(整理)酶聯(lián)免疫反應(yīng)常用底物

1、精品文檔酶聯(lián)免疫反應(yīng)常用底物辣根過氧化物酶HRP底物辣根過氧化物酶（HorseradishPeroxidase,HRP）具有分子量小，標(biāo)記方法簡(jiǎn)單，性質(zhì)穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)，是臨床檢驗(yàn)試劑中常用的酶。該產(chǎn)品廣泛用于各類生化檢測(cè)項(xiàng)目及免疫類（ELISA）試劑盒。中華試劑網(wǎng)辣根過氧化物酶的底物種類豐富，可滿足不同的實(shí)驗(yàn)需求。HRP的發(fā)色底物辣根過氧化物酶發(fā)色底物為過氧化物和供氫體（DH2），其真正底物是H0,但人們習(xí)慣把供氫體稱為底物22或統(tǒng)稱供氫體底物。在ELISA中常用的供氫體有以下幾種：1、OPD是ELISA技術(shù)中應(yīng)用較多的供氫體，酶作用后顯黃色（最大吸收波長(zhǎng)為492nm），其靈敏度高，測(cè)定方便。2、

2、TMB是近年來(lái)常用的一種供氫底物，經(jīng)酶作用后顯天藍(lán)色，目測(cè)對(duì)比度鮮明，加酸終止酶反應(yīng)后變黃色（最大吸收波長(zhǎng)為450nm），易比色定量測(cè)定。3、DBA供氫底物，其反應(yīng)產(chǎn)物為不能溶解的棕色吩嗪衍生物，可用不同光鏡觀察。此種多聚物能被還原和螯合四氯化碳，形成具有電子密度的產(chǎn)物，便于用電鏡觀察。中文名稱英文名稱反應(yīng)產(chǎn)物CAS包裝鄰苯二胺o-Phenylenediamine,OPD,99.5%黃色、可溶性95-54-5100g500g3,3,5,5-四甲基聯(lián)苯胺3,3,5,5-Tetramethylbenzidine,TMB,99%藍(lán)色（黃色）、可溶性54827T7-71g5g3,3-二氨基聯(lián)苯胺3,3

3、-Diaminobenzidine,DAB,99%棕色、不溶性91-95-225g100g聯(lián)苯胺Benzidine,95%藍(lán)色、不溶性92-87-525g250g四甲基聯(lián)苯胺硫酸鹽N-(3-Sulfopropyl)-3,3,5,5-tetramethylbenzidine,sodiumsalt,TMB-PS,99%藍(lán)色、可溶性102062-36-25g25g5-氨基水楊酸5-Aminosalicylicacid,98.5%棕色、可溶性89-57-625g100g500g2,2-二氮-雙（3-乙基苯并噻Azinobis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonicacid-2

4、NH-salt4綠色、可溶性30931-67-01g唑-6-磺酸）銨鹽3-氨基-9-乙基咔唑3-Amino-9-ethylcarbazole,AEC紅色、可溶性1323215g25g4-氯-1萘酚ChloroTnaphthol藍(lán)色、可溶性60444425g探小貼士：氧化物、硫化物、氟化物及疊氮化物等可抑制HRP的活性，故勿用這類試劑作為防腐劑。HRP的發(fā)光底物魯米諾（3-氨基鄰苯二甲酰肼，Luminol）或其衍生物如異魯米諾（4-氨基鄰苯二甲酰肼，Isoluminol），是一類重要的發(fā)光試劑。用HRP標(biāo)記抗體，進(jìn)行免疫反應(yīng)后，利用魯米諾作為發(fā)光底物，在HRP和起動(dòng)發(fā)光試劑帥呷2）作用下，魯米諾

5、發(fā)光，發(fā)光強(qiáng)度依賴于酶免疫反應(yīng)物中酶的濃度。反應(yīng)過程如下圖所示:M3H0注抗佯包攪抗原HRP固相撓煉標(biāo)記抗體艱抗體夾匕復(fù)合物=+他0洗滌清除網(wǎng)JT*國(guó)+K+雙抗體夾社復(fù)合物増強(qiáng)劑魯米話會(huì)米諾發(fā)光產(chǎn)品編號(hào)中文名稱英文名稱CAS純度包裝328061魯米諾Luminol52131398%1g5g25g分子式：CHNO8732分子量：433.63熔點(diǎn)：194-195C儲(chǔ)存條件：2-8CHNH0產(chǎn)品編號(hào)中文名稱英文名稱CAS號(hào)純度包裝A5300異魯米諾Isoluminol3682-14-298%1g10g分子式：CHN08732分子量：177.16熔點(diǎn)：194-195C儲(chǔ)存條件：2-8C00配套產(chǎn)品中文

