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文檔簡(jiǎn)介
1、如何解讀細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告你知道嗎?(1)有關(guān)病原菌與報(bào)告解讀下列哪些細(xì)菌屬于條件致病菌? A 大腸埃希菌 B 銅綠假單胞菌 C 肺炎克雷伯菌 D 白喉棒狀桿菌下列哪些菌屬于條件致病真菌? A 念珠菌 B 曲霉菌 C 卡氏肺孢子菌 D 隱球菌判斷題:所有的陰性報(bào)告都表示沒(méi)有感染所有報(bào)告的細(xì)菌均為病原菌2你知道嗎?(2)有關(guān)細(xì)菌耐藥與用藥選擇選擇題:A.天然耐藥;B.少見(jiàn)的耐藥 嗜麥芽窄食單胞菌對(duì)碳青霉烯類(lèi)藥物耐藥屬于: 葡萄球菌對(duì)萬(wàn)古霉素耐藥屬于:產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌下列哪些藥物不能選用 A 青霉素類(lèi) B 頭孢類(lèi) C 氨曲南 D 碳青霉烯類(lèi)治療MRSA最有效的藥物是 A 苯唑西林
2、 B 頭孢唑啉 C 亞胺培南 D 萬(wàn)古霉素3“溝通、理解、合作”是當(dāng)前臨床醫(yī)生與細(xì)菌檢驗(yàn)人員之間最缺乏的,也是最應(yīng)該做到的。4主要內(nèi)容正常菌群與病原菌藥敏試驗(yàn)與報(bào)告解讀經(jīng)驗(yàn)用藥與目標(biāo)用藥5一、正常菌群與病原菌 正常菌群的概念與分布 致病菌與條件致病菌 各類(lèi)標(biāo)本中的常見(jiàn)病原菌6正常菌群的概念正常菌群:在人的體表及與外界相通的口腔、鼻咽部、腸道、泌尿生殖道等腔道中寄居著微生物,在正常情況下對(duì)宿主無(wú)害而有益,這樣的微生物為正常微生物群,其中以細(xì)菌為主,通稱(chēng)正常菌群。7人體各部位的正常菌群汪復(fù).感染性疾病與抗微生物治療.第2版.上海:上海醫(yī)科大學(xué)出版社,2000,1.89病原菌的分類(lèi)病原菌致病菌(種類(lèi)
3、少,毒力強(qiáng))條件致病菌(種類(lèi)多并在不斷增加,毒力弱)臨床上常將病原菌和致病菌稱(chēng)謂混用。但前者包含的范圍顯然較后者為廣,或者可認(rèn)為通常所說(shuō)的致病菌是廣義的概念。病原菌:是指能入侵宿主引起感染的微生物,包括細(xì)菌、真菌、病毒等。病原菌按致病性分類(lèi)如下:10致病菌的概念致病菌的概念患者有典型的感染癥狀 隨時(shí)可從其體內(nèi)分離出特定的細(xì)菌 將細(xì)菌接種易感動(dòng)物感染癥狀與人相同 從動(dòng)物體內(nèi)可分離出與人相同的細(xì)菌 致病菌與條件致病差別是:致病菌侵害人體的能力遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于條件致病菌.11條件致病菌與菌群失調(diào)條件致病菌:某些細(xì)菌在正常情況下并不致病,當(dāng)在某些條件改變的特殊情況下可以致病,這樣的細(xì)菌稱(chēng)為條件致病菌或機(jī)會(huì)致病
4、菌。這種特定的條件大致有以下幾種:寄居部位的改變、免疫功能低下、菌群失調(diào)。 菌群失調(diào):是宿主部位正常菌群各類(lèi)菌間的比例發(fā)生較大幅度變化而超出正常范圍的狀態(tài)。由此產(chǎn)生的一系列表現(xiàn),稱(chēng)為菌群失調(diào)癥或菌群交替癥。12條件致病菌的主要特點(diǎn)毒力弱或無(wú)明顯毒力; 常為耐藥菌或多重耐藥菌; 引起感染的對(duì)象是長(zhǎng)期使用抗生素, 機(jī)體免疫功能下降的患者。13條件致病菌的幾種身份病原菌:會(huì)于宿主體內(nèi)繁殖并侵入或破壞組織,引起感染的微生物。患者由這類(lèi)菌引起感染,用細(xì)菌報(bào)告提示的抗生素治療,療效明顯。定植菌:(定植:細(xì)菌或真菌在人體的某個(gè)部位定居下來(lái)形成相對(duì)穩(wěn)定的寄生狀態(tài),不會(huì)隨外界機(jī)械沖擊而完全離開(kāi)原來(lái)寄居部位。)會(huì)
