàn)新的抗生素；氨基糖苷類抗生素代表藥物：鏈霉素，慶大霉素，卡那霉素，妥布霉素，阿米卡星。MLS(macrolides-lincosamids-streptogramins)是一類包括十四、十五和十六元大環(huán)內(nèi)酯類抗生素。MLS類抗生素的結(jié)構(gòu)特性1、化學(xué)結(jié)構(gòu)差異

17、大，但其抗菌機(jī)制和細(xì)菌耐藥性機(jī)制非常相似；2、抗菌譜較窄，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性球菌（特別是葡萄球菌、鏈球菌和腸球菌）和桿菌以及革蘭陰性球菌有效；3、這些藥物尤其是氯林可霉素對(duì)厭氧菌也有效；4、革蘭氏陰性桿菌通常對(duì)這類藥物不敏感，但某些腸桿菌和嗜血桿菌在體外對(duì)阿齊霉素敏感。MLS類抗生素的作用機(jī)制大環(huán)內(nèi)酯類抗生素對(duì)于50S大亞基形成的抑制作用是特異性的，即30S亞基的形成不受抗生素的影響，而且已組裝好了的50S大亞基也不會(huì)被降解。一般認(rèn)為：MLS類抗生素為第類型的蛋白質(zhì)合成抑制劑，即阻斷50S中肽酰轉(zhuǎn)移酶中心的功能，使P位上的肽酰tRNA不能與A位上的氨基酰tRNA結(jié)合形成肽鍵。紅霉素的抗菌作用機(jī)制：一

18、是抑制50S核糖體大亞基的形成；另一個(gè)是抑制核糖體的翻譯作用。鏈陽(yáng)性菌素A僅能結(jié)合在50S中不含氨基酰tRNA的A位和P位，這種結(jié)合后能夠誘導(dǎo)核糖體產(chǎn)生永久性的構(gòu)像變化并產(chǎn)生一個(gè)多余的60S亞基（這可能是由70S亞基分離而來(lái)），從而增加對(duì)B組分的特殊親和力，使達(dá)到殺菌作用，而鏈陽(yáng)性菌素B和其它大環(huán)內(nèi)酯類抗生素能夠在任何步驟與核糖體結(jié)合。因此，鏈陽(yáng)性菌素A 和B的混合物就是通過(guò)這種雙重代謝阻斷來(lái)達(dá)到抗菌作用的。MLS類抗生素耐藥機(jī)制 內(nèi)在性耐藥（intrinsic resistance）：所謂的內(nèi)在性耐藥即為細(xì)菌的天然耐藥性，這些細(xì)菌的細(xì)胞外膜限制脂溶性抗菌藥物和分子量大于500的MLS類抗生素

19、進(jìn)入胞內(nèi)。 獲得性耐藥（acquired resistance）：1.藥物作用靶位分子發(fā)生了變異；2.抗生素活性分子被鈍化；3.細(xì)菌產(chǎn)生藥物主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)。細(xì)菌對(duì)紅霉素產(chǎn)生耐藥性的作用機(jī)制1.影響紅霉素在胞內(nèi)的積累（大環(huán)內(nèi)酯的外排機(jī)制）；2.破壞紅霉素的結(jié)構(gòu)使其失去抗菌作用；3.改造或修飾紅霉素在核糖體上的結(jié)合作用位點(diǎn)。新型大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的耐藥性對(duì)策1.繼續(xù)修飾紅霉素化學(xué)結(jié)構(gòu)；2.尋找具有抗菌特點(diǎn)的新大環(huán)內(nèi)酯；3.探索具有抗菌活性以外其他生理活性的物質(zhì)；4.開(kāi)辟新用途。MLS類抗生素代表藥物：紅霉素，鏈陽(yáng)性菌素。糖肽類抗生素：glycopeptide antibiotics.性質(zhì)：糖肽類抗生素在結(jié)

