2022-2023學(xué)年新教材高中生物 第1章 發(fā)酵工程 第2節(jié) 微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用 一 微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)夯基提能作業(yè) 新人教版選擇性必修3

1、 第1章 第2節(jié) 一一、選擇題1下列有關(guān)平板劃線接種法的操作錯(cuò)誤的是(D)A將接種環(huán)放在火焰上灼燒B將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液C蘸取菌液和劃線要在火焰旁進(jìn)行D劃線時(shí)要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連解析：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他的金屬用具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速?gòu)氐椎販缇蔄正確；接種環(huán)必須冷卻后，才可以伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液，否則會(huì)燒傷或燒死微生物，故B正確；蘸取菌液和劃線要在火焰旁進(jìn)行，防止空氣中的雜菌污染，故C正確；劃線時(shí)要避免最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連，因?yàn)樽詈笠粎^(qū)是細(xì)菌最稀少的，而第一區(qū)是細(xì)菌最稠密的，如果連在一起則有可能影響單個(gè)

2、菌落的分離效果，故D錯(cuò)誤。2下列敘述錯(cuò)誤的是(B)A培養(yǎng)乳酸菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素B培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至堿性C培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性D培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)需要提供無(wú)氧的條件解析：維生素是乳酸菌生長(zhǎng)繁殖所必需的，在體內(nèi)又不能合成，因此要在培養(yǎng)乳酸菌的培養(yǎng)基中添加維生素，A正確；霉菌生長(zhǎng)所需要的pH呈酸性，培養(yǎng)霉菌時(shí)應(yīng)將pH調(diào)至酸性，在堿性條件下不易繁殖，甚至?xí)?dǎo)致霉菌死亡，B錯(cuò)誤；細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需要的pH呈中性或微堿性，C正確；厭氧微生物在有氧時(shí)無(wú)氧呼吸受抑制，因此培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)需要提供無(wú)氧的條件，D正確。3有關(guān)倒平板的操作錯(cuò)誤的是(C)A將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌

3、面上B使打開(kāi)的錐形瓶瓶口迅速通過(guò)火焰C將培養(yǎng)皿打開(kāi)，培養(yǎng)皿蓋倒放在桌子上D等待平板冷卻凝固后需要倒過(guò)來(lái)放置解析：將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，以防止雜菌污染，A正確；使打開(kāi)的錐形瓶瓶口迅速通過(guò)火焰，對(duì)瓶口進(jìn)行滅菌處理，B正確；倒平板時(shí)培養(yǎng)皿蓋打開(kāi)的開(kāi)口要盡量小，不能將培養(yǎng)皿完全打開(kāi)，C錯(cuò)誤；等待平板冷卻凝固后，將平板倒過(guò)來(lái)放置，D正確。4下列關(guān)于微生物營(yíng)養(yǎng)的說(shuō)法，不正確的是(C)A對(duì)異養(yǎng)微生物而言，牛肉膏既是碳源，又是氮源B生長(zhǎng)因子是指氨基酸、維生素、堿基等不可缺少的微量有機(jī)物C氮源不能為微生物提供能量D氮源主要用于合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物解析：同一種物質(zhì)可以既作為碳源又作為氮

4、源，如牛肉膏，A正確；生長(zhǎng)因子是指氨基酸、維生素、堿基等不可缺少的微量有機(jī)物，B正確；自然界中一些微生物如硝化細(xì)菌，可以通過(guò)氧化氨釋放的能量獲得生長(zhǎng)所需能量，C錯(cuò)誤；蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物等都含有氮元素，所以氮源主要用于合成這些含氮的化合物，D正確。5在酵母菌的純培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，劃線接種(甲)、培養(yǎng)結(jié)果(乙)如下圖，且甲、乙的對(duì)應(yīng)位置不變。有關(guān)敘述，錯(cuò)誤的是(B)A配制培養(yǎng)基時(shí)需進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B甲中a區(qū)域?yàn)閯澗€的起始位置C連續(xù)劃線的目的是獲得單個(gè)細(xì)菌形成的菌落D圖示實(shí)驗(yàn)過(guò)程中接種環(huán)灼燒了5次解析：為了能徹底滅菌，配制的培養(yǎng)基需進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，A正確；起始劃線的區(qū)域長(zhǎng)出的菌落多且密，根據(jù)