5、于體內(nèi)繁殖但不會(huì)入侵或破壞組織的微生物。以下現(xiàn)象提示報(bào)告的細(xì)菌為定植菌: 用細(xì)菌報(bào)告提示的抗生素治療,該菌消失,感染癥狀依然存在?;蚴怯捎谠摼耗退?,臨床憑經(jīng)驗(yàn)聯(lián)合用藥,感染癥狀好轉(zhuǎn),但該菌依然存在。污染菌:留取標(biāo)本過(guò)程中,污染了非感染部位的細(xì)菌。按其治療無(wú)效,多次送檢可排除。14各類(lèi)標(biāo)本中的常見(jiàn)病原菌15各類(lèi)標(biāo)本中的常見(jiàn)病原菌16二、藥敏試驗(yàn)與報(bào)告解讀 基本概念 藥敏試驗(yàn)的臨床價(jià)值 報(bào)告解讀與相關(guān)問(wèn)題171.基本概念藥敏試驗(yàn)CLSI與敏感、耐藥、中介抑菌環(huán)直徑與MIC抗生素的等效性與抗菌譜細(xì)菌的耐藥性18藥敏試驗(yàn)概念: 測(cè)定抗感染藥物在體外對(duì)病原微生物有無(wú)抑菌或殺菌作用的方法稱(chēng)為藥物敏感性試
6、驗(yàn),簡(jiǎn)稱(chēng)藥敏試驗(yàn)。目的:檢測(cè)可能引起感染的細(xì)菌對(duì)一種或多種抗菌藥的敏感性。方法:紙片法、稀釋法、Etest法結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn): 目前我國(guó)藥敏試驗(yàn)判斷標(biāo)準(zhǔn)參照CLSI標(biāo)準(zhǔn)文件,CLSI文件是我國(guó)的衛(wèi)生部部頒文件。19CLSI簡(jiǎn)介CLSI(Clinical and Laboratory Standards Institute,臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)研究所 ):以前稱(chēng)NCCLS(美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)),是一個(gè)國(guó)際性的、學(xué)科間的、非營(yíng)利性的、制定標(biāo)準(zhǔn)的教育組織,它促使人們對(duì)標(biāo)準(zhǔn)和指南達(dá)成共識(shí)并促進(jìn)其在醫(yī)療保健系統(tǒng)內(nèi)的應(yīng)用。在為臨床試驗(yàn)與相關(guān)的醫(yī)療問(wèn)題制定標(biāo)準(zhǔn)與指南時(shí),CLSI 實(shí)施了它所特有的達(dá)成一致的過(guò)程
7、,因而得到全世界的認(rèn)可。20CLSI簡(jiǎn)介臨床最常用到CLSI標(biāo)準(zhǔn)文件是抗菌藥物敏感性試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)文件。本文件是針對(duì)需氧菌藥敏的標(biāo)準(zhǔn)指南。其主要內(nèi)容包括需氧菌紙片法和稀釋法藥敏試驗(yàn)的選藥(抗菌藥物分組)、結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)(折點(diǎn))和質(zhì)量控制。CLSI根據(jù)細(xì)菌學(xué)、藥動(dòng)學(xué)和臨床資料設(shè)定并定期修訂抗生素對(duì)不同細(xì)菌敏感折點(diǎn),通過(guò)折點(diǎn)將細(xì)菌分為敏感(S)、中介(I)、耐藥(R)。CLSI最新版本M100-S1921CLSI文件中關(guān)于敏感、中介、耐藥的定義CLSI.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing;Nineteenth Inf
