專題九生物科技與技術(shù)實踐課件(PPT 36頁)

1、考綱要求專題九 生物科技與技術(shù)實踐 內(nèi)容要求1基因工程基因工程的誕生基因工程的原理及技術(shù)基因工程的應(yīng)用蛋白質(zhì)工程2克隆技術(shù)植物的組織培養(yǎng)動物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆細(xì)胞融合與單克隆抗體3胚胎工程動物胚胎發(fā)育的基本過程與胚胎工程的理論基礎(chǔ)胚胎干細(xì)胞的移植胚胎工程的應(yīng)用第1頁，共36頁。4.生物技術(shù)的安全性和倫理問題轉(zhuǎn)基因生物的安全性生物武器對人類的威脅生物技術(shù)中的倫理問題5.生態(tài)工程闡述生態(tài)工程的原理生態(tài)工程的實例6.酶的應(yīng)用酶的存在與簡單的制作方法酶活力測定的一般原理和方法酶在食品制造和洗滌等方面的應(yīng)用制備和應(yīng)用固相化酶（1）能獨立完成“生物知識內(nèi)容表”所列實驗，包括理解實驗?zāi)康摹⒃?、方法和?/p>

2、作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實驗的方法和技能進(jìn)行綜合運用（2）具備驗證簡單生物學(xué)事實的能力，并能對實驗現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理（3）能對一些簡單的實驗方案作出恰當(dāng)?shù)脑u價和修訂7.生物技術(shù)在食品加工及其他方面的應(yīng)用（1）從生物材料中提取某些特定的成分（2）運用發(fā)酵加工食品的基本方法（3）測定食品加工中可能產(chǎn)生的有害物質(zhì)（4）植物的組織培養(yǎng)（5）蛋白質(zhì)的提取和分離（6）PCR 技術(shù)的基本操作和應(yīng)用第2頁，共36頁。合成逆轉(zhuǎn)錄 基因工程目的基因的獲取: 分為直接分離基因、人工合成基因。人工合成法反轉(zhuǎn)錄法mRNA 單鏈DNA 雙鏈DNA 專一性強(qiáng)，目的基因不含內(nèi)含子操作麻煩，mRNA存

3、在的時間短，技術(shù)要求高根據(jù)已知氨基酸序列合成通過測出的核苷酸序列，利用化學(xué)方法合成專一性最強(qiáng)，目的基因不含內(nèi)含子，可以合成自然界中不存在的基因目前，復(fù)雜的、尚不知核苷酸序列的基因不能合成第3頁，共36頁。基因表達(dá)載體的構(gòu)建方法 重組DNA（環(huán)狀重組質(zhì)粒） 同一種限制酶切割 帶有黏性 帶有相同黏性末端的 末端切口 目的基因片段 載體（質(zhì)粒） DNA分子（含目的基因） DNA連接酶 第4頁，共36頁。將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞植物細(xì)胞動物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用方法 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法顯微注射技術(shù)感受態(tài)細(xì)胞法(用Ca2+處理)受體細(xì)胞受精卵體細(xì)胞 (需經(jīng)組織 培養(yǎng))受精卵原核細(xì)胞第5頁，共

4、36頁。目的基因的檢測與鑒定 導(dǎo)入檢測:DNA 分子雜交技術(shù) , 即使用放射性同位素標(biāo)記的含目的基因的 DNA 片段作探針檢測。 轉(zhuǎn)錄檢測 : 分子雜交法 , 即目的基因表達(dá)檢測 作探針與 mRNA 雜交 翻譯檢測 : 抗原抗體雜交法個體生物學(xué)水平鑒定: 轉(zhuǎn)基因生物是否具有抗性或轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的功能活性。 第6頁，共36頁。細(xì)胞工程細(xì)胞工程包括動物細(xì)胞工程和植物細(xì)胞工程。植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞的全能性。植物組織培養(yǎng)可培育繁殖速度快而且無病毒的植株,還可以通過大規(guī)模的植物、細(xì)胞培養(yǎng)來生產(chǎn)藥物、食品添加劑、香料、色素和殺蟲劑等,另外，還可用植物組織培養(yǎng)方法形成的胚狀體,包裹上人工種皮

