藥物動力學課件：第14章 新藥的藥物動力學研究2

1、2022/7/241第十四章新藥的藥物動力學研究2022/7/242中國地圖真的只像一只公雞嗎？多元化、個性、愛好2022/7/243回 顧掌握：掌握給藥方案個體化和治療藥物監(jiān)測的主要內(nèi)容及其在臨床藥學中的應用：1、掌握生物半衰期與給藥方案設計；2、掌握平均穩(wěn)態(tài)血藥濃度與給藥方案設計；3、穩(wěn)態(tài)血藥濃度與給藥方案設計4、治療藥物監(jiān)測的定義及臨床應用意義2022/7/2441、掌握新藥藥物動力學研究的基本內(nèi)容與基本方法。2、掌握生物利用度和生物等效性的概念與試驗方法。3、掌握控緩釋制劑的體內(nèi)外評價方法及劑量設計方法。4、熟悉新藥藥物動力學研究的作用。5、了解生物樣品檢測的特點和方法。本 章 要 求

2、2022/7/245第一節(jié) 新藥藥物動力學研究的內(nèi)容一、新藥研究開發(fā)中藥物動力學的作用二、新藥臨床前藥物動力學研究的基本要求及研究內(nèi)容三、新藥臨床藥物動力學研究的基本要求及內(nèi)容四、新藥藥物動力學研究中生物樣本的測定方法五、計算機在藥物動力學研究中的應用2022/7/246一、新藥研究開發(fā)中藥物動力學的作用1、臨床前藥物動力學研究 通過動物體內(nèi)和體外的研究方法，揭示藥物在體內(nèi)的動態(tài)變化規(guī)律，獲得藥物的基本藥代動力學參數(shù)，闡明藥物的吸收、分布、代謝和排泄的過程和特點。 2、臨床藥物動力學研究 旨在闡明藥物在人體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄的動態(tài)變化規(guī)律。2022/7/247新藥臨床前藥物動力學研究的

3、基本原則： （1）試驗目的明確；（2）試驗設計合理；（3）分析方法可靠；（4）所得參數(shù)全面，滿足評價要求；（5）對試驗結(jié)果應進行綜合分析與評價；（6）具體問題具體分析。二、新藥臨床前藥物動力學研究2022/7/2481、實驗動物 一般采用成年和健康動物。常用的有犬、小鼠、大鼠、兔和豚鼠等。 選擇實驗動物的基本原則：首選動物應與藥效學或毒理學研究一致；創(chuàng)新藥應選用兩種動物或兩種以上的動物，其中一種為嚙齒類動物，另一種為非嚙齒類動物，其他類別藥物，可選用一種動物進行實驗；口服給藥不宜選用兔等食草類動物。 荷宮頸癌的裸鼠張國榮：2003年4月1日，抑郁癥，46歲；梅艷芳：2003年12月30日，子宮

4、頸癌導致肺功能衰竭，40歲滑膜肉瘤晚期，于2016年4月12日在咸陽的家中去世，21歲人性最大的惡是什么？去吧，偉大，去超越！ 魏則西2011年10月5日，史蒂夫喬布斯因患胰腺癌病逝，享年56歲。紀念為科學事業(yè)獻身的動物們！中華田園犬黑 狼Beagle犬糖尿病狗模型的建立2022/7/24122、試驗藥品 質(zhì)量穩(wěn)定且與藥效學或毒理學研究所用試驗藥品一致。3、試驗方案的設計(1)給藥途徑和給藥劑量 應盡可能與臨床用藥一致。藥動學研究至少應設三個劑量組，高劑量一般接近于最大耐受量，中、小劑量根據(jù)動物有效劑量的上下限范圍選取。以考察藥代過程是否線性和解釋藥效和毒性。 2022/7/2413單劑量靜脈

5、注射20 mg/kg多利培南（新型碳青霉烯類藥物）后在不同實驗動物的血漿濃度變化圖TOSHIHIKO HORI, MASAO NAKANO, YASUO KIMURA, et al.Pharmacokinetics and Tissue Penetration of a New Carbapenem, Doripenem, Intravenously Administered to Laboratory AnimalsJ.2006.20: 91-96.2022/7/2414靜脈注射多利培南后在動物體內(nèi)的藥物代謝動力學結(jié)果(20mg/kg)采用生物測定法來確定多種試驗動物血漿、尿樣和組織樣本中多

6、利培南濃度。小鼠、大鼠、兔、狗和猴子的曲線下面積ACU0（ugh/m）及尿樣回收率（VR,%,024h）分別是14.1和36.3、9.3和42.1、47.9和47.6、78.6和83.1、44.1和51.0。給猴子同時口服丙磺舒，其AUC0增加2.2倍而尿排泄稍微延長。多利培南在小鼠各組織器官中，血漿中水平最高，其次是腎、肝、肺、心臟和脾，并能在組織中很快代謝，不引起積蓄。小鼠、大鼠、兔、狗、猴及人中，多利培南血漿蛋白結(jié)合率分別是25.2%、35.2%、11.8%、10.2%、6.1%、8.1%。2022/7/2415(2)取樣時間點安排 吸收相：23個采樣點 Cmax附近：至少3個采樣點 消