8、ormational Supplement. M100-S19 ed.2009,28(1):21.22敏感: 最高血藥濃度4倍MIC,使用常規(guī)劑量有效;中介:最高血藥濃度MIC,加大劑量或藥物濃縮部位有效;耐藥:最高血藥濃度MIC,無(wú)效。23CLSI推薦的藥敏試驗(yàn)藥物分組24抑菌環(huán)直徑和最低抑菌濃度(MIC)分界值標(biāo)準(zhǔn)腸桿菌科菌抑菌環(huán)直徑和MIC解釋標(biāo)準(zhǔn)25抑菌環(huán)直徑與MIC抑菌環(huán)直徑:是指含抗菌藥物的紙片能夠抑制所有肉眼可見(jiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)的范圍。 MIC(minimal inhibitory concentration ,最小抑菌濃度):是指在體外試驗(yàn)中,抗菌藥物能抑制培養(yǎng)基中細(xì)菌生長(zhǎng)的最低藥物濃
9、度。是抗菌藥抗菌活性指標(biāo),顯示出藥物抑制病原微生物的能力。26抗生素的等效性與抗菌譜抗生素的等效性:是指用一種相關(guān)抗生素的試驗(yàn)結(jié)果預(yù)測(cè)同類(lèi)抗生素體內(nèi)抗菌活性。如頭孢噻吩與其他一代頭孢具有等效性,可用頭孢噻吩結(jié)果預(yù)測(cè)其他一代頭孢。此特性允許檢測(cè)少數(shù)幾種抗生素而不影響臨床對(duì)其他抗生素的廣泛選擇??咕V:是指細(xì)菌在“野生菌”狀態(tài)下能被抗生素在體內(nèi)達(dá)到有效濃度時(shí)抑制的種類(lèi)。這些細(xì)菌稱(chēng)為對(duì)該抗生素的天然敏感菌。未列在抗菌譜中的細(xì)菌則為天然耐藥菌。27細(xì)菌的耐藥性細(xì)菌耐藥性:是細(xì)菌抵抗抗菌藥物殺菌、抑菌作用的一種防御能力,一種生物學(xué)的表型。天然耐藥(固有耐藥):耐藥性為某種細(xì)菌固有的特點(diǎn)稱(chēng)細(xì)菌的天然或固有
10、耐藥性。天然耐藥非常穩(wěn)定,據(jù)此就可預(yù)測(cè)某一細(xì)菌或可能存在的細(xì)菌對(duì)某種抗生素是否耐藥。獲得性耐藥:由于細(xì)菌獲得耐藥基因,使原來(lái)敏感的細(xì)菌變?yōu)槟退幏Q(chēng)細(xì)菌的獲得性耐藥。獲得性耐藥是目前臨床面臨的最主要的耐藥問(wèn)題。由天然敏感菌基因突變或獲得一段基因片段,使其基因型改變而產(chǎn)生耐藥。獲得性耐藥不斷在變化(其變化頻率與抗生素應(yīng)用相關(guān)),不能預(yù)測(cè),需要做藥敏試驗(yàn)。28常見(jiàn)細(xì)菌的天然耐藥情況馬越,李景云,金少鴻.細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)分析中應(yīng)注意的問(wèn)題.中國(guó)抗生素雜志,2005,30(12):763292.藥敏試驗(yàn)的臨床價(jià)值評(píng)價(jià)抗菌藥物敏感性,新抗菌藥物的藥效學(xué)評(píng)價(jià)。評(píng)價(jià)指標(biāo):MIC、抑菌環(huán)直徑、MIC50、MIC90
11、指導(dǎo)細(xì)菌感染治療時(shí)的抗菌藥物選擇。鑒于獲得性耐藥不斷在變化,天然抗菌譜已無(wú)法指導(dǎo)對(duì)多數(shù)細(xì)菌治療時(shí)的抗菌藥物選擇。因此,病原學(xué)檢查和藥敏試驗(yàn)對(duì)臨床抗感染治療具有重要意義。監(jiān)測(cè)細(xì)菌耐藥性變化,為醫(yī)院制訂預(yù)防措施提供依據(jù)。303.報(bào)告解讀與相關(guān)問(wèn)題 報(bào)告單簡(jiǎn)介 藥敏試驗(yàn)藥物選擇 特殊耐藥機(jī)制的解讀 陰性報(bào)告結(jié)果的解讀 各種標(biāo)本陽(yáng)性結(jié)果的解讀 相關(guān)問(wèn)題與臨床可能的抱怨31革蘭陰性板現(xiàn)有藥物21種32革蘭陽(yáng)性板現(xiàn)有藥物24種3334藥敏試驗(yàn)藥物選擇 藥敏試驗(yàn)藥物選擇原則 代表藥物在藥敏試驗(yàn)中的作用35藥敏試驗(yàn)藥物選擇原則代表性:所選藥物應(yīng)具有代表性及對(duì)同類(lèi)藥物有提示作用,同類(lèi)藥物通常只選擇一種或幾種代表
