臨床免疫學(xué)和免疫檢驗2018講義

1、第二十五章 免疫增殖性疾病及其免疫檢測免疫增殖性疾病是指由于淋巴細(xì)胞異常增殖所引起的疾病，故多屬于血液疾病范疇。漿細(xì)胞功能異常導(dǎo)致免疫球蛋白異常增殖性疾病分為良性增殖病和惡性增殖病兩大類疾病。第一節(jié) 免疫球蛋白異常增殖性疾病的概念及分類免疫球蛋白異常增殖性疾病是指由于漿細(xì)胞的異常增殖而導(dǎo)致的免疫球蛋白的異常增加，引起機體病理損傷的一組疾病。通常多克隆增殖的免疫球蛋白多為良性反應(yīng)性增殖或繼發(fā)某一疾病，如肝病、結(jié)締組織病及急等。染單克隆免疫球蛋白增殖多呈惡性發(fā)展趨勢，故免疫球蛋白異常增殖性疾病多專指單克隆免疫球蛋白異常增殖的疾病。第二節(jié) 免疫球蛋白異常增殖性疾病的免疫損傷機制異常的免疫細(xì)胞增殖，不

2、具有免疫活性，其本身將造成免疫系統(tǒng)的直接損害或通過步損害正常的免疫細(xì)胞和其他組織，最終導(dǎo)致疾病。有關(guān)物質(zhì)進(jìn)一一、漿細(xì)胞異常增殖是指單克隆漿細(xì)胞異常增殖并伴有單克隆免疫球蛋白或其多肽鏈亞異常。二、正常體液免疫抑制正常的體液免疫中，IL-4 啟動 B 細(xì)胞進(jìn)入 DNA期；IL-5 促進(jìn) B 細(xì)胞繼續(xù)增殖；IL-6 促使 B 細(xì)胞分化成漿細(xì)胞，及反饋抑制 IL-4 控制 B 細(xì)胞的增殖分化過程。另外，大量的漿細(xì)胞瘤無活性的 Ig，其 Fc 段與正常 B 細(xì)胞等有 Fc 受體的細(xì)胞結(jié)合，將 Fc 受體封閉，影響對其他生物信息的接收，并可阻斷 B 細(xì)胞的增殖、發(fā)育和影響抗原提呈。三、異常免疫球蛋白增殖所

3、造成的病理損傷單克隆的漿細(xì)胞異常增殖產(chǎn)生大量的單克隆異常免疫球蛋白或免疫球蛋白片段，這些異常免疫球蛋白或片段不具有正常抗體功能，但其在組織的沉淀可造成組織變性和淋巴細(xì)胞浸潤，進(jìn)而導(dǎo)致相應(yīng)的功能。單克隆免疫球蛋白濃度過高，甚至可以導(dǎo)致血液黏稠度增加，產(chǎn)生一系列直接或間接的病理損害。四、溶骨變漿細(xì)胞瘤大多伴有溶骨性破壞?；颊唧w內(nèi)高水平 IL-6 是使破骨細(xì)胞數(shù)量增多的重要因子，溶骨性破壞與漿細(xì)胞的惡性增殖有非常密切的關(guān)系，是骨髓瘤患者疾病的重要原因之一。第三節(jié) 常見免疫球蛋白增殖病單克隆免疫球蛋白增殖病是指患者體內(nèi)存在異常增多的單克隆免疫球蛋白的一類疾病。免疫球蛋白電泳位置在丙種球蛋白區(qū)域，故亦稱

4、丙種球蛋白增殖病。其產(chǎn)生的免疫球蛋白理化性質(zhì)十分均一，但無免疫活性，所以稱這類免疫球蛋白為 M 蛋白。M 蛋白的輕鏈由于分子量較小，可通過腎小球從尿中排出，這種在尿中檢出的免疫球蛋白的輕鏈稱本-周蛋白。一、多發(fā)性骨髓瘤多發(fā)性骨髓瘤也稱漿細(xì)胞瘤?；颊叱０橛胸氀?、腎功損害和免疫功能。本病可以出現(xiàn)血沉增快，血中檢出M 蛋白和不明原因的蛋白尿。當(dāng)瘤細(xì)胞的數(shù)量達(dá)到一定程度時可以出現(xiàn)骨質(zhì)損傷或骨髓抑制，出現(xiàn)骨痛，以腰骶痛為多見，有時誤診為風(fēng)濕，后期疼痛劇烈，骨骼可有局部隆起形成腫塊，有時出現(xiàn)病理性骨折。造血損害主要表現(xiàn)為貧血。骨痛和貧血常作為多發(fā)性骨髓瘤的首發(fā)癥狀和就診原因，和腎功能衰竭是本病的重要死因。

