《藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》word版

1、藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)（供臨床醫(yī)學(xué)、口腔醫(yī)學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)、護(hù)理學(xué)專業(yè)用）主 編：張明遠(yuǎn) 栗 坤 劉 蕾 盧春鳳副主編：朱秋雙 王麗敏 劉明遠(yuǎn) 楊 麗主 審：趙玉珍 趙錦程 傅正宗目 錄 TOC o 1-2 h z HYPERLINK l _Toc72295251 一、藥理實(shí)驗(yàn)基本知識(shí)與技術(shù) PAGEREF _Toc72295251 h HYPERLINK l _Toc72295252 (一) 藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)課的目的和要求 PAGEREF _Toc72295252 h HYPERLINK l _Toc72295253 (二) 常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉拿和給藥法 PAGEREF _Toc72295253 h HYPER

2、LINK l _Toc72295254 (三) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥量的計(jì)算 PAGEREF _Toc72295254 h HYPERLINK l _Toc72295255 二、藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)課內(nèi)容選編 PAGEREF _Toc72295255 h 9 HYPERLINK l _Toc72295256 實(shí)驗(yàn)一 水楊酸鈉血漿半衰期的測(cè)定 PAGEREF _Toc72295256 h 9 HYPERLINK l _Toc72295257 實(shí)驗(yàn)二 磺胺類藥物在正常與腎衰家兔體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)測(cè)算 PAGEREF _Toc72295257 h 11 HYPERLINK l _Toc72295258 實(shí)驗(yàn)三 不同

3、給藥途徑對(duì)異戊巴比妥作用的影響 PAGEREF _Toc72295258 h 14 HYPERLINK l _Toc72295259 實(shí)驗(yàn)四 口服與腹腔注射硫酸鎂的作用比較 PAGEREF _Toc72295259 h 15 HYPERLINK l _Toc72295260 實(shí)驗(yàn)五 藥物的相互作用 PAGEREF _Toc72295260 h 16 HYPERLINK l _Toc72295261 實(shí)驗(yàn)六 傳出神經(jīng)藥物對(duì)在體兔腸的作用 PAGEREF _Toc72295261 h 17 HYPERLINK l _Toc72295262 實(shí)驗(yàn)七 傳出神經(jīng)藥物對(duì)離體兔腸的作用 PAGEREF _T

4、oc72295262 h 18 HYPERLINK l _Toc72295263 實(shí)驗(yàn)八 煙的毒性實(shí)驗(yàn) PAGEREF _Toc72295263 h 20 HYPERLINK l _Toc72295264 實(shí)驗(yàn)九 有機(jī)磷藥物中毒及其解救 PAGEREF _Toc72295264 h 21 HYPERLINK l _Toc72295265 實(shí)驗(yàn)十 新斯的明對(duì)琥珀膽堿和筒箭毒堿肌松作用的影響 PAGEREF _Toc72295265 h 22 HYPERLINK l _Toc72295266 實(shí)驗(yàn)十一 傳出神經(jīng)藥物對(duì)兔眼瞳孔的作用 PAGEREF _Toc72295266 h 23 HYPERLI

5、NK l _Toc72295267 實(shí)驗(yàn)十二 傳出神經(jīng)藥物對(duì)狗血壓的影響 PAGEREF _Toc72295267 h 24 HYPERLINK l _Toc72295268 實(shí)驗(yàn)十三 心得安對(duì)抗腎上腺素對(duì)蛙心受體的興奮作用 PAGEREF _Toc72295268 h 26 HYPERLINK l _Toc72295269 實(shí)驗(yàn)十四 普魯卡因的阻斷麻醉作用 PAGEREF _Toc72295269 h 28 HYPERLINK l _Toc72295270 實(shí)驗(yàn)十五 普魯卡因的椎管麻醉作用 PAGEREF _Toc72295270 h 29 HYPERLINK l _Toc72295271

6、實(shí)驗(yàn)十六 丁卡因與普魯卡因表面麻醉作用的比較 PAGEREF _Toc72295271 h 30 HYPERLINK l _Toc72295272 實(shí)驗(yàn)十七 藥物的抗電驚厥作用 PAGEREF _Toc72295272 h 31 HYPERLINK l _Toc72295273 實(shí)驗(yàn)十八 巴比妥類藥物對(duì)藥物性驚厥的影響 PAGEREF _Toc72295273 h 32 HYPERLINK l _Toc72295274 實(shí)驗(yàn)十九 士的寧驚厥作用部位分析 PAGEREF _Toc72295274 h 33 HYPERLINK l _Toc72295275 實(shí)驗(yàn)二十 鈣鎂拮抗作用 PAGEREF

7、_Toc72295275 h 34 HYPERLINK l _Toc72295276 實(shí)驗(yàn)二十一 地西泮對(duì)小鼠激怒反應(yīng)的影響 PAGEREF _Toc72295276 h 35 HYPERLINK l _Toc72295277 實(shí)驗(yàn)二十二 藥物的鎮(zhèn)痛作用（熱板法） PAGEREF _Toc72295277 h 36 HYPERLINK l _Toc72295278 實(shí)驗(yàn)二十三 藥物的鎮(zhèn)痛作用（扭體法） PAGEREF _Toc72295278 h 38 HYPERLINK l _Toc72295279 實(shí)驗(yàn)二十四 尼可剎米對(duì)中樞性呼吸抑制的解救 PAGEREF _Toc72295279 h 3

8、9 HYPERLINK l _Toc72295280 實(shí)驗(yàn)二十五 利多卡因?qū)β然^誘發(fā)大鼠心律失常的治療作用 PAGEREF _Toc72295280 h 40 HYPERLINK l _Toc72295281 實(shí)驗(yàn)二十六 強(qiáng)心甙對(duì)在體蛙心的作用 PAGEREF _Toc72295281 h 41 HYPERLINK l _Toc72295282 實(shí)驗(yàn)二十七 強(qiáng)心甙對(duì)離體蛙心的作用（斯氏法） PAGEREF _Toc72295282 h 42 HYPERLINK l _Toc72295283 實(shí)驗(yàn)二十八 正常心血管功能的調(diào)節(jié)和急性心力衰竭 PAGEREF _Toc72295283 h 44 H

9、YPERLINK l _Toc72295284 實(shí)驗(yàn)二十九 呋塞米對(duì)家兔的利尿作用 PAGEREF _Toc72295284 h 47 HYPERLINK l _Toc72295285 實(shí)驗(yàn)三十 硫酸鎂的導(dǎo)瀉作用機(jī)制分析 PAGEREF _Toc72295285 h 48 HYPERLINK l _Toc72295286 實(shí)驗(yàn)三十一 藥物對(duì)家兔離體子宮的作用 PAGEREF _Toc72295286 h 49 HYPERLINK l _Toc72295287 附錄 PAGEREF _Toc72295287 h 50一、藥理實(shí)驗(yàn)基本知識(shí)與技術(shù)(一)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)課的目的和要求藥理學(xué)既是理論科學(xué)，又是

10、實(shí)踐科學(xué)。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)課是藥理學(xué)教學(xué)的一個(gè)重要組成部分。它的目的一方面是驗(yàn)證理論，鞏固并加強(qiáng)對(duì)理論知識(shí)的理解；另一方面是學(xué)習(xí)和掌握藥效學(xué)與藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本操作方法和技能，培養(yǎng)對(duì)科學(xué)工作嚴(yán)肅的態(tài)度，嚴(yán)密的方法、嚴(yán)格的要求及科學(xué)的思維方式，學(xué)習(xí)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理的有關(guān)知識(shí)，初步具備客觀地對(duì)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象進(jìn)行觀察、比較分析、綜合和解決實(shí)際問(wèn)題的能力。從而更深入、準(zhǔn)確地理解和掌握藥理學(xué)基本知識(shí)，指導(dǎo)臨床合理用藥；并為研究開(kāi)發(fā)新藥、發(fā)現(xiàn)藥物新用途，為其他生命科學(xué)的研究探索奠定初步基礎(chǔ)。藥理實(shí)驗(yàn)包括進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，觀察和記錄實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象，整理實(shí)驗(yàn)結(jié)果和寫出實(shí)驗(yàn)報(bào)告等環(huán)節(jié)。為了提高實(shí)驗(yàn)效果，實(shí)驗(yàn)前應(yīng)做好

