細胞工程提綱

1、專題二 細胞工程 2.1.1植物細胞工程的基本技術1.理論基礎（原理）：_ ，即具有某種生物全部_的任何一個細胞都具有發(fā)育成_的潛能。全能性表達的難易程度：受精卵 _ 生殖細胞 _ 體細胞；植物細胞 _ 動物細胞2.植物組織培養(yǎng)技術過程離體的植物器官、組織或細胞，可以_形成_，之后誘導其_生成_或_，進而發(fā)育成完整的小植株。3.植物細胞表現(xiàn)全能性，需要的條件是_、_。4.脫分化就是讓_的細胞，經(jīng)過誘導后，失去其特有的_而轉(zhuǎn)變成_細胞的過程。植物組織培養(yǎng)選取_，這些組織最容易誘導脫分化。5.愈傷組織是指一種高度_的呈_狀態(tài)的薄壁細胞。培養(yǎng)愈傷組織最初應該_培養(yǎng)。6. 再分化過程中細胞分裂素和生長

2、素比例不同結(jié)果也不同：細胞分裂素比例低側(cè)重_，細胞分裂素比例高側(cè)重于_，一樣多就只生長不分化。7. 植物體細胞雜交就是將_的植物細胞，在一定條件下融合成_，并將其培育成新的植物體的技術。8. 植物細胞融合首先要去除細胞壁，常采用的方式是_，需要_酶。植物體細胞融合實質(zhì)上是不同植物體細胞的_融合的過程。一般用物理法和化學法來促使其融合，物理方法有_、振動、_等，化學方法用_作為誘導劑。9. 植物細胞融合成功的標志為_。10. 植物體細胞雜交的意義：克服不同種生物_的障礙。2.1.2 植物細胞工程的實際應用1.微型繁殖技術的優(yōu)點：保持優(yōu)良品種的_，高效快速實現(xiàn)種苗的大量繁殖。2.作物脫毒應該選取植

3、物_進行組織培養(yǎng)。3.人工種子就是以_得到的_、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)人工薄膜包裝得到的種子。4. 單倍體育種過程：對植物花粉進行_，對其幼苗時期進行_，得到了正常的純合二倍體植株。5.在植物組織培養(yǎng)中，培養(yǎng)細胞容易受到_和_的影響而產(chǎn)生突變體，可以從有用的突變體中選育出新品種。6.細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，對植物細胞進行培養(yǎng)，只培育到_階段，生產(chǎn)對人們有利的產(chǎn)物。2.2.1 動物細胞培養(yǎng)和核移植技術1. 動物細胞培養(yǎng)（1）動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關的_，將它分散成_，然后放在適宜的_中，讓這些細胞_。（2）動物細胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）剪碎用

4、_處理分散成_制成_轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行_培養(yǎng)懸液中分散的細胞很快就_當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為_重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分瓶繼續(xù)_培養(yǎng)。（3）傳代培養(yǎng)的細胞一般傳至_代后就不易傳下去了，_代至_代細胞核型可能會發(fā)生變化。當繼續(xù)傳代培養(yǎng)時，少部分細胞獲得_性，朝著等同于_方向發(fā)展。所以目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常為_代以內(nèi)。（4）動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件:_：培養(yǎng)液應進行無菌處理，通常還要，添加一定量的_，以防培養(yǎng)過程中的污染。應定期更換培養(yǎng)液，防止_對細胞自身造成危害。營養(yǎng)：培養(yǎng)基成分有糖、氨基酸、促生長因子、_、微量元素等。通常需加入

5、_等天然成分。溫度：_和pH：_ 。氣體環(huán)境：95%空氣5%CO2 。O2是_所必需的，CO2的主要作用_。（5）動物組織培養(yǎng)可以用在有重要價值的蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)，如燒傷病人的_、有毒物質(zhì)的檢測等。2.動物體細胞核移植技術和克隆動物（1）哺乳動物核移植可以分為_核移植（比較容易）和_核移植（比較難）。應用的原理為_。（2）體細胞核移植的大致過程是： 卵巢卵母細胞體外培養(yǎng)至_吸出_和第一極體將供體細胞注入去核的卵母細胞通過_使兩細胞融合激活重組細胞使其發(fā)育為_用_技術將胚胎移入代孕母牛體內(nèi)生出與供體奶牛遺傳物質(zhì)_的犢牛。（3）以上過程屬于生殖性克隆，若取病人的體細胞核進行核移植，從重組的早期

6、胚胎中獲得_，體外誘導分化形成_，用于自體移植，則稱為_。（4）選用去核卵(母)細胞的原因：卵(母)細胞比較_，容易操作；卵(母)細胞_多，營養(yǎng)豐富。卵母細胞必須選用_細胞，原因是該時期_ _。2.2.2 動物細胞融合與單克隆抗體1.動物細胞融合（1）動物細胞融合也稱_，是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的_細胞，稱為雜交細胞。（2）動物細胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同，誘導方法類似，常用的誘導因素有_ 、_、_等。（3）動物細胞融合突破了_的局限，使_成為可能。2.單克隆抗體（1）制備過程：將_注入小鼠體內(nèi)，分離_細胞，與小鼠_細

7、胞融合，在選擇培養(yǎng)基上篩選出_，進行克隆化培養(yǎng)和_，篩選出能分泌所需_的細胞，將其在體外培養(yǎng)或注射到_內(nèi)增值，就可以提取出大量單克隆抗體。（2）雜交瘤細胞的特點：既能_，又能產(chǎn)生專一的抗體。（3）單克隆抗體的優(yōu)點：_、_，并可能大量制備。（5）應用： 作為_：準確識別各種抗原物質(zhì)的細微差異，并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合。 用于治療疾病和運載藥物：主要用于癌癥治療，可制成“_”，借助_的導向作用，將藥物_癌細胞所在位置。答案：2.1.11.細胞的全能性 遺傳信息 完整生物體 2.脫分化 愈傷組織 再分化 胚狀體 從芽 3.植物體的器官或組織處于離體狀態(tài) 有一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件4.已經(jīng)

8、分化 結(jié)構(gòu)和功能 未分化 根尖、莖尖、形成層部位等分生組織5.液泡化無定形 避光6.生根 生芽7. 不同種 雜種細胞8. 酶解法纖維素酶和果膠 原生質(zhì)體 離心 電激 聚乙二醇9.產(chǎn)生新的細胞壁10. 遠緣雜交不親和2.1.21.遺傳特性 2.分生區(qū)附近如莖尖3.植物組織培養(yǎng) 胚狀體4. 花藥離體培養(yǎng) 秋水仙素處理5.培養(yǎng)條件 外界壓力6.愈傷組織2.2.11.（1）組織 單個細胞 培養(yǎng)基 生長和增殖 （2）胰蛋白酶或膠原蛋白酶 單個細胞 細胞懸液 原代 貼壁生長 接觸抑制 傳代（3）10 10 50 不死 癌細胞 10（4）無菌、無毒的環(huán)境 抗生素 細胞代謝產(chǎn)物積累 無機鹽 血清、血漿 36.50.5 7.2-7.4 細胞代謝 維持培養(yǎng)液的pH （5）皮膚移植2.（1）胚胎細胞 體細胞 動物細胞核的全能性（2）大 細胞質(zhì)（2）減數(shù)第二次分裂中期 顯微操作 細胞核 電刺激 重組胚胎 胚胎移植 基本相同（3）胚胎干細胞 相應的組織、器官 治療性克隆（4）大，易操作 細胞質(zhì) 減數(shù)第二次分裂中期 含有促使細