溶血對生化檢驗結(jié)果影響

1、溶血對生化檢驗結(jié)果影響溶血的定義01溶血對生化檢驗結(jié)果的影響02溶血標(biāo)本的處理04標(biāo)本溶血的原因03如何避免溶血05一、溶血的定義溶血是紅細胞破壞,紅細胞的一些組分釋放進入血清或血漿，導(dǎo)致實驗樣品出現(xiàn)特有的紅色增加。很多因素都可以使紅細胞破壞，發(fā)生溶血，從而干擾監(jiān)測，使檢驗結(jié)果失去真實性和準(zhǔn)確性，影響疾病的診斷和治療。溶血是臨床生化檢驗中最常見的一種干擾和影響因素。溶血后顯著增高的有AST、ALT、LDH、K+、TBIL、TP、ALB等；溶血后顯著降低的項目有GLU、CR等。（一）溶血對肝功能測定的影響1.天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST） 溶血造成AST升高可能是由以下兩個方面的原因引起(1)人

2、類紅細胞中AST活性約為血清中的40倍，當(dāng)標(biāo)本溶血時紅細胞破裂后釋放AST，勢必引起血清AST活性的升高從而使溶血標(biāo)本的結(jié)果明顯高于未溶血標(biāo)本。(2)溶血后血清顏色加深，致使測得的吸光度值增高。2、谷氨酸-丙酮酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT） 紅細胞中ALT活性約是血清中715倍。嚴(yán)重溶血（Hb約）時，可使血清ALT由20U/L增高到（增加約27%）。因此溶血后ALT含量測定的增高主要來源于細胞內(nèi)ALT的大量釋放。 可見與AST相比，ALT受溶血影響輕些。3、乳酸脫氫酶（LDH） 紅細胞和血小板中含有豐富的LDH，紅細胞中LDH的含量是血清的160200倍，故受溶血影響最大。在測定環(huán)節(jié)上都有可能發(fā)生不同程度

3、的血小板破壞，而影響LDH測定，使其測定結(jié)果偏高。4、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT） 由于紅細胞內(nèi)GGT含量很低，輕微溶血對其測定結(jié)果影響不大，但重度溶血則有影響5、總蛋白（TP） 總蛋白的測定通常選用雙縮脲法，主波長540nm,而血紅蛋白在555nm有吸收峰，試驗表明如果溶血標(biāo)本中Hb L時無干擾；而高Hb，會使結(jié)果偏高，可以做樣品空白來消除影響。6、總膽紅素（TBIL） 重氮法測定TBIL，最后生成紅紫色的偶氮膽紅素，主要在波長為540nm560nm處有光吸收。而Hb在波長540nm550nm處有光吸收，恰與偶氮膽紅素的比色波長相近。因此溶血后細胞破裂時大量Hb進入血清,勢必造成TBIL測定值的升

4、高,是TBIL測定的正向干擾因素。 此外，由于Hb重氮試劑反應(yīng)形成的產(chǎn)物可破壞偶氮膽紅素，溶血對重氮法測定膽紅素同時存在負(fù)向干擾，使測定結(jié)果偏低，但該作用較輕微，因此溶血后由于Hb對測定結(jié)果的干擾，TBIL的測定結(jié)果往往偏高。（二）溶血對血脂測定的影響1、總膽固醇（TC） 試驗表明如果溶血標(biāo)本中HbL無干擾；而高濃度時因Hb的固有顏色干擾，會使結(jié)果偏高。2、甘油三酯（TG） 除去上述如總膽固醇影響因素外，目前所用甘油磷酸氧化酶過氧化物酶法和乙酰丙醇顯色法都以測量甘油為基礎(chǔ)，而紅細胞膜磷脂可被磷脂酶作用，產(chǎn)生游離甘油，所以溶血后測定結(jié)果偏高。3、載脂蛋白A(APOA)及載脂蛋(APOB) 免疫透

5、射比濁法使用最廣泛，以抗原抗體為基礎(chǔ)，血紅蛋白可使測定結(jié)果升高，故標(biāo)本溶血后測定結(jié)果偏高。（三）溶血對腎功能測定的影響1、尿素（UREA) 無論是二乙酰肟法還是脲酶法，溶血均可導(dǎo)致光譜藍色部分吸光度值升高對結(jié)果都有干擾，導(dǎo)致結(jié)果偏高。2、尿酸(UA) 試驗表明如果溶血標(biāo)本中Hb1gL會干擾；是因為測定波長546mm時因Hb固有顏色潛在影響使測定結(jié)果偏高(比色法) 。 3、肌酐（Cre） 苦味酸法測定Cre的特異性較差，易受其它還原性物質(zhì)影響，主要是維生素C、酮體、丙酮酸等假肌酐干擾。假肌酐物質(zhì)亦可與苦味酸形成顏色反應(yīng)，導(dǎo)致測定值發(fā)生偏差。這種假肌酐物質(zhì)紅細胞中最多，血清中較少，故溶血后紅細胞中