7、除相：46個采樣點 采樣時間至少應持續(xù)到35個半衰期，或持續(xù)到血藥濃度為 Cmax的1/101/20。4、藥動學參數(shù)的計算 要求提供的基本藥動學參數(shù)有： 靜注給藥的t1/2、V、 AUC和Cl等； 血管外給藥的ka、Cmax、tmax、 t1/2 和AUC等。 水溶性藥物：應提供血管外給藥的絕對生物利用度。 緩、控釋制劑：應根據(jù)多次給藥穩(wěn)態(tài)時完整給藥間隔的血藥濃度-時間數(shù)據(jù)，提供穩(wěn)態(tài)時達峰時間tmax 、穩(wěn)態(tài)峰濃度等。2022/7/24165. 臨床前藥物動力學研究內(nèi)容血藥濃度-時間曲線1.吸收2.分布3.血漿蛋白結(jié)合率4.藥物生物轉(zhuǎn)化5.藥物排泄6.對藥物代謝酶活性的影響2022/7/241

8、7血藥濃度-時間曲線1.劑量的選擇：在有效安全范圍內(nèi)，要選擇三種劑量2.給藥后取血時間應注意到下列三個相的時間點分布。血管外給藥時應體現(xiàn)吸收相、平衡相和消除相。實驗觀察期不小于3個半衰期。3.口服給藥,一般在給藥前禁食12h。研究口服給藥,不宜選用兔和反芻動物如羊等。4.盡量從同一動物多次采樣以避免采用多只動物合并樣品。2022/7/2418藥物的分布選用大鼠或小鼠做分布試驗較為方便。選擇劑量后、至少測定藥物在心、肝、脾、肺、腎、胃腸道、生殖腺、腦、脂肪、骨髓肌等組織的分布。特別注意藥物在靶器官/靶組織(包括藥效學與毒理學)的分布。以血藥濃度-時間曲線作參考,選2-3個時間點分別代表分布相、平

9、衡相和消除相的藥物。每個時間點的組織,必須有至少5只動物的數(shù)據(jù)。擬通過改進劑型而增加組織分布的藥物，應該提供改進劑型與原劑型比較的組織分布研究，以支持其立題依據(jù)。2022/7/2419藥物與血漿蛋白的結(jié)合研究藥物與血漿蛋白結(jié)合的方法包括平衡透析法、超濾法、超速離心法、凝膠過濾法等2022/7/2420注意事項藥物與血漿蛋白結(jié)合程度受很多因素影響,如血漿pH、血漿濃度、藥物濃度等。血漿pH應固定為7.4,至少選擇三個血藥濃度(包括有效濃度在內(nèi))進行實驗。必須證明藥物與半透膜本身有無結(jié)合,并做對照予以校正。 可被血漿轉(zhuǎn)化的藥物,應加入少量酶抑制劑,以終止其轉(zhuǎn)化。建議進行比較試驗對于蛋白結(jié)合率大于9

10、0%以上的藥物，建議開展體外藥物競爭結(jié)合試驗。2022/7/2421藥物的代謝考察轉(zhuǎn)化類型、代謝途徑、代謝物結(jié)構及量、代謝酶等 其中對藥物代謝酶的影響：觀察藥物對細胞色素P450同功酶的誘導或抑制作用；應用肝微粒體技術，了解代謝相互作用或種族差異。 2022/7/2422藥物的排泄確定藥物的排泄途經(jīng)、排泄速率和各排泄途經(jīng)的排泄量。藥物排泄試驗一般選用小鼠或大鼠進行。 2022/7/2423 三、新藥臨床藥物動力學研究臨床藥物動力學研究的GCP要求受試藥物的要求受試者的選擇劑量的確定藥時曲線的數(shù)據(jù)的測定藥時曲線的數(shù)據(jù)的處理新藥臨床藥物動力學研究報告2022/7/24241.符合GCP要求 試驗的

11、方案設計與試驗過程中，均應注意對受試者的保護。2倫理學考慮 按照GCP原則制訂試驗方案并經(jīng)倫理委員會討論批準，受試者必須自愿參加試驗，并簽訂書面知情同意書。3.受試藥物 應為經(jīng)國家藥檢部門檢驗合格，符合臨床研究用質(zhì)量標準的中試放大產(chǎn)品。（一）新藥臨床藥物動力學研究的基本要求2022/7/24254.受試者的選擇 期臨床藥物動力學試驗時，應選擇健康志愿者。年齡以1845歲為宜。體重符合標準。不吸煙、不嗜酒。5.劑量確定 一般選用低、中、高三種劑量。高劑量組劑量必須接近或等于人最大耐受的劑量。 2022/7/24266.藥時曲線的數(shù)據(jù)測定 單劑量和多劑量試驗時，均確定12例以上受試者。 多劑量試驗

12、時，根據(jù)給藥次數(shù)不同而確定不同的服藥方法，具體參見教材和輔導材料。取血時間點可參見臨床前藥物動力學研究的相關內(nèi)容。2022/7/24277.藥時曲線數(shù)據(jù)處理 通過單次給藥測得的各受試者血藥濃度-時間數(shù)據(jù)，需獲得的主要藥物動力學參數(shù)包括：ka、tmax、Cmax、AUC、V、k、t12和Cl等。從尿藥濃度估算藥物經(jīng)腎排泄的速率和總量。通過多次給藥的穩(wěn)態(tài)血藥濃度-時間曲線數(shù)據(jù)，求得主要藥物動力學參數(shù)包括：tmax、tmax、t1/2、Cl 、 、 、 穩(wěn)態(tài)血藥濃度-時間曲線下面積AUCss及DF等。 2022/7/2428四、新藥藥物動力學研究中生物樣本的測定方法（一）生物樣本分析的意義和特點：*

