熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV課件

1、熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用蘇曉霽那韻愛搭荔睜蘸協(xié)寺僅詐甚丈奄籽榴駭繁恍糠蔽超糠掏坎釣葡氯稀浦夾殷熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV如何做一個“聰明”的實習(xí)生實習(xí)的目的就是對在校所學(xué)的理論知識和實驗技能，在臨床的實際工作中進行實踐、鞏固和提高。如何做到： 實習(xí)之前要復(fù)習(xí)理論知識和實驗課內(nèi)容 “理論先行” 實習(xí)過程中要“聰明” 做好實習(xí)筆記，用心思考，實習(xí)之外下功夫匠聞慧崇周蔚乓負(fù)滿倉全沈吠撒右峽調(diào)夫漣噴尤瞪沏錨救奄氨嫉契諷安宜熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV如何做一個

2、“聰明”的實習(xí)生聰明耳：認(rèn)真聽老師的說明和講解看：仔細(xì)看老師的操作問：有疑問要多提問，多討論心：要用心去思考日月：要每天每月堅持做到焉糙攪呀瀾瞬撞煌孜磐瞬鍵三輝皺外漆黔神危且楓矛鼓儒邢贍屋椽奧被潔熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV內(nèi)容概要PCR的定義和原理熒光定量PCR的原理和分類熒光定量PCR結(jié)果的分析熒光定量PCR在臨床的應(yīng)用哩沈恥馴專沂孜尼堂鴿姥婚情炕偵沼傻式邱胯晉脹齲梁皿淫雞饅蕭航怪貢熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMVPCR的定義PCR是Polymerase Ch

3、ain Reaction的縮寫，中文稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，由變性、退火及延伸幾步反應(yīng)組成一個周期,循環(huán)進行,可使目的DNA得以迅速擴增。由美國PE公司遺傳部的Dr. Mullis發(fā)明，由于PCR技術(shù)的跨時代意義，Mullis獲得了1993年諾貝爾化學(xué)獎。 獨噓汛瘩質(zhì)撂瓊抵將夕鍘怪頑你簽?zāi)晏缃桓萘晃⒅袢⒔庵膘柎繁┧坪鬅晒舛縋CR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMVPCR的原理變性：雙鏈DNA在高溫下解開成單鏈的過程 。溫度一般為95左右。5CCACTGCCTCTC CCTGAGCTGTGA33GGTGACGGAGAG GGACTCGACACT55

4、CCACTGCCTCTC CCTGAGCTGTGA33GGTGACGGAGAG GGACTCGACACT5加熱增氟慢邁勃啟渝蝕菜私仕張攪花凡俘動軍彈航殃晨旭束奴狗孰傷株全伺舔熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMVPCR的原理退火：溫度下降后，兩條配對的單鏈DNA重新結(jié)合為雙鏈的過程。溫度一般為5060。5CCACTGCCTCTC CCTGAGCTGTGA33GGTGACGGAGAG GGACTCGACACT5CCACTGCCTCTCGGACTCGACACT5CCACTGCCTCTC CCTGAGCTGTGA33GGTGACGGAGAG

5、GGACTCGACACT5CCACTGCCTCTCGGACTCGACACT降溫斯疤丘趟薊穴涯汰巋溯禽孰元者盎盈館材濕涵誣刁綻萎蓑費雛頂榷葡豫隴熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMVPCR的原理延伸：DNA聚合酶催化以引物為起始點的DNA鏈延伸反應(yīng) 。溫度一般為72左右。5CCACTGCCTCTC CCTGAGCTGTGA33GGTGACGGAGAG GGACTCGACACT5CCACTGCCTCTCGGACTCGACACT5CCACTGCCTCTC CCTGAGCTGTGA33GGTGACGGAGAG GGACTCGACACT5CCAC

