高效毛細(xì)管電泳法

1、第十三章 高效毛細(xì)管電泳法 電泳是溶液中帶電粒子在電場力作用下，以不同的速度向電荷相反方向遷移的現(xiàn)象。利用這種現(xiàn)象對(duì)化學(xué)和生物化學(xué)組分進(jìn)行分離分析的方法稱之為電泳法。電泳法已有近百年歷史，傳統(tǒng)的電泳技術(shù)由于受到焦耳熱的限制，只能在低電場強(qiáng)度下進(jìn)行電泳操作，分離時(shí)間長，效率低。上世紀(jì)80年代初, 細(xì)徑毛細(xì)管被用于電泳，由此產(chǎn)生了一種新型的分析技術(shù)毛細(xì)管電泳（CE）,也稱為高效毛細(xì)管電泳（HPCE）。 CE開始主要用于蛋白質(zhì)，多肽的分析,以后逐漸被廣泛應(yīng)用于生物，化學(xué)，醫(yī)藥，環(huán)保等領(lǐng)域。它具有分離效率高，分析速度快，樣品及試劑用量少,潔凈無污染等特點(diǎn), 和高效液相色譜法成為分析化學(xué)中互補(bǔ)的技術(shù)。隨

2、著生命科學(xué)的發(fā)展，毛細(xì)管電泳技術(shù)也有了廣闊的發(fā)展空間。目前，不同分離模式的毛細(xì)管電泳技術(shù)正成為最重要的醫(yī)學(xué)生物樣品分離分析手段。1第一節(jié) 毛細(xì)管電泳的特點(diǎn)和分類一、電泳和色譜毛細(xì)管電泳和色譜都是一種分離分析方法，兩者比較如下：1.分離原理 電泳是溶液中帶電粒子在電場力作用下發(fā)生定向運(yùn)動(dòng)，因粒子所帶電荷數(shù)、形狀、大小等不同，導(dǎo)致不同的遷移速度而分離。色譜是不同組分在流動(dòng)相的推動(dòng)下，由于在固定相流動(dòng)相中的分配系數(shù)不同，導(dǎo)致不同的遷移速度而分離。但某些毛細(xì)管電泳的分離模式也包含了色譜的分離機(jī)制。2.分離過程 電泳和色譜的分離過程都是差速遷移過程，可用相同的理論來描述。色譜中所用的一些名詞概念和基本理

3、論，如保留值、塔板理論、速率理論等均可借用于毛細(xì)管電泳中。3.儀器流程2二、毛細(xì)管電泳的特點(diǎn)1. 柱效高高效毛細(xì)管電泳的柱效遠(yuǎn)高于高效液相色譜，理論塔板數(shù)高達(dá)幾十萬塊/米，特殊柱子可以達(dá)到數(shù)百萬。色譜儀和電泳儀（HPLC和CE），都包括進(jìn)樣部分、分離柱、檢測器和數(shù)據(jù)處理等。32.消耗低CE所需樣品為nl級(jí), 流動(dòng)相用量也只需幾毫升, 而HPLC所需樣品為l級(jí), 流動(dòng)相則需幾百毫升乃至更多。3.速度快一般幾十秒至十幾分，最多半小時(shí)，即可完成一個(gè)試樣的分析。4.應(yīng)用廣泛 可用于有機(jī)物、無機(jī)物、生物大分子等的分離和分析，在藥學(xué)、化學(xué)、環(huán)境保護(hù)、材料科學(xué)特別是在分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。三

4、、毛細(xì)管電泳的分類按分離模式分類，常用的技術(shù)有六種： 毛細(xì)管區(qū)帶電泳，膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜，毛細(xì)管凝膠電泳，毛細(xì)管等電聚焦，毛細(xì)管等速電泳 ，毛細(xì)管電色譜 4毛細(xì)管區(qū)帶電泳是CE中最基本、應(yīng)用最普遍的一種模式。第二節(jié) 基本原理一、電泳和電泳淌度 在一定電場強(qiáng)度作用下，溶質(zhì)帶電粒子在溶液中的定向移動(dòng)（遷移），這種現(xiàn)象稱為電泳。帶電粒子在電場中遷移時(shí)，所受的電場力為q: 溶質(zhì)離子所帶的有效電荷 E: 電場強(qiáng)度帶電粒子在溶液中運(yùn)動(dòng)時(shí)受到的阻力即摩擦力為是電泳速度1. 電泳與電泳速度5 f為摩擦系數(shù)，其大小與帶電粒子的大小、形狀以及介質(zhì)粘度有關(guān)。對(duì)于球形離子，f = 6；對(duì)于棒狀離子，f = 4。式中，