20、構(gòu)上共具高度修飾的七肽骨架，作用靶點(diǎn)在細(xì)菌胞壁成分D-丙氨酰-D-丙氨酸上。依據(jù)所含氨基酸的不同可分為四個(gè)族：vancomycin族，ristocetin族，avoparcin族，synmonicin族。糖肽類抗生素作用機(jī)制：1.糖肽類抗生素的抗菌作用雖與b內(nèi)酰胺類抗生素的相同，都是通過(guò)干擾細(xì)菌細(xì)胞壁肽聚糖的鉸鏈，從而使細(xì)菌細(xì)胞發(fā)生溶解。2.直接抑制轉(zhuǎn)葡基酶。革蘭陽(yáng)性菌的細(xì)胞壁是由一厚厚的肽聚糖層構(gòu)成，其位于細(xì)胞質(zhì)膜（內(nèi)膜的外側(cè)）；而革蘭陰性菌在一薄薄的肽聚糖層外面還有一完整的細(xì)胞外膜，其阻止萬(wàn)古霉素和替考拉寧等糖肽類抗生素滲透到肽聚糖。因此，這類抗生素僅對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌有效。細(xì)菌對(duì)糖肽類抗生素

21、產(chǎn)生耐藥性的作用機(jī)制萬(wàn)古霉素耐藥腸球菌(VRE) ：1.VRE逐漸增加的原因除了耐萬(wàn)古霉素的遺傳因子可以傳播外；2.將糖肽類抗生素作為動(dòng)物生長(zhǎng)促進(jìn)劑用于食源性動(dòng)物，提供VRE出現(xiàn)的選擇壓力。耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌（methicillin resistant Staphylococcus aureus，MRSA）萬(wàn)古霉素中等耐藥金黃色葡萄球菌（vancomycin-intermidiate S.aureus，VISA），因此，由多重耐藥的MRSA變遷為VISA，而引起的感染就會(huì)導(dǎo)致任何治療無(wú)效；細(xì)菌對(duì)萬(wàn)古霉素產(chǎn)生耐藥性的機(jī)制是由于耐藥菌能夠產(chǎn)生一種分子結(jié)構(gòu)不同于敏感菌的肽聚糖前體末端二肽，D

22、-丙氨酰-D-乳酸、D-丙氨酰-D-絲氨酸或D-丙氨酸，使萬(wàn)古霉素分子不能與之結(jié)合，而細(xì)菌能夠照樣合成其細(xì)胞壁。對(duì)細(xì)菌產(chǎn)生萬(wàn)古霉素耐藥性的更為精細(xì)的作用機(jī)制的研究發(fā)現(xiàn)：vanA基因存在于被稱為轉(zhuǎn)座子或跳躍基因的Tn1546中；這一轉(zhuǎn)座子含有9個(gè)基因：其中二個(gè)編碼與轉(zhuǎn)座能力有關(guān)的功能；另外7個(gè)通常被稱為萬(wàn)古霉素耐藥基因的“vanA基因簇”。具有抗耐藥菌作用的新的糖肽類抗生素1.達(dá)托霉素的抗菌機(jī)制與糖肽類抗生素的作用機(jī)制不同：它可擾亂細(xì)胞膜對(duì)氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)，從而阻礙細(xì)菌細(xì)胞壁肽聚糖的磷壁(酸) 脂質(zhì)（LTA）的生物合成，改變細(xì)胞質(zhì)膜的性質(zhì)；另外，它還能通過(guò)破壞細(xì)菌的細(xì)胞膜，使其內(nèi)容物外泄而達(dá)到殺滅細(xì)

23、菌的目的；也有報(bào)道是其與細(xì)胞膜的結(jié)合，導(dǎo)致膜電位的降低，從而破壞胞內(nèi)RNA和DNA的合成，最終抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。該抗生素的抗菌活性為濃度依賴性的，并受到pH和離子化鈣濃度的影響。2.雷莫拉寧的作用機(jī)制特異地抑制細(xì)胞壁上肽聚糖的生物合成,研究表明這種抑制方式與萬(wàn)古霉素及替考拉寧的作用方式不同：抑菌作用發(fā)生在轉(zhuǎn)肽反應(yīng)之前,是一種膜上反應(yīng)的抑制物,抑制UDP-N-乙酰-D-葡萄糖胺的摻入作用；萬(wàn)古霉素及替考拉寧的抑制作用主要發(fā)生在肽聚糖的延伸和交聯(lián)水平上，即作用于肽聚糖生物合成的后期。3.半合成糖肽類抗生素 1、對(duì)糖肽類抗生素中的結(jié)合域進(jìn)行改造2、改造和增加功能團(tuán)3、改變糖肽類抗生素結(jié)構(gòu)中的糖4.萬(wàn)古霉