5、多發(fā)性骨髓瘤的特點可歸納為：中有大量單克隆 M 蛋白或尿中有大量本-周蛋白檢出；骨髓發(fā)現(xiàn)大量漿細(xì)胞或組織活檢證實有漿細(xì)胞瘤；性的溶骨性損害或廣泛骨質(zhì)疏松。確診多發(fā)性骨髓瘤必須要做進(jìn)一步免疫學(xué)檢查和分型。二、巨球蛋白血癥巨球蛋白血癥是以IgM 的漿細(xì)胞惡性增殖為病理基礎(chǔ)的疾病。好發(fā)于老年。本病骨髓浸潤、骨質(zhì)破壞，但骨痛、骨折等表現(xiàn)較少。主要表現(xiàn)骨髓外浸潤，以肝、脾和淋腫大為主要體征并伴有血黏滯過高綜合征，如表現(xiàn)為視網(wǎng)膜等。在檢查時，呈膠凍狀難以分離，電泳時有時難以泳動，集中于原點是該病的電泳特征。將做適當(dāng)稀釋后可檢出高水平的 IgM 型 M 蛋白，結(jié)合臨床癥狀可以本病。三、重鏈病重鏈病是突變的漿

6、細(xì)胞所產(chǎn)生的重鏈異常增多或質(zhì)量異常不能與輕鏈裝配，導(dǎo)致重鏈過剩，致使中和尿中出現(xiàn)大量游離的無免疫功能的免疫球蛋白重鏈所引起的疾病。根據(jù)重鏈的不同可進(jìn)行免疫分型，以、型為多見。四、輕鏈病輕鏈病是變異的漿細(xì)胞產(chǎn)生大量的異常輕鏈，過多的輕鏈在腎臟和其他內(nèi)臟組織沉積，導(dǎo)致腎損害和淀粉樣變性。本病血液和尿中可查到大量的輕鏈蛋白，分為型和型，型腎毒性較強。本病發(fā)病較輕，多數(shù)患者溶骨性損害嚴(yán)重。中免疫球蛋白水平僅輕度降低或處于正常低限，但免疫球蛋白/型比值明顯異常，和尿中往往可同時檢測出免疫球蛋白輕鏈。五、良性單克隆丙種球蛋白血癥是指中出現(xiàn)高水平免疫球蛋白，但并無漿細(xì)胞惡性增殖的疾病。一般無臨床癥狀，體檢時

7、發(fā)現(xiàn)血中有 M 蛋白，但其并不呈進(jìn)行性增加。約有 1/4 的良性單克隆丙種球蛋白血癥，在 10 年左右的時間里轉(zhuǎn)變成惡性單克隆丙種球蛋白增多疾病，如果血中或尿中出現(xiàn)本-周蛋白，很可能是信號。第四節(jié) 免疫球蛋白異常增殖常用的免疫檢測目的是早期發(fā)現(xiàn)疾病、病情和判斷預(yù)后。一、區(qū)帶電泳區(qū)帶電泳是測定 M 蛋白的一種定性實驗，常采用醋酸素膜和瓊脂糖電泳兩種方法。可采用自動化電泳分析儀。單克隆丙種球蛋白增高時常在區(qū)，呈現(xiàn)濃密狹窄的蛋1）。，經(jīng)掃描顯示為高尖蛋白峰（高：寬2：多克隆丙種球蛋白增高時，如慢的蛋白峰。染、自身免疫病和肝病等，區(qū)帶寬而濃密，掃描圖顯示為寬大有些輕鏈病，或重鏈病的 M 蛋白峰并不明顯