5、是溶質(zhì)離子的動(dòng)力學(xué)半徑，是電泳介質(zhì)的粘度。平衡時(shí)，電場力和摩擦力相等，即qE = fvep 電泳速度為不同物質(zhì)在同一電場中，由于它們的有效電荷、形狀大小的差異，它們的電泳速度不同，所以可能實(shí)現(xiàn)分離 6我們把溶質(zhì)在給定溶液中和單位電場強(qiáng)度下的電泳速度稱為電泳淌度，用ep表示。所以淌度不同是電泳分離的內(nèi)因和前提。溶質(zhì)粒子的電泳速度決定于粒子淌度和電場強(qiáng)度的乘積，vep epE2電泳淌度 在一定條件下，不同粒子的形狀、大小以及所帶電量都可能有差別，則電泳淌度也可能不同。73有效淌度 在實(shí)際溶液中，離子活度系數(shù)、溶質(zhì)分子的離解程度和溶液的酸度等均對(duì)離子的淌度有影響，這時(shí)的淌度稱為有效淌度，用ef 表示

6、。二、電滲和電滲流1電滲現(xiàn)象 當(dāng)固體與液體相接觸時(shí)，如果固體表面因某種原因帶一種電荷，則因靜電引力使其周圍液體帶相反電荷，當(dāng)液體兩端施加一定電壓時(shí)，就會(huì)發(fā)生液體相對(duì)于固體表面的移動(dòng)，我們把這種液體相對(duì)于帶電固體表面移動(dòng)的現(xiàn)象叫做電滲。8 目前，高效毛細(xì)管電泳大多使用石英毛細(xì)管，在內(nèi)充緩沖液PH2時(shí)，管壁的硅醇基（SiOH）開始部分離解成硅醇基陰離子（SiO），使管壁帶負(fù)電荷，并由此吸引溶液中的陽離子，在管壁和溶液之間形成雙電層。毛細(xì)管內(nèi)壁的雙電層及其電勢(shì)分布見下圖。9 在外電場的作用下，帶正電荷的溶液表面及擴(kuò)散層中的陽離子向陰極移動(dòng)。由于這些陽離子實(shí)際上是溶劑化的，故將引起柱中的溶液整體向負(fù)極

7、移動(dòng)，這就是毛細(xì)管電泳中的電滲現(xiàn)象。2。電滲流（electroosmotic flow，EOF） 電滲現(xiàn)象中整體移動(dòng)著的液體叫電滲流。103. 電滲流的大小和方向電滲流的大小用電滲流速度vos表示，其大小決定于電滲淌度os和電場強(qiáng)度E。即式中，、分別是電泳介質(zhì)的介電常數(shù)和粘度, 毛細(xì)管壁的Zeta電位，它近似等于擴(kuò)散層與吸附層界面上的電位。一般來說，擴(kuò)散層內(nèi)凈電荷數(shù)（正電荷數(shù)）越多、擴(kuò)散層厚度越薄，Zeta電位越大。11實(shí)際電泳分析，可在實(shí)驗(yàn)測定相應(yīng)參數(shù)后，按下式計(jì)算 Lef毛細(xì)管有效長度； tos電滲流標(biāo)記物（中性物質(zhì)）的遷移時(shí)間。在一般情況下，電滲流的速度是電泳速度的57倍。 電滲流的方向

8、取決于毛細(xì)管內(nèi)壁表面電荷的性質(zhì)。一般情況下，石英毛細(xì)管內(nèi)壁表面帶負(fù)電荷，則電滲流帶正電荷，向負(fù)極移動(dòng)。但如果將毛細(xì)管內(nèi)壁改性，比如在在內(nèi)壁表面涂漬或鍵合一層陽離子表面活性劑，將使壁表面帶正電荷，則電滲流帶負(fù)電荷，向正極移動(dòng)。4.電滲流的流形12 由于擴(kuò)散層中的過剩陽離子均勻分布，所以在外電場驅(qū)動(dòng)下產(chǎn)生的電滲流為平流，即塞式流形。液體流動(dòng)速度除在管壁附近因摩擦力迅速減小到零以外，其余部分幾乎處處相等。這一點(diǎn)和HPLC中靠泵驅(qū)動(dòng)的流動(dòng)相的流形完全不同。13 HPLC流動(dòng)相的流形為拋物線形的層流，在管壁處的速度為零，管中心的速度是平均速度的2倍。 平流引起的譜峰展寬很小，而層流引起的譜峰展寬較大。電