6、名稱英文名稱CAS號(hào)純度包裝4-碘苯酚4Iodophenol540-38-599%5g25g100g四苯基硼酸鈉Sodiumtetraphenylborate143-66-899.5%(ACS)25g100g500g牛血清白蛋白BovineserumalbuminFractionV,BSA9048-46-85g25g100g十二烷基硫酸鈉Dodecylsulfatesodiumsalt,SDS151-21-399%100g500g脫氧膽酸鈉Sodiumdeoxycholate302-95-498%25g100g500g苯甲基磺酰氟化物Phenylmethylsulfonylfluoride,P

7、MSF329-98-699%25g100g亮抑酶肽Leupeptin103476-89-796.5%10mg50mg三(羥甲基)氨基甲烷鹽酸鹽Tris(hydroxymethyl)aminomethanehydrochloride,Tris-HCl1185-53-199%25g100g500g吐溫80Polysorbate809005-65-6250mL1L堿性磷酸酶底物堿性磷酸酶(Alkalinephospharase,AP)是一種能夠在堿性情況下將對(duì)應(yīng)底物去磷酸化的酶，廣泛分布于人體的各臟器器官中，以肝臟、骨骼、小腸中存在的量最多。其含量的變化能引起肝炎、肝癌等疾病，是目前免疫診斷試劑產(chǎn)品

8、最常用的標(biāo)記酶之一。PNPP(p-Nitrophenylphosphatedisodiumsalt)是常用的堿性磷酸酶底物，當(dāng)堿性磷酸酶與PNPP反應(yīng)后，形成黃色水溶性反應(yīng)產(chǎn)物，其在&lambda=405nm有光吸收。其反應(yīng)靈敏，顏色鮮明，在診斷試劑盒生產(chǎn)中得到廣泛應(yīng)用。PNPPBCIP和NBT是堿性磷酸酶最佳的發(fā)色底物組合之一，產(chǎn)物為深藍(lán)色。在堿性磷酸酯酶的催化下，BCIP會(huì)被水解產(chǎn)生強(qiáng)反應(yīng)性的產(chǎn)物，該產(chǎn)物會(huì)和NBT發(fā)生反應(yīng)，形成不溶性的深藍(lán)色至藍(lán)紫色的NBT-formazan，從而達(dá)到標(biāo)記作用。0-P-0-CI右EGIFIrnjigo(1冗CIBCIP產(chǎn)品編號(hào)中文名稱英文名稱CAS包裝33

9、85605-溴-4-氯-3-吲哚磷酸酯對(duì)甲苯胺鹽5Bromo4chloro3indolylphosphateptoluidinesalt,BCIP,98%6578069100mg250mg1g分子式：CHBrClNOPCHN86479分子量：433.63熔點(diǎn)：194-195C儲(chǔ)存條件：2-8CH匚出NBT產(chǎn)品編號(hào)中文名稱英文名稱CAS包裝577118氯化硝基四氮唑蘭NitrotetrazoliumBluechloride,NBT,90%298839100mg1gno2分子式：CHNO2Cl4030106于嚴(yán)尙r分子量：817.64彳*j廠熔點(diǎn)：200CU好廠c-嚴(yán)、儲(chǔ)存條件：2-8CoP|其它

10、底物產(chǎn)品編號(hào)中文名稱英文名稱終顏色及水溶性CAS包裝10840294-硝基苯磷酸二鈉Disodium4nitrophenylphosphate,99%黃色、可溶性4264-83-9Inquire209946萘酚AS-BI磷酸鹽NaphtholASBIphosphate,NABP,95%紅色、不溶性1919-91-1100mg500mg1g3000201萘酚-AS-MX-磷酸鹽Naphthol-AS-MX-phosphate,NAMP,99%紅色、不溶性1596-56-1250mg配套產(chǎn)品產(chǎn)品編號(hào)中文名稱英文名稱CAS包裝1418875-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二鈉鹽5-Bromo-4-chloro-3-indoxylphosphate,disodiumsaltsesquihydrate102185-33-1100mg250mgBIB14195-溴-6-氯-3-吲哚磷酸二鈉鹽5-Bromo-6-chloro-3-indoxylphosphate,disodiumsaltmonohydrate404366-59-2100mg250mgI6550003-吲哚酰磷酸酯二鈉鹽3-Indoxylphosphate,disodiumsalt3318-43-2500mg5g5653604-甲基傘形酮磷酸酯4-Methylumbelliferylpho