12、品種 ;預(yù)報(bào)性:選擇藥物可對(duì)抗菌藥物使用或耐藥機(jī)制有提示作用。如金葡菌對(duì)苯唑西林耐藥提示對(duì)所有-內(nèi)酰胺類(lèi)耐藥;革蘭陽(yáng)性球菌耐慶大霉素提示對(duì)氨基糖苷類(lèi)耐藥;肺炎鏈球菌選擇苯唑西林提示青霉素耐藥性。如大腸和克雷伯菌藥敏中選三代頭孢(頭孢他啶、頭孢噻肟)或氨曲南可提示細(xì)菌是否產(chǎn)ESBLs;在腸球菌藥敏中選高濃度慶大霉素或鏈霉素可提示能否采用聯(lián)合用藥方案。特殊性:選擇感染部位有較高濃度的抗菌藥。如尿路感染的尿液標(biāo)本可選擇呋喃妥因,中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的腦脊液可選氯霉素、頭孢呋辛等(能通過(guò)血腦屏障)。36代表藥物在藥敏試驗(yàn)中的作用代表性代表性藥物在藥敏試驗(yàn)中的作用不僅僅局限于該藥物本身, 還代表與其相關(guān)的抗
13、菌藥物37代表藥物在藥敏試驗(yàn)中的作用預(yù)報(bào)性38倪語(yǔ)星,王金良.抗微生物藥物敏感性試驗(yàn)規(guī)范.上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,2002,7-8.39特殊耐藥機(jī)制的解讀常見(jiàn)特殊耐藥表型ESBLs(產(chǎn)超廣譜內(nèi)酰胺酶)MRS(耐甲氧西林葡萄球菌)包括MRSA(耐甲氧西林金黃色葡萄球菌)和MRSCN(耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌)BL(產(chǎn)內(nèi)酰胺酶)HLAR(高水平氨基糖苷類(lèi)耐藥腸球菌)AMPC酶碳青酶烯酶40特殊耐藥機(jī)制的解讀CLSI 規(guī)定不能報(bào)敏感的抗菌藥和細(xì)菌組合CLSI.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing;Ninet
14、eenth Informational Supplement. M100-S19 ed.2009,28(1):23.41陰性報(bào)告結(jié)果的解讀 陰性報(bào)告提示以下可能非感染性疾病感染已治愈感染未治愈,但各種原因?qū)е虏≡w未檢測(cè)出來(lái)采樣運(yùn)送不當(dāng):標(biāo)本采集、送檢、保存不當(dāng),導(dǎo)致病原菌死亡,污染菌大量增殖;抗生素影響:經(jīng)抗菌治療,標(biāo)本中含大量抗生素,病原菌受到傷害,不能正常生長(zhǎng);苛養(yǎng)菌:如嗜血桿菌、軍團(tuán)菌、淋球菌等因培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成份不佳或培養(yǎng)條件限制,導(dǎo)致漏檢;特殊病原體:常規(guī)培養(yǎng)無(wú)法檢測(cè)的病原體如厭氧菌、結(jié)核桿菌、衣原體、支原體、病毒等。檢驗(yàn)技術(shù)受限:實(shí)驗(yàn)室條件和人員技術(shù)影響。42血培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果的解讀臨床
15、因素病史、體征、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、影像學(xué)、病程、其它部位的培養(yǎng)結(jié)果實(shí)驗(yàn)室因素微生物鑒定血培養(yǎng)陽(yáng)性率(陽(yáng)性瓶/總數(shù))每套血培養(yǎng)陽(yáng)性的瓶數(shù)微生物陽(yáng)性檢出時(shí)間菌株種類(lèi)(如凝固酶陰性葡萄球菌) 分子分型技術(shù)(如脈沖場(chǎng)凝膠電泳) 傳統(tǒng)方法(生化、抗菌譜)43痰培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果的解讀痰培養(yǎng)結(jié)果包括:涂片染色結(jié)果、分離致病菌的鑒定結(jié)果、藥敏試驗(yàn)結(jié)果。