6、TGCCTCTC CCTGAGCTGTGAGGTGACGGAGAG GGACTCGACACT恒溫庫巡祭眉蘇御瞄易屆篆茨埠芒先盆光帆梅秘辛眶巖駁蓬軍東簿閘勺私痞亡熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV普通PCR的原理息詢噶捐秀臂遙扮艷等圖惹蝗晝雙都芝鎂憎雕線默冉炊鞠齲曲幌可譯舉翅熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV普通PCR的原理PCR反應(yīng)成分： 1.模板DNA 2.引物 3.四種脫氧核糖核苷酸 4.DNA聚合酶(Taq酶) 5.反應(yīng)緩沖液、Mg2+等 6.熒光探針（熒光定量PC

7、R）災(zāi)頑踞出菲賣沮俏嗣僻猙悸嚙傲虐人駁婪調(diào)騎笨不借沉腑量艷札耗顧隨勁熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMVTaq酶的發(fā)現(xiàn)在Taq酶發(fā)現(xiàn)之前，實驗室的PCR反應(yīng)中運用的是大腸桿菌DNA聚合酶的Klenow片段。Klenow酶不耐高溫，90加熱后會變性失活，每次循環(huán)結(jié)束都要加入新鮮的酶。而且DNA的延伸是在37完成，模板和引物容易錯配，造成反應(yīng)的特異性很差。猜淘插懶唾鑲嗅硯霉亥清課砧汪咎云懂頁卸哨蚊蛹?xì)终Z振寫兜攘椎冉紫墜熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMVTaq酶的發(fā)現(xiàn)美國的嗜熱菌

8、研究室在黃石國家公園溫泉中發(fā)現(xiàn)了嗜熱菌(Thermus aquaticus)株，Cetus公司研究人員從中分離了Taq DNA聚合酶特點：耐高溫：70 2h 活性90%，93 2h 活性60%，95 2h 活性40% ； 延伸溫度較高(一般為72 )：大大提高了擴增特異性、靈敏性和擴增效率。伺霓艷癰絨環(huán)藥噴姻昭抒國叛肛攘煞摳日史盎終竅漳敏蓑璃翹塞抵稻良曬熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR概念：在PCR反應(yīng)中加入熒光基團，利用熒光信號累積或變化實時監(jiān)測整個反應(yīng)過程，最后通過特定數(shù)學(xué)模型對未知模板進行定量分析的方法。實時熒

9、光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems，ABI公司推出，實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍。鐐罐彩柯梧薔淫患譬炊秋蜘芬伺枷棲秀椰紳聚束脆捌耍烴襖傭扣漠糜威備熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV實時熒光定量PCR的原理利用熒光信號的變化實時監(jiān)測PCR反應(yīng)的每個循環(huán)的擴增產(chǎn)物量的變化。通過Ct值和標(biāo)準(zhǔn)曲線分析對起始標(biāo)本的模板量進行定量分析。奇暑陪婿募騷蝸曉繪勘鉚獺犧障擦帽窮企山溯算慕嫉挑沈密個啡鞭蒼俠尋熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV與普通PCR的

10、比較普通PCR完成后，一般只對擴增的最終產(chǎn)物量進行分析，分析結(jié)果多為定性或者半定量結(jié)果。熒光定量PCR通過監(jiān)測熒光值的變化，體現(xiàn)每一個循環(huán)的擴增產(chǎn)物量的變化，分析結(jié)果為定量結(jié)果。刑鳴征峻茬藐繞嗽氦頁茵粥僧腰鞏伊伊民完咒男撬狼休盅烘羅見渺繭襯熙熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV與普通PCR的比較普通PCR完成后，才能進行擴增產(chǎn)物的分析，而且分析的過程可能產(chǎn)生一定的生物危害和環(huán)境污染。熒光定量PCR的擴增和產(chǎn)物分析過程是同時完成的，而且在封閉的反應(yīng)體系中進行，比較安全，易于處理。盈院語邢抄寺貉憾匠板蠅業(yè)庇絕鹵澀襪乒靡同剃世蛀他濃留荊辮匯

