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1、專題2.2動(dòng)物細(xì)胞工程1精選ppt動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合單克隆抗體制備細(xì)胞核移植動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)2精選ppt2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)3精選ppt動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)4精選ppt(一)、概念 是指從動(dòng)物機(jī)體內(nèi)取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。(二)、原理細(xì)胞分裂增殖5精選ppt(三)、過(guò)程幼齡動(dòng)物剪碎組織胰蛋白酶處理單個(gè)細(xì)胞原代細(xì)胞培養(yǎng)取動(dòng)物器官和組織細(xì)胞懸浮液傳代細(xì)胞培養(yǎng)6精選ppt歸納過(guò)程取 的組織、器官細(xì)胞懸浮液 酶 貼滿瓶壁的細(xì)胞單個(gè)細(xì)胞加入 液動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物胰蛋白培養(yǎng)接觸抑制原代 培養(yǎng)1-10代細(xì)胞7精選ppt遺
2、傳物質(zhì) 改變?cè)?xì)胞培養(yǎng)加 液4050代細(xì)胞(細(xì)胞株)未遺傳物質(zhì) 改變無(wú)限傳代(細(xì)胞系)已傳代培養(yǎng)胰蛋白 酶 8精選ppt思考題:1、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料?2、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞?因?yàn)檫@些組織或器官,分裂能力旺盛,易于培養(yǎng)。成塊組織使細(xì)胞靠在一起限制了細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖,且細(xì)胞不能與培養(yǎng)液充分接觸,不利于培養(yǎng)。9精選ppt3、胰蛋白酶的作用是什么呢?由此可說(shuō)明細(xì)胞間的物質(zhì)是什么成份?催化蛋白質(zhì)水解。細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)(膠原蛋白等)。4、細(xì)胞膜的主要成份是什么?蛋白質(zhì)和磷脂5、胰蛋白酶能將細(xì)胞消化掉嗎?能10精選ppt6、既然胰蛋白酶
3、能將細(xì)胞消化掉,那將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞要注意什么問(wèn)題呢?7、能夠用胃蛋白酶代替胰蛋白酶嗎?為什么?注意時(shí)間的控制 不能,因?yàn)閮烧叩淖钸mPH不同,而正常組織細(xì)胞的生存環(huán)境與胰蛋白酶的最適PH較接近11精選ppt1、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境 保證細(xì)胞順利的生長(zhǎng)增殖(添加一定量的抗生素,定期更換培養(yǎng)液)(葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清等。)(四)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件2、營(yíng)養(yǎng)12精選ppt3、溫度和PH 培養(yǎng)室中控制,使之達(dá)到36.5 0.5, 7.27.4培養(yǎng)箱中提供O2和CO2(95%空氣和5% CO2 )4、氣體環(huán)境:13精選ppt植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)
4、胞培養(yǎng)原理細(xì)胞的 細(xì)胞培養(yǎng)基特有成分 、植物激素葡萄糖、 培養(yǎng)結(jié)果植物體培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無(wú)病毒植株獲得全能性增殖蔗糖動(dòng)物血清細(xì)胞株、細(xì)胞系細(xì)胞,某些蛋白質(zhì)14精選ppt(五)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用(3)細(xì)胞的生理、藥理、病理研究 (1) 培養(yǎng)健康細(xì)胞用于燒傷病人皮膚移植(2) 基因工程的受體細(xì)胞15精選ppt動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物16精選ppt(一)、動(dòng)物細(xì)胞核移植的概念: 動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核,移如入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中.使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體.克隆動(dòng)物:用核移植的方法得到的動(dòng)物。17精選ppt卵細(xì)胞母綿羊母綿羊