11、預(yù)習(xí)，明確本次實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹⒎椒ú襟E和原理，做到心中有數(shù)，避免實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)忙亂和差錯(cuò)。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中要在教師指導(dǎo)下加強(qiáng)培養(yǎng)獨(dú)立操作能力，克服對(duì)教師的依賴性。通過(guò)實(shí)驗(yàn)操作要求在生理生化實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上掌握常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉持、固定和給藥方法，掌握藥物劑量換算和常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉方法，學(xué)會(huì)觀察記錄主要生理生化指標(biāo)，掌握注射器、天平、磅秤、多導(dǎo)儀及CAI等用法，掌握以動(dòng)物或其離體器官、組織為實(shí)驗(yàn)對(duì)象的外周神經(jīng)系統(tǒng)藥物實(shí)驗(yàn)法、中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥物實(shí)驗(yàn)法、內(nèi)臟系統(tǒng)藥物實(shí)驗(yàn)法等主要實(shí)驗(yàn)方法以及藥代動(dòng)力學(xué)的基本實(shí)驗(yàn)方法。為達(dá)到上述目的，要求做到下列事項(xiàng)：實(shí)驗(yàn)前 1、仔細(xì)閱讀實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，了解實(shí)驗(yàn)的目的、要求、方法和操作步驟，領(lǐng)會(huì)其設(shè)

12、計(jì)原理；2、結(jié)合實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，復(fù)習(xí)有關(guān)藥理學(xué)和生理學(xué)、生化學(xué)等方面的理論知識(shí)，達(dá)到充分理解；3、估計(jì)實(shí)驗(yàn)中可能出現(xiàn)的情況和發(fā)生的問(wèn)題。實(shí)驗(yàn)時(shí) 1、嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)上的步驟進(jìn)行操作，準(zhǔn)確計(jì)算給藥量，防止出現(xiàn)差錯(cuò)造成實(shí)驗(yàn)失??；2、認(rèn)真、細(xì)致地觀察實(shí)驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)的現(xiàn)象，隨時(shí)記錄藥物反應(yīng)的出現(xiàn)時(shí)間、表現(xiàn)以及最后結(jié)果，聯(lián)系理論內(nèi)容進(jìn)行思考；3、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中要注意節(jié)約藥品及實(shí)驗(yàn)材料，避免造成浪費(fèi)。實(shí)驗(yàn)后 1、認(rèn)真整理實(shí)驗(yàn)結(jié)果，經(jīng)過(guò)分析思考，寫出報(bào)告，按時(shí)交給指導(dǎo)教師；2、整理實(shí)驗(yàn)器材，洗凈擦干，妥為安放。將實(shí)驗(yàn)后的動(dòng)物按要求放到指定地點(diǎn)，課后認(rèn)真做好實(shí)驗(yàn)室的清潔衛(wèi)生工作。(二)常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉持和給藥法1、青蛙

13、、蟾蜍通常以左手握持，用食指和中指夾住左前肢，用拇指壓住右前肢，用右手協(xié)助將兩后肢拉直，左手的無(wú)名指和小指將其壓住固定。淋巴囊內(nèi)注射法：蛙的皮下有數(shù)個(gè)淋巴囊（圖1），一般多選胸、腹或股淋巴囊給藥。胸部淋巴囊注射時(shí)應(yīng)將針頭插入蛙口腔，由口腔底部穿過(guò)下頜肌層而達(dá)胸部皮下；腹部淋巴囊注射時(shí)針頭從蛙大腿上端刺入，經(jīng)大腿肌層入腹壁肌層，再淺出進(jìn)入腹部皮下，即進(jìn)入淋巴囊，然后注入藥液。 圖1 蛙的皮下淋巴囊 1、頜下囊 2、胸囊 3、腹囊 4、股囊 5、脛囊 6、側(cè)囊 7、頭背囊 圖2 小鼠灌胃法2、小鼠右手提起鼠尾，放在粗糙物（如鼠籠）上面，輕輕向后拉其尾，此時(shí)小鼠前肢抓住粗糙面不動(dòng)；用左手的拇指和食指

14、捏住其頭部皮膚和雙耳；其余三指和掌心夾住其背部皮膚及尾部。這樣小鼠便可被完全固定在手中。灌胃（po）：將小鼠固定后，右手持裝有灌胃針頭的注射器，自口角處插入口腔，沿上腭插入食道（圖2）。如遇阻力，可將灌胃針頭抽出再另插，以免穿破食道或誤入氣管，造成動(dòng)物死亡。灌注量一般為0.10.2ml/10g，不超過(guò)0.5ml/只。肌內(nèi)注射（im）：兩人合作，注射部位多選后腿上部外側(cè)。一處注射量不超過(guò)0.1ml。腹腔注射（ip）：左手將小鼠握持固定，使其腹部朝上。右手持注射器，取300角從下腹部外側(cè)向頭端刺入腹腔，進(jìn)針部位不宜太高，刺入不能太深。注射量0.050.2ml/10g，不超過(guò)0.5ml/只。靜脈注射

15、（iv）：將小鼠置于固定筒內(nèi)，使其尾巴露在外面，用70%酒精涂擦尾部，或?qū)⑹笪步?0水中。待尾部靜脈擴(kuò)張后，左手拉住尾尖，右手進(jìn)針，注射量不超過(guò)0.5m/只。3、大鼠捉持固定法基本與小鼠相同。因大鼠體積大，捉持固定時(shí)難一些。先將大鼠放在粗糙物上，向后輕輕拉其尾，使其不動(dòng)，再用拇指、食指捏住頭頸部皮膚后，其余三指和手掌固定鼠體，使其頭、頸、胸、腹呈一直線。如果未抓緊，動(dòng)物頭部尚能轉(zhuǎn)動(dòng)，可用另一手幫助捏緊其頭頸皮膚重新固定。灌胃、腹腔注射、腹部皮下注射均可一人操作。尾部靜脈注射與小鼠注射法相似，但較困難。也可將大鼠腹股溝切開(kāi)，從股靜脈注射藥物。每只大鼠用藥量為小鼠的23倍。4、豚鼠先用手掌以穩(wěn)準(zhǔn)

16、的手法迅速扣住豚鼠背部，抓住其肩胛上方，將手張開(kāi)，用手指握住頸部，或握住身體的四周，再拿起來(lái)，懷孕或體重較大的豚鼠，應(yīng)以另手托住其臀部。豚鼠腹腔、皮下及肌內(nèi)注射法基本同小鼠。5、家兔一手抓頸背部皮膚，輕輕將兔提起，另一手托其臀部，根據(jù)需要將兔固定為各種姿勢(shì)。灌胃：二人合作，一人取坐位，用兩腿夾持免身，一手握兔雙耳，另一手抓住兔兩前肢，另一人將開(kāi)口器橫插入兔口內(nèi)，并向后翻轉(zhuǎn)幾下，使兔舌壓住并固定之。將胃管（導(dǎo)尿管）從開(kāi)口器中央孔插入口內(nèi)，再慢慢地插入食道和胃。插管時(shí)感覺(jué)順利，動(dòng)物不掙扎也無(wú)呼吸困難出現(xiàn)，表示胃管在胃內(nèi)。為慎重起見(jiàn)，將胃管外端放入水中，如未見(jiàn)氣泡出現(xiàn)，即證明在胃內(nèi)。然后將藥液注入胃

17、內(nèi)（圖3）。灌注量一般為10m1/kg。如有兔固定箱一人也可操作。耳緣靜脈注射：將兔置于固定箱內(nèi)固定（或由一人固定），用灑精棉球涂擦兔耳，或用手指彈兔耳，使局部血管擴(kuò)張。用左手拇指和中指捏住兔耳尖，以食指墊在兔耳擬進(jìn)針部位的下面，右手持注射器從近耳尖處將針頭刺入血管，并以左手將針頭固定在兔耳上，然后注入藥液。如已注入血管，推藥時(shí)則暢通無(wú)阻；如推注時(shí)有阻力，局部腫脹變白，表明針頭不在血管內(nèi)，須拔針重新穿刺。注射量不超過(guò)2m1/kg，等滲液可達(dá)10m1/kg。 圖3 家兔灌胃法 圖4 犬后肢靜脈注射法皮下、肌內(nèi)、腹腔注射的基本方法與鼠類相同，選用的針頭可以大些。給藥的最大容量分別為0.5ml、1.