5、,制成人工種子。過程名稱過程形成體特點條件脫分化 由外植體形成愈傷組織排列疏松、高度液泡化的薄壁細(xì)胞團(tuán)離體提供營養(yǎng)物質(zhì)(有機(jī)物、無機(jī)物)提供激素(生長素和細(xì)胞分裂素)提供其他適宜條件再分化由愈傷組織成為幼苗或胚狀結(jié)構(gòu)有根、芽或有生根發(fā)芽的能力第7頁，共36頁。植物組織培養(yǎng)與動物細(xì)胞培養(yǎng)項目原理培養(yǎng)基結(jié)果培養(yǎng)目的植物組織培養(yǎng)細(xì)胞的全能性固體：營養(yǎng)物質(zhì)、激素培養(yǎng)成植株快速繁殖,培育無病毒植株等動物細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞的增殖液體:營養(yǎng)物質(zhì)、動物血清等培育成細(xì)胞系或細(xì)胞株獲得細(xì)胞的產(chǎn)物或細(xì)胞等第8頁，共36頁。植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合項目細(xì)胞融合原理細(xì)胞融合方法誘導(dǎo)手段用途植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞膜的流動性去除

6、細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合離心、電刺激、聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)克服遠(yuǎn)緣雜交不親和,獲得雜種植株動物細(xì)胞融合細(xì)胞膜的流動性使細(xì)胞分散后,誘導(dǎo)細(xì)胞融合離心、電刺激、聚乙二醇、滅活病毒等試劑誘導(dǎo)制備單克隆抗體的技術(shù)第9頁，共36頁。單克隆抗體制備過程中的兩個核心問題 為何制備單克隆抗體要將單個 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合? 體內(nèi)的 B 淋巴細(xì)胞數(shù)目很多 , 可以產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的特異性抗體 , 這些抗體主要存在于動物體血清中, 也存在于組織液及外分泌液中。如果從動物血清中分離出所需要的抗體 , 不僅獲得的抗體產(chǎn)量低 , 而且抗體的特異性差 , 純度低 , 反應(yīng)不靈敏。如果利用單個 B 淋巴細(xì)胞通過無性

7、繁殖 , 就可產(chǎn)生大量單一抗體,但 B 淋巴細(xì)胞在體外不能無限增殖(從動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程可以理解, 單個細(xì)胞要度過兩次“危機(jī)”幾乎是不可能的 ), 這就需要利用腫瘤細(xì)胞無限增殖的特點, 將單個 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合, 可以使雜種細(xì)胞具有兩個親本的遺傳特性 , 也就是既具有無限增殖的特點, 又能產(chǎn)生單一抗體。第10頁，共36頁。制備過程中為何須經(jīng)兩次篩選 ? 第一次篩選是在 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合之后 , 因為有三種融合情況:B 淋巴細(xì)胞與 B 淋巴細(xì)胞融合、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合、 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。而只有 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞才是需要的雜種細(xì)胞。第

8、二次篩選是在雜交瘤細(xì)胞中篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。第11頁，共36頁。胚胎移植胚胎移植的供體和受體必須是同種生物,同一物種的動物才有可能具有相同的生理特征。作為受體的雌性動物應(yīng)為常見或存量大的品種,供體則為優(yōu)良的品種。胚胎移植的意義: 大大縮短了供體本身的繁殖周期 , 充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力。第12頁，共36頁。“生物技術(shù)實踐”知識網(wǎng)絡(luò)建構(gòu)微生物的培養(yǎng)生物技術(shù)在食品加工等方面的應(yīng)用生物技術(shù)在食品加工等方面的應(yīng)用生物技術(shù)在食品加工等方面的應(yīng)用成分類型消毒滅菌配制培養(yǎng)基倒平板接種培養(yǎng)臨時保藏永久保藏滅菌培養(yǎng)基無菌技術(shù)基本技術(shù)菌種保藏固定化酶生物技術(shù)實踐酶的研究應(yīng)用酶的制備酶活力的測

9、定果膠酶的應(yīng)用加酶洗衣粉固定化細(xì)胞技術(shù)制作果酒制作果醋制作腐乳制作泡菜測定亞硝酸鹽的含量 方法方法優(yōu)點應(yīng)用原理反應(yīng)式發(fā)酵條件制作流程配制溶液制備標(biāo)準(zhǔn)顯色液 制備樣品處理液 比色微生物的利用土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)纖維素分解菌的篩選流程菌株篩選統(tǒng)計菌落數(shù)目設(shè)置對照土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋涂布平板挑選菌落微生物的培養(yǎng)生物技術(shù)在食品加工等方面的應(yīng)用第13頁，共36頁。制作原理果酒和果醋制作腐乳的制作制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量果酒:無氧呼吸果醋:有氧呼吸多種微生物發(fā)酵泡菜制作:乳酸菌無氧呼吸亞硝酸鹽檢測：在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后,與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形