痰涂片革蘭染色報(bào)告的內(nèi)容白細(xì)胞和鱗狀上皮細(xì)胞數(shù)量。包括白細(xì)胞和鱗狀上皮細(xì)胞數(shù)/低倍鏡、細(xì)胞內(nèi)是否含有細(xì)菌和胞內(nèi)細(xì)菌染色及形態(tài)學(xué)特性。 細(xì)菌學(xué)鏡檢的描述性報(bào)告。痰標(biāo)本直接涂片的目的和意義評(píng)價(jià)標(biāo)本質(zhì)量。判別標(biāo)本是否適合做細(xì)菌培養(yǎng)。初步判定病原菌。判斷病原菌的有無(wú)、數(shù)量及其類(lèi)別
16、。有助于初步報(bào)告、選擇培養(yǎng)基和對(duì)培養(yǎng)結(jié)果的綜合分析。 44痰培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果分析常見(jiàn)有三種情況第一種情況:患者有典型的呼吸道感染癥狀,按細(xì)菌報(bào)告選抗生素療效明顯這類(lèi)患者的痰標(biāo)本共同特征:痰涂片革蘭染色:見(jiàn)大量的白細(xì)胞,并見(jiàn)白細(xì)胞吞噬或伴行大量形態(tài)一致的非上呼吸道正常菌;痰培養(yǎng):生長(zhǎng)大量非上呼吸道正常菌,痰培養(yǎng)與痰涂片所見(jiàn)一致結(jié)論:報(bào)告的細(xì)菌為病原菌。45痰培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果分析第二種情況:患者有典型的呼吸道感染癥狀,按細(xì)菌報(bào)告選用的抗生素治療無(wú)效,改為憑經(jīng)驗(yàn)聯(lián)合用藥這類(lèi)患者痰細(xì)菌檢驗(yàn)時(shí)有如下特征:痰涂片:大量白細(xì)胞,吞噬或伴行的是革蘭陽(yáng)性球菌(形似葡萄球菌)、革蘭染色陰陽(yáng)不定的小球菌或桿菌(形似厭氧菌)
17、、出芽的念珠菌,偶見(jiàn)革蘭陰性桿菌;痰培養(yǎng):生長(zhǎng)大量陰性桿菌,痰涂片所見(jiàn)的大量細(xì)菌不生長(zhǎng)或少量生長(zhǎng),痰涂片鏡檢與痰培養(yǎng)結(jié)果不一致。結(jié)論:報(bào)告的細(xì)菌為定植菌46痰培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果分析第三種情況:患者的感染已基本治愈,做痰檢的目的是希望得到一張陰性報(bào)告作為停止治療、出院的憑證這類(lèi)患者的痰做細(xì)菌檢驗(yàn)時(shí)的特征: 痰涂片:顯示標(biāo)本來(lái)自上呼吸道,大量上皮細(xì)胞,大量陰性桿菌,少量白細(xì)胞。 痰培養(yǎng):生長(zhǎng)大量陰性桿菌,較常見(jiàn)的是綠膿桿菌和不動(dòng)桿菌結(jié)論:報(bào)告的細(xì)菌為定植菌。47痰標(biāo)本細(xì)胞學(xué)篩選標(biāo)準(zhǔn)近年來(lái)推薦判別標(biāo)本合格的簡(jiǎn)單方法是痰標(biāo)本涂片鏡檢10個(gè)白細(xì)胞低倍鏡,就可判斷是基本合格并可用于細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本,尤其是白細(xì)胞減
18、少的患者。全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程第2版,461頁(yè)48衛(wèi)生部北京醫(yī)院推薦的篩選標(biāo)準(zhǔn)注:13類(lèi)不作培養(yǎng),要求重新留取標(biāo)本;4-6類(lèi)為合格標(biāo)本;6類(lèi)為氣管穿刺液時(shí),如未見(jiàn)白細(xì)胞,而鱗狀上皮細(xì)胞10/低倍鏡,亦應(yīng)重新留取標(biāo)本。蔡文成,實(shí)用臨床微生物診斷學(xué),1998,207頁(yè)49痰標(biāo)本半定量培養(yǎng)原因:定性鑒定的培養(yǎng)方法不易區(qū)分感染菌或污染菌;標(biāo)準(zhǔn)定量培養(yǎng)方法繁瑣。