18、0ml和5.0ml/kg。6、犬一人用長(zhǎng)柄鉗式捕犬夾夾犬頸，另一人將犬嘴綁住。綁嘴方法：先將繩帶從嘴下面繞上來(lái)，在鼻子上面打一結(jié)，再將繩帶繞到嘴下面打一結(jié)，然后將繩帶拉倒耳后頸部打結(jié)固定。犬在手術(shù)臺(tái)上的固定方法：將犬仰臥在手術(shù)臺(tái)上，四肢拴上繩帶，將兩前肢的繩帶從背后交叉遞向?qū)?cè)，并壓住對(duì)側(cè)上肢，再將繩帶拉緊固定于臺(tái)邊上；后肢平行固定在臺(tái)邊即可。如果是麻醉犬，需要解開(kāi)綁嘴帶，將舌頭拉出嘴外以防窒息。腹腔注射：犬被夾住后，用力將犬的頸、頭部壓在地上，一人提起一側(cè)后肢并將藥液注入腹腔。靜脈注射；多從后肢外側(cè)小隱靜脈或前肢皮下頭靜脈注射。注射前，先局部剪毛，并由一人用力壓迫靜脈近心端，使靜脈充血擴(kuò)張，

19、另一人進(jìn)行注射，針管內(nèi)見(jiàn)有回血，表示針頭在靜脈內(nèi)，解除對(duì)靜脈近心端的壓迫，即可推注藥物（圖4）。(三)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥量的計(jì)算藥量單位藥量的基本單位是克(g)，有時(shí)亦用毫克(mg)、微克(g)、毫微克(ng)及微微克(g)。換算關(guān)系是:1g=103mg=106g藥量的基本容量單位是毫升(ml)，有時(shí)亦用到升(L)及微升(l)。換算關(guān)系是：1L=103ml=106l。給藥容量注射用藥前應(yīng)首先考慮該種動(dòng)物在特定注射途徑所能允許的最大容量（ml），只有確定容量之后才能決定溶液配成多大濃度合適。通常，動(dòng)物血容量約占體重的1/13左右，靜脈注射藥液容量過(guò)大，可能影響到循環(huán)系統(tǒng)正常功能，故靜脈注射容量最好在體

20、重的1/100以下，靜脈外（皮下，肌內(nèi)及腹腔）注射容量最好在體重的1/40以下。如一只20g體重的小白鼠，尾靜脈注射不宜超過(guò)0.2ml，肌內(nèi)、皮下、腹腔等部位注射不宜超過(guò)0.5ml。藥物濃度藥物濃度是指定量液體或固體制劑中所含藥物的份量，常用的液體制劑有以下幾種表示方法：1百分濃度 以每一百份溶液中所含藥物的份數(shù)來(lái)表示，簡(jiǎn)寫成%。（1）重量/容量（W/V）法：表示每100ml溶液中含有藥物的克數(shù)，如5%葡萄糖，是指100ml溶液中含有5g葡萄糖。（2）容量/容量（V/V）法：適用于液體藥物的配制，表示100ml溶液中含有藥物的ml數(shù)，如75%乙醇即100ml溶液中含無(wú)水乙醇75ml。2比例濃度

21、 用來(lái)表示稀溶液的濃度，如1:10000腎上腺素溶液即指0.01%腎上腺素溶液（1ml溶液中含0.1mg腎上腺素）。3摩爾/升（mol/L）濃度 是指1L溶液中所含溶質(zhì)的摩爾質(zhì)量數(shù)，稱為該溶液的摩爾/升濃度，如0.1mol/LNaCl溶液表示1L溶液中含有0.1摩爾，即5.844gNaCl（NaCl分子量為58.44）。劑量換算動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所用藥物劑量，一般以mg/kg（有時(shí)也以g/kg）計(jì)算，給藥時(shí)需從已知藥物濃度換算成相當(dāng)于每kg體重（為方便起見(jiàn)，大鼠、豚鼠也可按100g體重，小鼠、蟾蜍可按每10g體重）應(yīng)該注射的藥液量（ml）。有時(shí)則需根據(jù)藥物劑量和給藥容量計(jì)算出合適的藥物濃度，有時(shí)還需進(jìn)行

22、濃度間（如百分濃度和摩爾濃度間）換算，以便進(jìn)行分析和計(jì)算。1由藥物劑量mg/kg及藥液百分濃度換算成每kg體重注射藥量（ml），進(jìn)而計(jì)算出每只動(dòng)物應(yīng)注射多少ml藥液。例：小白鼠體重22g，腹腔注射嗎啡10mg/kg，藥物濃度0.1%，應(yīng)注射多少ml？計(jì)算方法：0.1%的鹽酸嗎啡溶液每ml含藥物1mg，10mg/kg相當(dāng)于10ml/kg，小鼠22g體重?fù)Q算成0.022kg，10ml/kg0.022kg=0.22ml。為計(jì)算方便，上述10mg/kg首先換算成0.1ml/10g，小白鼠體重改寫成2.210g，0.1ml/10g2.210g=0.22ml。2由藥物劑量mg/kg和設(shè)定的藥液容量ml/k

23、g，計(jì)算應(yīng)配制藥物濃度。例：家兔靜脈注射嗎啡10mg/kg，注射容量1ml/kg，應(yīng)該配制的藥液濃度是多少？計(jì)算方法：10mg/kg相當(dāng)于1ml/kg，1ml藥液應(yīng)該含10mg嗎啡，1：10=100：X，X=1000mg=1g，故應(yīng)配成的藥液濃度為100ml含1g，即1%鹽酸嗎啡。3百分濃度與摩爾濃度間換算：例：0.5%鹽酸組胺相當(dāng)于多少摩爾/升濃度？計(jì)算方法：依公式M=10X/W，式中M為摩爾/升濃度，X為百分濃度中%左側(cè)的數(shù)字（即100ml藥液中藥物的克數(shù)），W為藥物的分子量，已知X為0.5、W=184.1，代入公式M=100.5/184.1=2.7102，所以0.5%鹽酸胺組織溶液的摩爾

24、濃度相當(dāng)于2.7102mol/L。二、藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)課內(nèi)容選編實(shí)驗(yàn)一 水楊酸鈉血漿半衰期的測(cè)定【目的】了解用比色法測(cè)定水楊酸鈉血漿濃度和計(jì)算其半酸期的方法?！緞?dòng)物】兔1只?！舅幤贰?0%及0.02%水楊酸鈉、10%三氯醋酸、10%三氯化鐵、0.5%肝素、20%烏拉坦，蒸餾水。【器材】10ml試管、試管架、吸管（0.5、1.0、5.0ml），5ml注射器、針頭、玻璃記號(hào)筆、吸球、721分光光度計(jì)、離心機(jī)、兔手術(shù)臺(tái)、計(jì)算器?！痉椒ā繀⒁?jiàn)表2-1測(cè)定步驟進(jìn)行：1取4支試管編號(hào)后各加10%三氯醋酸溶液3.5ml表2-1 水楊酸鈉血藥濃度測(cè)定步驟試管（編號(hào)）10%三氯醋酸（ml）血（ml）蒸餾水（ml）0.