10、成玫瑰紅色染料實驗流程圖讓豆腐上長出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制操作提示材料的選擇與處理;防止發(fā)酵被污染;控制好發(fā)酵條件控制好材料的用量;防止雜菌污染泡菜壇的選擇;腌制的條件;測定亞硝酸鹽含量的操作切分成條狀或片狀原料加工修整、洗滌、晾曬加鹽、鹽水冷卻、加入調(diào)味料、裝壇發(fā)酵 成品 亞硝酸鹽的含量果醋沖洗榨汁酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵果酒挑選葡萄第14頁，共36頁。植物芳香油三種提取方法提取方法實驗原理方法步驟適用范圍水蒸氣蒸餾利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來水蒸氣蒸餾分離油層除水過濾適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油壓榨法通過機(jī)械加壓,壓榨出果皮中的芳香油石灰水浸泡、漂洗壓榨、過濾、

11、靜置再次過濾適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料中芳香油的提取有機(jī)溶劑萃取使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中,蒸發(fā)溶劑后就可獲得芳香油粉碎、干燥萃取、過濾濃縮適用范圍廣,要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小,能充分溶解在有機(jī)溶劑中第15頁，共36頁。直接使用酶與固定化酶類型優(yōu)點不足直接使用酶催化效率高,低耗能,低污染對環(huán)境非常敏感,易失活;難回收,不能再次利用,與產(chǎn)物混在一起,可能影響產(chǎn)品質(zhì)量固定化酶酶與產(chǎn)物分開,可反復(fù)利用一種酶只能催化一種化學(xué)反應(yīng),生產(chǎn)實踐中,很多產(chǎn)物的形成是通過一系列的酶促反應(yīng)得到的第16頁，共36頁。例1 制備單克隆抗體所采用的細(xì)胞工程技術(shù)包括（ ）細(xì)胞培養(yǎng) 細(xì)胞融合 胚胎移植 細(xì)胞核移植 B.

12、C. D. A第17頁，共36頁。例2 下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述，錯誤的是（ ）A.電刺激可誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合或動物細(xì)胞融合B.去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和將動物組織分散成單個細(xì)胞均需酶處理C.小鼠骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)抗原免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞融合可制備單克隆抗體D.某種植物甲乙兩品種的體細(xì)胞雜種與甲乙兩品種雜交后代的染色體數(shù)目相同D第18頁，共36頁。例3 下列有關(guān)植物細(xì)胞與組織培養(yǎng)的敘述中，錯誤的是（ ）A.花藥、胚不能作為組織培養(yǎng)的材料B.植物細(xì)胞具有全能性C.外植體是指用于培養(yǎng)的植物組織或器官D.外植體可誘導(dǎo)出愈傷組織A第19頁，共36頁。例4 不同的微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要各不相同。下列有關(guān)一種以C

13、O2為唯一碳源的自養(yǎng)生物營養(yǎng)的描述中，不正確的是（ ）A.氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮素B.碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì)C.無機(jī)鹽是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)D.水是該微生物的營養(yǎng)要素之一B第20頁，共36頁。例5 利用細(xì)胞工程方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是（ ）A.用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體B.體外培養(yǎng)單個效應(yīng)B細(xì)胞可以獲得大量針對SARS病毒的單克隆抗體C.將等量效應(yīng)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞D.利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者

14、D第21頁，共36頁。例6 下列有關(guān)基因工程中限制性內(nèi)切酶的描述，錯誤的是（ ）A.一種限制性內(nèi)切酶只能識別一種特定的脫氧核苷酸序列B.限制性內(nèi)切酶的活性受溫度影響C.限制性內(nèi)切酶能識別和切割RNAD.限制性內(nèi)切酶可從原核生物中提取C第22頁，共36頁。例7 利用外源基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，可生產(chǎn)人類所需要的產(chǎn)品。下列選項中能說明目的基因完成了在受體細(xì)胞中表達(dá)的是（ ）A.棉花二倍體細(xì)胞中檢測到細(xì)菌的抗蟲基因B.大腸桿菌中檢測到人胰島素基因及其mRNAC.山羊乳腺細(xì)胞中檢測到人生長激素DNA序列D.酵母菌細(xì)胞中提取到人干擾素蛋白D第23頁，共36頁。例8 單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科

15、學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述，錯誤的是（ ）A.特異性強(qiáng)，靈敏度高B.與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈”C.體外培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞可大量分泌單克隆抗體D.由效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞分泌C第24頁，共36頁。例9 下列關(guān)于基因工程應(yīng)用的敘述，正確的是（ ）A.基因治療就是把缺陷基因誘變成正?；駼.基因診斷的基本原理是DNA分子雜交C.一種基因探針能檢測水體中的各種病毒D.原核基因不能用來進(jìn)行真核生物的基因改良B第25頁，共36頁。例10 在已知某小片段基因堿基序列的情況下，獲得該基因的最佳方法是（ ）A.用mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄合成DNAB.以4種脫氧核苷酸為原料