13、 取樣量少* 藥物濃度低* 干擾物質(zhì)多* 個體差異大2022/7/2429（二）生物樣本檢測的方法：（1）色譜法：氣相色譜法 高效液相色譜法 色譜質(zhì)譜聯(lián)用法等；（2）免疫學方法：放射免疫分析法 酶免疫分析法 熒光免疫分析法等（3）微生物學方法 2022/7/2430測定方法注意點根據(jù)實驗室條件,首選HPLC、GC等分離方法,以及紫外、熒光等測定方法。用放射性核素標記藥物,在用前要進行純度檢查,放化純度要95%。定位標記要指明標記位置。放射免疫法和酶標免疫法具有一定特異性,靈敏度高,但原藥與其代謝產(chǎn)物或內(nèi)源性物質(zhì)常有交叉反應,需提供證據(jù),說明特異性。生物檢定法常能反映藥效學本質(zhì),但一般特異性較差

14、,最好用特異性高的方法予以對比、證明,否則應加以說明。2022/7/2431目前用于生物樣品測定的部分儀器填充柱超臨界流體色譜儀微量毛細HPLC系統(tǒng)分析純化LC-MS系統(tǒng)GC-MS系統(tǒng)2022/7/2432正電子發(fā)射斷層顯像(Positron Emission Tomography,PET)基本原理：利用回旋加速器加速帶電粒子(如質(zhì)子、氘核)轟擊靶核發(fā)生核反應,產(chǎn)生正電子放射性核素, 通過有機合成或無機反應制備各種正電子顯像劑。顯像劑進入體內(nèi)后定位于靶器官,在衰變過程中發(fā)射帶正電荷的電子。這種正電子與人體組織中的負電子相互作用, 產(chǎn)生能量相等、方向相反的兩個高能光子, 兩個光子被PET儀相對的

15、兩個探頭同時檢測到，這被稱為“符合事件”，表明兩個探頭連線上存在著被正電子核素標記的藥物。“符合事件”的多少則由藥物在局部的密集程度決定。PET能對體內(nèi)放射性標記的藥物的分布進行準確的定位和定量，再經(jīng)過計算機重建，即可獲得三維的分布圖像。PET-CT掃描儀PET被用于腫瘤的診斷2022/7/2433PET的優(yōu)點：1、小動物PET顯像的方法和結(jié)果可類推到人體研究，縮短了新化合物進入臨床應用的時間。2、可以在同一動物身上進行無損傷的反復實驗，減少實驗動物的使用，并且可以對同一只動物在不同時間點進行研究，消除種屬差異。3、PET 顯像可以對實驗動物進行動態(tài)掃描，能獲得動態(tài)的數(shù)據(jù)資料。 4、可對整個動

16、物進行有效的測量和在體外快速的掃描，從而對整個實驗過程進行縱向研究，可以觀察動物體內(nèi)疾病的發(fā)展狀況以及藥物對疾病的治療效果，快速得出更加明確的結(jié)論。PET的局限性：1、PET設備較昂貴,試驗費用高。2、PET用示蹤劑品種有限，而且標記過程操作困難，或某些藥物的示蹤劑難以標記。3、有些標記化合物在體內(nèi)不穩(wěn)定易分解, PET 圖像難以區(qū)分標記藥物與代謝物。2022/7/2434（三）生物樣品測定方法的評價指標與要求：1、靈敏度2、精密度3、準確度4、特異性5、樣品穩(wěn)定性6、回收率7、標準曲線和定量范圍8、微生物學和免疫學方法確證2022/7/2435五、計算機在藥物動力學研究中的應用主要軟件介紹3

17、P87/97軟件：國內(nèi)應用較廣，可處理各種用藥途徑的線性和非線性藥動學模型，給出有關的藥動學參數(shù)及各種圖表的詳細結(jié)果。 DAS軟件：是在NDST-21基礎上發(fā)展起來，在微軟視窗下運行的專業(yè)統(tǒng)計軟件包。DAS可完成臨床前藥學、藥理以及臨床新藥研究關系密切的各種統(tǒng)計計算， WinNonlin軟件：國外最常用的藥動學軟件，被認為可用于幾乎所有的藥動、藥效及非房室模型的分析。NDST軟件：可進行與臨床前藥理及臨床新藥研究關系密切的各種統(tǒng)計計算。PKBP-N1軟件： 計算方法主要有：最優(yōu)化方法中的單純形法、解矛盾方程組的正交化方法與二分法、樣條插值法、優(yōu)選法和逐次直線回歸法等。NONMEN軟件：主要用于

18、群體藥動學的參數(shù)估算及分析，是群體藥動學分析的主流軟件。中國醫(yī)藥企業(yè)100強排行榜名單（2014-02-18）2022/7/2436序號企業(yè)名稱利潤總額（千元）序號企業(yè)名稱利潤總額（千元）1上海醫(yī)藥（集團）有限公司 181253811新華魯抗藥業(yè)集團有限公司 5160702中國醫(yī)藥集團總公司 123857112南京醫(yī)藥股份有限公司 4217423廣州醫(yī)藥集團有限公司 103137713重慶醫(yī)藥股份有限公司 3491214天津市醫(yī)藥集團有限公司 101151114天津藥業(yè)集團有限公司 3444225山東東阿阿膠集團有限責任公司 83874015杭州華東醫(yī)藥集團有限公司 3395666哈藥集團有限