25、2%水楊酸鈉（ml）10%三氯化鐵（ml）光密度K值藥物濃度（g/ml）對(duì)照管13.51.01.00.5標(biāo)準(zhǔn)管23.51.01.00.5給藥管33.51.01.00.5給藥管43.51.01.00.52取家兔1只，稱重后耳緣靜脈注射烏拉坦1g/kg麻醉，仰位固定于兔手術(shù)臺(tái)上。分離出氣管后插入氣管插管。分離出一側(cè)頸動(dòng)脈（或股動(dòng)脈），用經(jīng)0.5%肝素潤(rùn)濕過(guò)內(nèi)壁的注射器從頸動(dòng)脈（或股動(dòng)脈）取血2.0ml，分別置于1號(hào)管和2號(hào)管內(nèi)各1.0ml，搖勻靜置。3由耳緣靜脈緩慢注射10%水楊酸鈉2.0ml/kg。給藥后10分鐘和60分鐘各取血1.0ml，分別置入3號(hào)管和4號(hào)管內(nèi)，搖勻靜置。41、3、4、號(hào)管內(nèi)

26、各加入蒸餾水1.0ml，2號(hào)管內(nèi)加入0.2%水楊酸鈉1.0ml，搖勻。5將4支試管離心5分鐘（15003000rpm），使血漿蛋白沉淀。6取4支試管編號(hào)，將離心后的上清液一次性倒入相應(yīng)編號(hào)的試管中，從中準(zhǔn)確吸取3.0ml分別置入相應(yīng)編號(hào)的另外4支試管中，每管再各加入10%三氯化鐵溶液0.5ml，搖勻顯色。7以1號(hào)管為對(duì)照管，用分光光度計(jì)在波長(zhǎng)520nm處測(cè)定其余3管的光密度值。由2號(hào)管光密度值（Y2）和濃度（X2已知）求比值K，即K=，再根據(jù)X=KY，由Y3和Y4，求得X3和X4，根據(jù)下式求t1/2：t1/2=式中X3和X4分別為給藥后10分鐘和60分鐘的血藥濃度，t為兩次取血間隔時(shí)間（50分

27、鐘）?！窘Y(jié)果】將實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入上表中，并根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算半衰期。【注意事項(xiàng)】1操作必須準(zhǔn)確，否則不僅計(jì)算出的半衰期不準(zhǔn)確，而且有可能出現(xiàn)負(fù)值。2取血方法也可采取不麻醉家兔而直接從心臟或耳緣靜脈取血?！舅伎碱}】測(cè)定藥物的t1/2有何臨床意義？實(shí)驗(yàn)二 磺胺類藥物在正常與腎衰家兔體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)測(cè)算【目的】1了解磺胺類藥物在正常與腎功能衰竭的動(dòng)物體內(nèi)隨時(shí)間變化的代謝規(guī)律，并掌握藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的擬合與計(jì)算方法。2掌握藥代動(dòng)力學(xué)對(duì)于臨床用藥的意義和重要性?！緦?shí)驗(yàn)原理】磺胺類藥物能與某些試劑發(fā)生反應(yīng)生成有色物質(zhì)，通過(guò)比色法可以對(duì)磺胺類藥物血濃度進(jìn)行定量分析?；前奉愃幬镌谒嵝原h(huán)境下使其苯環(huán)氨基（NH2）離

28、子化生成銨類化合物（NHJ），與亞硝酸鈉發(fā)生重氮化反應(yīng)生成重氮鹽（NN一）。該化合物在525nm波長(zhǎng)下比色，其光密度與磺胺類藥物濃度成正比?！緦?shí)驗(yàn)動(dòng)物】健康成年家兔2只，體重2.03.0kg。【藥品與試劑】1HgCl2溶液、0.9NaCl溶液、1普魯卡因、0.3肝素鈉溶液、10%磺胺二甲嘧啶（sulfamethazine，SM2）或以等濃度的磺胺嘧啶（su1fadiazine，SD）、磺胺噻唑（sulfathiazo1e，ST）、磺胺甲基異惡唑（sulfamethoxazole，SMZ）代替，7.5%三氯醋酸，0.1%SM2標(biāo)準(zhǔn)液，0.5%亞硝酸鈉，0.5%麝香草酚（用20NaOH配制），0.

29、3%肝素（用生理鹽水配制），20%烏拉坦或1%鹽酸普魯卡因，蒸餾水?！緦?shí)驗(yàn)器材】752型分光光度計(jì)、離心機(jī)、嬰兒秤、手術(shù)器材1套、動(dòng)脈夾、硅膠管、家兔手術(shù)臺(tái)、注射器（5ml、10ml、20ml）及針頭、吸管（0.1m1、0.2m1、0.5m1、1ml、2ml、5ml）、吸球、離心管、試管架、半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙、玻璃記號(hào)筆、藥棉、紗布、具有回歸功能的計(jì)算器或進(jìn)行程序處理的微型計(jì)算機(jī)?！痉椒ㄅc步驟】1家兔腎功能損傷模型的建立實(shí)驗(yàn)前1d（1828h）進(jìn)行，取家兔2只，稱重后1只皮下注射1Hg Cl2溶液1.2mlkg體重，造成急性腎功能衰竭動(dòng)物模型；另1只則在相同部位注射等容量的生理鹽水作為正常對(duì)照。2藥

30、動(dòng)學(xué)實(shí)驗(yàn)（1）血中藥物濃度測(cè)定：參見(jiàn)表2-2測(cè)定步驟進(jìn)行。麻醉全麻或局麻均可。取正常或腎功能損傷的家兔1只（實(shí)驗(yàn)前禁食12h，不禁水），記錄體重和性別，耳緣靜脈注射20%烏拉坦（5mlkg體重）麻醉，仰位固定于家兔手術(shù)臺(tái)上，或以1%的鹽酸普魯卡因做手術(shù)區(qū)浸潤(rùn)麻醉。手術(shù)：可選用頸總動(dòng)脈或股動(dòng)脈。手術(shù)區(qū)剪毛，切皮約6cm，鈍性分離皮下組織和肌肉，分離出動(dòng)脈23cm，在其下穿2根絲線，結(jié)扎遠(yuǎn)心端，保留近心端。耳緣靜脈注射0.3%肝素1m1kg體重。插管：用動(dòng)脈夾夾住動(dòng)脈近心端，再于兩線中間的一段動(dòng)脈上剪一V形切口，插入硅膠管（己肝素化），用線結(jié)扎牢固，以備取血用。取血：打開(kāi)動(dòng)脈夾放取空白血樣0.4m

31、1，分別放入1號(hào)管（對(duì)照管）和2號(hào)管（標(biāo)準(zhǔn)管）各0.2m1，搖勻靜置。爾后靜注10%SM23m1kg，分別于注射后1、3、5、15、30、45、60、90、150min時(shí)由動(dòng)脈取血0.2ml，加到含有7.5%三氯醋酸2.7ml的試管中，搖勻。標(biāo)準(zhǔn)管中加入0.1SM2標(biāo)準(zhǔn)液0.1ml，其余各管加蒸餾水0.1ml，搖勻。顯色：將上述各管離心5min（15003000rpm），取上清液1.5m1，加入0.5%亞硝酸鈉0.5ml，搖勻，再加入0.5%麝香草酚1ml，搖勻后為橙色。測(cè)定：于分光光度計(jì)上在525nm波長(zhǎng)下測(cè)定各樣品管的光密度值。計(jì)算血中藥物濃度：根據(jù)同一種溶液濃度與光密度成正比的原理，可用