24、素耐藥基因產(chǎn)物抑制劑的研究糖肽類抗生素代表藥物：萬(wàn)古霉素。其他類別抗生素（主要前四種比較重要）利福霉素（安莎類抗生素）：一類在化學(xué)結(jié)構(gòu)上類似、以一個(gè)脂肪鏈連接著一個(gè)芳香核的兩個(gè)不相鄰碳原子的“安莎橋”結(jié)構(gòu)為特征的抗生素所組成。代表藥物：利福平。其他類別的抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成的抗生素磷霉素的作用部位目前尚有爭(zhēng)議，可能與磷酸烯醇丙酮酸競(jìng)爭(zhēng)UDP(uridine diphosphate)-NAG(二磷酸尿喧啶核苷-N-乙酰葡糖胺)轉(zhuǎn)移酶，抑制了粘肽合成的第一步，使UDP-NAG不能轉(zhuǎn)化為UDP-NAMA；桿菌肽的作用機(jī)制是阻止細(xì)胞膜上脂質(zhì)體的再生，因而導(dǎo)致UDP-NAMA-五肽在細(xì)胞漿內(nèi)堆積,從而影響

25、細(xì)胞壁粘肽的合成。D-環(huán)絲氨酸和鄰甲氨酰-D-絲氨酸的結(jié)構(gòu)與D-丙氨酸相似，可干擾丙氨酸消旋酶的作用，使L-丙氨酸不能變成D-丙氨酸，并可阻斷兩分子D-丙氨酸連接時(shí)所需D-丙氨酸合成酶的作用。多黏菌素對(duì)多數(shù)革蘭陰性桿菌有殺滅作用。多肽類抗生素具有表面活性，含有帶陽(yáng)電荷的游離氨基，能與革蘭陰性菌細(xì)胞膜的磷脂中帶陰電荷的磷酸根結(jié)合，使細(xì)菌細(xì)胞膜面積擴(kuò)大，通透性增加，細(xì)胞內(nèi)的磷酸鹽、核苷酸等成份外漏，導(dǎo)致細(xì)菌死亡。其他類別的抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成的抗生素四環(huán)類抗生素素抗菌作用的主要機(jī)制是阻斷多肽鏈的延長(zhǎng)。四環(huán)類抗生素耐藥機(jī)制：最頻繁地發(fā)生的革蘭陰性細(xì)菌對(duì)四環(huán)素類抗生素耐藥是由Tet阻遏物識(shí)別作用所觸發(fā)的

26、；其引起阻遏物-操作子DNA復(fù)合物的締合作用，使耐藥蛋白質(zhì)TetA能夠得以表達(dá)，TetA負(fù)責(zé)四環(huán)素的活性外排；Tet阻遏物與四環(huán)素-鎂復(fù)合的二聚體的2.5A分辨度的結(jié)晶結(jié)構(gòu)揭示著詳細(xì)的藥物識(shí)別作用。氯霉素為廣譜抑菌劑。通過(guò)脂溶性可彌散進(jìn)入細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)，主要作用于細(xì)菌70s核糖體的50s亞基，抑制轉(zhuǎn)肽酶，使肽鏈的增長(zhǎng)受阻，抑制了肽鏈的形成，從而阻止蛋白質(zhì)的合成。高濃度時(shí)或?qū)Ρ酒犯叨让舾械募?xì)菌也呈殺菌作用。氯霉素耐藥機(jī)制：細(xì)菌對(duì)氯霉素產(chǎn)生耐藥性的主要作用機(jī)制是細(xì)菌產(chǎn)生的O-酰化酶將氯霉素分子中的游離羥基乙?；隆ｇ揞惪股刈饔脵C(jī)制是對(duì)氨基酸轉(zhuǎn)移酶有選擇性抑制作用,從而阻斷細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成。嘌呤霉素

27、能和結(jié)合在P位的肽酰-tRNA反應(yīng)，生成肽酰嘌呤霉素復(fù)合體，并從核蛋白體上游離。嘌呤霉素是革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的強(qiáng)烈抑制劑，它是肽合成的一種有效抑制劑，所以對(duì)高等動(dòng)物的毒性也頗大，沒(méi)有臨床應(yīng)用價(jià)值。莫匹羅星Mupirocin為異亮氨酸的結(jié)構(gòu)類似物，其作用機(jī)制為通過(guò)抑制異亮氨酰RNA合成酶，阻止異亮氨酰摻入到正在合成的肽鏈中去。-內(nèi)酰胺類抗生素、氨基糖苷類抗生素、MLS類抗生素和糖肽類抗生素四種抗生素比較作用對(duì)象不同：-內(nèi)酰胺類抗生素作用對(duì)象是干擾轉(zhuǎn)肽反應(yīng)，從而使細(xì)菌不能合成細(xì)胞壁；氨基糖苷類抗生素作用對(duì)象特異性地抑制30S亞基合成起始復(fù)合體的形成，抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成。MLS類抗生素作用對(duì)象是阻斷5