19、公司 72771916江西省醫(yī)藥集團公司 3341787南京醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)（集團）有限公司 71651817石家莊制藥集團有限公司 2965858華北制藥集團有限責任公司 70086918東北制藥集團有限責任公司 2822609江蘇揚子江藥業(yè)集團公司 60554219西安楊森制藥有限公司 27563910太極集團有限公司 58970020上海雷允上藥業(yè)有限公司 275041利潤總和：127.07709億元人民幣2010年我國與全球制藥企業(yè)利潤額比較2022/7/2437我國醫(yī)藥制造企業(yè)排名全球醫(yī)藥制造企業(yè)排名排名企業(yè)名稱利潤總額（千元）排名企業(yè)名稱凈利潤（百萬美元）1上海醫(yī)藥（集團）有限公司1712

20、5381默沙東公司12,9012中國醫(yī)藥集團總公司12385712強生公司12,2663廣州醫(yī)藥集團有限公司12313773百時美施貴寶公司10,6124天津市醫(yī)藥集團有限公司9115114輝瑞制藥8,6355山東東阿阿膠集團有限責任公司7387405葛蘭素史克公司8,6266哈藥集團有限公司7077196諾華制藥8,4007南京醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)（集團）有限公司7065187阿斯利康公司7,5218華北制藥集團有限責任公司7008698賽諾菲-安萬特集團7,3189江蘇揚子江藥業(yè)集團公司6055429羅氏公司7,16910太極集團有限公司58970010雅培公司5,74611新華魯抗藥業(yè)集團有限公司5

21、1607011禮來公司4,32912南京醫(yī)藥股份有限公司42174212勃林格殷格翰公司2,44513重慶醫(yī)藥股份有限公司34912113拜耳集團1,889利潤總和：104.30018億元人民幣研發(fā)投入排名排名企業(yè)名稱2008年（億美元）占藥品銷售%2007年（億美元）占銷售額%1輝瑞79.450017.9980.890018.212羅氏73.225821.9863.385620.663賽諾菲安萬特63.830016.605651.0016.174阿斯利康51.790016.3951.620017.465強生50.950020.745265.0021.176默克48.053020.3448.8

22、28020.407武田43.945531.2823.442021.688禮來38.409019.9234.867019.779百時美施貴寶35.850020.2432.820021.0110先靈葆雅35.290024.7632.820028.762013年全球研發(fā)投入最多的20家醫(yī)藥企業(yè)排行 2022/7/2439排名 公司 2013（億美元） 2012（億美元） 百分比變化 1 羅氏 99.1 96.54 3% 2 諾華 98.52 93.32 5.60% 3 強生 81.83 76.65 6.80% 4 默沙東(美國默克) 75.03 81.68 -8.10% 5 輝瑞 66.78 74.

23、82 -10.70% 6 賽諾菲 66.08 68.18 -3.10% 7 葛蘭素史克 65.18 66.11 -1% 8 禮來 55.31 52.78 4.80% 9 阿斯利康 48.21 52.43 -8.04% 10 安進 39.28 32.96 19.20% 11 百時美施貴寶 37.31 39.04 -4.40% 12 武田制藥 31.48 27.37 15% 13 雅培 28.55 27.78 2.80% 14 拜耳 22.91 21.62 6.00% 15 賽爾基因 22.26 17.24 29.10% 16 諾和諾德 21.78 20.23 7.70% 17 吉利德科學 21.

24、2 17.6 20.50% 18 第一三共株式會社 17.77 17.96 -1.10% 19 阿斯特拉 17.71 18.46 -4.10% 20 默克（德國） 16.44 16.38 -0.30%全球研發(fā)投入最多的1000家公司調(diào)查2011年10月,國際咨詢公司Booz & Company發(fā)表了其每年進行一次的“全球研發(fā)投入最多的1000家公司調(diào)查”的結(jié)果。根據(jù)結(jié)果，在2010年度，排名前5位的5家公司中有4家是制藥企業(yè)，第1位的羅氏2010年的研發(fā)投入為106.46億美元，第2位的輝瑞為94.13億美元，第3位的諾華為90.70億美元，第5位的美國默沙東為85.91億美元。因此，2010

25、年全球研發(fā)投入最多的公司前3位均由制藥企業(yè)獨占。2022/7/2440國家發(fā)改委醫(yī)藥行業(yè)十一五發(fā)展指導意見中的數(shù)據(jù)顯示，2005年我國醫(yī)藥行業(yè)研發(fā)投入占銷售收入的比重平均僅為1.02%，除個別企業(yè)在5%以上外，大部分企業(yè)的研發(fā)投入比重非常低，與發(fā)達國家的水平相去甚遠。時至今日，這一局面并未有明顯改善。“不同企業(yè)之間存在較大差異，現(xiàn)在一般企業(yè)的研發(fā)投入是占到1%2%，為數(shù)不多的創(chuàng)新性企業(yè)如恒瑞、先聲等能達到7%8%，個別能達到10%。除了資金投入的直接差距，研發(fā)人員的配置占比也存在頗大距離。有數(shù)據(jù)顯示，我國60家大型醫(yī)藥企業(yè)的研發(fā)人員僅占大中型醫(yī)藥企業(yè)研發(fā)人員總數(shù)的33.8%，占全行業(yè)研發(fā)人員數(shù)