32、空白血樣標(biāo)準(zhǔn)管濃度及其光密度值求算出其他樣品管的磺胺藥物濃度。公式如下：樣品管光密度（OD）標(biāo)準(zhǔn)管光密度（OD）樣品管濃度（gml）標(biāo)準(zhǔn)管濃度（gml）樣品管濃度（gml）樣品管光密度（OD）標(biāo)準(zhǔn)管光密度（OD）（標(biāo)準(zhǔn)管濃度（gml）將計(jì)算所得數(shù)據(jù)填入表2中。表2-2 磺胺類藥物血藥濃度測(cè)定的步驟試 管 編 號(hào)標(biāo)準(zhǔn) 管對(duì)照 管給藥 后1min3 min5 min15 min30 min60 min90 min150min7.5%三氯醋酸（ml）2.72.72.72.72.72.72.72.72.72.7血樣（ml）0.20.20.20.20.20.20.20.20.20.2蒸餾水（ml）0.1

33、0.10.10.10.10.10.10.10.1標(biāo)準(zhǔn)液（ml）0.1充分搖勻 離心5min 取上清夜1.5ml0.5%亞硝酸鈉（ml）0.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.5%麝香草酚（ml）1.01.01.01.01.01.01.01.01.01.0光密度（OD）濃度（gml）（2）藥動(dòng)學(xué)參數(shù)求算：列表：SM2藥時(shí)數(shù)據(jù)表時(shí)間（t） 實(shí)測(cè)濃度（C） 外推濃度（C） 剩余濃度（C）（min） （gml） （gml） （gml）作圖：在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上以時(shí)間（t）為橫坐標(biāo)，實(shí)測(cè)濃度的對(duì)數(shù)值（lgC）為縱坐標(biāo)，將所得數(shù)據(jù)在坐標(biāo)紙上作點(diǎn)連線，可得到二房室模型特征性藥時(shí)曲線。計(jì)算

34、藥時(shí)曲線方程式：同二房室模型。計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)：同二房室模型。【結(jié)果與處理】自行作圖與列表，然后求算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)?！咀⒁馐马?xiàng)】1每次取血前要先將插管中的殘血放掉。2每吸取一個(gè)血樣時(shí)，必須更換吸管，若只用一支吸管時(shí)，必須將其中的殘液用生理鹽水沖凈。3將血樣加到三氯醋酸試管中應(yīng)立即搖勻，否則易出現(xiàn)血凝塊。4可用靜脈血取代動(dòng)脈血，但靜脈取血的缺點(diǎn)是有時(shí)因靜脈不充盈而取不出血。可以用燈泡加溫、涂抹二甲苯等方法刺激靜脈使之充盈。另外，取血時(shí)間無(wú)保證易使結(jié)果不準(zhǔn)確?！舅伎碱}】1一次靜脈注射后的藥時(shí)曲線能反映哪些與藥代動(dòng)力學(xué)有關(guān)的基本概念？2房室模型的涵義是什么？3說(shuō)明實(shí)驗(yàn)中所求的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的意義。實(shí)驗(yàn)

35、三 不同給藥途徑對(duì)異戊巴比妥作用的影響【目的】觀察不同的給藥途徑對(duì)藥物作用快慢的影響，掌握小白鼠的灌胃法、皮下注射及尾靜脈注射法。【動(dòng)物】小鼠4只?！舅幤贰?%amobarbital（異戊巴比妥）?！酒鞑摹看鬅⑻炱?、1ml注射器、小鼠灌胃器。【方法】取小鼠4只稱重、編號(hào)，觀察正?；顒?dòng)、呼吸狀況及翻正反射后，分別給予1%amobarbital溶液0.1ml/20g，甲鼠灌胃，乙鼠皮下注射，丙鼠腹腔注射，丁鼠尾靜脈注射。觀察、記錄作用發(fā)生的時(shí)間，并比較4鼠給藥后表現(xiàn)有何不同。【結(jié)果】鼠號(hào)體重劑量給藥途徑給藥時(shí)間翻正反射消失時(shí)間甲乙丙丁實(shí)驗(yàn)四 口服與腹腔注射硫酸鎂的作用比較【目的】觀察硫酸鎂口服

36、與注射給藥的作用有何不同，掌握硫酸鎂口服與注射給藥對(duì)機(jī)體的作用。【動(dòng)物】小鼠2只?！舅幤贰?2%MgSO4?！酒鞑摹看鬅?、天平、1ml注射器、小鼠灌胃器?！痉椒ā咳⌒∈?只，1只由腹腔注射12%MgSO4（含水）0.1ml/10g（1.2g/kg），另一只灌胃給予同樣劑量（1.2g/kg）的MgSO4。觀察并記錄動(dòng)物出現(xiàn)的癥狀?！咀⒁馐马?xiàng)】被灌胃給藥的小鼠如果也出現(xiàn)抑制，甚至呼吸麻痹而死亡，系由技術(shù)操作失誤，可能是將灌胃針頭穿透食管或胃臟，使MgSO4進(jìn)入胸腔或腹腔所致。應(yīng)及時(shí)補(bǔ)作。實(shí)驗(yàn)五 藥物的相互作用【目的】通過(guò)實(shí)驗(yàn)，認(rèn)識(shí)聯(lián)合用藥時(shí)藥物的協(xié)同作用和拮抗作用?！緞?dòng)物】小鼠5只。【藥品】0.

37、05%地西泮溶液，0.1%戊巴比妥鈉溶液，0.05%回蘇靈溶液?！酒鞑摹?ml注射器，鐵絲鼠籠?！痉椒ā咳⌒詣e、體重相近的小鼠5只，編號(hào)、稱重，然后分別給藥：1號(hào)鼠腹腔注射地西泮0.1mg/10g（0.05%溶液0.2ml/10g）。2號(hào)鼠皮下注射戊巴比妥鈉0.2mg/10g（0.1%溶液0.2ml/10g）。3號(hào)鼠先腹腔注射地西泮0.1mg/10g（0.05%溶液0.2ml/10g），10min后再皮下注射戊巴比妥鈉0.2mg/10g（0.1%溶液0.2ml/10g）。4號(hào)鼠皮下注射回蘇靈0.1mg/10g（0.05%溶液0.2ml/10g）。5號(hào)鼠先腹腔注射地西泮0.1mg/10g（0.0

38、5%溶液0.2ml/10g），10min后再皮下注射回蘇靈0.1mg/10g（0.05%溶液0.2ml/10g）。將5鼠分置鐵絲鼠籠中，比較所出現(xiàn)的藥物反應(yīng)及最終結(jié)果。給小鼠預(yù)先注射地西泮，對(duì)于戊巴比妥鈉和回蘇靈的藥理作用各有何影響？編號(hào)性別體重(g)第一次給藥第二次給藥兩藥相互作用類型藥名及劑量給藥后反應(yīng)藥名及劑量給藥后反應(yīng)1 2345【思考題】聯(lián)合用藥的臨床意義有哪些？實(shí)驗(yàn)六 傳出神經(jīng)藥物對(duì)在體兔腸的作用【目的】觀察并分析作用于傳出神經(jīng)系統(tǒng)藥物對(duì)腸平滑肌的作用?！緞?dòng)物】家兔1只?！舅幤贰?0%烏拉坦，0.9%NaCl，1%atropine，0.1%pilocarpine nitrate，0

39、.5%physostigmine salicylate?！酒鞑摹客檬中g(shù)臺(tái)、嬰兒秤、手術(shù)刀、剪刀、1ml、2ml、20ml注射器、針頭、蛙心夾、手術(shù)線、縫合針、鑷子、試管夾、兔腸管懸吊固定套管、支架、張力換能器、BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)?！痉椒ā咳⊥?只，稱重，10%烏拉坦10ml/kg耳緣靜脈麻醉后，仰臥固定于兔臺(tái)上，沿腹正中線切口，長(zhǎng)約5cm，剖開(kāi)腹腔，選取一段長(zhǎng)約10cm的空腸，于兩端腸系膜無(wú)血管處各穿一小孔，經(jīng)此二孔用手術(shù)線結(jié)扎這段腸管的兩端，兩端固定在套管上，再將套管用試管夾固定于支架上，將連有長(zhǎng)線的蛙心夾夾住結(jié)扎腸管段的中間，線的另一端與張力換能器的受力片相連。固定好換能器的位置