16、人工合成C.將供體DNA片段轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞中，再進(jìn)一步篩選D.由蛋白質(zhì)的氨基酸序列推測mRNAB第26頁，共36頁。例11 【現(xiàn)代生物科技專題】 天然釀酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶類，用作發(fā)酵原料的淀粉需經(jīng)一系列復(fù)雜的轉(zhuǎn)化過程才能被利用。研究者從某絲狀真菌中獲取淀粉酶基因并轉(zhuǎn)入釀酒酵母菌，獲得的釀酒酵母工程菌可直接利用淀粉產(chǎn)生酒精。請回答下列問題：（1）將淀粉酶基因切割下來所用的工具是_，用_將淀粉酶基因與載體拼接成新的DNA分子，下一步將該DNA分_，以完成工程菌的構(gòu)建。解析：基因工程的步驟是：獲取目的基因、目的基因與運載體結(jié)合、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測和鑒定。用限制酶將目的基因切

17、割下來，再用DNA連接酶連接形成重組DNA分子，將重組DNA分子導(dǎo)入釀酒酵母菌細(xì)胞中。限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶導(dǎo)入釀酒酵母菌第27頁，共36頁。（2）若要鑒定淀粉酶基因是否插入釀酒酵母菌，可采用的檢測方法是_；若要鑒定淀粉酶基因是否翻譯成淀粉酶，可采用_檢測；將該工程菌接種在含淀粉的固體平板培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一定時間后，加入碘液，工程菌周圍出現(xiàn)透明圈，請解釋該現(xiàn)象發(fā)生的原因。 解析：目的基因的檢測過程包括三個步驟：用基因探針檢測受體細(xì)胞中是否有目的基因、用基因探針檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA、用抗原抗體雜交技術(shù)檢測是否有相應(yīng)蛋白質(zhì)的合成。該工程菌可分解淀粉，因此，在固體平板培養(yǎng)基上接種細(xì)菌的

18、部位不具有淀粉，滴加碘液后沒有藍(lán)色反應(yīng)出現(xiàn)，產(chǎn)生透明圈。DNA分子雜交技術(shù)抗原抗體雜交或淀粉酶活性答案：該工程菌產(chǎn)生的淀粉酶可分泌至培養(yǎng)基，水解淀粉后的區(qū)域，遇碘不再變藍(lán)色，產(chǎn)生透明圈。（3）如何進(jìn)一步鑒定不同的轉(zhuǎn)基因工程菌菌株利用淀粉能力的大小？解析：該實驗自變量為不同轉(zhuǎn)基因工程菌，因變量為淀粉酶活性或酒精產(chǎn)量。在相同條件下培養(yǎng)不同工程菌菌株，酒精產(chǎn)量較高的菌株利用淀粉的能力較強(qiáng)。答案：測定相同培養(yǎng)條件下不同工程菌菌株的淀粉酶活性或酒精產(chǎn)量。第28頁，共36頁。（4）微生物在基因工程領(lǐng)域中有哪些重要作用？ 解析：微生物具有繁殖周期短、多為單細(xì)胞、易培養(yǎng)、遺傳物質(zhì)相對較少等特點，因此，一般用微

19、生物作為受體細(xì)胞和用于發(fā)酵的工程菌?；蚬こ痰墓ぞ呙赣邢拗泼负虳NA連接酶，其中限制酶主要來自微生物。基因工程的常用運載體有：質(zhì)粒、動植物病毒、噬菌體的衍生物，其中質(zhì)粒是微生物細(xì)胞染色體外能夠自主復(fù)制的小型環(huán)狀DNA分子。 答案：工具酶主要來自微生物；最重要的目的基因供體庫之一；目的基因的載體之一；作為受體細(xì)胞；提供用于發(fā)酵的工程菌。第29頁，共36頁。例12 【生物技術(shù)實踐】科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種抗菌活性蛋白。這種蛋白質(zhì)具有極強(qiáng)的抗菌能力，受到研究者重視。（1）分離該抗菌蛋白可用電泳法，其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的_、大小及形狀不同，在電場中的_不同而實現(xiàn)分離。（2）可用金黃色葡萄球菌來檢驗