26、的比重就更低，這種趨勢在近年并沒有得到實質(zhì)性改善，而美國39家PhRMA會員企業(yè)的研發(fā)人員就占美國全產(chǎn)業(yè)研發(fā)人員總量的72.8%，即研發(fā)人員在大型企業(yè)當中占有很高的集中度。而更有國內(nèi)權威部門在對國內(nèi)110家大型制藥企業(yè)進行的調(diào)研中發(fā)現(xiàn)：新藥研究人員100人以上的單位只有13家，50100人規(guī)模的有10家，沒有專利專職人員的有49家。110家國內(nèi)企業(yè)中有43家涉及到結(jié)構創(chuàng)新的研究，39家只從事非創(chuàng)新項目的研究，28家沒有進行任何研究。投資創(chuàng)新項目和非創(chuàng)新項目的比例約為17110，平均每個項目的年研究經(jīng)費少于200萬元。2022/7/24412022/7/2442第二節(jié) 生物利用度與生物等效性20

27、22/7/2443一、生物利用度與生物等效性的概念生物利用度（Bioavailability, BA）是指劑型中的藥物被吸收進入體循環(huán)的速度(rate of bioavailability, RBA)與程度（extent of bioavailability, EBA）。包括絕對生物利用度和相對生物利用度2022/7/2444絕對生物利用度（absolute bioavailability）是藥物吸收進入體循環(huán)的量與給藥劑量的比值，是以靜脈給藥制劑（通常認為靜脈給藥制劑生物利用度為100%）為參比制劑獲得的藥物吸收進入體循環(huán)的相對量。相對生物利用度（relative bioavailabili

28、ty）是以其他非靜脈途徑給藥的制劑（如片劑和口服溶液）為參比制劑獲得的藥物吸收進入體循環(huán)的相對量，是同一種藥物不同制劑之間比較吸收程度與速度而得到的生物利用度。2022/7/2445計算公式：相對生物利用度 絕對生物利用度2022/7/2446要求進行生物利用度研究的藥物 新開發(fā)的藥物產(chǎn)品,尤其是口服制劑。改變劑型的產(chǎn)品。 改變處方與工藝的產(chǎn)品(仿制產(chǎn)品)。2022/7/2447有必要進行生物利用度研究的藥物預防與治療嚴重疾病的藥物治療指數(shù)窄的藥物治療指數(shù)是毒性濃度與有效濃度的比值水溶性低的藥物：水溶解度低于5mg/ml溶解速度慢的藥物有胃腸道中生物轉(zhuǎn)化或在胃腸中不穩(wěn)定的藥物 有特殊理化性質(zhì)的

29、藥物如多晶型藥物,溶劑化物、粒度影響吸收的藥物賦形劑比例高的產(chǎn)品2022/7/2448藥劑等效性（pharmaceutical equivalence）：如果兩制劑含等量的相同活性成分，具有相同的劑型，符合同樣的或可比較的質(zhì)量標準，則可以認為它們是藥學等效的。 生物等效性（Bioequivalence, BE）：是指一種藥物的不同制劑在相同試驗條件下，給以相同劑量，反映其吸收程度和速度的主要藥物動力學參數(shù)無統(tǒng)計學差異。 生物等效性及相關概念2022/7/2449生物等效性與藥劑等效性的區(qū)別藥劑等效性沒有反映藥物制劑在體內(nèi)的情況。生物等效性的研究,反映了藥物制劑的生物學標準,對臨床療效提供直接的

30、證明。2022/7/2450三、生物等效性評價方法SFDA推薦的方法從高到低排列為：*藥物動力學研究方法*藥效動力學研究方法*臨床比較試驗方法*體外研究方法2022/7/24511、藥物動力學評價方法 采用峰濃度Cmax、達峰時間tmax和血藥濃度-時間曲線下面積AUC全面評價。2、藥效動力學評價方法 采用明確的可分級定量的人體藥效學指標通過效應-時間曲線（Effect-Time curve）與參比制劑比較來確定生物等效性。 3、臨床隨機對照試驗評價方法 給予患者兩種（或多種）藥物制劑后，通過觀察藥物的療效、不良反應與毒性之間的差異進行評價（100例）。4、體外研究 鑒于體外結(jié)果并不能完全代替

31、體內(nèi)行為，一般不提倡用體外的方法來確定生物等效性 。2022/7/2452四、生物利用度的研究方法血藥濃度法尿藥數(shù)據(jù)法藥理效應法2022/7/2453（一）血藥濃度法 藥物的吸收量應等于劑量乘以吸收分數(shù)f，即制劑的生物利用度F為2022/7/2454（二）尿藥數(shù)據(jù)法 如果藥物大部分（70%）經(jīng)尿排泄，而且藥物在尿中的累積排泄量與藥物吸收總量的比值保持不變，則可用藥物在尿中排泄的數(shù)據(jù)估算生物利用度。2022/7/2455（三）藥理效應法 在某些情況下由于分析方法精密度不夠，重現(xiàn)性差或其它原因，無法進行血藥濃度測定，可以用急性藥理作用（如瞳孔放大、心率或血壓）作為藥物生物利用度測定的指標。2022