40、，按步驟進(jìn)行操作：將換能器的輸入端插頭與BL-420系統(tǒng)前面板“1通道”（或2、3通道）輸入接口接好，用鼠標(biāo)選擇“輸入信號(hào)”菜單中的“1通道” （或2、3通道）菜單項(xiàng)，以彈出“1通道” （或2、3通道）子菜單，在“1通道”（或2、3通道）菜單中選擇“張力”信號(hào)，用鼠標(biāo)單擊工具條上的“啟動(dòng)波形顯示”命令按鈕，或者從“基本工能”菜單中選擇“啟動(dòng)波形顯示”命令項(xiàng)，此時(shí)“1通道”（或2、3通道）顯示窗口可有腸平滑肌蠕動(dòng)波形顯示，根據(jù)窗口中顯示的波形，再適當(dāng)?shù)恼{(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)參數(shù)，以獲取最佳的實(shí)驗(yàn)效果（也可以將用鼠標(biāo)選擇“輸入信號(hào)”改成選擇“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”菜單中的“消化實(shí)驗(yàn)”菜單項(xiàng)，以彈出“消化實(shí)驗(yàn)”子菜單，在消化

41、實(shí)驗(yàn)子菜單中選擇“消化道平滑肌運(yùn)動(dòng)”）。描記正常腸管蠕動(dòng)波形后，由耳緣靜脈注射下列藥物：0.1%pilocarpine nitrate 0.1ml/kg，描記一段蠕動(dòng)波形。0.1%atropine 0.1ml/kg，描記腸管蠕動(dòng)曲線。0.5%physostigmine salicylate 0.1ml/kg，觀察腸蠕動(dòng)波形有何變化?！窘Y(jié)果】根據(jù)需要可進(jìn)行描記圖形的記錄，剪輯粘貼打印后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析?！咀⒁馐马?xiàng)】1處理腸管時(shí)操作要輕柔。2勿損傷腸系膜血管。3實(shí)驗(yàn)中可同時(shí)觀察瞳孔、唾液分泌等變化。此實(shí)驗(yàn)也可用二道生理記錄儀進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作方法同上，實(shí)驗(yàn)用儀器改用二道生理記錄儀，張力換能器的

42、輸入端插頭插入儀器FD2功能放大器輸入插孔，調(diào)節(jié)好儀器各有關(guān)部位（由教師課前調(diào)好）后，描記一段正常腸管蠕動(dòng)曲線后，按上述給藥順序進(jìn)行給藥。實(shí)驗(yàn)七 傳出神經(jīng)藥物對(duì)離體兔腸的作用【目的】學(xué)習(xí)離體平滑肌器官的實(shí)驗(yàn)方法，觀察擬膽堿藥和抗膽堿藥、擬腎上腺素藥和抗腎上腺素藥對(duì)離體兔腸的作用。【動(dòng)物】家兔1只?！舅幤放c試劑】0.001%氯化乙酰膽堿溶液、0.1%硫酸阿托品溶液、0.002%鹽酸腎上腺素溶液、0.3%鹽酸普萘洛爾溶液、0.001%甲基硫酸新斯的明溶液、臺(tái)氏（Tyrode/s）液?！酒鞑摹葵湥∕agnus）氏浴槽、恒溫水浴、L形通氣管、溫度計(jì)、充氣球膽、鐵支架、張力換能器、彈簧夾、螺旋夾、雙凹夾

43、、粗剪刀、手術(shù)剪、眼科鑷、下口瓶（500ml）、量筒、注射器、燒杯、培養(yǎng)皿、縫合針、縫合線、張力換能器、BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)?！痉椒ā?取制腸段標(biāo)本：取空腹家兔1只，左手執(zhí)髂上部，右手握木棰，猛擊枕骨部致死。迅速開(kāi)腹，剪取整個(gè)空腸及回腸上半段，迅速置于冷臺(tái)氏液中，除去腸系膜，用臺(tái)氏液將腸內(nèi)容物沖洗干凈，剪成長(zhǎng)約2cm的小段，置盛有臺(tái)氏液的培養(yǎng)皿內(nèi)備用。多余腸管如不及時(shí)應(yīng)用，可剪成數(shù)段，連同臺(tái)氏液置于4冰箱中保存，12h內(nèi)仍可使用。2裝于麥?zhǔn)显〔郏涸谀c段兩端用縫針各穿一線，將腸段的一端系在通氣管的小鉤上。將通氣管連同腸段放入盛有臺(tái)氏液的麥?zhǔn)显〔蹆?nèi)（臺(tái)氏液量30ml），以雙凹夾將通氣管的另

44、一端固定在鐵支架上，使充滿空氣的球膽和通氣管相連，微微開(kāi)啟球膽橡皮管上的螺旋夾，使球膽內(nèi)的空氣以2個(gè)氣泡/s的速度從通氣管尖端的小孔逸出，供給腸肌以氧氣。3標(biāo)本聯(lián)接及記錄：腸段另端的一線系于張力換能器的小鉤上，將換能頭輸出線與電源部分的輸入插座相聯(lián)，電源部分的輸出線聯(lián)接于記錄儀。浴槽中的腸肌承受約1g的拉力。開(kāi)動(dòng)記錄儀，記錄一段正常收縮曲線，然后依次用藥。（1）加0.001%氯化乙酰膽堿溶液0.1ml，結(jié)果如何？當(dāng)腸段收縮明顯時(shí)，立即加入：（2）0.1%硫酸阿托品溶液0.1ml，觀察對(duì)腸段收縮的影響。收縮曲線下降到基線時(shí)再加入：（3）0.001%氯化乙酰膽堿溶液，劑量同（1），結(jié)果又如何？如作

45、用不明顯，接著追加：（4）0.001%氯化乙酰膽堿溶液1ml，此時(shí)腸段有無(wú)收縮？觀察3min后更換浴槽中的臺(tái)氏液3次。（5）0.002%腎上腺素溶液0.2ml，觀察對(duì)腸段的舒張，待作用明顯后，用臺(tái)氏液沖洗3次。（6）0.3%普萘洛爾溶液0.2ml，接觸23min后，加入腎上腺素，劑量同（5），與首次用腎上腺素時(shí)的結(jié)果比較，有何不同？觀察結(jié)果后用臺(tái)氏液沖洗3次。（7）加入0.001%新斯的明溶液0.2ml，當(dāng)作用明顯時(shí)，加入0.1%硫酸阿托品溶液0.1ml，觀察對(duì)腸段收縮的影響?！咀⒁馐马?xiàng)】1注意控制浴槽的水溫，調(diào)節(jié)腸肌的張力，否則均可影響腸段的收縮功能與對(duì)藥物的反應(yīng)。2方法中的用藥量系以麥?zhǔn)显?/p>

46、槽中有30ml左右的臺(tái)氏液為準(zhǔn)。如臺(tái)氏液的容量有所改變，用藥量亦相應(yīng)調(diào)整。【報(bào)告要點(diǎn)】以描圖和文字記述正常離體腸肌的張力和舒縮情況、加入各種藥物后的反應(yīng)，并對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果作適當(dāng)討論?！居懻擃}】1使離體平滑肌保持其收縮功能需要哪些基本條件？2試從受體學(xué)說(shuō)分析阿托品對(duì)腸肌的作用，并討論這些作用的臨床意義。3普萘洛爾阻斷什么受體而拮抗腎上腺素的作用？注：本實(shí)驗(yàn)既可用兔腸來(lái)做，也可用豚鼠腸來(lái)做，但兩者稍有區(qū)別：1兔腸的肌層較厚，通氣最好用95%O2+5%CO2，用藥后需多換幾次臺(tái)氏液，才能將藥物洗去。豚鼠腸的肌層較薄，一般通氣即可，洗去藥物也較容易。2兔腸的肌層較厚，收縮力較強(qiáng)，以加1g左右的負(fù)荷為宜。豚