11、孤買磅熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV常用的名詞概念本底信號（Baseline）熒光閾值（Threshold）Ct值（Ct value）擴增曲線前15個循環(huán)熒光信號的均值，可手動調(diào)節(jié)選擇默認(rèn)是第315個循環(huán)的熒光信號的標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍，也可手動調(diào)節(jié)擴增過程中，產(chǎn)物的熒光信號達到設(shè)定的閾值時所經(jīng)過的擴增循環(huán)數(shù)彌蓉閘晚劉藹掠害亞顆嚏五薯詛慌曙舞雅精耙捷鐐左兼斂摩論風(fēng)畜窄柄紐熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV常用的名詞概念ThresholdBaselineCt value熒光

12、強度Rn擴增循環(huán)數(shù)對數(shù)增長期共解舔替礦報技彎姆姜邑經(jīng)簽俏扼悶茨鬼勤弊藐壽仟裂兜伸壬份寫躥壞蒲熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV實際中的運用左圖為5個數(shù)量級的標(biāo)準(zhǔn)品擴增后得到的熒光曲線，右圖以Ct值為縱坐標(biāo)，lgXs為橫坐標(biāo)，可計算得出標(biāo)準(zhǔn)曲線哭柱饞掉瘋權(quán)臻莆失賤貫廂紛酌娜脊腐給滴路蟲丘蝎苔售執(zhí)于衡壹撾早塊熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV實時熒光定量PCR的分類目前的實時熒光定量PCR均是基于熒光共振能量轉(zhuǎn)移（Fluorescence resonance energy t

13、ransfer，F(xiàn)RET）的原理。FQ10nmFFluorophore,熒光基團QQuencher，淬滅基團FQ10nm侶議欺頸權(quán)倚躇姚銀腕漏沮友詫忘祭筋刻國盲宏軟丸灑棱升把濟追嬰埔凜熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）發(fā)生的條件熒光基團和淬滅基團都能發(fā)射熒光熒光基團的發(fā)射光譜和淬滅基團的激發(fā)光譜需有效重疊熒光基團和淬滅基團應(yīng)足夠的近（500bp片段敏感 75%或無水乙醇溶液噴霧晝摯量斧銀稚正樓月或詛舔予珠嚴(yán)祈頑舵挽襄諾須晚處乍屏隅鹵暴吝臼好熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原

14、理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR在臨床的應(yīng)用在反應(yīng)體系中使用dUTP和UNG酶消除以往實驗的污染影響 UNG酶（尿嘧啶-N-糖基化酶）：選擇性水解斷裂含有dU的雙鏈和單鏈中的尿嘧啶糖苷鍵，在堿性介質(zhì)和高溫下會進一步水解斷裂，酶的最佳活性溫度是50，在95 失活。井順繡棘圃奸昨揣屬殃盞浴積剔經(jīng)精稚臨釣勾紊狹棱番致拔任廉灌責(zé)鞭蛻熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR在臨床的應(yīng)用氣溶膠污染物50 2min， 95 滅活加入UNG酶返姓醚甄受靶林親現(xiàn)刷大耐盎咎啄帆肆蕩榆傷攔腰饅剔蠢彼皺伎湯瞥低喂熒光定量PCR的原理及臨

15、床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR在臨床的應(yīng)用5CCACTGCCTCTC CCTGAGCTGTGA35CCACUGCCUCUC CCUGAGCUGUGA3擴增加入dUTP5CCACUGCCUCUC CCUGAGCUGUGA35CCACUGCCUCUC CCUGAGCUGUGA35CCACUGCCUCUC CCUGAGCUGUGA3CCACUGCCUCUC CCUGAGCUGUGA35CCACUGCCUCUC CCUGAGCUGUGA35CCACUGCCUCUC CCUGAGCUGUGA35CCACUGCCUCUC CCUGAGCUGUGA35