6、假肌酐物質(zhì)的釋放是造成測定值發(fā)生偏差的主要原因。 溶血釋放出的物質(zhì)導(dǎo)致Jaffe反應(yīng) 而致測定結(jié)果的升高。Jaffe反應(yīng)指血漿中的肌酐與堿性苦味酸鹽反應(yīng)，生成黃紅色的苦味酸肌酐復(fù)合物的反應(yīng)。（四）溶血對電解質(zhì)測定的影響1、鉀（K+） 細胞內(nèi)液的主要陽離子，約98的鉀存于細胞內(nèi)，紅細胞內(nèi)鉀濃度約為105mmol/L，而血清中僅有3.5mmol/L5.4mmol/L，紅細胞中鉀的含量比血清中高23倍。因此溶血造成血清鉀明顯升高，增高主要來源于紅細胞內(nèi)鉀的大量釋放。 有報道表明血清游離血紅蛋白在時血清鉀增高14%16%，血清游離血紅蛋白達時血清鉀增高可達41%，所以應(yīng)在樣品采集后1h內(nèi)應(yīng)將紅細胞與血

7、清分離。并且在分析血清鉀的結(jié)果時應(yīng)引起高度注意。2、氯（CL-） 血漿中氯約為103mmol/L，紅細胞中氯約為4954mmol/L。溶血會導(dǎo)致細胞內(nèi)的氯離子轉(zhuǎn)移到血清中，從而引起了血清氯離子測定值的升高3、磷（P） 實驗表明如果溶血標(biāo)本中Hb1g/L影響很小，而在Hb等于L時影響較大，所以應(yīng)在采血后30min內(nèi)分離血細胞，否則會因磷酸酯從RBC中釋放而會使結(jié)果偏高。 （五）溶血對葡萄糖測定的影響葡萄糖(GLU) 葡萄糖氧化酶法測定GLU的特異性較強，干擾物較少，但過氧化氫酶易受到其它物質(zhì)的影響，如維生素C、谷胱苷肽均因能競爭H2O2而導(dǎo)致負(fù)偏差，樣品中某些強的酶會促使GLU降解而導(dǎo)致測定值明

8、顯下降的。如果在血清或血漿加入NaF、KF作為酵解抑制劑樣品收集后立即去蛋白時，溶血樣品也可以用。（六）溶血對心肌酶譜測定的影響 由于LDH 、HBDH在紅細胞內(nèi)的含量皆明顯高于胞外，故溶血后結(jié)果都升高，雖然紅細胞中不含CK ，但含有大量的腺苷酸激酶(AK)，可干擾測定CK 的偶聯(lián)法的反應(yīng)體系，人為地引起CK結(jié)果的升高。三、標(biāo)本溶血的原因1、環(huán)境溫度變化，氣溫較低時血清不易分離，標(biāo)本需經(jīng)多次離心，離心后容易出現(xiàn)溶血現(xiàn)象。2、標(biāo)本運送過程中導(dǎo)致碰撞，從而使離心后也會出現(xiàn)溶血現(xiàn)象。3、采血量不足，相對低滲抗凝導(dǎo)致溶血。4、特殊人群如肥胖者、小孩等血管不易找到或太細導(dǎo)致抽血時多次操作或壓迫時間過長也會引起溶血現(xiàn)象。5、針頭過細或抽血速度過快，負(fù)壓太大，紅細胞通過針尖時破壞而溶血。四、溶血標(biāo)本的處理1、主動與臨床聯(lián)系，結(jié)合臨床首先排除體內(nèi)溶血的可能，若不是體內(nèi)溶血，建議重新采取標(biāo)本，否則應(yīng)在檢驗報告單上注明“標(biāo)本溶血”，以提醒臨床醫(yī)生注意.2、利用溶血指數(shù)變化值，根據(jù)各項目的回歸方程，對易受溶血影響的AST、CK、CK-MB、LDH, K+的測定結(jié)果進行部分糾正，尤其對輕中度溶血效果較好，但對重度溶血標(biāo)本則應(yīng)重新復(fù)查。3、從方法學(xué)上克服或減少溶血的干擾，如通過設(shè)置樣品空