47、鼠腸的肌層菲薄，收縮力較弱，以加0.5g左右的負(fù)荷為宜。3兔腸的腔道較寬，自發(fā)收縮也較多，剪成短段置于臺(tái)氏液中后，其內(nèi)容物可自動(dòng)洗出。豚鼠腸常需用小心地向腸管內(nèi)滴加臺(tái)氏液的方法將其中的內(nèi)容物洗出。4兔的腸段自發(fā)活動(dòng)較多，適宜于做觀察藥物對(duì)腸運(yùn)動(dòng)影響的實(shí)驗(yàn)。豚鼠腸段自發(fā)活動(dòng)較少，基線穩(wěn)定，適宜于做生物檢定（特別是組胺）的實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)八 煙的毒性實(shí)驗(yàn)【目的】觀察煙堿對(duì)機(jī)體的毒性作用?！緞?dòng)物】小鼠2只?！舅幤放c試劑】香煙?！酒鞑摹?ml注射器2支，水煙斗。【方法】吸煙前先取蒸餾水4ml置于水煙斗內(nèi)，振搖后，用注射器抽取1ml作對(duì)照實(shí)驗(yàn)。然后將香煙插入水煙斗上，點(diǎn)燃香煙吸入（2支）。此時(shí)煙內(nèi)毒物如煙堿等

48、即溶于水中。取小鼠2只，觀察其正?；顒?dòng)后，一鼠由腹腔注射吸煙后水煙斗內(nèi)液體0.10.5ml。另一鼠腹腔注射吸煙前水煙斗內(nèi)液體0.10.5ml作對(duì)照，注射后內(nèi)觀察二鼠有何不同反應(yīng)?！舅伎碱}】試述吸煙對(duì)人體有哪些危害？為什么？實(shí)驗(yàn)九 有機(jī)磷藥物中毒及其解救【目的】觀察有機(jī)磷藥物中毒的癥狀及血液膽堿酯酶的抑制情況。根據(jù)阿托品和碘解磷定對(duì)有機(jī)磷中毒的解救效果，初步分析兩藥的解毒機(jī)制。【動(dòng)物】家兔2只。【藥品與試劑】0.2%atropine，5%dipterex，2.5%PAM，二甲苯，測(cè)定血液膽堿酯酶的試劑另詳?！酒鞑摹?0ml注射器2支，兔固定箱，瞳孔尺，小鼠灌胃針頭，預(yù)先加草酸鉀的試管，試管架，刀

49、片，木夾，干棉球?！痉椒ā?取家兔2只，以甲、乙編號(hào)，稱重，觀察下列指標(biāo)：活動(dòng)情況、呼吸（頻率、幅度、節(jié)律是否均勻）、瞳孔大小、唾液分泌、大小便、肌張力及有無(wú)肌震顫等，分別加以記錄。2將兩兔分別固定于箱內(nèi)，以蘸有二甲苯或酒精的棉球涂擦耳殼，使血管擴(kuò)張。當(dāng)充血明顯時(shí)，用刀片切割耳靜脈（切口不要過(guò)大、過(guò)深），讓血液自然流出，滴入預(yù)先置有少量草酸鉀結(jié)晶的試管內(nèi)，立即搖勻，供測(cè)定血液膽堿酯酶活力之用。如取血后切口流血不止，可用干棉球按壓，再夾上木夾止血。3兩兔同樣給予有機(jī)磷農(nóng)藥：5%dipterex 2ml/kg，由另一側(cè)耳靜脈注入。密切注意給藥后家兔上述生理指標(biāo)的變化，加以記錄。中毒癥狀明顯時(shí)，再按

50、上法取血，留供膽堿酯酶活力測(cè)定。4立即給甲兔靜脈注射0.2%atropine lml/kg，給乙兔靜脈注射2.5%PAM 2ml/kg，然后每隔5min，再檢查各項(xiàng)生理指標(biāo)一次，觀察兩兔的情況有無(wú)好轉(zhuǎn)，特別注意甲兔和乙兔的區(qū)別。中毒癥狀明顯減輕后，再次由兩兔的靜脈取血，測(cè)定血液膽堿酯酶活力。【報(bào)告要點(diǎn)】兔號(hào)體重觀察階段活動(dòng)情況呼吸情況瞳孔大小唾液分泌大小便次數(shù)及 性 狀肌張力及震顫血液膽堿酯酶活力甲給藥前給敵百蟲(chóng)后給阿托品后乙給藥前給敵百蟲(chóng)后給碘解磷定后【注意事項(xiàng)】1敵百蟲(chóng)的精制，可利用其在沸水中溶解度增加，冷卻后可結(jié)晶析出的性能來(lái)進(jìn)行。取粗制敵百蟲(chóng)溶解于沸水中，保溫過(guò)濾。將濾液放置冷卻，濾取

51、結(jié)晶，干燥后即得。2給家兔靜注敵百蟲(chóng)后，如經(jīng)15min尚未出現(xiàn)中毒癥狀，可追加1/3量。3本實(shí)驗(yàn)系為分析阿托品和碘解磷定的解毒機(jī)制而設(shè)計(jì)。在臨床實(shí)際應(yīng)用中，需將阿托品與碘解磷定配合應(yīng)用，才能獲得最佳解毒效果。為防止動(dòng)物死亡，在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)也應(yīng)給兩兔分別補(bǔ)注碘解磷定與阿托品?！舅伎加懻擃}】1根據(jù)本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果，分析有機(jī)磷農(nóng)藥的中毒機(jī)制及阿托品和解磷定的解毒原理。2將本實(shí)驗(yàn)方法用于有機(jī)磷解毒劑的篩選時(shí)，最好選用哪些指標(biāo)？3為什么對(duì)中度或重度有機(jī)磷農(nóng)藥中毒病人，必須合并應(yīng)用阿托品和AChE復(fù)活藥？附：全血膽堿酯酶活力的比色測(cè)定法【原理】在反應(yīng)系統(tǒng)中加入一定量的乙酰膽堿，溫育一定時(shí)間，膽堿酯酶使乙酰膽堿水

52、解為膽堿和乙酸。未被膽堿酯酶水解剩余的乙酰膽堿與堿性羥胺作用生成乙酰羥胺。乙酰羥胺在酸性溶液中成為乙酰羥肟酸再與三氯化鐵反應(yīng)形成棕色鐵的復(fù)合物。依據(jù)顏色深淺計(jì)算剩余乙酰膽堿含量，推算出水解乙酰膽堿的酶活力。OH O OH(CH3)3N(CH2)2OCCH3 + HNOH H 乙酰膽堿 羥胺O OHCH3CNOH + (CH3)3N(CH2)2OH H 乙酰羥胺 膽堿O H+ O3 CH3CNOH + Fe3+ 3 CH3CNO Fe + 3H+ H H 乙酰羥胺 棕色鐵的復(fù)合物【器材】試管、試管架、吸管、恒溫水浴、分光光度計(jì)、漏斗、濾紙。【藥品與試劑】2/15mol/L磷酸氫二鈉溶液：稱取Na

53、2HPO412H2O 23.87g，用蒸餾水溶解，稀釋至500ml。2/15mol/L磷酸二氫鉀溶液：稱取KH2PO4 9.08g，用蒸餾水溶解，稀釋至500ml。pH7.2磷酸鹽緩沖液：取2/15mol/L磷酸氫二鈉溶液72ml，與2/15mol/L磷酸二氫鉀溶液28ml混合即成。0.001mol/L pH4.5醋酸鹽緩沖液：先由每升含冰醋酸5.78ml之水溶液28ml和每升含醋酸鈉（不含結(jié)晶水）8.20g之水溶液22ml混合，成為0.1mol/L pH4.5之醋酸鹽緩沖液，臨用前以蒸餾水稀釋100倍。0.07mol/L 乙酰膽堿底物貯存液：快速稱取氯化乙酰膽堿0.127g（或溴化乙酰膽堿0