5、甲、乙對(duì)應(yīng)區(qū)域?qū)Ρ?，甲中a區(qū)域?yàn)閯澗€的結(jié)束位置，B錯(cuò)誤；連續(xù)劃線的目的是獲得單個(gè)細(xì)菌形成的菌落，C正確；由于每次使用接種環(huán)前后都要灼燒滅菌，從圖示甲中4次劃線接種就可推出，接種過(guò)程中接種環(huán)至少灼燒了5次，D正確。6(2021山東濟(jì)南外國(guó)語(yǔ)學(xué)校高二下期中)某小組的同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)，包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察與計(jì)數(shù)。下列與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的敘述中，正確的是(D)A實(shí)驗(yàn)用過(guò)的帶菌培養(yǎng)基經(jīng)過(guò)加熱后才能倒掉B利用平板劃線法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行分離純化并計(jì)數(shù)C觀察細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)中，最好是在另一平板上接種清水作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)D培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉可分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供氮源和碳源解

6、析：實(shí)驗(yàn)用過(guò)的帶菌培養(yǎng)基，需要用高壓蒸汽滅菌法滅菌后才能倒掉，以免污染環(huán)境，A錯(cuò)誤；利用平板劃線法可以對(duì)細(xì)菌進(jìn)行分離純化，但是不能計(jì)數(shù)，應(yīng)利用稀釋涂布平板法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行分離純化并計(jì)數(shù)，B錯(cuò)誤；要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種無(wú)菌水作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)，C錯(cuò)誤；培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉可分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供氮源和碳源，蛋白胨也可以提供碳源，D正確。7(2021山東膠州高二上期末改編)某研究小組用平板劃線法從有機(jī)廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是(C)A培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌B轉(zhuǎn)換劃線角度時(shí)不需灼燒接種環(huán)即可進(jìn)行劃線C接種時(shí)不能劃破培養(yǎng)基，否則難以達(dá)到分離單菌落的目的D劃

7、線操作時(shí)完全打開(kāi)皿蓋，劃完立即蓋上解析：培養(yǎng)基配制好后要先高壓蒸汽滅菌，后分裝到培養(yǎng)皿，A錯(cuò)誤；轉(zhuǎn)換劃線角度后要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌，冷卻后再進(jìn)行劃線，B錯(cuò)誤；接種時(shí)不應(yīng)劃破培養(yǎng)基表面，否則不能分離得到單菌落，C正確；劃線時(shí)左手將皿蓋打開(kāi)一條縫隙，右手于火焰近處將接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，不可完全打開(kāi)皿蓋，D錯(cuò)誤。8(2021山東臨沂羅莊區(qū)高二下期末)做微生物的分離與培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí)，下列敘述正確的是(D)A所有培養(yǎng)基都必須含有碳源和氮源B倒平板時(shí)，應(yīng)將打開(kāi)的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)灼燒滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落D進(jìn)行系列稀釋操作時(shí)，用移液管吸

8、取相應(yīng)的菌液注入試管后，還要用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，使菌液與水充分混勻解析：培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基一般含有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽等，但是培養(yǎng)某些特殊微生物的時(shí)候可以缺少部分成分，如能利用空氣中CO2的自養(yǎng)生物，培養(yǎng)基中不需要添加碳源；能進(jìn)行固氮作用的微生物，培養(yǎng)基中不需要添加氮源，A錯(cuò)誤。倒平板過(guò)程中，不能直接打開(kāi)培養(yǎng)皿的皿蓋并放到一邊，應(yīng)該用左手將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條略大于瓶口的縫隙，B錯(cuò)誤。接種環(huán)在酒精燈火焰上灼燒滅菌后，需冷卻后才能快速挑取菌落，以免接種環(huán)溫度過(guò)高，殺死細(xì)菌，C錯(cuò)誤。進(jìn)行系列稀釋操作時(shí)，用移液管吸取相應(yīng)的菌液注入試管后，還要用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，使菌液

9、與水充分混勻，D正確。9(2021河北滄州一中高二下月考)下列關(guān)于制備大腸桿菌培養(yǎng)基的敘述，錯(cuò)誤的是(B)A制作培養(yǎng)基時(shí)，可不加入瓊脂B倒入培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿要立即倒過(guò)來(lái)放置C大腸桿菌培養(yǎng)基可用高壓蒸汽滅菌法滅菌D制備斜面培養(yǎng)基可用于大腸桿菌的保存解析：用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，不需要加入瓊脂，A正確；將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿后需等培養(yǎng)基冷凝后才能倒過(guò)來(lái)放置，B錯(cuò)誤；大腸桿菌培養(yǎng)基可用高壓蒸汽滅菌法滅菌，C正確；將大腸桿菌用劃線法接種在斜面培養(yǎng)基上，37 培養(yǎng)24 h后，置于4 的冰箱中保存，D正確。10(不定項(xiàng))生長(zhǎng)圖形法是一種測(cè)定微生物營(yíng)養(yǎng)需求的簡(jiǎn)便方法。為探究某嗜熱菌所需生長(zhǎng)因子的種類(lèi)，研究小組

