PTEN和PCNA在胃癌中的表達(dá)及其臨床意義

1、PTEN和PCNA在胃癌中的表達(dá)及其臨床意義【摘要】 目的：檢測PTEN蛋白和PCNA蛋白在胃癌組織中的表達(dá)，并研究其臨床病理意義。方法：用免疫組織化學(xué)SP法檢測PTEN和PCNA蛋白在80例胃癌組織中的表達(dá)，并取30例同期胃炎黏膜標(biāo)本作為對照。結(jié)果：胃炎黏膜PTEN蛋白陽性表達(dá)表達(dá)率為100.0%(30/30)，胃癌組織PTEN蛋白陽性表達(dá)率為40.0%(32/80)；高、中分化腺癌的PTEN蛋白陽性表達(dá)率高于低分化腺癌的；期、期胃癌的PTEN蛋白陽性表達(dá)率高于期、期的；無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組胃癌的PTEN陽性表達(dá)率高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的；胃癌組織PCNA標(biāo)記指數(shù)為(86.712.3)%，高于胃炎黏膜的

2、PCNA標(biāo)記指數(shù)；PTEN蛋白表達(dá)陰性的胃癌細(xì)胞PCNA的標(biāo)記指數(shù)高于PTEN蛋白表達(dá)陽性者。胃癌患者生存年限5 a PTEN蛋白陽性表達(dá)率高于生存年限75%。染色強(qiáng)度與陽性細(xì)胞計(jì)分乘積0分2分記為(-)，3分5分記為(+)，6分9分記為(+)，10分12分記為(+)。PCNA以細(xì)胞核中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞；連續(xù)計(jì)數(shù)500個(gè)腫瘤細(xì)胞，以平均每100個(gè)瘤細(xì)胞中PCNA陽性細(xì)胞數(shù)作為PCNA標(biāo)記指數(shù)。1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用2檢驗(yàn)和Spearman等級相關(guān)檢驗(yàn)。2 結(jié)果2.1 胃癌組織中PTEN蛋白的表達(dá) 80例胃癌組織中有32例PTEN蛋白陽性表達(dá)，其中(+)18例，(+)10例，(+)4例

3、，陽性表達(dá)率為40.0%；多數(shù)陽性表達(dá)不強(qiáng)。而30例胃炎黏膜組織全部有PTEN蛋白陽性表達(dá)，陽性表達(dá)率為100.0%，而且陽性強(qiáng)，其中(+)22例，(+)8例。二者陽性表達(dá)率比較，差異有高度顯著性(2=6.42,P0.01)。2.2 胃癌組織中PCNA蛋白的表達(dá) 80例胃癌組織中PCNA標(biāo)記指數(shù)為(86.712.3)%；30例胃炎黏膜組織中PCNA標(biāo)記指數(shù)為(41.810.2)%，二者標(biāo)記指數(shù)比較，差異有顯著性(2=5.12,P0.05)。2.3 胃癌組織中PTEN和PCNA蛋白表達(dá)的相關(guān)性 PTEN蛋白表達(dá)陽性的32例中， 平均PCNA標(biāo)記指數(shù)為(58.811.2)%，PTEN蛋白表達(dá)陰性的

4、48例中，平均PCNA標(biāo)記指數(shù)為(95.812.4)%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理發(fā)現(xiàn)，PTEN和PCNA表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性(=-0.621,P0.05)。2.4 PTEN蛋白表達(dá)與胃癌臨床病理聯(lián)系 PTEN蛋白表達(dá)與胃癌患者年齡、性別、肉眼分型、病理類型及浸潤深度等臨床病理特征無明顯關(guān)系。PTEN蛋白在高、中分化腺癌和低分化腺癌PTEN陽性表達(dá)率分別為50.0%(27/54)和19.2%(5/26)，差異具有顯著性(2=6.23,P0.05)。PTNM分期、期胃癌的PTEN蛋白陽性表達(dá)率為17.9%(7/39)，期、期胃癌的PTEN蛋白陽性表達(dá)率為61.0%(25/41)，二者差異有高度顯著性(2=6.71,

5、P0.01)。胃癌組織的PTEN陽性表達(dá)率在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組為30.0%(15/50)，在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組為56.7%(17/30)，差異具有顯著性(2=4.73，P5 a者35例，23例PTEN蛋白表達(dá)陽性，表達(dá)率為65.7%；生存年限5 a者45例，9例PTEN蛋白表達(dá)陽性，表達(dá)率為20.0%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，兩表達(dá)率差異有顯著性(2=5.93，P0.05)。3 討論抑癌基因PTEN是1997年發(fā)現(xiàn)的一種抑癌基因，是至今發(fā)現(xiàn)的唯一一種能使脂類去磷酸化的抑癌基因，定位于染色體10 q 23.3，編碼由403個(gè)氨基酸殘基組成的蛋白質(zhì)。PTEN蛋白中與抑癌功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)域主要是氨基端的磷酸酶結(jié)構(gòu)域和羧基