32、/7/2456第十四章新藥的藥物動力學研究2022/7/2457桃花庵桃花塢里桃花庵，桃花庵里桃花仙；桃花仙人種桃樹，又摘桃花換酒錢。 酒醒只在花前坐，酒醉還來花下眠；半醒半醉日復日，花落花開年復年。 但愿老死花酒間，不愿鞠躬車馬前；車塵馬足貴者趣，酒盞花枝貧者緣。 若將富貴比貧賤，一在平地一在天；若將貧賤比車馬，他日驅(qū)馳我得閑。 別人笑我太瘋癲，我笑他人看不穿；不見五陵豪杰墓，無花無酒鋤作田。2022/7/2458回 顧1、掌握生物利用度、生物等效性、藥學等效性的概念。2、掌握生物等效性評價方法，評價生物等效性的3個藥動學指標。3、熟悉生物利用度的研究方法；熟悉新藥藥物動力學研究的基本內(nèi)容與

33、基本方法。2022/7/2459五、生物利用度(生物等效性)的實驗設計 1.研究單位應具備的基本條件2.受試制劑與參比制劑3.試驗設計4.檢測方法的選擇與評價5.對受試對象的要求6.受試者例數(shù)的確定7.洗凈期的確定8.給藥劑量與方法9.采樣點的確定10.試驗中的醫(yī)學監(jiān)護11.結(jié)果處理方法（一）生物利用度研究的基本條件2022/7/24601研究單位的基本條件 要求研究單位應有良好的醫(yī)療監(jiān)護條件，良好的分析測試條件和良好的數(shù)據(jù)分析處理條件。（GCP）參加生物利用度研究的人員，應包括臨床藥物動力學研究人員、臨床醫(yī)師、分析檢驗技術人員和護理人員等。2022/7/24612受試制劑和參比制劑供試制劑的

34、臨床前研究工作已經(jīng)完成并通過嚴格的臨床前評審，獲得了國家食品藥品監(jiān)督管理局的臨床試驗批文。供試品應當在符合GMP條件的車間制備，制備過程應當嚴格執(zhí)行GMP的要求，應符合國家藥品監(jiān)督管理局審定的藥品標準要求并有質(zhì)量檢驗報告。2022/7/2462參比制劑的選擇 參比制劑選擇方法： 絕對生物利用度研究選用在我國已獲得上市許可的相同藥物靜脈注射劑作為參比制劑。 相對生物利用度研究時，選用在我國已獲得上市許可的相同藥物相同劑型的主導產(chǎn)品作為參比制劑；若為完成特定研究目的，可選用相同藥物的其它藥劑學性質(zhì)相近的上市劑型作為參比制劑，這類參比制劑亦應為上市主導產(chǎn)品。2022/7/24633.試驗設計 盡量避

35、免生物因素與給藥方法影響，成為生物利用度試驗應注意的重要問題。生物利用度試驗的試驗設計，主要目的就是為了消除個體差異與試驗周期對試驗結(jié)果的影響。生物利用度的試驗設計要求采用隨機交叉試驗設計方法。2022/7/24644檢測方法的選擇與評價 生物樣品中藥物的分離測定應選靈敏度高、專屬性強、精密度好、準確度高的分析方法。生物樣品分析方法確證完成后方可測試未知樣品。每個未知樣品一般測定一次，必要時可進行復測。每批生物樣品測定時應建立新的標準曲線，并隨行測定高、中、低三個濃度的質(zhì)控樣品。質(zhì)控樣品測定結(jié)果的偏差一般應小于20。 2022/7/24655對受試對象的要求 臨床生物等效性評價中的生物利用度研

36、究，受試對象是健康人。年齡一般1840歲； 性別以男性為宜；體重應具標準體重或接近標準體重，一般要求為標準體重（110）范圍內(nèi)，或體重指數(shù)BMI 在2024范圍內(nèi)；試驗前兩周內(nèi)未服用其它藥物，且受試期間忌煙、酒。2022/7/24666.受試者例數(shù)的確定一個理想的生物利用度試驗方案是采用最少的樣本數(shù)達到有80以上把握證明制劑間的生物等效性，否則受試者例數(shù)過大可能會帶來其他非重要變異的出現(xiàn)，也增加了試驗的經(jīng)費支出。2022/7/24677.洗凈期的確定試驗中設置洗凈期是為了避免前一次所用藥物對后一次試驗產(chǎn)生影響。洗凈期由受試藥物t1/2 而定。洗凈期一般不小于7個 t1/2， 洗凈期通常為1周或

37、2周，半衰期長的藥物需要更長的洗凈期。2022/7/24688.給藥劑量與方法劑量為臨床常用量，最大不得超過最大安全劑量。當采用非臨床治療劑量時，應提供劑量設置的依據(jù)。通常，供試品與參比制劑的給藥劑量應該一致。普通制劑的生物利用度試驗一般采用單劑量給藥方式。 2022/7/24699.采樣點的確定包括吸收相、平衡相及消除相。采樣持續(xù)到受試藥原形或其活性代謝物3倍t1/2后，或持續(xù)采樣至血藥濃度為Cmax的1/10以后。應用尿藥法時，要求收集受試藥原形或其代謝物7倍t1/2后的全部尿樣。2022/7/247010.試驗中的醫(yī)學監(jiān)護 新藥的生物利用度試驗方案需經(jīng)倫理委員會審批通過方可進行試驗。生物