方法:三區(qū)劃線接種標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng),每劃一區(qū)后均需火燒接種環(huán),使細(xì)菌在平板上生長(zhǎng)數(shù)逐級(jí)下降。報(bào)告:優(yōu)勢(shì)菌生長(zhǎng)菌落為3+或3+以上,也可分為大量、中等量和少量生長(zhǎng)三種;可以只鑒定和報(bào)告優(yōu)勢(shì)生長(zhǎng)的需氧菌和兼性厭氧菌,只在原始區(qū)生長(zhǎng)的少數(shù)菌不必作常規(guī)鑒定,
19、除非臨床或直接革蘭染色提示可能為感染的病原菌。50痰半定量培養(yǎng)判斷標(biāo)準(zhǔn)及臨床意義感染菌與污染菌51肺部細(xì)菌性感染病原診斷:確定意義 血或胸液培養(yǎng)到病原菌 纖支鏡或人工氣道吸引標(biāo)本 細(xì)菌105cfu/ml(2+) BALF(支氣管肺泡灌洗液):細(xì)菌104cfu/ml(1-2+) PSB(防污染樣本毛刷)、PBALF(防污染灌洗):細(xì)菌103cfu/ml(1+)52肺部細(xì)菌性感染病原診斷:有意義 合格痰標(biāo)本培養(yǎng)致病或條件致病菌3+ 少量生長(zhǎng),但與鏡檢結(jié)果一致 (肺球、流感、卡他莫拉菌) 入院3天內(nèi)多次培養(yǎng)到相同細(xì)菌53肺部細(xì)菌性感染病原診斷:無(wú)意義痰培養(yǎng)到上呼吸道正常菌草鏈、表葡、非致病奈瑟菌、類(lèi)
20、白喉?xiàng)U菌等多種病原菌少量(105CFU/ ml可能為感染;105CFU/ml,革蘭陽(yáng)性菌 104CFU/ml,念珠菌103cfu/ml為診斷尿路感染的標(biāo)準(zhǔn)。55尿培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果的解讀56尿培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果的解讀 以下因素可使尿液中細(xì)菌數(shù)量減少,判斷結(jié)果時(shí)應(yīng)予以注意:使用抗生素治療,細(xì)菌生長(zhǎng)受到抑制;尿液稀釋?zhuān)虮戎?.003,營(yíng)養(yǎng)成分減少,細(xì)菌生長(zhǎng)遲緩;尿pH 8.5,細(xì)菌生長(zhǎng)受阻;尿頻時(shí),膀胱內(nèi)細(xì)菌停留時(shí)間短,菌落數(shù)減少;尿道口消毒液混入標(biāo)本中,影響細(xì)菌繁殖,菌落數(shù)減少;不同種類(lèi)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度不同、營(yíng)養(yǎng)要求不同,菌落計(jì)數(shù)有所不同。57糞便培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果的解讀引起腹瀉的原因:1.細(xì)菌感染2.食物中毒3
21、.菌群失調(diào)58抗生素相關(guān)性腹瀉的實(shí)驗(yàn)室診斷 抗生素相關(guān)性腹瀉的本質(zhì)是腸道菌群失調(diào) 細(xì)菌檢驗(yàn)的現(xiàn)象: 1.未生長(zhǎng)志賀氏菌、沙門(mén)氏菌 2.未生長(zhǎng)真菌 3.未生長(zhǎng)或生長(zhǎng)少量大腸桿菌 4.生長(zhǎng)其它陰性桿菌或陽(yáng)性球菌 這種現(xiàn)象就是腸道菌群失調(diào)59腸道菌群失調(diào)的分類(lèi)I度失調(diào):無(wú)癥狀或癥狀輕微,停藥后自行恢復(fù),無(wú)須治療II度失調(diào):患者腹部不適,食欲不佳;大便糊狀或稀便,次數(shù)明顯增加;為醫(yī)院最常見(jiàn)的菌群失調(diào)類(lèi)型,與I度區(qū)別是停藥后無(wú)法自行恢復(fù);治 療:“先抑后補(bǔ)”,用敏感抗生素殺滅不該大量生長(zhǎng)的細(xì)菌,使其數(shù)量降至原有狀態(tài),2-3天后停藥,給予生態(tài)制劑補(bǔ)充生理菌群(如雙岐桿菌等)III度失調(diào):血水樣便,次數(shù)多達(dá)
