中藥制劑含量測(cè)定(3)

1、關(guān)于中藥制劑的含量測(cè)定 (3)第一張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月一、含量測(cè)定方法（外標(biāo)法 ） 內(nèi)標(biāo)法 外標(biāo)法 藥物分析大多采用此法 1.系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn) 包括色譜柱的理論板數(shù)、分離度、重復(fù)性和拖尾因子等四個(gè)指標(biāo)。其中分離度和重復(fù)性更具實(shí)用意義。 系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)即用各品種項(xiàng)下規(guī)定的對(duì)照品和條件對(duì)色譜系統(tǒng)進(jìn)行試驗(yàn)，應(yīng)符合要求。否則可對(duì)色譜分離條件作適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。第二張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（1）色譜柱的理論板數(shù)（n）：考察柱效 第三張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 （2）分離度（R） 考察分離效果 在規(guī)定的條件下，注入對(duì)照液或供試液，記錄色譜圖，按下式計(jì)算待測(cè)峰

2、（定量峰）與相鄰峰的分離度。除另有規(guī)定，分離度應(yīng)大于1.5。 第四張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 （3）重復(fù)性 考察測(cè)量的精密度 在規(guī)定條件下，取一定量的對(duì)照液，連續(xù)進(jìn)樣35次，除另有規(guī)定外，其峰面積測(cè)量值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）應(yīng)不大于2.0。 （4）拖尾因子（T） 考察色譜峰的對(duì)稱性。除另有規(guī)定外，T應(yīng)在0.951.05之間。第五張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 2. 測(cè)定 （1）求出供試液中被測(cè)成分的濃度C供 （2）求出藥品中被測(cè)成分的含量C供C對(duì)A對(duì)A供C供 X 稀釋倍數(shù)含量（W/W）取樣量第六張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 二、應(yīng)用實(shí)例 1.牛黃解毒

3、片中黃芩的含量測(cè)定 本品由牛黃、大黃、黃芩、冰片、石膏等八味中藥制成。中國(guó)藥典以黃芩苷為指標(biāo)，采用HPLC測(cè)定其中黃芩的含量。 （1）色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn) 固定相：用十八烷基硅烷鍵合硅膠； 流動(dòng)相：甲醇-水-磷酸（45550.2），流速1ml/min； 檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)為315nm；理論塔板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。 （2）對(duì)照品溶液制備 精密稱取在60減壓干燥4小時(shí)的黃芩苷對(duì)照品適量，以甲醇溶解配成每1ml中含31.2g的對(duì)照品溶液。第七張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 （3）供試品溶液制備 取牛黃解毒片20片，剝?nèi)ヌ且?，精密稱定（6.254g），研細(xì)，精密

4、稱取1.045 g，加70%乙醇30ml，超聲處理20分鐘，放冷，濾過(guò)，濾液置50ml量瓶中，用少量70%乙醇分次洗滌容器和殘?jiān)?，洗液濾于同一量瓶中，加70%乙醇至刻度，搖勻，即得。 （4）測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10l進(jìn)樣，測(cè)得對(duì)照品及供試品中黃芩苷的峰面積分別為A供4340441，A對(duì)3945856。第八張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月【解答】 采用的是外標(biāo)法還是內(nèi)標(biāo)法？ 流動(dòng)相中為什么要加入少量磷酸？ 計(jì)算黃芩苷的含量 （保留兩位有效數(shù)字）。 第九張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月求算供試液中黃芩苷的濃度3945856=31.2(g/ml) =34.

5、3(g/ml)4340441 第十張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月求算藥品中黃芩苷的含量 黃芩苷（mg/片）=C供稀釋倍數(shù)平均片重取樣量 =34.3（g/ml）10 50ml312.7mg/片1045mg =0.51 -3第十一張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 2.藿香正氣水中厚樸酚與和厚樸酚總量的測(cè)定 本品由蒼術(shù)、陳皮、厚樸（姜制）、白芷等十味中藥制成的液體制劑，每支裝10ml（標(biāo)示裝量）。其中厚樸為要藥之一，故中國(guó)藥典采用HPLC，以厚樸酚及和厚樸酚的總量為指標(biāo)，控制厚樸的含量。 （1）色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-乙腈-水（50:20

6、:40）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)294nm。理論板數(shù)按厚樸酚峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。 （2）對(duì)照品溶液的制備 取厚樸酚、和厚樸酚對(duì)照品適量，精密稱定，分別加甲醇制成每1ml含厚樸酚0.2mg、和厚樸酚0.1mg的溶液，搖勻，即得。第十二張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 （3）供試品溶液的制備 精密量取裝量項(xiàng)下的本品5ml，加鹽酸2滴，用氯仿振搖提取3次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)眉状既芙獠⒕芟♂屩?0ml，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。 （4）測(cè)定法 精密吸取上述三種溶液各10l，分別注入液相色譜儀測(cè)定，根據(jù)對(duì)照品的峰面積（AR厚 AR和）以及供