9、滲流呈平流是毛細(xì)管電泳能獲得較HPLC更高分離效率的重要原因。4. 電滲流的作用在一般情況下，電滲流流向負(fù)極，電滲流速度約等于一般離子電泳速度的57倍。所以，各種電性物質(zhì)在毛細(xì)管中的遷移速度為兩種速度的矢量和，稱為表觀電泳速度，用vap表示。14陽離子： vapvos+vep陰離子： vapvosvep中性分子： vapvos 當(dāng)把試樣從陽極端注入到毛細(xì)管內(nèi)時(shí)，不同電性的粒子將按不同的速度向負(fù)極遷移，從負(fù)極端先后流出毛細(xì)管。出峰次序是： 陽離子中性分子陰離子中性分子與電滲流速度相同，不能互相分離。vap=apE=(osep)Eap稱為表觀淌度。ap=osep15電滲流具有像HPLC中泵一樣的作

10、用，推動(dòng)離子前進(jìn)，加上不同離子電泳速度和方向的差異，完成陽離子、陰離子和中性離子的分離。改變電滲流的大小和方向，可以改變分離效率和選擇性。這是HPCE中優(yōu)化分離的重要因素。電滲流在HPCE 的分離中起著極其重要的作用：電滲流的微小變化影響分離結(jié)果的重現(xiàn)性。電泳中影響電滲流的因素很多，應(yīng)設(shè)法控制電滲流的恒定。16三、HPCE中影響電滲流的因素1.電場強(qiáng)度的影響 電滲流速度和電場強(qiáng)度成正比，當(dāng)毛細(xì)管長度一定時(shí)，電滲流速度正比于工作電壓。2.毛細(xì)管材料的影響 不同材料毛細(xì)管的表面電荷特性不同，產(chǎn)生的電滲流大小不同；173. 電解質(zhì)溶液性質(zhì)的影響（1）溶液pH的影響 對(duì)于石英毛細(xì)管，溶液pH增高時(shí)，表

11、面電離多，電荷密度增加，管壁zeta電勢(shì)增大，電滲流增大，pH=7，達(dá)到最大； pH3，完全被氫離子中和，表面電中性，電滲流為零。分析時(shí)，采用緩沖溶液來保持pH穩(wěn)定。（2）陰離子的影響 在其他條件相同，濃度相同而陰離子不同時(shí)，毛細(xì)管中的電流有較大差別，產(chǎn)生的焦耳熱不同。 緩沖溶液離子強(qiáng)度，影響雙電層的厚度、溶液黏度和工作電流，明顯影響電滲流大小。緩沖溶液離子強(qiáng)度增加，電滲流下降。18194. 溫度的影響 毛細(xì)管內(nèi)溫度的升高，使溶液的黏度下降，電滲流增大。 溫度變化來自于“焦耳熱” 焦耳熱：毛細(xì)管溶液中有電流通過時(shí)，產(chǎn)生的熱量； HPCE中的焦耳熱與背景電解質(zhì)的摩爾電導(dǎo)、濃度及電場強(qiáng)度成正比。

12、溫度每變化1，將引起背景電解質(zhì)溶液黏度變化2%3%；205. 添加劑的影響（1）加入濃度較大的中性鹽，如K2SO4，溶液離子強(qiáng)度增大，使溶液的黏度增大，電滲流減小。（2）加入表面活性劑，可改變電滲流的大小和方向 某些陽離子表面活性劑使電滲流減小，某些陰離子表面活性劑，如十二烷基硫酸鈉（SDS），可以使壁表面負(fù)電荷增加，電滲流增大（3）加入有機(jī)溶劑如甲醇、乙腈，使電滲流增大。2122四、柱效和分離度（一）理論塔板數(shù)和塔板高度引入與色譜相似的處理和表達(dá)方法，用理論塔板數(shù)n和塔板高度H表示柱效。n可以直接由電泳圖求出tm為起點(diǎn)到譜峰最高點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的時(shí)間，稱為遷移時(shí)間。因?yàn)槊?xì)管中，沒有固定相，不存在組