54、.158g），溶于0.001mol/L pH4.5醋酸鹽緩沖液10ml中。在冰箱中可保存4w。0.07mol/L 乙酰膽堿底物應(yīng)用液：臨用前取0.07mol/L 乙酰膽堿底物貯存液，用pH7.2磷酸鹽緩沖液稀釋10倍。堿性羥胺溶液：臨用前取等量14%氫氧化鈉溶液和14%鹽酸羥胺溶液，混合即成。4mol/L 鹽酸溶液：取比重1.19的鹽酸1容積，加蒸餾水2容積，混合即成。10%三氯化鐵溶液：稱取FeCl36H2O 10g，用0.1mol/L 鹽酸溶解，使成100ml?！痉椒ā堪聪卤聿僮?。每加一種試劑后均須充分搖勻，保溫時(shí)間須嚴(yán)格控制。步驟加 入 量 （ml）標(biāo) 準(zhǔn) 管測(cè) 定 管空 白 管1 pH

55、7.2磷酸鹽緩沖液1.01.01.02 全血（混勻后）0.10.10.13 370C水浴預(yù)熱3min4 乙酰膽堿底物應(yīng)用液1.05 370C水浴保溫20min6 堿性羥胺溶液4.04.04.07 乙酰膽堿底物應(yīng)用液1.08 室溫靜置2min9 4mol/L 鹽酸溶液2.02.02.010 10%三氯化鐵溶液2.02.02.011 乙酰膽堿底物應(yīng)用液1.012 用濾紙過(guò)濾，選用525nm于15min內(nèi)比色完畢。以蒸餾水校正吸收度到零點(diǎn)，讀取各管吸收度?！居?jì)算】（標(biāo)準(zhǔn)管吸收度空白管吸收度）（測(cè)定管吸收度空白管吸收度） 70 = 膽堿酯酶活力（單位/ml）標(biāo)準(zhǔn)管吸收度空白管吸收度注：通常以1ml血液

56、在規(guī)定條件下能分解1mol/L 乙酰膽堿定為1個(gè)膽堿酯酶活力單位。計(jì)算式中的“70”是由于每管中加有7mol/L 乙酰膽堿，0.1ml血液，71.0/0.1=70。實(shí)驗(yàn)十 新斯的明對(duì)琥珀膽堿和筒箭毒堿肌松作用的影響【目的】觀察新斯的明對(duì)除極化型和非除極化型肌松藥肌松作用的影響，學(xué)習(xí)麻醉大鼠腓神經(jīng)一脛前肌標(biāo)本的制備方法。【動(dòng)物】大鼠。【藥品】0.005%氯化筒箭毒堿，0.03%氯化琥珀膽堿，0.01%溴化新斯的明，20%烏拉坦，2%鹽酸普魯卡因，0.9%NaCl?！酒鞑摹渴中g(shù)器械1套（大、小手術(shù)剪、手術(shù)刀、鑷子、分離鉗、玻璃分針），大鼠手術(shù)臺(tái)，棉球，棉線，張力換能器，描記裝置1套，電刺激裝置，保

57、護(hù)電極，鐵支架，雙凹夾，1ml、2ml注射器。BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)?！痉椒ā?調(diào)節(jié)好BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)及電刺激裝置。2取大白鼠1只，稱重，腹腔注射烏拉坦1.21.5g/kg。麻醉后，兩前肢背位固定在手術(shù)臺(tái)上，做好氣管插管，從后肢踝關(guān)節(jié)正前部向上剪開(kāi)小腿皮膚，剪斷踝關(guān)節(jié)部橫韌帶，分離脛前肌肌腱，沿脛骨分離脛前?。ㄎ饟p傷血管），在脛前肌肌腱處扎一線，于遠(yuǎn)端切斷肌腱；分離出腓神經(jīng)，安裝電極以備進(jìn)行實(shí)驗(yàn)刺激；在髖關(guān)節(jié)后外側(cè)約0.5cm處切開(kāi)皮膚，暴露出一段坐骨神經(jīng)，用浸有鹽酸普魯卡因的棉球，在坐骨神經(jīng)干上做傳導(dǎo)麻醉，約12min后，沿放置麻醉藥部位，將神經(jīng)切斷。手術(shù)結(jié)束后，將脛前肌與

58、換能器相連，腓神經(jīng)處安上保護(hù)電極，在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中每5s給一次單刺激，選擇適當(dāng)?shù)拇碳?qiáng)度（以收縮曲線高度24cm為宜），記錄給藥前肌肉收縮曲線35min。3腹腔注射氯化筒箭毒堿0.2mg/kg，待收縮振幅被抑制50%時(shí)，立即由舌靜脈勻速注射溴化新斯的明0.1mg/kg。4肌肉收縮恢復(fù)后，由腹腔注射氯化琥珀膽堿1.22.4mg/kg。待收縮振幅被抑制50%時(shí)，立即由舌靜脈注入溴化新斯的明0.1mg/kg?！窘Y(jié)果】根據(jù)描記曲線圖分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果?！咀⒁馐马?xiàng)】1溴化新斯的明注射不宜過(guò)快，尚可進(jìn)行靜脈插管給藥。每次注射藥物后，需立即注射生理鹽水0.51ml，以便將插管內(nèi)積存的藥液全部注入靜脈中。2實(shí)驗(yàn)過(guò)程

59、中應(yīng)密切注意呼吸狀態(tài)，必要時(shí)進(jìn)行人工呼吸。實(shí)驗(yàn)十一 傳出神經(jīng)藥物對(duì)兔眼瞳孔的作用【目的】觀察擬膽堿藥、抗膽堿藥及擬腎上腺素藥對(duì)兔眼瞳孔的作用，并分析后兩類藥物散瞳作用的機(jī)制。【動(dòng)物】家兔2只?！舅幤贰?%atropine，1%pilocarpine，0.5%physostigmine，1%neosynephrine。【器材】測(cè)瞳尺，手電筒，兔固定箱，滴管?！痉椒ā咳⊥?只，于適度的光照下，用測(cè)瞳尺測(cè)量?jī)裳弁椎拇笮。ㄒ詍m表示之）。另用手電筒的光試驗(yàn)對(duì)光反射，即突然從側(cè)面照射兔眼，如瞳孔隨光照而縮小，即為對(duì)光反射陽(yáng)性，否則為陰性。在兔的結(jié)膜囊內(nèi)滴藥（滴藥時(shí)用拇指與食指將兔下眼瞼拉開(kāi)，使其成杯狀

60、，并用中指壓住鼻淚管，滴入藥液2滴，輕輕揉動(dòng)眼瞼，使藥液與角膜充分接觸，并在結(jié)膜囊內(nèi)保留1min，然后放手任其自溢），所滴藥液參見(jiàn)下表。家兔編號(hào)左眼右眼甲1%atropine1%pilocarpine乙1%neosynephrine0.5%physostigmine滴藥后10min，在同樣的光照下，再測(cè)兩兔左、右眼的瞳孔大小和對(duì)光反射。如滴毛果蕓香堿及毒扁豆堿眼的瞳孔已經(jīng)縮小，在這兩眼的結(jié)膜囊內(nèi)再分別滴入1%阿托品、1%苯腎上腺素2滴，10min后檢查瞳孔大小及對(duì)光反射又有何變化？【報(bào)告要點(diǎn)】瞳孔大?。╩m） 對(duì)光反射兔號(hào) 眼睛 藥物用藥前 用藥后 用藥前 用藥后左 阿托品1 毛果蕓香堿 右再