生化藥物制造工藝酶類藥物優(yōu)秀

1、酶類藥物生化藥物制造工藝酶類藥物優(yōu)秀酶的分類生化藥物制造工藝酶類藥物優(yōu)秀生化藥物制造工藝酶類藥物優(yōu)秀生化藥物制造工藝酶類藥物優(yōu)秀酶類藥物的提取和純化 原料選擇生物材料的預處理提取濃縮純化結晶生化藥物制造工藝酶類藥物優(yōu)秀動物材料的預處理：（1）機械法：有絞碎、刨碎、勻漿、研磨、超聲波、擠壓等方法， 有些酶用機械法處理后仍不能有效的提取，可結合其 他處理法。（2）凍融： 冷到-10左右，再緩慢溶解至室溫，如此反復多次。 由于細胞中冰晶的形成，及剩下液體中鹽濃度的增高， 能使細胞中顆粒及整個細胞破碎，使酶釋放出來。（3）丙酮粉：組織經(jīng)丙酮迅速脫水干燥制成丙酮粉，不僅可以減少 酶的變性，同時因細胞結構

2、成分的破碎使蛋白質與脂 質結合的某些化學鍵打開，促使某些結酶釋放到溶液中。材料的預處理生化藥物制造工藝酶類藥物優(yōu)秀生化藥物制造工藝酶類藥物優(yōu)秀 酶的濃縮（1）工業(yè)上：超濾、真空減壓濃縮、薄膜濃縮、冷凍濃縮（2）實驗室： 除上述方法外，對少量樣品可用下列方法 1. 用G-15或G-25濃縮 2. 用聚乙二醇濃縮生化藥物制造工藝酶類藥物優(yōu)秀注意兩個問題：1.建立快速的測定酶活力的方法 2.建立活力回收表酶的純化：凡用于蛋白質的純化手段均適用于酶的純化從大腸桿菌中提取天冬酰胺酶活力回收表生化藥物制造工藝酶類藥物優(yōu)秀酶的結晶 特征：有序性，對稱排列，周期性的重復結構 為空間結構研究提供x-衍射樣品1.

3、酶的結晶方法 緩慢改變酶蛋白的溶解度，使其略處于過飽和狀態(tài)。 （1）鹽析法 （2）有機溶劑沉淀法 （3）復合結晶法 （4）透析平衡法 （5）等電點法既是純化的結果又是純化的手段生化藥物制造工藝酶類藥物優(yōu)秀2.結晶的條件選擇酶的純度酶的濃度金屬離子pH溫度、時間晶種生化藥物制造工藝酶類藥物優(yōu)秀 酶的分離純化工作中的注意事項1. 防止酶蛋白變性2. 防止復因子丟失3. 防止酶被蛋白 水解酶降解生化藥物制造工藝酶類藥物優(yōu)秀超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase, SOD）結構特點：金屬酶Fe-SOD: Mw38000，2個亞基，每個亞基含1個Fe，存在 于 中 Cu、Zn-SOD:

4、 Mw32000，2個亞基，每個亞基含1個Cu，1個 Zn，存在于 中Mn-SOD: 原核細胞中，Mw40000,2個亞基，每個亞基1個Mn 真核細胞中，Mw80000，4個亞基，每個亞基1個Mn真核細胞原核細胞生化藥物制造工藝酶類藥物優(yōu)秀酶的性質穩(wěn)定性 對熱穩(wěn)定：天然牛血SOD可75加熱數(shù)分鐘，對熱 穩(wěn)定性與溶液離子強度有關 對pH的穩(wěn)定性：一般pH5.39.5較穩(wěn)定，豬血SOD在 pH7.69較穩(wěn)定金屬輔基與酶活性關系 Cu、Zn-SOD：Zn與分子結構有關，與催化活性無關 Cu與活性有關，對酶活力是必需的 Mn-SOD：Mn對酶活力是必需的 Fe-SOD：Fe對酶活力是必需的生化藥物制造工藝酶類藥物優(yōu)秀1.以牛血紅細胞提取Cu、Zn-SOD