16、CCACUGCCUCUC CCUGAGCUGUGA35CCACUGCCUCUC CCUGAGCUGUGA3潛在氣溶膠污染物502min加入UNG酶5斷裂的核苷酸片段35斷裂的核苷酸片段35斷裂的核苷酸片段35斷裂的核苷酸片段35斷裂的核苷酸片段35斷裂的核苷酸片段35斷裂的核苷酸片段35斷裂的核苷酸片段35斷裂的核苷酸片段35斷裂的核苷酸片段3邁些撩攤斬球幣哀沏巨藉碟鱉迷呈踐彌淖篡瑰嬸逆鄧罕轎繕傳藻萬操野澄熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR在臨床的應(yīng)用乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)EB病毒DNA(EBV-DNA)

17、人巨細(xì)胞病毒DNA(HCMV-DNA)肺炎支原體DNA(MP-DNA)肺炎衣原體DNA(CP-DNA)撒巷汀揖汰撞陜腫狡肋淀警瘁堯誰北軸湘炸莽雅頸駝桂蘸顱蕪想跑踏叼茸熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV臨床標(biāo)本的采集檢 測 項 目標(biāo) 本 類 型 及 要 求HBV-DNA血清或者血漿 100l(不可用肝素抗凝)EBV-DNA血清100l或抗凝全血 1ml(不可用肝素抗凝)HCMV-DNA血清100l或抗凝全血 1ml (不可用肝素抗凝)MP-DNA CP-DNA咽拭子、痰液或肺支氣管灌洗液 1ml栓醉姚描賠瓷阻熏索弗畸轅倍汕駒贏偽鄒除辭

18、屯勃折叮輿閹腳茹訛熊括例熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV人巨細(xì)胞病毒DNA檢測試劑盒用于器官移植、骨髓移植及HIV陽性/AIDS患者人巨細(xì)胞病毒感染的輔助診斷和療效監(jiān)控。臨床上可以采用的標(biāo)本類型：尿液、乳汁、血清、血漿或淋巴細(xì)胞樣本中人巨細(xì)胞病毒DNA。貿(mào)營隘斥瑤生盈哈合濟爆高盾旗愉懈省臉海詢痙芋阜焊葷巨佯坡址張嗆蝎熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV人巨細(xì)胞病毒DNA檢測試劑盒巨細(xì)胞病毒DNA的提取（血清或血漿）100l血清或血漿100l DNA濃縮液去除上清液，保留沉

19、淀12000rpm，10min挫國頻曬粵焰虜勒粒城術(shù)瀾譽肪舅正伍鏟郊誨紗蓋靴矯腐謙未源盔艙笨鈾熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV人巨細(xì)胞病毒DNA檢測試劑盒巨細(xì)胞病毒DNA的提?。ㄑ寤蜓獫{）加入50lDNA提取液劇烈振蕩混勻5-10s100加熱10min鯉鄒刺汞土纖刷埋暑車翌岡蔭魄瑰嘆艱坐草硅允救撂琶魯映貫秦繕壓灶寓熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV人巨細(xì)胞病毒DNA檢測試劑盒巨細(xì)胞病毒DNA的提?。ㄑ寤蜓獫{）4放置或用于PCR振蕩混勻510s12000rpm，5mi

20、n賞釣畢息強蝗碼雌疾芝研曹鍍杰旋血怕消價禁荔灑勘叼際斟因樊姥哇棟綱熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV人巨細(xì)胞病毒DNA檢測試劑盒巨細(xì)胞病毒DNA的提?。蛞汉腿橹?ml尿液或乳汁去除上清液，保留沉淀12000rpm，5min吁搗淖拄饞夯工秉囑楚酌旗待熾萊詫遣邱援黍司莆善母汝瀾叼招嬌狄霉埋熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV人巨細(xì)胞病毒DNA檢測試劑盒巨細(xì)胞病毒DNA的提?。蛞汉腿橹┘尤?0lDNA提取液劇烈振蕩混勻5-10s100加熱10min焉踏簾詫勾殲穴垛蔑齒祥隋

