藥物血漿半衰期測(cè)定

1、藥物血漿半衰期測(cè)定【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?.以磺胺嘧啶鈉為例學(xué)習(xí)測(cè)定藥物半衰期（t1/2）等藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的基本方法。2.理解常用藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的臨床意義7/31/20222【實(shí)驗(yàn)原理】磺胺類(lèi)藥物為對(duì)氨基苯磺酰胺類(lèi)化合物，在酸性溶液中，可與亞硝酸鈉起重氮反應(yīng)，產(chǎn)生重氮鹽。在堿性溶液中，重氮鹽可與酚類(lèi)化合物（麝香草酚）起偶氮反應(yīng)，形成橙紅色的偶氮化合物?？稍?25nm波長(zhǎng)下進(jìn)行比色測(cè)定。根據(jù)Beer-Lamber定律，濃度與光密度成正比關(guān)系。其化學(xué)反應(yīng)式如下：橙紅色7/31/20223【材料與方法】 一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：家兔1只。 二、器材與藥品：試管24只，移液吸管10ml，1只；1ml，2只；2ml 7只；移液器1

2、支，吸頭若干，試管夾，試管架，離心機(jī)，722型分光光度計(jì)，手術(shù)剪，眼科剪，止血鉗，動(dòng)脈夾，眼科鑷，縫線，藥棉，紗布，捆扎繩，注射器10ml 1支，5ml 1支。5%磺胺嘧啶鈉溶液，7.5%三氯醋酸溶液，0.5%亞硝酸鈉溶液，0.5% 麝香草酚溶液（溶于20氫氧化鈉內(nèi)），草酸鉀結(jié)晶，25%氨基甲酸乙酯溶液，肝素注射液。 7/31/20224 三、方法與步驟1.取試管5只，依次用A1、A2、A3A5標(biāo)記，各加入7.5%三氯醋酸2ml備用。 2.取試管5只，依次用B1，B2，B3B5標(biāo)記，各加入草酸鉀結(jié)晶幾粒(抗凝)。3.取家兔，稱(chēng)重，取血方法1： 以烏拉坦(4ml/kg)耳緣靜脈注射麻醉，麻醉后將

3、兔背位固定于手術(shù)臺(tái)上，正中切開(kāi)頸部皮膚，分離一側(cè)頸總動(dòng)脈，結(jié)扎其遠(yuǎn)心端，并在近心端夾上動(dòng)脈夾，以阻斷血流，再將放血導(dǎo)管向心臟方向插入頸總動(dòng)脈內(nèi)，用線打活結(jié)固定。取血方法2：耳緣靜脈近心端開(kāi)始向遠(yuǎn)心端方向抽血1ml 4. 耳緣靜脈注入3%磺胺嘧啶鈉4ml/kg，記錄注完時(shí)間（準(zhǔn)確到分鐘）。5.給藥前、給藥后5min、10min、20min、30min，松開(kāi)動(dòng)脈夾，放血約1ml，分別置于B1 、 B2、B3、B4、B5管，迅速搖勻抗凝，記錄取血標(biāo)本的準(zhǔn)確時(shí)間。 注意在取血前先要放掉動(dòng)脈插管內(nèi)的殘血。7/31/20225動(dòng)脈取血約1ml準(zhǔn)確移液100l7.5%三氯醋酸2ml混勻1500轉(zhuǎn)/分離心5m

4、in準(zhǔn)確移上清液1.加亞硝酸鈉2.加0.5%麝香草酚1ml525nm測(cè)光密度ABC偶氮反應(yīng)橙紅色7/31/202266.然后準(zhǔn)確吸取100l加入相應(yīng)的各A管, 各管以1500轉(zhuǎn)/分離心5min，分別取離心后的上清液，加0.5%亞硝酸鈉溶液0.5 ml，搖勻，再加0.5%麝香草酚1ml，可見(jiàn)橙紅色反應(yīng)。以給藥前血樣作空白對(duì)照，用722型分光光度計(jì)于525nm波長(zhǎng)下進(jìn)行比色，測(cè)定各時(shí)間點(diǎn)的光密度，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得磺胺鈉濃度。 C=582D-537/31/20227根據(jù)吸光度,線性方程 y=582x-53, 計(jì)算濃度,求對(duì)數(shù)值. (Excel 常用函數(shù) log10 計(jì)算對(duì)數(shù)值. )將給藥時(shí)間t 與已

5、求得的磺胺藥血漿濃度對(duì)數(shù)值做直線回歸, 根據(jù)一級(jí)消除動(dòng)力學(xué)公式: lgCt=lgCo+ (-K/2.303)t回歸方程的斜率(-K/2.303), Excel 常用函數(shù) slope斜率 計(jì)算得(-K/2.303)= -19.6, 計(jì)算K, t1/2=0.693/K, Vd=D/Co, Cl=K*Vd; 已知 t , lgCt, 計(jì)算Co, 從而計(jì)算Vd, Cl給藥后不同時(shí)間點(diǎn)的磺胺鈉鈉濃度管號(hào)12345給藥時(shí)間光密度值磺胺鈉濃度磺胺鈉對(duì)數(shù)濃度7/31/202297.計(jì)算根據(jù)一級(jí)動(dòng)力學(xué)消除公式 t 將給藥時(shí)間t與已求得的磺胺血漿濃度對(duì)數(shù)值lg Ct作直線回歸，即可得回歸方程的斜率（- K）和截距

6、（lgCo）7/31/202210應(yīng)用公式t1/2K，Vd=D/Co，CL=KVd，便可求得t1/2、Vd和CL。7/31/2022111.計(jì)算器（Casio fx180或fx3600p）的操作步驟MODE 2 屏幕顯示LR，進(jìn)入線性回歸計(jì)算狀態(tài)；INV AC消除儲(chǔ)存器內(nèi)的全部數(shù)據(jù)；XoDo自變量輸入； DATA因變量數(shù)據(jù)輸入；INV A（截距），INV B（斜率） INV r（相關(guān)系數(shù)）；INV X得期望值。7/31/2022122.計(jì)算機(jī)的操作步驟（以Excel2002為例） 將數(shù)據(jù)輸入Excel中，調(diào)用其自帶的函數(shù)，根據(jù)對(duì)話框要求操作即可完成運(yùn)算。INTERCEPT（known-ys，known-xs）求線性回歸擬合線方程的截距。CORREL（arrayl，array2）返回兩組數(shù)值的相關(guān)系數(shù)。SLOPE（Known-ys known- xs）返回經(jīng)過(guò)給定數(shù)據(jù)點(diǎn)的線性回歸擬合線方程的斜率。FORECAST（X，Known-ys known- xs）通過(guò)一線性回歸擬合線返回一個(gè)預(yù)測(cè)值。7/31/202213【注意事項(xiàng)】麻醉藥?kù)o脈推注速度不宜過(guò)快，頸總動(dòng)脈分離及插管給藥時(shí)間及各取血點(diǎn)均要準(zhǔn)確記錄，加樣精確，減少誤差。在取血