6、端結(jié)構(gòu)域。PTEN的酶活性中心有3個(gè)堿性氨基酸，從而擴(kuò)大了PTEN結(jié)合底物所需的口袋結(jié)構(gòu)的空間，為特異催化酸性底物奠定了結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。PTEN基因在人類多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起作用。PTEN通過誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯和細(xì)胞凋亡等抑制腫瘤發(fā)生發(fā)展，其突變和異常表達(dá)與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、浸潤、轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)，是患者預(yù)后不良的標(biāo)志2。國外學(xué)者報(bào)道，PTEN基因表達(dá)缺失可促進(jìn)胃癌血管生成，并在胃癌的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移中起關(guān)鍵作用3；其下調(diào)表達(dá)在胃癌的發(fā)生、進(jìn)展、生長、分化和血管生成中起重要作用4。本組研究發(fā)現(xiàn)，80例胃癌組織中PTEN蛋白陽性表達(dá)率為40.0%，多數(shù)陽性表達(dá)不強(qiáng)，而對照組胃炎黏膜組織PTEN蛋白陽性

7、表達(dá)率為100.0%，而且陽性強(qiáng)，二者差異有高度顯著性；PTEN蛋白表達(dá)與胃癌患者年齡、性別、肉眼分型、病理類型及浸潤深度等臨床病理特征無明顯關(guān)系；PTEN蛋白陽性表達(dá)率隨癌組織的分化程度降低而降低；臨床分期越晚，PTEN蛋白陽性表達(dá)率越低；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組PTEN蛋白陽性表達(dá)率低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組；生存年限5 a者。這表明，PTEN蛋白低表達(dá)，會(huì)促進(jìn)胃癌的發(fā)生、影響胃癌的分化、促進(jìn)胃癌的轉(zhuǎn)移，影響胃癌患者的預(yù)后。這結(jié)果與上述文獻(xiàn)報(bào)道相似，并與國內(nèi)學(xué)者范凱5的報(bào)道相似?；虻谋磉_(dá)缺失可以是基因突變引起，也可以是基因的雜合性丟失(LOH)引起。PTEN基因突變常見于惡性膠質(zhì)瘤、前列腺癌、子宮內(nèi)膜癌等多

8、種人類惡性腫瘤，但在胃癌中其突變率較低，且所發(fā)現(xiàn)的突變多位于非編碼區(qū)2。Sato等6用聚合酶鏈反應(yīng)一單鏈構(gòu)象多態(tài)性方法(PCRSSCP)分析了10個(gè)胃癌細(xì)胞系和58例原發(fā)胃癌組織，發(fā)現(xiàn)PTEN基因突變在胃癌的發(fā)生發(fā)展中不具有重要作用，推測胃癌中PTEN基因的雜合性丟失(LOH)可能較為常見。李錦毅等7用PCRSSCP檢測進(jìn)展胃癌中的PTEN圍基因微衛(wèi)星位點(diǎn)的LOH情況，結(jié)果其LOH的總發(fā)生率為28.6%。Li8等用免疫組化檢測發(fā)現(xiàn)：從不典型增生到進(jìn)展期胃癌，LOH的發(fā)生率從13.3%到33.3%。這些研究都表明，胃癌中PTEN表達(dá)缺失主要是由PTEN基因的雜合性丟失(LOH)引起。增殖細(xì)胞核抗

9、原(PCNA)可以評估腫瘤細(xì)胞的增殖活性，有助于研究細(xì)胞的增殖狀態(tài)。本組胃癌組織中PCNA蛋白的標(biāo)記指數(shù)顯著比胃炎黏膜組織中的PCNA標(biāo)記指數(shù)高，結(jié)果與李菁華9報(bào)道的相似。而且，本組研究還發(fā)現(xiàn)，PTEN蛋白表達(dá)陽性的平均PCNA標(biāo)記指數(shù)較低，PTEN蛋白表達(dá)陰性的PCNA標(biāo)記指數(shù)較高，二者表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性。這結(jié)果也與文獻(xiàn)報(bào)道的相似5。本實(shí)驗(yàn)證明：PTEN基因蛋白表達(dá)是反映胃癌發(fā)生、分化、發(fā)展、轉(zhuǎn)移和預(yù)后的重要生物學(xué)標(biāo)記物之一。PTEN基因蛋白和PCNA蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性。【參考文獻(xiàn)】 1 許良中，楊文濤.免疫組織化學(xué)結(jié)果的判定J.中國癌癥雜志，1996，6(1)：229231.2 馬鵬，談曉紅，

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