22、每天十次以上,;又稱(chēng)菌群交替癥,病原菌最為常見(jiàn)的是難辨梭狀芽孢桿菌,其可產(chǎn)生大量腸毒素;糞便中有肉眼可見(jiàn)膜狀物(壞死腸黏膜脫落),涂片革蘭染色鏡檢見(jiàn)大量G+梭形芽孢桿菌治 療:首選萬(wàn)古霉素,次選滅滴靈。60重視原始標(biāo)本直接涂片 分類(lèi) 血培養(yǎng)涂片 痰涂片 膿、分泌物涂片 意義:全程導(dǎo)航61重視原始標(biāo)本直接涂片培養(yǎng)結(jié)果結(jié)合涂片判斷定植菌或致病菌尿培養(yǎng)分離出3種以上的細(xì)菌,或分離出凝固酶陰性葡萄球菌、革蘭陽(yáng)性棒狀桿菌等非定義為致病菌的細(xì)菌,涂片未見(jiàn)到,應(yīng)在報(bào)告中提示可能是污染細(xì)菌建議結(jié)合臨床表現(xiàn)考慮結(jié)果的參考價(jià)值。眼結(jié)膜拭子分離出凝固酶陰性葡萄球菌,涂片未見(jiàn)到,可能是污染細(xì)菌,應(yīng)建議重送標(biāo)本。前列腺
23、液標(biāo)本分離出凝固酶陰性葡萄球菌或革蘭陽(yáng)性小桿菌,涂片未見(jiàn)到,可能是污染細(xì)菌,應(yīng)建議重送標(biāo)本。當(dāng)涂片中見(jiàn)到的細(xì)菌,并有細(xì)菌吞嗜現(xiàn)象存在,在培養(yǎng)時(shí)分離出該細(xì)菌可推測(cè)為致病菌。62相關(guān)問(wèn)題1如何正確應(yīng)用藥物敏感結(jié)果?正確運(yùn)用藥敏試驗(yàn)結(jié)果應(yīng)考慮以下3個(gè)方面:首先要確定病原菌,如未找到真正的致病菌,藥敏實(shí)驗(yàn)不但不能指導(dǎo)用藥甚至可能誤導(dǎo)臨床;重視耐藥監(jiān)測(cè),這是經(jīng)驗(yàn)用藥的一個(gè)重要的參考;考慮到藥敏試驗(yàn)的局限性:體外報(bào)告敏感的藥物體內(nèi)治療不一定有效,而體外報(bào)告耐藥的藥物體內(nèi)治療不一定無(wú)效。原因:1.分離的細(xì)菌不是真正的致病菌。污染菌?定植菌? 2.藥敏標(biāo)準(zhǔn)的局限性,CLSI制定的藥敏折點(diǎn)不能全面考慮到藥物在體
24、內(nèi)的代謝,導(dǎo)致藥敏標(biāo)準(zhǔn)有時(shí)和療效標(biāo)準(zhǔn)不一致。 3.體外藥敏條件較單一而恒定,而體內(nèi)環(huán)境比較復(fù)雜。根據(jù)藥敏報(bào)告治療可能存在90/60原則即藥敏報(bào)告敏感的藥物90%治療有效,但報(bào)告耐藥的仍有60%有效。 解決方法:1.實(shí)驗(yàn)室應(yīng)與臨床密切配合確定真正的致病菌。 2.根據(jù)藥動(dòng)學(xué)和藥效學(xué)參數(shù)(PK/PD)制訂給藥方案。時(shí)間依賴(lài)型藥物:%TMIC,濃度依賴(lài)型藥物:Cmax/MIC和AUC/MIC。63相關(guān)問(wèn)題2是否MIC越低的藥物越好?答:不一定。因?yàn)椴煌幬飳?duì)同種細(xì)菌,同一藥物對(duì)不同細(xì)菌的折點(diǎn)均可不同,并且若細(xì)菌產(chǎn)生某些特殊耐藥機(jī)制時(shí),即使體外敏感也應(yīng)報(bào)耐藥,另外尚需考慮藥動(dòng)學(xué)和耐受性。因此,不能單純比