10、把該菌的懸浮液與不含任何生長(zhǎng)因子但含有其他必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒成平板，然后在平板上劃分?jǐn)?shù)區(qū)，將甲、乙、丙三種生長(zhǎng)因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結(jié)果如下圖所示。下列說(shuō)法正確的是(ACD)A倒成平板后直接培養(yǎng)可判斷有無(wú)污染B倒成平板后需要進(jìn)行滅菌處理C圖示結(jié)果表明該菌需要生長(zhǎng)因子乙和丙D生長(zhǎng)圖形法還可用于某些菌種的篩選解析：倒平板后不接種任何菌種直接進(jìn)行培養(yǎng)觀察有無(wú)菌落的出現(xiàn)，可以判斷培養(yǎng)基有無(wú)污染，A項(xiàng)正確；在制作培養(yǎng)基的過(guò)程中，需要先進(jìn)行滅菌再倒平板，B項(xiàng)錯(cuò)誤；圖中嗜熱菌在添加了乙、丙生長(zhǎng)因子的區(qū)域生長(zhǎng)，故該菌需要的生長(zhǎng)因子是乙和丙，C項(xiàng)正確；不同的菌種所需的生長(zhǎng)因子不同，利用生長(zhǎng)圖形法

11、可用于某些菌種的篩選，菌種只會(huì)在提供其需要的生長(zhǎng)因子的區(qū)域生長(zhǎng)，D項(xiàng)正確。11(不定項(xiàng))(2021山東威海文登區(qū)期末)下圖是微生物平板劃線示意圖，劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5，下列操作方法錯(cuò)誤的是(CD)A每次劃線操作后要將接種環(huán)放在火焰上灼燒滅菌B劃線操作應(yīng)在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行C第3次劃線操作可從第2次開(kāi)始劃出，也可從第4次開(kāi)始劃出D只有在第5次劃線區(qū)域中才可以得到單菌落解析：進(jìn)行平板劃線操作之前，將接種環(huán)在酒精燈火焰上進(jìn)行灼燒滅菌，A項(xiàng)正確；劃線操作應(yīng)在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行，B項(xiàng)正確；劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5，應(yīng)保證每次劃線的菌種來(lái)自上一次劃線的末端，C項(xiàng)錯(cuò)誤；有可能在第5次劃線的區(qū)域獲

12、得單菌落，也有可能在第4次劃線的區(qū)域得到所需要的單菌落，D項(xiàng)錯(cuò)誤。12(不定項(xiàng))將大腸桿菌接種到適宜的細(xì)菌培養(yǎng)基上，加蓋后，以不同的方式處理，并放置在不同的溫度環(huán)境中，培養(yǎng)24 h后，觀察所得結(jié)果如表：編號(hào)abcdef處理方法接種大腸桿菌接種大腸桿菌，并覆一吸有抗生素X的圓紙片接種大腸桿菌，并覆一吸有抗生素Y的圓紙片接種大腸桿菌，表面全被醋覆蓋接種大腸桿菌無(wú)接種菌溫度40 40 40 40 0 40 觀察結(jié)果全表面渾濁紙片周?chē)尸F(xiàn)一片清晰區(qū)，其余表面渾濁全表面渾濁全表面清晰全表面清晰全表面清晰下列判斷中，正確的是(ACD)A編號(hào)a和f比較可知，有大腸桿菌的培養(yǎng)基表面會(huì)變渾濁B根據(jù)編號(hào)b和c的觀

13、察結(jié)果可知，抗生素Y有較強(qiáng)的殺菌能力C將編號(hào)e和a的結(jié)果比較可知，0 的環(huán)境不適合大腸桿菌生長(zhǎng)D若揭開(kāi)編號(hào)f的蓋子，24 h后可觀察到培養(yǎng)基表面出現(xiàn)渾濁解析：根據(jù)對(duì)照原則，a、f的區(qū)別在于是否接種了大腸桿菌，比較題表觀察結(jié)果可知，有大腸桿菌的培養(yǎng)基表面會(huì)變渾濁，A正確；用含有抗生素的紙片覆蓋在大腸桿菌的培養(yǎng)基上，可根據(jù)培養(yǎng)基表面的渾濁程度判定抗生素的殺菌效果，b和c對(duì)比可知抗生素X可殺死大腸桿菌，而抗生素Y不能殺死大腸桿菌，B錯(cuò)誤；編號(hào)e、a可形成對(duì)照，其自變量是溫度，根據(jù)觀察結(jié)果可知0 不適合大腸桿菌生長(zhǎng)，C正確；若揭開(kāi)編號(hào)f的蓋子，空氣中的微生物將落到培養(yǎng)基表面進(jìn)行生長(zhǎng)，24 h后可觀察到