38、利用度試驗工作在一期臨床試驗的觀察室進行。受試者應得到醫(yī)護人員的監(jiān)護。受試期間發(fā)生的任何不良反應，均應及時處理和記錄，并通報新藥開發(fā)研究單位和藥品監(jiān)督管理部門。2022/7/247111.結(jié)果處理方法應提供如下資料：各受試者經(jīng)時過程的血藥濃度數(shù)據(jù)、平均值及標準差，并繪制血藥濃度時間曲線。生物利用度評價所需參數(shù)，如藥時曲線下面積AUC0t 或 AUC0。峰值血藥濃度Cmax、達峰時間tmax，均為實測值。生物利用度F。其它藥動學參數(shù)，如MRT、t1/2等。盡量能提供用血藥濃度時間數(shù)據(jù)擬合得到的血藥濃度隨時間變化的規(guī)律及其相關藥動學參數(shù)。 2022/7/2472（二）影響生物利用度測定的因素：（生

39、物利用度試驗的注意點）嚴格挑選受試者、設立嚴格的試驗設計來減少或消除生物學因素與給藥方法對生物利用度測定的影響。采用嚴格的自身對照、隨機分組的試驗設計。無特殊情況，采用空腹給藥；控制飲水量和飲用水水溫以減少水量和水溫對藥物吸收的影響。受試者應無煙酒嗜好，試驗過程應禁煙、酒、茶和咖啡。避免受試者參加劇烈運動或靜臥。對血藥濃度的分析檢測方法嚴格要求。2022/7/2473生物等效性評價的三個重要指標血藥濃度-時間曲線下面積AUC與藥物吸收總量成正比, 代表藥物吸收的程度。達峰時tmax表示吸收的速度。峰濃度Cmax是與治療效果及毒性水平有關參數(shù),也與藥物吸收數(shù)量有關。六、生物等效性統(tǒng)計學分析（一）

40、等效性判斷標準2022/7/2474（二）生物等效性評價的檢驗方法統(tǒng)計分析多采用：可信區(qū)間法（置信區(qū)間）、等效性檢驗法、貝葉斯分析法、非參數(shù)檢驗法。數(shù)據(jù)都要通過方差分析得出基本的參數(shù)，然后進行相應的統(tǒng)計分析，如：等效性檢驗法、貝葉斯分析法、雙單側(cè)t檢驗等。將AUC和Cmax兩參數(shù), 經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后, 以多因素方差分析。(ANOVA)進行判斷, 比較制劑間, 周期間和個體間的差異, 如P0.05 說明無差異性。2022/7/2475 以雙向單側(cè)t檢驗和計算(12)%可信區(qū)間(90%可信區(qū)間)進行判斷。 雙向單側(cè)t檢驗, 設定的無效假設是兩藥不等效, 受試藥在參比藥一定范圍之外, 為兩個單側(cè)t檢驗。

41、當P0.05時, 說明受試藥沒有超過參比藥的高限和低限, 因此, 兩制劑等效。2022/7/2476（三）方差分析 方差分析是檢驗差異的傳統(tǒng)方法,也是其它方法的基礎。方差分析的統(tǒng)計假設是: 樣品的隨機化; 方差齊性; 統(tǒng)計模型的可加性; 殘差的獨立性和正態(tài)性。 2022/7/2477（四）雙單側(cè)檢驗雙單側(cè)檢驗用于可信限檢驗,確定受試制劑與參比制劑生物利用度參數(shù)平均值的差異是否在允許范圍內(nèi)。2022/7/2478（五）90置信區(qū)間分析置信區(qū)間分析：生物等效性分析中常用90%的置信區(qū)間分析，即為受試制劑的生物利用度有90的可能性在此范圍之間。 2022/7/2479生物等效判斷標淮: AUC的90

42、%可信限在參比制劑80%125%范圍。 Cmax的90%可信限在70%143%范圍。 tmax用非參數(shù)檢驗, 無差異性為生物等效。2022/7/2480第三節(jié) 緩釋與控釋制劑的藥物動力學2022/7/2481緩釋與控釋制劑的定義緩釋制劑：系指在規(guī)定釋放介質(zhì)中，按要求緩慢地非恒速釋放藥物，其與相應的普通制劑比較，給藥頻率比普通制劑減少一半或給藥頻率比普通制劑有所減少，且能顯著增加患者順應性的制劑。 控釋制劑：系指在規(guī)定釋放介質(zhì)中，按要求緩慢地恒速或接近恒速釋放藥物，且與相應的普通制劑比較，給藥頻率比普通制劑減少一半或給藥頻率比普通制劑有所減少，血藥濃度比緩釋制劑更加平穩(wěn)，且能顯著增加患者順應性的

43、制劑。 2022/7/2482緩釋、控釋制劑和普通制劑的比較2022/7/2483（一）緩釋與控釋制劑的血藥濃度-時間關系： 由于符合一室模型藥物的血藥濃度與時間關系為 （1423）一、緩釋與控釋制劑的藥物動力學設計2022/7/2484對于控釋制劑如果吸收過程不能被忽略 ，則（1424）（1425）2022/7/2485如果控釋部分以零級速率釋放藥物，同時有速釋部分劑量時，血藥濃度與時間關系為： 2022/7/2486（二）緩控釋制劑的劑量設計當控釋制劑以零級速率釋放藥物時，控釋制劑的維持劑量Xm等于釋放速率與維持時間T的乘積，而釋放速率應與體內(nèi)藥物消除量相等，即： 如臨床治療希望該藥物達到

