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1、歡迎進(jìn)入學(xué)習(xí) 課堂第十六章 人體組織的檢驗(yàn) 一、毛發(fā)檢驗(yàn) 毛發(fā)結(jié)構(gòu):毛發(fā)是皮膚的一種特殊的附屬器,是 皮膚毛囊細(xì)胞產(chǎn)生的一種富有彈性角質(zhì)體。 毛尖-是毛干的游離末端,毛干向毛尖逐漸 變細(xì)而尖 毛干-是裸露于皮膚外部的部分,由角化上 皮細(xì)胞組成,中心向外可以分為: 毛小皮:人-毛小皮花紋通常為細(xì)小波浪狀。 毛皮質(zhì):人-皮質(zhì)發(fā)達(dá), 毛髓質(zhì):人-髓質(zhì)不發(fā)達(dá)、而且髓質(zhì)不連續(xù) 毛根-是埋在皮膚內(nèi)的部分。 毛 球:毛根起始端膨大和球狀的部分 毛 囊:包裹毛根的一管狀結(jié)構(gòu),內(nèi)層為上皮 根鞘、外層為纖維組織鞘 毛乳頭:毛球和毛囊末端膨大,底面內(nèi)凹,含 毛細(xì)血管和神經(jīng)的結(jié)締組法醫(yī)意義: 1 毛發(fā)容易脫落,在兇殺
2、、強(qiáng)奸、搶劫等 案件中均可遺留 2 毛發(fā)理化性質(zhì)穩(wěn)定,其主要成分為角蛋 白,不易腐蝕和毀壞,可長(zhǎng)期保存 3 毛發(fā)可以進(jìn)行個(gè)人識(shí)別鑒定注意: 1 毛發(fā)容易丟失,檢驗(yàn)時(shí)應(yīng)該特別小心,最 好帶口罩 2 選擇合適的背景進(jìn)行觀察 毛發(fā)與其他纖維的鑒別 肉眼觀:毛尖、毛干、毛根 顯微鏡:毛小皮、毛皮質(zhì)、毛髓質(zhì) 燃燒法:毛發(fā)由特殊的臭味-角蛋白中含有 3%5%的硫 人毛與其他動(dòng)物毛的鑒別毛小皮毛皮質(zhì)毛髓質(zhì)形態(tài)邊緣寬度色素寬度連續(xù)性末端人 毛細(xì)而不規(guī)則花形細(xì)鋸齒狀較寬2/3均勻較窄1/41/5不連續(xù)部分缺如動(dòng)物毛形狀多變粗鋸齒狀較窄1/21/3不均勻較寬1/3連續(xù)直至毛尖毛發(fā)部位的確定毛發(fā)其他特征鑒別 5%1
3、0%亞硝基鐵氰化鈉溶液 脫落-毛根完全角化,干燥萎縮,無(wú)根鞘附著, 根部色素少。染色不顏色反應(yīng) 拔出-毛囊組織附著、毛球濕潤(rùn),毛球下端開(kāi)放 呈鉤狀,染色呈紅色。 鈍器損傷-鈍器作用部位變寬扁平,皮質(zhì)纖維分 離,部分或完全斷裂 銳器損傷-斷端平滑整齊、毛干不碎裂、皮質(zhì)纖 維不分裂長(zhǎng) 度直徑橫斷面頭發(fā)2m0.1圓形或橢圓形胡須30cm0.15鈍的三角形陰毛36cm0.10.2長(zhǎng)橢圓形 毛發(fā)的個(gè)人識(shí)別 形態(tài)學(xué)檢查:長(zhǎng)度- 色澤-黑色、淺褐色、灰色、白色-色素:白色、黑色、紅色 形態(tài)-直發(fā)、波狀發(fā)、卷發(fā) 斷端-剪切或切割、部分撕裂或完全撕裂 免疫學(xué)檢查:ABO血型-解離試驗(yàn) 特征:1 血型物質(zhì)含量少;
4、2 毛小皮沒(méi)有血型物質(zhì),只有皮質(zhì)和髓質(zhì)才有 方法:毛發(fā)洗凈-乙醇脫色-充分壓扁-加抗體吸收-滌、解離、RBC 注意:1 毛發(fā)壓扁,原寬度地4倍; 2 抗血清效價(jià)128; 3吸收時(shí)間充分,過(guò)夜 4 毛發(fā)對(duì)照 生化學(xué)檢查:有毛根和毛囊的毛發(fā)可以檢測(cè)ESD、GLOI、PGM1、ORM等 分子生物學(xué):帶毛囊-DNA提取用chelex-100,STR基因座分析,性別基因鑒定 毛 干-線粒體DNA多態(tài)性分析 化學(xué) 分 析:微量元素的檢測(cè) 應(yīng)用:可以推測(cè)可能的生活環(huán)境、從事的職業(yè)、判斷是否中毒 方法:原子發(fā)射光譜析、原子吸收分光光度、中子活性、氣相色譜、質(zhì)譜二、軟組織檢驗(yàn) 1 種類鑒別 肉眼觀察 適合于組織