13、分在固定相中分配和保留。塔板高度H為：Lef為進(jìn)樣口到檢測器的距離, 為有效柱長.檢測器在柱上，LefL23（二）譜帶展寬在理想的情況下，縱向擴(kuò)散是HPCE中導(dǎo)致譜帶展寬的唯一因素。根據(jù)范第母特方程1. 縱向擴(kuò)散D是溶質(zhì)組分的擴(kuò)散系數(shù)V是電壓，L是毛細(xì)管全長。縱向擴(kuò)散與擴(kuò)散系數(shù)成正比，與表觀電泳速度成反比。若只考慮縱向擴(kuò)散，則理論塔板數(shù)為由上式可知，n與電場強(qiáng)度E（或電壓V）成正比，與溶質(zhì)的擴(kuò)散系數(shù)成反比。24 在HPCE中，溶質(zhì)在幾萬至十幾萬伏的電壓下，遷移速度較快，縱向擴(kuò)散小，柱效高。因?yàn)榉肿釉酱髷U(kuò)散系數(shù)越小，所以毛細(xì)管電泳特別適合分析生物大分子。2. 自熱 自熱是指當(dāng)毛細(xì)管兩端施加電壓，

14、電流通過緩沖液時(shí)產(chǎn)生的熱量，也稱焦耳熱。焦耳熱通過管壁向周圍環(huán)境散熱，管中心溫度最高，由中心向管壁溫度逐漸下降。溶液的粘度與溫度有關(guān)，溫度高粘度小，因而管中心的遷移速度最快，管壁附近的遷移速度最慢，破壞了溶質(zhì)帶的扁平流輪廓，導(dǎo)致溶質(zhì)區(qū)帶展寬。在實(shí)際電泳過程中，出了溶質(zhì)的縱向擴(kuò)散外，還存在很多引起譜峰展寬的因素，如自熱、吸附等。小內(nèi)徑毛細(xì)管散熱面積大，溫度梯度小，譜峰展寬小。3. 吸附25 毛細(xì)管內(nèi)壁對(duì)靠近內(nèi)壁的溶質(zhì)粒子的吸附，使遷移速度減慢，導(dǎo)致譜峰變寬。造成管內(nèi)壁表面吸附的主要原因有兩個(gè): 在電解質(zhì)溶液PH大于3時(shí)，石英毛細(xì)管壁帶負(fù)電荷，因靜電引力溶質(zhì)陽離子被管壁吸附。蛋白質(zhì)、多肽帶電荷數(shù)多

15、，有較多的疏水基，有較強(qiáng)的疏水作用，被極性水溶劑向管壁擠壓，在PH小于3，管壁呈電中性時(shí)尤為明顯。 細(xì)內(nèi)徑毛細(xì)管柱，一方面有利于散熱，另一方面比表面積大，又增加了溶質(zhì)吸附的機(jī)會(huì)。（三）分離度毛細(xì)管中的分離度也用R表示，可按譜圖直接由下式計(jì)算：26分離度也可表示為柱效的函數(shù)：影響分離度的主要因素：工作電壓V；毛細(xì)管有效長度與總長度比；表觀淌度差。第三節(jié) 毛細(xì)管電泳儀 毛細(xì)管電泳儀結(jié)構(gòu)比高效液相色譜儀 簡單。CE只需高壓直流電源、進(jìn)樣裝置、毛細(xì)管和檢測器等。前三個(gè)部件均易實(shí)現(xiàn), 困難之處在于檢測器。272829一、高壓電源（1）030 kV 穩(wěn)定、連續(xù)可調(diào)的直流電源；（2）具有恒壓、恒流、恒功率輸