5、乳腺細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核細(xì)胞核移植早期胚胎卵裂C母綿羊子宮胚胎移植多莉羊分娩妊娠多莉羊的培育過(guò)程融合后的卵細(xì)胞18精選ppt克隆羊培育過(guò)程黑面綿羊去核卵細(xì)胞白面綿羊乳腺細(xì)胞核細(xì)胞核移植重組細(xì)胞電脈沖刺激早期胚胎胚胎移植另一頭綿羊的子宮妊娠、出生克隆羊多利19精選ppt、動(dòng)物的克隆與植物克隆一樣嗎?、用動(dòng)物體細(xì)胞進(jìn)行克隆的過(guò)程,其實(shí)際操作過(guò)程是什么?動(dòng)物克隆過(guò)程的實(shí)際是細(xì)胞核移植不思考題20精選ppt(二)、分類:胚胎細(xì)胞核移植:體細(xì)胞核移植:細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)全能性容易 細(xì)胞分化程度高,恢復(fù)全能性困難21精選ppt去核卵母細(xì)胞供體細(xì)胞電刺激使兩細(xì)胞融合重組細(xì)胞重組胚胎新個(gè)體代孕母牛C胚胎移植卵母
6、細(xì)胞培養(yǎng)無(wú)性生殖(三)、體細(xì)胞的核移植過(guò)程高產(chǎn)奶牛A供體細(xì)胞培養(yǎng)供卵奶牛B22精選ppt、在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前,為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核?為使核移植動(dòng)物的遺傳物質(zhì)全部來(lái)自有利用價(jià)值的動(dòng)物提供的細(xì)胞。、用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞,為什么?10代以內(nèi)的細(xì)胞一般保持正常二倍體的核型,未發(fā)生突變思考題23精選ppt3、體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎?為什么?不是,克隆動(dòng)物絕大部分DNA來(lái)自供體細(xì)胞核,但核外還有少部分DNA(如線粒體DNA)來(lái)自受體卵母細(xì)胞思考題24精選ppt4.動(dòng)物克隆實(shí)例很多,為何多莉就舉世聞
7、名呢?在1997年2月英國(guó)羅斯林研究所維爾穆特博士科研組公布體細(xì)胞克隆羊“多莉”培育成功之前,胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)已經(jīng)有了很大的發(fā)展。實(shí)際上,“多莉”的克隆在核移植技術(shù)上沿襲了胚胎細(xì)胞核移植的全部過(guò)程,但這并不能減低“多莉”的重大意義,因?yàn)樗鞘澜缟系谝焕?jīng)體細(xì)胞核移植出生的動(dòng)物,是克隆技術(shù)領(lǐng)域研究的巨大突破。這一巨大進(jìn)展意味著:在理論上證明了,同植物細(xì)胞一樣,分化了的動(dòng)物細(xì)胞核也具有全能性 思考題25精選ppt5、對(duì)比多莉羊和課本高產(chǎn)奶牛的克隆過(guò)程,找出操作過(guò)程的不同點(diǎn)?多莉克隆過(guò)程的受體細(xì)胞是去核卵細(xì)胞,而高產(chǎn)奶牛的克隆過(guò)程的受體細(xì)胞是去核卵母細(xì)胞;多莉克隆過(guò)程是將供體細(xì)胞核注入受體細(xì)胞,而
8、高產(chǎn)奶牛的克隆過(guò)程是將供體細(xì)胞注入受體細(xì)胞。6、討論分析上述哪一種措施更科學(xué)?并說(shuō)明理由? 卵母細(xì)胞當(dāng)中的細(xì)胞周期蛋白含量、活性比卵細(xì)胞高,用它作受體更容易成功將供體細(xì)胞注入受體細(xì)胞,使克隆動(dòng)物更像供體動(dòng)物,操作也方便思考題26精選ppt胚胎移植技術(shù)試管動(dòng)物(嬰兒)培養(yǎng)過(guò)程卵細(xì)胞精子體外受精受精卵胚胎新個(gè)體母體子宮內(nèi)孕育、產(chǎn)出27精選ppt(五)、體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題 1、克隆動(dòng)物基因組重新編程的機(jī)制尚不清楚。2、克隆技術(shù)效率低,畸形率高、死亡率高、易出 現(xiàn)早衰等問(wèn)題。3、生產(chǎn)克隆動(dòng)物費(fèi)用昂貴。28精選ppt體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景 1、加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育2、保護(hù)瀕
9、危物種,增加存活數(shù)量3、克隆動(dòng)物作為生物反應(yīng)器,生產(chǎn)醫(yī)用蛋白4、可以作為異種移植的供體,可以用于組織器官的移植29精選ppt總結(jié)二 動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物)一動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)概念過(guò)程原理應(yīng)用概念過(guò)程應(yīng)用存在問(wèn)題體細(xì)胞核移植胚胎細(xì)胞核移植30精選ppt 2、在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的細(xì)胞是 ( ) A獲得不死性的細(xì)胞 B10代以內(nèi)細(xì)胞 C原代細(xì)胞 D傳代細(xì)胞1、動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是 ( ) A.動(dòng)物細(xì)胞融合 B.單克隆抗體 C.胚胎移植 D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)AD課堂反饋練習(xí)31精選ppt3、在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的有關(guān)敘述中正確的是:( )A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的只是為了獲得大量的細(xì)胞 分