8、，富含類風(fēng)濕因子的蛋白峰的電泳區(qū)帶。、溶血標(biāo)本，有些卻可出現(xiàn)類似M二、免疫電泳標(biāo)本先行區(qū)帶電泳分成區(qū)帶，繼而用特定的抗進(jìn)行免疫擴散，M 蛋白將在適當(dāng)?shù)牟课恍纬僧惓３恋砘　ＵＨ诵纬傻某恋砭€是均勻的弧形，而 M 蛋白的沉淀線或沉淀弧較寬，呈弓形或船形。有時 M 蛋白的四級結(jié)構(gòu)會影響輕鏈與抗體結(jié)合，需在中加入 2-巰基乙醇（10l/ml）。否則輕鏈不能檢出，可能會誤診為重鏈病。將尿標(biāo)本與血標(biāo)本一同進(jìn)行免疫電泳分析會減少檢驗誤差。三、免疫固定電泳是區(qū)帶電泳與免疫沉淀反應(yīng)相結(jié)合的定性實驗，具有更高的靈敏性。固定電泳后分別在電泳條上加入不同類型的單克隆抗體，相應(yīng)的抗原將與抗體在某一區(qū)帶形成抗原抗體復(fù)合物

9、，經(jīng)漂洗和染色可清晰地顯示出抗原抗體反應(yīng)帶。M 蛋白在免疫固定電泳中顯示狹窄而界限明確的區(qū)帶，而多克隆增殖或正常蛋白區(qū)帶則比較彌散。四、免疫球蛋白定量免疫球蛋白及輕鏈的定量分析對免疫球蛋白異常增殖性疾病具有重要價值，以免疫比濁分析法為主。若患者有某一類型免疫球蛋白明顯高出正常值，應(yīng)考慮中有 M 蛋白的存在。正常中/比例約為 2：1，當(dāng)/比例大于 4：1 或小于 1：1 時應(yīng)考慮型或型 M 蛋白血癥。第五節(jié) 異常免疫球蛋白測定是指理化和生物學(xué)性質(zhì)發(fā)生改變的免疫球蛋白，主要包括血液中 M 蛋白、血液和尿中輕鏈蛋白。一、M 蛋白的檢測M 蛋白有 3 種存在形式：由輕鏈和重鏈組成的完整的 IgG、Ig

10、A 或 IgM；只有游離的或輕鏈；只有游離的三類重鏈中的某一類。區(qū)帶電泳時可檢出 M 蛋白，但不能檢出是哪一類型；而免疫電泳和免疫固定電泳可檢出 M 蛋白的類型，但不能確定其含量。二、尿液輕鏈蛋白的檢測尿中的免疫球蛋白輕鏈即為本-周蛋白。此蛋白在 4060的條件下發(fā)生沉淀，在 100時沉淀。故將尿液標(biāo)本置 56水浴 15 分鐘，本-周蛋白陽性?；鞚峄虺恋?，再將試管放入沸水中煮沸 3 分鐘，如混濁變清則提示對疑為本-周蛋白陽性的標(biāo)本可以直接對尿中鏈和鏈進(jìn)行定量分析，也可將尿液透析濃縮 50 倍后做免疫固定電泳分析。三、異常免疫球蛋白檢測的應(yīng)用原則對有可疑臨床表現(xiàn)者，一般先進(jìn)行區(qū)帶電泳分析、免疫球蛋白定量檢測和尿本-周蛋白定性檢測作為初篩實驗。對于陽性者宜進(jìn)行免疫電泳、免疫固定電泳、免疫球蛋白亞型和作為確證實驗?！玖?xí)題】良性單克隆丙種球蛋白病常出現(xiàn)貧血血中 Ig 升高及尿中輕鏈蛋白的定量檢測C.本周蛋白 D.骨損害 E.游離輕鏈正確B良性單克隆丙種球蛋白病常出現(xiàn)血中 Ig 升高。關(guān)于多發(fā)性骨髓瘤不正確的是 A.是單株漿細(xì)胞異常增生的 B.是免疫球蛋白增殖病C.患者造血干細(xì)胞無異常改變D.患者有骨質(zhì)破壞E.患者預(yù)后不良，和腎功能損害為本病的死因正確C關(guān)于多發(fā)性骨髓瘤不正確的是患者造血干細(xì)胞無異常改變。不是免疫