7、試品中被測(cè)成分的峰面積（AS厚 AS和）計(jì)算厚樸的含量。本品每支含厚樸以厚樸酚（ C18H18O2 ）及和厚樸酚（C18H18O2）的總量計(jì)，不得少于5.8mg。 混合對(duì)照品. 和厚樸酚 厚樸酚 樣品第十三張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 【解答】 采用的是外標(biāo)法還是內(nèi)標(biāo)法？為什么要酸化樣品溶液，再用氯仿萃??？計(jì)算厚樸的含量 （保留兩位有效字）。 【含量計(jì)算】 分別求算供試液中厚樸酚及和厚樸酚的濃度（mg/ml） 分別求算藥品中厚樸酚及和厚樸酚的含量（mg/支） 求算厚樸酚及和厚樸酚的總量 （參考P239三黃片中大黃的含量測(cè)定）C對(duì)為厚樸酚或和厚樸酚對(duì)照溶液的濃度；A供為供試品中厚樸

8、酚或和厚樸酚的峰面積；A對(duì)為對(duì)照品厚樸酚或和厚樸酚的峰面積。含量（mg/支）5ml 5ml （ 取樣量）C供mg/ml 10ml 10ml標(biāo)示裝量ml/支第十四張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第四節(jié) 氣相色譜法 （Gas Chromatography GC） 第十五張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月內(nèi)標(biāo)法精密稱（量）取對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，分別配成溶液，精密量取各溶液，配成校正因子測(cè)定用的對(duì)照溶液。再取各品種項(xiàng)下含有內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的供試品溶液，注入儀器，記錄色譜圖。 第十六張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月應(yīng)用實(shí)例 十滴水軟膠囊中樟腦含量的測(cè)定 本品由樟腦、干姜、大黃、小茴香、

9、肉桂、辣椒、桉油等七味中藥制成，樟腦是其主成分之一，具升華性，故采用氣相色譜法，以樟腦為對(duì)照品，薄荷腦為內(nèi)標(biāo)物，對(duì)其進(jìn)行含量測(cè)定。 1.色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以聚乙二醇（PEG）-20M為固定相，涂布濃度為10%，柱溫150。理論塔板數(shù)按樟腦峰計(jì)算應(yīng)不低于2000，樟腦峰與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的分離度應(yīng)大于2。 第十七張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 2.校正因子測(cè)定 精密稱取樟腦對(duì)照品（r）50mg，置10ml量瓶中，精密加入薄荷腦內(nèi)標(biāo)物質(zhì)(s)50mg，加無(wú)水乙醇至刻度，搖勻，精密量取12l，注入氣相色譜儀， Ar=211948、As=215835，計(jì)算校正因子（保留四位有效數(shù)字） 。

10、 3.測(cè)定法 取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混勻，取0.8g，精密稱定（0.7956g），置具塞試管中，用無(wú)水乙醇提取5次，每次4ml，分取乙醇提取液，合并，轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中，精密加入薄荷腦125mg，使溶解，加無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液(is)。精密量取12l，注入氣相色譜儀測(cè)定， Ai108685、 As123544，計(jì)算即得（保留兩位有效數(shù)字)。第十八張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月解答問(wèn)題 本法屬于氣液分配GC還是氣固吸附GC？ 使用哪種載氣？哪種檢測(cè)器？ 采用的是外標(biāo)法還是內(nèi)標(biāo)法？ 求算樟腦的含量。藥典規(guī)定，本品每粒含樟腦不得少于53mg。（平均粒重0.425g

11、粒）求算校正因子（f） f =(As/AR) X(MR / Ms ) = (215835/ 211948)/(50mg/50mg) 1.108求算供試液中樟腦的濃度Ci（mg/ml）Ci= f Cs=1.108 X X 5mg/ml=6.30 mg/mlAsAi123544108685第十九張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月求算藥品中樟腦的含量（mg粒）含量795.6mg6.30mg/ml X 25ml X 425mg/粒84第二十張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第五節(jié) 容量分析法含量計(jì)算：原料藥：第二十一張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月克痢痧膠囊含量測(cè)定 雄黃 取