14、培養(yǎng)基表面出現(xiàn)渾濁，D正確。二、非選擇題13回答下列與細(xì)菌培養(yǎng)相關(guān)的問(wèn)題。(1)在細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中能同時(shí)提供碳源、氮源的成分是_蛋白胨_(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常，制備培養(yǎng)基時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)菌的不同來(lái)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，其原因是_不同細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需的最適pH不同_。硝化細(xì)菌在沒(méi)有碳源的培養(yǎng)基上_能夠_(填“能夠”或“不能”)生長(zhǎng)，原因是_硝化細(xì)菌可以利用空氣中的CO2作為碳源_。(2)用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)一般需要將平板_倒置_(填“倒置”或“正置”)。(3)單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來(lái)初步區(qū)分不同種的微生物，原因是_在一定的

15、培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征_。(4)有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過(guò)_滅菌_處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物。解析：(1)能同時(shí)提供碳源、氮源的成分必須同時(shí)含有碳和氮兩種元素，蛋白胨、葡萄糖和NaNO3中，只有蛋白胨同時(shí)含有這兩種元素。不同細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需的最適pH不同，所以在配制培養(yǎng)基時(shí)，在分裝前必須調(diào)節(jié)pH。硝化細(xì)菌能夠進(jìn)行化能合成作用，即能夠利用化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的化學(xué)能固定外界的CO2，所以能夠在沒(méi)有碳源的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。(2)用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，為防止培養(yǎng)基冷凝后形成的水滴滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基，要將平板倒置。(3)通常根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征初步區(qū)

16、分不同種的微生物，因?yàn)椴煌⑸锏木涞男螤?、大小、顏色、凹凸情況等不同，且在一定的培養(yǎng)條件下微生物的菌落特征是穩(wěn)定的。(4)為防止污染環(huán)境，使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需進(jìn)行滅菌處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物。14炭疽桿菌能引起人畜患炭疽病。炭疽桿菌呈竹節(jié)狀排列，菌落呈卷發(fā)狀。對(duì)炭疽病疑似患者，可根據(jù)噬菌體的寄主專一性，通過(guò)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行確診。細(xì)菌培養(yǎng)：采集疑似患者的樣本，分離培養(yǎng)，獲得可疑菌落。細(xì)菌鑒定：實(shí)驗(yàn)流程圖如下所示。(1)對(duì)配制的液體培養(yǎng)基要采用_高壓蒸汽滅菌法_(方法)進(jìn)行滅菌。培養(yǎng)基配制和滅菌時(shí)，滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是_先調(diào)節(jié)pH，后滅菌_。(2)挑選可疑菌落制片后，用_顯

17、微鏡_觀察，可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。(3)接種可疑菌后，35 培養(yǎng)24 h，液體培養(yǎng)基變渾濁，原因是_細(xì)菌大量繁殖_。圖中的對(duì)照組試管中應(yīng)加入_等量生理鹽水_。兩組試管同時(shí)培養(yǎng)6 h后，進(jìn)行比較，若實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度_降低_(填“提高”“降低”或“不變”)，則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染。此實(shí)驗(yàn)依據(jù)的原理是_實(shí)驗(yàn)組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽桿菌，使細(xì)菌裂解，溶液變澄清_。解析：(1)培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌。在配制培養(yǎng)基時(shí)，需要先調(diào)節(jié)pH，后滅菌。(2)菌落可以通過(guò)肉眼觀察，而單個(gè)細(xì)菌無(wú)法通過(guò)肉眼觀察，需要借助顯微鏡觀察。(3)接種可疑菌后，35 培養(yǎng)24 h，液體培養(yǎng)基變渾濁，原

18、因是細(xì)菌大量繁殖。對(duì)照組試管中應(yīng)加入等量生理鹽水，與實(shí)驗(yàn)組同時(shí)培養(yǎng)6 h后，若實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對(duì)照組低，則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除。噬菌體的宿主具有專一性，患者被炭疽桿菌感染，則實(shí)驗(yàn)組加入的噬菌體就會(huì)侵染炭疽桿菌，炭疽桿菌就會(huì)裂解，細(xì)菌數(shù)量減少，渾濁度降低。15(2021福建莆田二模)隨著紡織工業(yè)的迅速發(fā)展，聚乙烯醇(PVA)作為漿料大量進(jìn)入印染廢水，由于PVA屬于難降解有機(jī)物，給傳統(tǒng)廢水處理工藝帶來(lái)了新的挑戰(zhàn)。某研究小組從活性污泥中分離出了3株聚乙烯醇降解菌株W1、W2、W3，該研究小組進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示(OD600值能反映出菌株生長(zhǎng)量)。請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題：項(xiàng)目W1W2W3W1W2W1W3W2W3W1W2W3PVA降解率/%42.74.64.87