20、該蛋白的體外抗菌特性。抗菌實驗所用培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為細(xì)菌生長提供_和_。（3）分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基中接種等量菌液。培養(yǎng)一定時間后，比較兩種培養(yǎng)基中菌落的_，確定該蛋白質(zhì)的抗菌效果。（4）細(xì)菌培養(yǎng)常用的接種方法有_和_。實驗結(jié)束后，對使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行_處理。 解析：本題考查生物技術(shù)實踐中的基礎(chǔ)知識，知識點覆蓋面大，答案容易組織。有關(guān)物質(zhì)的分離與提取方法，設(shè)計分離蛋白質(zhì)的電泳法電泳利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離。有關(guān)微生物培養(yǎng)基的成分、種類與作用，涉及牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)

21、基中的牛肉膏與蛋白胨分別為微生物提供碳源、氮源和維生素。有關(guān)微生物的接種和培養(yǎng)方法，常采用平板畫線法和稀釋涂布平板法對細(xì)菌進(jìn)行接種。為防止細(xì)菌的污染，實驗結(jié)束后要對用過的培養(yǎng)基作滅菌處理。電荷（帶電情況）遷移速率碳源氮源數(shù)量平板劃線法稀釋涂布平板法滅菌第30頁，共36頁。例13 【現(xiàn)代生物科技專題】為擴(kuò)大可耕地面積，增加糧食產(chǎn)量，黃河三角洲等鹽堿地的開發(fā)利用備受關(guān)注。我國科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因育出了耐鹽水稻新品系。（1）獲得耐鹽基因后，構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性內(nèi)切酶作用于圖中的_處，DNA連接酶作用于_。（填“a” 或“b”）（2）將重組DNA分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和_

22、法。（3）由導(dǎo)入目的基因的水稻細(xì)胞培養(yǎng)成植株需要利用_技術(shù)，該技術(shù)的核心是_和_。（4 ）為了確定耐鹽基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的_作探針進(jìn)行分子雜交檢測，又要用_方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。3553C T G C A G G A C G T C- b b a a第31頁，共36頁。 解析：本題以“科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系”為背景，考查了現(xiàn)代生物技術(shù)專題中的有關(guān)基因工程和植物細(xì)胞工程的基本內(nèi)容?；蚬こ讨械墓ぞ呙赶拗泼负虳NA連接酶的作用是斷開或連接兩核苷酸間的磷酸二酯鍵。將目的基因?qū)胫参锸荏w細(xì)胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法。目的

23、基因的檢測和鑒定，常利用DNA分子雜交技術(shù)（探針）等作分子水平的檢測和個體生物學(xué)水平的鑒定。植物組織培養(yǎng)的基本過程是植物在離體狀態(tài)下，進(jìn)行脫分化與再分化。 答案：（1）a a (2)基因槍、花粉管通道 (3)植物組織培養(yǎng) 脫分化（去分化） 再分化 (4)耐鹽基因（目的基因）一定濃度鹽水澆灌（移栽到鹽堿地中）第32頁，共36頁。例14 【現(xiàn)代生物科技專題】回答下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的問題：（1）在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到細(xì)胞表面_時，細(xì)胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的_。此時，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是_。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是_。（2）隨著細(xì)胞傳

24、代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn)_的現(xiàn)象；但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成_細(xì)胞，該種細(xì)胞的黏著性_，細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)（糖蛋白）的量_。（3）現(xiàn)用某種大分子染料，對細(xì)胞進(jìn)行染色時，觀察到死細(xì)胞被染色，而活細(xì)胞不染色，原因是_。（4 ）檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染色體的數(shù)目，最好選用細(xì)胞分裂到_期的細(xì)胞用顯微鏡進(jìn)行觀察。（5）在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，通常在_條件下保存細(xì)胞。因為在這種條件下，細(xì)胞中_的活性降低，細(xì)胞_的速率降低。（6）給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后，發(fā)生了排斥現(xiàn)象，這是因為機(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)作_進(jìn)行攻擊。第33頁，共36頁。 解析：本題考查現(xiàn)代生物科技專題中的有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)知識。在動物細(xì)胞的培養(yǎng)過程中，細(xì)胞因相互接觸而出現(xiàn)接觸抑制并具有貼壁現(xiàn)象，可用胰蛋白酶將貼壁細(xì)胞分離下來。隨著細(xì)胞培養(yǎng)傳代次數(shù)的增多，大多數(shù)細(xì)胞失去了分裂能力而衰老死亡，只有少數(shù)細(xì)胞仍具有分裂能力，這少數(shù)的細(xì)胞具有癌細(xì)胞的特征，其細(xì)胞膜上的糖蛋白減少，細(xì)胞的黏著性下降。細(xì)胞膜具有選擇透過性，故染料分子不