28、0S亞基中肽酰轉(zhuǎn)移酶中心的功能。糖肽類抗生素作用對(duì)象干擾細(xì)菌細(xì)胞壁肽聚糖的鉸鏈，從而使細(xì)菌細(xì)胞發(fā)生溶解或直接抑制轉(zhuǎn)葡基酶。代表藥物不同（太多，具體看上面）耐藥機(jī)制和對(duì)該機(jī)制對(duì)策不同細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性機(jī)制1.細(xì)胞外膜滲透性發(fā)生改變的耐藥機(jī)制2.主動(dòng)外排的耐藥機(jī)制，對(duì)策是采用外排泵抑制劑3.細(xì)菌菌膜耐藥機(jī)制主要包括滲透限制，營(yíng)養(yǎng)限制，表達(dá)耐受表型，細(xì)菌菌膜環(huán)境不均一，對(duì)策是增強(qiáng)抗生素通透性，用特殊的酶解離胞外基質(zhì)，以化學(xué)藥物抑制胞外基質(zhì)合成以及在基因水平上控制細(xì)菌菌膜特異基因表達(dá)等。尋找新的藥物作用靶位與客服耐藥性研究1. 抑制蛋白質(zhì)合成2. 基于反義RNA沉默技術(shù)的脂肪酸合成酶FabH超敏細(xì)胞抑制模

29、型（就是反義RNA沉默技術(shù)，反義RNA與靶位RNA結(jié)合，影響靶基因表達(dá)）3. 作用于細(xì)胞分裂的新靶位點(diǎn)4. 細(xì)菌感染的新的靶位分子，用藥物將其抑制。5. 細(xì)菌宿主細(xì)胞表面黏附作為藥物新靶點(diǎn)6. 使用疫苗（對(duì)腦膜炎抑制）7. 應(yīng)用基因工程技術(shù)破壞細(xì)菌耐藥性基因8. 使用粒細(xì)胞集落刺激因子能夠提高白細(xì)胞的產(chǎn)生，減少抗菌藥物使用量，降低細(xì)菌耐藥性。抗真菌藥物的作用機(jī)制及耐藥性1、 抗真菌藥物的作用機(jī)制與真菌耐藥性機(jī)制1 作用于真菌細(xì)胞膜：作用靶位為真菌細(xì)胞膜的主要組成-麥角甾醇。l 多烯類抗真菌抗生素的作用機(jī)制：抗生素發(fā)揮作用時(shí)首先與膜結(jié)合，其結(jié)合程度與膜內(nèi)甾醇含量成正比。結(jié)合后生成的膜-抗生素復(fù)合

30、物，使細(xì)胞質(zhì)膜結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，在膜脂質(zhì)雙層中形成由多烯大環(huán)內(nèi)酯抗生素與膽固醇結(jié)合的環(huán)狀化合物，構(gòu)成親水通道，致使細(xì)胞內(nèi)容物向胞外泄漏。2 作用真菌細(xì)胞壁合成：作用于甘露聚糖、幾丁質(zhì)、-和-葡聚糖3 抑制蛋白質(zhì)合成：干擾氨基酸的傳輸4 抑制電子傳遞：對(duì)線粒體呼吸鏈的電子傳遞具有抑制作用，從而干擾線粒體的有氧呼吸，引起真菌細(xì)胞的死亡。5 作用于核酸合成：具有鳥(niǎo)嘌呤相似結(jié)構(gòu)的灰黃霉素以競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用干擾真菌細(xì)胞的DNA合成，從而抑制其生長(zhǎng)?？咕?- 抗菌藥物新資源1、 抗菌肽：抗菌肽指昆蟲(chóng)體內(nèi)經(jīng)誘導(dǎo)而產(chǎn)生的一類具有抗菌活性的堿性多肽物質(zhì)，分子量在20007000左右，由2060個(gè)氨基酸殘基組成2、 陽(yáng)離子多肽有兩個(gè)顯著的特征：1 一是根據(jù)組成多肽分子的精氨酸和賴氨酸的數(shù)量，這些多肽具有至少一個(gè)凈的二價(jià)正電荷，這些氨基酸在自然pH條件下