16、出；（3）電場強(qiáng)度程序控制系統(tǒng)；（4）電壓穩(wěn)定性：0.1%；（5）電源極性易轉(zhuǎn)換；二、電極槽CE的電極通常由直徑0.5 1 mm的鉑絲制成，電極槽通常是帶螺口的小玻璃瓶或塑料瓶（1 5 mL不等），要便于密封。30三、進(jìn)樣系統(tǒng) 一般的進(jìn)樣方式是電動(dòng)進(jìn)樣和壓力進(jìn)樣。 電動(dòng)進(jìn)樣是將毛細(xì)管柱的一端及其相應(yīng)端的電極從緩沖池中移出，放入試樣杯中，然后在一準(zhǔn)確時(shí)間范圍內(nèi)施加電壓，使試樣因離子移動(dòng)和電滲流進(jìn)入毛細(xì)管柱。 壓力進(jìn)樣是用壓差使試樣溶液進(jìn)入毛細(xì)管。產(chǎn)生壓差的辦法可以采用在出口端抽真空，或者通過進(jìn)樣端加壓。 進(jìn)樣體積一般在納升級(jí)，進(jìn)樣長度必須控制在毛細(xì)管總長度的1%2%，否則將影響分離效率。31四、

17、毛細(xì)管柱 常用彈性石英毛細(xì)管，內(nèi)徑50m和75m兩種使用較多（毛細(xì)管電色譜有時(shí)用內(nèi)徑再大些的毛細(xì)管）。細(xì)內(nèi)徑分離效果好，且焦耳熱小，允許施加較高電壓，但若采用柱上檢測因光程較短，檢測限比較粗內(nèi)徑管要差。 毛細(xì)管長度稱為總長度，根據(jù)分離度的要求，可選用20100cm長度，進(jìn)樣端至檢測器間的長度稱為有效長度。 毛細(xì)管柱中充入緩沖溶液，柱的兩端置于兩個(gè)緩沖池中。毛細(xì)管常盤放在管架上控制在一定溫度下操作。3233五、檢測系統(tǒng) 紫外-可見光分光檢測、激光誘導(dǎo)熒光檢測、電化學(xué)檢測和質(zhì)譜檢測均可用作毛細(xì)管電泳的檢測器，其中以紫外-可見光分光光度檢測器應(yīng)用最廣。 將毛細(xì)管接近出口端的外層聚合物剝?nèi)ゼs2mm一段

18、，使石英管壁裸露，毛細(xì)管兩側(cè)各放置一個(gè)石英聚光球，使光源聚焦在毛細(xì)管上，透過毛細(xì)管到達(dá)光電池。六、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)與一般色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)基本相同。3435第四節(jié) 分離模式及其分離條件的選擇一、毛細(xì)管區(qū)帶電泳（CZE） 毛細(xì)管區(qū)帶電泳也稱為自由溶液溶液區(qū)帶電泳,是毛細(xì)管電泳中最簡單，應(yīng)用最廣泛的一種形式。這種電泳模式的特征是整個(gè)系統(tǒng)都用同一種緩沖溶液充滿。帶電粒子的遷移速度是電泳和電滲流速度的矢量和。不同離子按照淌度的差異,以不同的速度在電解質(zhì)中移動(dòng), 而實(shí)現(xiàn)分離。（一）分離原理 36 在一般情況下，電滲流流向負(fù)極，電滲流速度約等于一般離子電泳速度的57倍。當(dāng)把試樣從陽極端注入到毛細(xì)管內(nèi)時(shí)，不同電性

19、的粒子將按不同的速度向負(fù)極遷移，從負(fù)極端先后流出毛細(xì)管。首先是最快的陽離子，緊接著是依次減慢的陽離子，然后是全部的中性分子在一個(gè)區(qū)域出現(xiàn)，最后是最慢的陰離子，緊接著的是依次加快的陰離子。3738（二）分離條件的選擇1緩沖液 電泳過程在緩沖液中進(jìn)行，緩沖液的選擇直接影響粒子的遷移和最后的分離.緩沖液的選擇通常須遵循下述要求： （l）在所選擇的pH范圍內(nèi)有很好的緩沖容量； （2）在檢測波長處無吸收或吸收值低； （3）自身的淌度低，即分子大而荷電小，以減少電流的產(chǎn)生 （4）為了達(dá)到有效的進(jìn)樣和合適的電泳淌度，緩沖液的pH值至少必須比被分析物質(zhì)的等電點(diǎn)相差l個(gè)pH單位。 39(5)只要條件允許就盡可能