44、的穩(wěn)態(tài)血藥濃度為則2022/7/2487或 速釋劑量的校正方法為： 控釋制劑的總劑量為速釋劑量與緩釋劑量之和，則2022/7/2488控釋制劑的速釋劑量與維持劑量所產(chǎn)生的血藥濃度時間曲線 2022/7/2489維持劑量滯后釋放的控釋制劑血藥濃度曲線 2022/7/2490不同半衰期藥物的緩釋速釋劑量比半衰期（h）緩釋 6h緩釋 8h緩釋12h14.605.548.3222.082.774.1631.391.852.7741.011.292.0850.831.111.6660.690.921.3970.590.791.1980.520.691.0490.460.620.92100.420.550

45、.832022/7/2491（一）緩控釋制劑生物利用度研究的目的（二）緩控釋制劑生物等效性研究的基本要求1參比制劑 如果國內(nèi)已有相同產(chǎn)品上市，應選用該緩、控釋制劑相同的國內(nèi)上市的原創(chuàng)藥或主導產(chǎn)品作為參比制劑；如系首創(chuàng)的緩、控釋制劑，則可以該藥物已上市同類普通制劑的原創(chuàng)藥或主導產(chǎn)品作為參比制劑。二、緩控釋制劑生物利用度與生物等效性研究2022/7/24922.單劑量給藥試驗 實驗設計基本同普通制劑，給藥方式應與臨床推薦用法用量一致。注意：Cmax 、tmax 為單個試驗點數(shù)據(jù)，其準確程度有賴于試驗設計時的時間點確定及藥物消除速度、表觀分布容積的影響，此外緩、控釋制劑的藥時曲線一般達峰時間不明顯，

46、峰濃度多為平臺狀并維持較長時間，有時還會出現(xiàn)多峰現(xiàn)象,因此使用Cmax與tmax反映藥物的吸收速度將出現(xiàn)較大誤差。 2022/7/2493注意：2、MRT不宜用于反映一些t1/2較長藥物的吸收速度。3、MAT實驗成本較高。2022/7/24943.多次給藥試驗 具體要求參考以下的介紹。4.食物影響試驗 食物對緩、控釋制劑的影響較大。食物影響試驗的試驗設計是23交叉設計。所測定的指標有AUC和Cmax。具體設計方法可參考本章第二節(jié)拉丁方試驗設計的內(nèi)容。2022/7/2495DF=(Cmax-Cmin)/CavAUCssCmaxCminCav=AUCss/單次給藥及多次給藥試驗2022/7/249

47、6參比制劑為緩、控釋制劑時：供試品與參比制劑的AUC0t 或AUC0比值的90%可信限在80% 125%置信區(qū)間內(nèi)；供試品與參比制劑的Cmax或比值的90%可信限在70% 143%置信區(qū)間內(nèi)；供試品與參比制劑的AUC 0t或AUC 0 、Cmax或 的雙單側(cè)t檢驗均得到P0.05的結(jié)果，t1 與t2 同時成立；tmax經(jīng)非參數(shù)法檢驗無差異，則認為供試品與參比制劑為生物等效制劑。（四）等效性檢驗標準2022/7/2497參比制劑為普通制劑時：供試品與參比制劑的AUC0比值的90%可信限在80%125%置信區(qū)間內(nèi)，雙向單側(cè)t檢驗P0.05，t1 ，t2 則認為供試品與參比制劑為吸收程度上的生物等效

48、制劑；Cmax 、DF 和 有顯著降低，tmax有顯著延長，表明供試品具有緩/控釋特征。2022/7/2498（一）釋放度試驗 釋放度：指一定劑型的藥物在規(guī)定介質(zhì)中釋放的速度和程度。 通常緩、控釋制劑的釋放度測定至少需設置3個時間點。 第一點的取樣時間為0.52小時，用于考察藥物是否有突釋。 第二點為在累計釋放量約為50左右取樣，用于考察釋藥特性及藥物是否平穩(wěn)釋放。 最后取樣在累計釋放量至少達80或釋放達到平臺期時進行，用于考察藥物釋放是否基本完全。三、緩釋與控釋制劑的質(zhì)量評價2022/7/2499中國藥典（2010年版二部）收載的緩、控釋制劑及釋放度要求藥品名稱 釋 放 度 要 求（占標示量

49、的百分率） 1h 2h 3h 4h 5h 6h 7h 8h 12h 16h緩釋膠囊 布洛芬 1035 2555 5080 75鹽酸曲馬多 2045 3560 5580 75鹽酸氨溴索 1545 4580 80硫酸沙丁胺醇 40 4580 75緩釋片鹽酸嗎啡 2545 4060 5575 6585 7090 80鹽酸維拉帕米 2045 4570 70氨茶堿 2545 3555 50硫酸亞鐵 2040 5075硫酸慶大霉素 4570 6085 80氯化鉀 1035 3070 80碳酸鋰 4565 6585硫酸嗎啡 3045 4565 5575 6585 7595 80己酮可可堿 1030 3055 5085 75茶堿