12、裝量差異項(xiàng)下的本品內(nèi)容物，研 細(xì) ，取 約 2.8g,精密稱定，置 250ml 凱氏燒瓶中，加 硫 酸 鉀 2g 、硫 酸 銨 3g 與硫 酸 12ml ，置 電 熱 套 中 加 熱 至 溶 液 呈 乳 白 色 ，放 冷 ，用水50ml 分 4 次轉(zhuǎn)移至 250ml 錐形瓶中，加熱微沸 5 分鐘，放冷，加酚酞指示液 2 滴 ，用氫氧化鈉溶液 (40100 )中和至溶液顯微紅色，放冷，用 0.25mol/L 硫酸溶液中和至褪色，加碳酸氫鈉 5g, 搖勻后, 用碘滴定液 (0.05mol/L) 滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，加淀 粉 指 示 液 2ml ，滴 定 至 溶 液 顯 紫 藍(lán) 色 。每1ml 碘滴定

13、液(0.05mol/L )相當(dāng)于 5. 348mg 的二硫化二砷（ As2S 2)。 本 品 每 粒 含 雄 黃 以 二 硫 化 二 砷 （ As2S2 ) 計(jì) ，應(yīng)為6. 3 10.8 m g 。第二十二張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)CI2m1m2V1V20.04985mol/L2.7891g2.8012g16.51ml16.69ml結(jié)果計(jì)算第二十三張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月北豆根片中總生物堿測(cè)定【含量測(cè)定】 總 生 物 堿 取 本 品 2 0 片 ，除 去 包 衣 ，精密稱 定 ，研 細(xì) ，精 密 稱 取 適 量 （約 相 當(dāng) 于 總 生 物 堿 80m

14、g )置具塞錐 形 瓶 中 ，加 乙 酸 乙 酯 25ml ，振 搖 30 分 鐘 ，濾 過(guò) ，用乙酸乙酯10ml 分 三 次 洗 滌 容 器 及 濾 液 ，洗 液 與 濾 液 合 并 ，置水浴上蒸干 ，殘 渣 加 無(wú) 水 乙 酵 10ml 使 溶 解 ，精 密 加 人 硫 酸 滴 定 液(0.01mol/L)25m l與甲基紅指示液 2 滴 ，用氫氧化鈉滴定液(0.02mol/L) 滴 定 ，即 得 。每 1ml 琉 酸 滴 定 液 (0. 01mol/L )相當(dāng)于 6. 248mg蝙 蝠葛堿 (C38 H 44 N2O 6 ) 。本 品 含 總 生 物 堿 以 蝙 蝠 葛 堿 (C38 H

15、 44 N2O 6) 計(jì),應(yīng)為標(biāo)示量的 90.0% 110.0 % 。第二十四張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)CNaOHm1m2V1V220片重量標(biāo)示量0.02008mol/ml0.7036g0.7020g12.12ml12.07ml5.0010g30mg/片計(jì)算第二十五張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第六節(jié) 揮發(fā)油測(cè)定法（ Determination of Volatile Oil）一、意義 某些藥品中的主要有效成分為揮發(fā)油。例如，正骨水、牡荊油膠丸、保婦康栓和滿山紅油滴丸等中揮發(fā)油的測(cè)定。二、測(cè)定原理 首先利用揮發(fā)油的揮發(fā)性用水蒸氣蒸餾法將其提取完全；再利用其較

16、強(qiáng)的親脂性與水不相溶而分層，即可讀取油的總量并求算出含量。第二十六張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月三、測(cè)定方法 供試品需粉碎后過(guò)二號(hào)至三號(hào)篩，混勻再測(cè)定。 1.甲法 本法適用于測(cè)定相對(duì)密度在1.0以下的揮發(fā)油。取供試品適量（約相當(dāng)于揮發(fā)油0.5ml1.0ml），稱重（準(zhǔn)至0.01g），置燒瓶中，加水300ml500ml（或適量）與玻璃珠數(shù)粒，振搖混合后，連接揮發(fā)油測(cè)定器與回流冷凝管。自冷凝管上端加水使充滿揮發(fā)油測(cè)定器的刻度部分，并溢流入燒瓶時(shí)為止。置電熱套中或用其他適宜方法緩緩加熱至沸，并保持微沸約5小時(shí)，至測(cè)定器中油量不再增加，放置片刻，開(kāi)啟測(cè)定器下端的活塞，將水緩緩放出，至油層上端到達(dá)刻度0線上面5mm處為止。放置1小時(shí)以上，再開(kāi)啟活塞使油層下降至其上端恰與刻度0線平齊，讀取揮發(fā)油量，計(jì)算即得。第二十七張，PPT共二十九頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2.乙法 本法適用于測(cè)定相對(duì)密