20、采用酸性緩沖液，在低pH值下，吸附和電滲流都很小，毛細(xì)管涂層的壽命較長。在配制毛細(xì)管電泳用的緩沖液時(shí)，必須使用高純蒸餾水和試劑，另外用前要用0.45m的濾器過濾以除去顆粒等。40名 稱pKa名 稱pKa磷酸檸檬酸 甲酸鹽2-羥基異丁酸琥珀酸鹽 谷氨酸乙酸鹽2-N-嗎啉乙磺酸N-2-乙酰氨基-2-亞氨基雙乙酸L,3-雙三（羥甲基）甲氨基丙烷哌嗪-N,N-雙乙磺酸 2-（2-氨基-2-氧代乙基）氨基乙磺酸3-N-嗎咪-2-羥基丙磺酸咪唑3-N-嗎啉-丙磺酸2.l23.063.753.974.l94.324.756.156.606.806.806.906.907.007.20.N-三羥甲基甲基-2-

21、氨基乙磺酸N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙磺酸N-2-羥乙基哌嗪-N-2-羥丙磺酸N-（2-羥甲基）乙基甘氨酸甘氨酰胺，鹽酸化物N-甘氨酰甘氨酸三（羥甲基）氯基甲烷N,N-雙2-羥乙基甘氨酸嗎啉硼酸鹽2-N-環(huán)己氨基乙磺酸3（3-膽酰胺丙基）-二甲基銨- 2-羥基-1-丙磺酸內(nèi)鹽3-環(huán)己氨基-1-丙磺酸7.507.558.008.158.208.258.308.358.499.249.509.6010.40 一些常用緩沖溶液及其pKa值412添加劑 在CZE分離中，常常還在緩沖溶液中添加某種試劑，通過它與管壁或與樣品溶質(zhì)之間的相互作用，改變管壁或溶液相物理化學(xué)特性，進(jìn)一步優(yōu)化分離條件，提高分離選

22、擇性和分離度。 常用添加劑有表面活性劑、有機(jī)溶劑、中性鹽類、兩性物質(zhì)和手性選擇劑等， 3工作電壓 電壓是控制柱效n、分離度Rs和遷移時(shí)間tm的重要因素。在焦耳熱可以忽略的條件下，外加電壓增大，分離時(shí)間縮短、柱效和分離度提高42但電壓升高，產(chǎn)生的焦耳熱增多，在不能有效地驅(qū)散所產(chǎn)生的焦耳熱情況下，柱溫顯著升高，工作電流增大，柱效和分離度降低。以在CE分離條件優(yōu)化時(shí)，除了采取有效的散熱措施外，選擇一種合適的條件，使在此條件下允許使用較高電壓，而不致產(chǎn)生過高的電流和過多的焦耳熱，是非常重要的。 二、膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜（MECC） 膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜是在緩沖溶液中加入濃度高于膠束臨界濃度的表面活性劑，膠

23、束相在分離中起到了準(zhǔn)固定相的作用，是電泳技術(shù)與色譜技術(shù)的結(jié)合。43 把離子型表面活性劑 (如十二烷基硫酸鈉)加到緩沖液中, 當(dāng)其濃度超過臨界濃度后就形成有一疏水內(nèi)核、外部帶負(fù)電的膠束。雖然膠束帶負(fù)電, 但一般情況下電滲流的速度仍大于膠束的遷移速度, 故膠束將以較低速度向負(fù)極移動(dòng)。（一）分離原理 44 帶電粒子不僅可以由于淌度差異而分離，同時(shí)又可基于在水相和膠束相(準(zhǔn)固定相)之間產(chǎn)生分配差異而分離。 中性粒子按其疏水性不同，在緩沖溶液和膠束之間分配。疏水性強(qiáng)、親水性弱的粒子分配到膠束中的多，分配到緩沖溶液中的少；反之，親水性強(qiáng)、疏水性弱的溶質(zhì)分配到膠束中的少，分配到緩沖溶液中的多。當(dāng)溶質(zhì)進(jìn)入膠束時(shí)，以膠束的速度遷移；溶質(zhì)進(jìn)入緩沖溶液時(shí)，以電滲的速度前移。在膠束中分配系數(shù)越大的粒子，在柱中遷移速度慢。從而使疏水性稍有差別的中性物質(zhì)在電泳中得以分離。45MECC的突出優(yōu)點(diǎn)是除能分離離子化合物外，還能分離不帶電荷的中性化合物。對(duì)含有離子和中性化合物的混合樣品，以及電泳淌度相同的溶質(zhì)