25、較MIC值而認(rèn)為MIC越低的藥物就一定越好。 MIC只表示一種藥物對(duì)某一株細(xì)菌抗菌作用的強(qiáng)弱 ,MIC越低(離中介值越遠(yuǎn))說(shuō)明該藥物對(duì)相應(yīng)的病原菌的作用越強(qiáng)。只能比較同一種藥對(duì)同一株菌,若MIC值升高,可認(rèn)為其耐藥性提高。64相關(guān)問(wèn)題3是否所有報(bào)告的細(xì)菌均為病原菌?答:不一定。原因如下:所報(bào)告細(xì)菌為污染菌或定植菌,細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果的臨床意義大小與所取標(biāo)本有關(guān)。如為血液等無(wú)菌標(biāo)本則臨床意義較大,但即使血培養(yǎng)陽(yáng)性也可能為污染菌。某些標(biāo)本易受污染如痰標(biāo)本易于受咽喉部攜帶菌的污染,尿培養(yǎng)易受下尿道、尿道口寄居菌污染??赡転閼?yīng)用抗菌藥后的菌群交替或菌群失調(diào)。特別是原為復(fù)數(shù)菌感染時(shí),針對(duì)優(yōu)勢(shì)菌治療一段時(shí)間后可
26、能非優(yōu)勢(shì)上升為優(yōu)勢(shì)菌,或廣譜抗菌藥治療后可能出現(xiàn)真菌感染。 有種以上病原菌時(shí)因生長(zhǎng)速度不同、營(yíng)養(yǎng)要求不同,培養(yǎng)結(jié)果不能真實(shí)反映病原菌的種類(lèi)、數(shù)量。65相關(guān)問(wèn)題4為什么有時(shí)痰涂片結(jié)果與痰培養(yǎng)結(jié)果不一致?由于痰標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)和涂片時(shí)選取的部位不一致;某些快生長(zhǎng)菌所占比例并不多,但由于生長(zhǎng)速度快、營(yíng)養(yǎng)要求低,能在培養(yǎng)過(guò)程中迅速變?yōu)閮?yōu)勢(shì)菌而掩蓋其他菌的生長(zhǎng);標(biāo)本從采集到接種的時(shí)間過(guò)長(zhǎng),造成部分苛養(yǎng)菌死亡,在涂片中看到的只是菌的殘骸而非活菌。66臨床對(duì)細(xì)菌室可能的抱怨 理由 報(bào)告發(fā)出時(shí)間太慢; 陽(yáng)性率太低,臨床符合率差; 結(jié)論:細(xì)菌室水平太差,還是憑經(jīng)驗(yàn)用藥!67臨床對(duì)細(xì)菌室可能的抱怨報(bào)告發(fā)出時(shí)間太慢分析
27、原因:細(xì)菌生長(zhǎng)慢,生長(zhǎng)需要適宜的條件。細(xì)菌一般以二分裂法進(jìn)行無(wú)性繁殖,在適宜條件下,多數(shù)細(xì)菌分裂一次需要20-30分鐘,結(jié)核分枝桿菌需18-20小時(shí)才分裂一次。對(duì)數(shù)期(鑒定、藥敏常用該期的培養(yǎng)物)一般在培養(yǎng)后8-18小時(shí)。普通細(xì)菌培養(yǎng)一般需48小時(shí)(培養(yǎng)需12-24小時(shí),鑒定藥敏需要12-24小時(shí));酵母樣真菌陽(yáng)性報(bào)告需要2-3天,陰性報(bào)告需5天;絲狀真菌(霉菌)陰性報(bào)告需2-4周;血培養(yǎng)陽(yáng)性報(bào)告需3天以上,陰性報(bào)告需5-7天。解決方法:分級(jí)報(bào)告;急診報(bào)告;非培養(yǎng)方法68臨床對(duì)細(xì)菌室可能的抱怨陽(yáng)性率太低,臨床符合率差分析原因:標(biāo)本采集、送檢不規(guī)范,這是關(guān)鍵原因!不合格的標(biāo)本直接導(dǎo)致病原菌分離率降低。操作程序不規(guī)范,未進(jìn)行直接涂片,未嚴(yán)格執(zhí)行拒收制度等也是重要原因。微生物和人體關(guān)系復(fù)雜。致病和條件致病,定植和感染等,導(dǎo)致細(xì)菌室判斷病原菌困難,要證明培養(yǎng)結(jié)果與感染相關(guān)性是臨床微生物檢驗(yàn)所面臨的難題。已使用抗菌藥,病原菌受到傷害,不能正常生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)室條件有限,苛養(yǎng)菌漏檢,常規(guī)培養(yǎng)不能檢測(cè)厭氧菌、結(jié)核桿菌、衣原體、支原體、病毒等.解決方法:拒收制度;規(guī)范操作;
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