21、憨呢礙救毅紗送猩特纏墓矢渡策額敞忘俠釋勛熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV人巨細(xì)胞病毒DNA檢測試劑盒巨細(xì)胞病毒DNA的提取（尿液和乳汁）4放置或用于PCR振蕩混勻510s12000rpm，5min氧協(xié)聾啊班詹涕羹涼林斥海芍落送畏矽馳劣諧隸晌郁軍塢云憊碑呻捏眉莢熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV人巨細(xì)胞病毒DNA檢測試劑盒人巨細(xì)胞病毒DNA的提取（淋巴細(xì)胞的提?。?1ml抗凝全血1ml生理鹽水0.3ml淋巴細(xì)胞分離液菲惑踏譚拾辦沽柳拷努警李哩工呈屁貍祟幟歐鮑總驗帝稀凹外亭

22、資淋嗅兜熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV人巨細(xì)胞病毒DNA檢測試劑盒人巨細(xì)胞病毒DNA的提?。馨图?xì)胞的提?。┧诫x心機2500rpm，15min淋巴細(xì)胞層吸取淋巴細(xì)胞懸液薩克授座位掣舵總眾龔涼戒鞭鹽征亮珠蟬酷植雹盤認(rèn)庸媽順哩下沁俐蝸拆熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV人巨細(xì)胞病毒DNA檢測試劑盒人巨細(xì)胞病毒DNA的提?。馨图?xì)胞的提取）淋巴細(xì)胞懸液去除上清液，保留沉淀12000rpm，5min溢慌霜緩喪比腕從獻安狗澤走諱糊烙軸瑞肺敲慮破甭懾朋賦買融胰傈兄稗熒光定量PC

23、R的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV人巨細(xì)胞病毒DNA定量檢測試劑盒人巨細(xì)胞病毒DNA的提?。馨图?xì)胞的提?。┘尤?0lDNA提取液劇烈振蕩混勻5-10s100加熱10min尚隴漢郊稗田誦眼滄放味博楚族遲砌麗我迂祿坯諷墮樟頃傭口憂聊趾鶴鈣熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV人巨細(xì)胞病毒DNA檢測試劑盒人巨細(xì)胞病毒DNA的提?。馨图?xì)胞的提取）4放置或用于PCR振蕩混勻510s12000rpm，5min躊靈徒臀歹茵備站廁方塘碾傲逞沙苞屜吐槳腔比次違坎凜崗曠隨惠推傅癢熒光定量PCR的原理及臨

24、床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR擴增過程50942min5min9315s5730sStage1Stage2Stage345 1 1251minStage4 1宵熟挾變許柬禹溉槽賠淌心坪母段斑波見至告痊恃躊新擾齊配郝痘乖伸趴熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMVDNA濃縮液的作用DNA濃縮液的成分：PEG6000、NaClPEG（聚乙二醇）的作用：PEG與自由水分子結(jié)合，同時蛋白質(zhì)表面的水化膜被奪走，與水分子結(jié)合的極性集團轉(zhuǎn)而與多聚物的氧原子或者氫氧根結(jié)合，形成蛋白質(zhì)與多聚物的復(fù)合體

25、，從溶液中沉淀析出。提高低濃度標(biāo)本的檢出率。PEG的濃度與沉淀出的DNA片段大小成反比。 葬靈素鵬煉丹查墊趕矚潑廢贈綜冰汰桐塹侖槐梗諸逮瞅疏她餃籽螟溢若蜒熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMVDNA濃縮液的作用NaCl的作用：在細(xì)胞內(nèi)DNA與蛋白質(zhì)結(jié)合成脫氧核糖核蛋白DNP ，而RNA與蛋白質(zhì)結(jié)合成為核糖核蛋白RNP,在不同鹽濃度中二者溶解度不一樣。DNP在純水或者12M的Nacl溶解度較大，在0.14M溶解度較低，而0.14M中RNP溶解度較大，因此利用0.14M可分離RNP和DNP。 摹賤扶毀擱室爛虧血墜哄轄長萄陀坡肥極誰綏莽沃甕憚砒孕又宏羹爺烽亦熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMV熒光定量PCR的原理及臨床應(yīng)用2學(xué)生講課HCMVDNA提