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文檔簡介

1、轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品的檢測方法1轉(zhuǎn)基因植物（GMO） 自1983年首例轉(zhuǎn)基因植物問世以來，其商業(yè)化種植面積和經(jīng)濟(jì)效益迅速擴(kuò)大。 提高農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)量、品質(zhì)提高植物對生物和非生物脅迫的抗性轉(zhuǎn)基因植物及其食品的生物安全性對環(huán)境的影響及生態(tài)效應(yīng)食品的安全性轉(zhuǎn)基因植物及產(chǎn)品的檢測定性及定量2轉(zhuǎn)基因植物檢測依據(jù)啟動子、目的基因、終止子；選擇標(biāo)記基因啟動子：CaMV 35s和土壤農(nóng)桿菌的nos啟動子終止子：土壤農(nóng)桿菌的nos終止子目的基因：近百種 選擇標(biāo)記基因：抗生素抗性基因：新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶基因npt-/潮霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶hpt除草劑抗性基因：bar基因和als基因3轉(zhuǎn)基因植物檢測依據(jù)報告基因：通過報告基因在轉(zhuǎn)化

2、植株中的瞬時表達(dá)和穩(wěn)定表達(dá)可以確定外源基因是否能在轉(zhuǎn)化細(xì)胞中表達(dá)。cat：氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶基因 CAT活性通過硅膠G薄層層細(xì)及DTNB分光光度法測定gus：-葡萄糖苷酸酶基因 GUS可催化底物X-Gluc水解產(chǎn)生藍(lán)色沉淀反應(yīng)和4-MUG 水解發(fā)熒光（=455nm）gfp：綠色熒光蛋白基因 在395nm光激發(fā)下可產(chǎn)生綠色熒光。luc：螢光素酶基因ant：花青素基因 在轉(zhuǎn)化植物組織上生成紅色的花青素斑點(diǎn)。4轉(zhuǎn)基因植物檢測依據(jù)表現(xiàn)性定性分析表性分析可通過測定某一特定的性狀存在與否，來判斷是否為轉(zhuǎn)基因植物。目前，能測定的性狀是對除草劑是否有抗性。用于GMO種子檢測。5轉(zhuǎn)基因植物檢測-外源基因檢測PCR檢測：常規(guī)PCR多重PCR巢式PCR實(shí)時熒光定量PCRPCR-ELISAPCR-genescan核酸雜交檢測印記雜交斑點(diǎn)雜交細(xì)胞原位雜交基因芯片技術(shù)GMO芯片試劑盒6轉(zhuǎn)基因植物檢測 -外源基因表達(dá)產(chǎn)物的檢測組織化學(xué)染色：檢測gus基因表達(dá)產(chǎn)物的方法螢光測定法：gus基因螢光素酶gfp基因NanoLuc 螢光素酶7轉(zhuǎn)基因植物檢測 -外源基因

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