實驗化膿性球菌分離鑒定

1、關(guān)于實驗化膿性球菌的分離鑒定第一張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月錄像：消毒滅菌操作：紫外線殺菌實驗（普通平板 1塊/3人）抗生素敏感試驗（普通平板 1塊/3人）化膿性球菌分離鑒定（一） 接種血平板材料：抗生素紙片（青霉素、鏈霉素、慶大霉素、黃連素 1套/6人）大腸桿菌、敏感金葡菌（1支/6人）膿汁標(biāo)本（乙型鏈球菌、致病性金葡菌 各1支/6人）普通平板、血平板、黑紙片等實驗內(nèi)容第二張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月了解：各種消毒滅菌的方法及應(yīng)用 無菌操作技術(shù)掌握：1.化膿性球菌分離鑒定的方法和步驟 2.紫外線殺菌的原理 3.抗生素敏感實驗的方法 教學(xué)目標(biāo) 重點難點 重點：化膿性

2、球菌分離鑒定接種血平板難點：化膿性球菌分離鑒定接種血平板第三張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月消毒與滅菌概念：消毒( disinfection):殺死物體上病原微生物，并不一定能殺死含芽孢的細(xì)菌和非病原微生物。用以消毒的藥品稱為消毒劑。滅菌(sterilization):殺滅物體上所有微生物的方法。第四張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月防腐(antisepsis):防止或抑制細(xì)菌生長繁殖的方法，細(xì)菌一般不死亡。同一種化學(xué)藥品在高濃度時稱為消毒劑，低濃度時為防腐劑。無菌(asepsis):不含活菌的意思。防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)，稱無菌操作。第五張，PPT共二十六頁，

3、創(chuàng)作于2022年6月熱力滅菌法濕熱滅菌法：巴氏消毒法、流動蒸汽消毒法、煮沸法、間歇蒸汽滅菌法、高壓蒸汽滅菌法干熱滅菌法：焚燒、燒灼、干烤（170/2h）電磁波輻射殺菌法紫外線電離輻射濾過除菌法超聲波殺菌干燥物理消毒滅菌法：第六張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月化學(xué)消毒滅菌法：使用消毒劑原理：1.使菌體蛋白質(zhì)變性或凝固：酚類、醇類、重金屬 鹽等。如石炭酸、來蘇、洗必泰2.干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)和代謝：氧化劑，如過氧化氫， 高錳酸鉀，過氧乙酸等3.損傷細(xì)菌細(xì)胞膜：表面活性劑，如新潔爾滅第七張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月二、抗生素敏感試驗 隨著抗生素的廣泛應(yīng)用，耐藥變異菌株日益增加（尤

4、其是金葡、腸道桿菌），給醫(yī)療工作帶來了不少的困難。 第八張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月 為正確使用抗生素，臨床上常在分離致病細(xì)菌的同時做藥物敏感試驗，以了解該細(xì)菌對常用各種抗生素的敏感性。 藥敏試驗的常用方法：紙片法第九張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月操作：貼紙片敏感金葡第十張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第十一張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月結(jié)果分析： 如果細(xì)菌對藥物敏感，則在藥片周圍有抑菌圈形成，敏感度越高抑菌圈直徑越大：20mm： 極度敏感15-20mm： 中度敏感10-15mm： 輕度敏感10mm: 不敏感無抑菌圈：耐藥抑菌圈直徑第十二張，PP

5、T共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月化膿性炎癥是臨床上常見病，除了病原性球菌外，其他微生物也可以引起化膿性感染。常見的標(biāo)本有膿汁、咽拭子、痰、血液、腦脊液等。本次實驗是以膿汁標(biāo)本進(jìn)行病原性球菌的分離鑒定三、化膿性球菌分離鑒定（一）第十三張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月化膿性球菌分離鑒定步驟 膿汁血平板菌落葡萄狀排列鏈狀排列血漿凝固酶試驗甘露醇發(fā)酵試驗血清肉湯管接種劃線法3724h革蘭染色成對排列第十四張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月操作：1. 接種血平板（1塊/人）三線法接種分離單個菌落第十五張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月1. 臨床上耐藥性菌株感染，如何確定其治療

6、用藥？2. 抗生素耐藥性實驗的結(jié)果是如何判定？思考題第十六張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第十七張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月高壓蒸汽滅菌法： 高壓蒸汽滅菌法的殺菌效果最好，運用廣泛。壓力為15磅/寸2，30分鐘可殺死一切芽胞，達(dá)到滅菌的目的。（溫度可達(dá)121 )優(yōu)點：1.能夠達(dá)到較高的溫度。 2.穿透力強。 3.蒸氣遇冷物凝成水時可放出汽化熱， 迅速提高冷物的溫度。 4.高壓蒸氣不會使物品過分潮濕，避 免了水煮的缺點。第十八張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第十九張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月高壓的整個過程必須有專人守侯，并隨時排氣以防壓力表顯示錯誤

7、及其它原因引起高壓鍋內(nèi)壓力劇增而導(dǎo)致爆炸。2. 高壓完畢需等待高壓鍋內(nèi)壓力降低至零時方可打開取物。注意事項：第二十張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月 波長200-300nm的紫外線具有殺菌作用，其中以265-266nm最強，這與DNA的吸收光譜范圍一致。紫外線主要作用于DNA，使一條DNA鏈上相鄰的兩個胸腺嘧啶共價結(jié)合而形成雙聚體，從而改變DNA的分子構(gòu)型，干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致細(xì)菌的死亡或變異。紫外線殺菌原理:第二十一張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月1.穿透力弱，一般玻璃、紙、布、塵埃、水蒸氣均能阻擋。2.適用于空氣、物體表面的消毒。3.有效距離在2米左右（紫外燈的安裝）4.紫外線對人的眼睛、皮膚有損害作用。注意事項:第二十二張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月操作步驟：取普通平板（1塊/3人）取大腸桿菌斜面培養(yǎng)物在平板上密集劃線用滅菌鑷子取無菌黑紙片夾放到平板正中將平板放到紫外線下照射30分鐘放37孵箱培養(yǎng)觀察結(jié)果注意操作中始終保持無菌操作第二十三張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月劃線、蓋紙、照射紫外線殺菌實驗操作第二十四張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月電離輻射 射線和射線；產(chǎn)生自由基或毒