5、塊比較大的檢材的識(shí)別 組織切片 HE染色后,在顯微鏡下觀察,鑒別 *如果干燥組織可以用5%醋酸浸軟組織以 恢復(fù)正常形態(tài) 皮膚-復(fù)層鱗狀上皮細(xì)胞的表層結(jié)構(gòu)+真皮層的 毛囊和皮脂腺,及皮下脂肪 腦組織-神經(jīng)細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞 肝 臟-肝細(xì)胞及膽管構(gòu)成發(fā)肝小葉結(jié)構(gòu) 腎 臟-腎小球、腎小管、 消化道-粘膜層、粘膜下層、肌層、外膜 2 種屬鑒定 免疫學(xué)方法:抗人血清-沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、酶免疫分析 *法醫(yī)檢驗(yàn)中的組織經(jīng)常受各種因素的影響,變性或分解, 易產(chǎn)生誤判。 分子生物學(xué): Alu序列 含有AluI酶切位點(diǎn) 散在重復(fù)序列,由300bp重復(fù)單位,該序列為人類和靈長(zhǎng)類特有-種屬特異性 PCR-AFLP:
6、人類130bp的擴(kuò)增產(chǎn)物 28srRNA rRNA=60s(28s+5.8s+5s+50多種多肽)+40 保守區(qū)中的可變區(qū)進(jìn)化較快,種屬之間差異很大 人類108、104、101、99bp,不同動(dòng)物的擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度不同 細(xì)胞色素b基因 位于線粒體上的具有種屬差異的遺傳標(biāo)記 人和哺乳類動(dòng)物區(qū)別 AluI酶切位點(diǎn)-酶切片斷的長(zhǎng)度不同 人和鳥類的動(dòng)物區(qū)別NcoI酶切位點(diǎn)-人類不含有該酶切位點(diǎn) SON基因 3 個(gè)人識(shí)別檢驗(yàn)基礎(chǔ):正常情況下,同一個(gè)體不同組織的血型、酶型、DNA分型結(jié)果相同 例外:癌變的組織;腐敗組織-獲得性B物質(zhì)影響因素:環(huán)境因素,干燥能保存,潮濕易破壞 溫度、酸堿 燒熟(但未焦)的組織可
7、以檢出, 自溶和腐敗 使組織的血型物質(zhì)及其他的遺傳標(biāo)記更容易被破壞送檢注意:1 盡快送檢- 2 妥善保存-所有檢材不宜用甲醛固定 3 合理選材-肝臟和脾臟中核酸分解酶豐富,蛋白質(zhì)和DNA降解快,不宜首選,肌肉和腦是提取DNA較理想的檢材血型:ABO血型 ABH抗原不僅分布于人類紅細(xì)胞 上,也存在于人體各種上皮細(xì)胞、血管與淋巴管的內(nèi)皮細(xì)胞、心內(nèi)膜及神經(jīng)組織的神經(jīng)細(xì)胞及突觸。 有些組織的ABH抗原發(fā)育較紅細(xì)胞早 方法:吸收試驗(yàn)-凝集抑制試驗(yàn) 解離試驗(yàn)-熱解離試驗(yàn) 混合凝集-紅細(xì)胞粘連試驗(yàn) 免疫組化-酶標(biāo)抗體的應(yīng)用 基因分型-PASA、PCR-RFLP、ASO-PCR酶 型測(cè)定 檢材處理:組織制成勻
8、漿,DNA分析 DNA提?。豪鋬鼋M織-常規(guī)有機(jī)溶劑,量少用Chelex-100 DNA分析 STR或HLA基因分型 三、其他組織檢驗(yàn) 1 指甲檢驗(yàn)由表皮細(xì)胞角化而成,由多層連接牢固的角化細(xì)胞構(gòu)成,細(xì)胞內(nèi)充滿角質(zhì)蛋白。 ABO血型 特點(diǎn):ABH為水溶性血型物質(zhì),但不受分泌型的影響,存在于所有的個(gè)體。成人和新生兒指甲中的ABH含量無(wú)明顯的差異。 方法:洗凈-用肥皂水充分的洗滌,再用蒸餾水沖洗數(shù)次 軟化-生理鹽水中2小時(shí),晾干 脫脂-丙酮或乙醇脫脂 壓碎-加大抗血清接觸的面積 mtDNA檢測(cè) 測(cè)定mtDNA多態(tài)性的靈敏度比檢測(cè)核DNA的多態(tài)性高 2 骨及牙檢驗(yàn)-人體最堅(jiān)硬的組織,抵抗腐敗,長(zhǎng)期保存 檢材處理:用手術(shù)刀刮凈骨表面和牙齒表面的污垢物,用蒸餾水沖洗2次,
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