10、泌蛋白B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶使細(xì)胞分散C、細(xì)胞的癌變發(fā)生在原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過(guò)渡 過(guò)程中D、培養(yǎng)至50代后傳代細(xì)胞遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生改變B32精選ppt4、一般說(shuō)來(lái),動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足以下條件( )無(wú)毒的環(huán)境 無(wú)菌的環(huán)境 培養(yǎng)基需要加入血清 溫度與動(dòng)物體溫相似 需要O2,不需要CO2 CO2能調(diào)節(jié)培養(yǎng)液PHA、 B、 C、 D、 D33精選ppt5、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn) ( )細(xì)胞貼壁 有絲分裂 細(xì)胞分化 接觸抑制 減數(shù)分裂 原代培養(yǎng)一般傳110代A、 B、C、 D、A34精選ppt6、下圖是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程示意圖。請(qǐng)據(jù)此回答:(1)容器A中放置的是動(dòng)物器官或組織。它一般取自
11、_。(2)容器A中的動(dòng)物器官或組織首先要進(jìn)行的處理是 ,然后用 酶處理,這是為了使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái),這樣做的目的是 。動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物剪碎胰蛋白使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸,便于培養(yǎng)35精選ppt(3)培養(yǎng)首先在B瓶中進(jìn)行,瓶中的培養(yǎng)基成分有 _等。在此瓶中培養(yǎng)一段時(shí)間后,有許多細(xì)胞衰老死亡,這是培養(yǎng)到第 代,到這時(shí)的培養(yǎng)稱為_(kāi) 。(4)為了把B瓶中的細(xì)胞分裝到C瓶中,用 處理,然后配置成 ,再分裝。動(dòng)物血清10原代培養(yǎng)胰蛋白酶細(xì)胞懸浮液36精選ppt(湖北,2004)動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中,正確的有 ( ) A誘導(dǎo)融合的方法完全相同B所用的技術(shù)手段完全相同C所采用的原理完全相同D都能形
12、成雜種細(xì)胞 解析 所用的誘導(dǎo)方法略有不同:除了植物細(xì)胞融合所用的誘導(dǎo)方法外,動(dòng)物細(xì)胞融合還常用滅活的仙臺(tái)病毒做誘導(dǎo)劑。動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交,這兩項(xiàng)細(xì)胞工程技術(shù)中都包含了細(xì)胞融合過(guò)程,兩種細(xì)胞融合所用的技術(shù)手段基本相同,但不完全相同。動(dòng)物細(xì)胞融合采用的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性,植物體細(xì)胞雜交采用的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞的全能性。動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中均能產(chǎn)生雜種細(xì)胞,只不過(guò)是動(dòng)物的雜種細(xì)胞在現(xiàn)有技術(shù)條件下,還不能發(fā)育成一個(gè)個(gè)體,它的全能性還不能表現(xiàn)出來(lái),植物的雜種細(xì)胞就不一樣了,植物的雜種細(xì)胞可以通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)形成雜種植株。 D37精選ppt謝謝38精選ppt細(xì)胞接觸抑制
13、細(xì)胞在貼壁生長(zhǎng)過(guò)程中,隨著細(xì)胞分裂,數(shù)量不斷增加,最后形成一個(gè)單層,此時(shí)細(xì)胞間相互接觸,細(xì)胞分裂和生長(zhǎng)停止,數(shù)量不再增加。39精選ppt原代培養(yǎng):將動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。40精選ppt傳代培養(yǎng):用胰蛋白酶將出現(xiàn)接觸抑制的貼壁細(xì)胞從培養(yǎng)瓶壁上脫離下來(lái),制成細(xì)胞懸液,分裝到多個(gè)培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),這個(gè)過(guò)程叫傳代培養(yǎng)。41精選ppt42精選ppt前景展望資料一:43精選ppt 培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞還可以用于檢測(cè)有毒物質(zhì)。許多致畸、致癌物質(zhì)加入培養(yǎng)液后,培養(yǎng)細(xì)胞會(huì)發(fā)生染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目的變異。根據(jù)變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù),可以判斷某種物質(zhì)的毒性?,F(xiàn)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)已經(jīng)成為檢測(cè)有毒物質(zhì)的快速而靈敏的有效手段。 資料二:44精選ppt人工關(guān)節(jié)軟骨再生1.第一次手術(shù):
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