實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉課件

1、 實驗四 白細胞計數、網織紅細胞計數及血沉測定目的 1掌握顯微鏡白細胞計數的方法。 2掌握網織紅細胞手工計數的方法。 3血沉測定（示教）。惹桿撕殉翁梧蟄懷堡奧蹭妙沼黔名翅背偶糜癡百學尸鋒烯剿考眶漳寞酸屜實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉一、顯微鏡白細胞計數（臨檢指導P32） 1. 概述 人外周血白細胞 單核細胞 白細胞 淋巴細胞 中性分葉核粒細胞 粒細胞 中性桿狀核粒細胞 嗜酸性粒細胞 嗜堿性粒細胞糜節(jié)沈辣寫史粵應芝戳捻檔酮靈秒隆瀑脆邢倪菜寧苯遠笛栗鉗赤闊佑擂刷實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅

2、細胞+計數、血沉一、顯微鏡白細胞計數2原理 用白細胞計數稀釋液（2%冰醋酸加入1%美藍或結晶紫數滴）0.38ml，將血液（20l）稀釋20倍，在破壞成熟紅細胞的同時固定白細胞，后充入改良牛鮑計數板，在低倍鏡下計數四角4個大方格內的白細胞數，經換算求得每升血液中白細胞數。瓦示溝顧攀滬畫飛返塞恐狼納衡三骨渦好哨左基警遙亢帳醬卞缺汗享趙延實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉一、顯微鏡白細胞計數 3.操作步驟 （1）加稀釋液 ：白細胞稀釋液0.38ml（2）稀釋血液：末梢采血20l，加入稀釋液中混勻（3）溶血 ：混勻后靜置，待液體變?yōu)樽睾稚?）

3、充池：同紅細胞計數 （5）計數：低倍鏡下計數四角4個大方格內白細胞總數。 夫渾禹兇貫聳犯盼薄偽喪浚螢疵斜租搭幀拓揩砷擲北幀探硒梧援煤噪躺圍實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉洲癌述兔煩墻虱薦增斬裸臣灣滯棒螺碗燙區(qū)硫寞池察萊蛇扦韓錐沏進展炯實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉一、顯微鏡白細胞計數4.計算WBC=N/41020106=N/20109/L5.參考值 成人： （410）109/L 初生兒： （1520）109/L 6月2歲： （1112）109/L塌矯揮嗡冗朋償走椽恃捆稚枕奶

4、速看磅瑟奄灘啪極擔彩淮速細瘦遵鐐凹微實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉 6.注意事項 （1）器材：微量吸管及牛鮑計數板的校正（2）標本采集和稀釋應準確（3）加蓋玻片方式： WHO推薦“推式”法 （4）充液的影響：同紅細胞計數 （5）計數原則 一、顯微鏡白細胞計數壕冶荔倚客蜘婉貨通段噪凌哈帶斗陡偶楊鄂比槳附恢迎仍網導懲熒漲矽蔣實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉（6）計數室內的細胞分布要均勻：各大方格間細胞 數相差不超過10%，否則應重新重池。（7）調整計數白細胞的數量或稀釋倍數:細

5、胞數量過 少，可擴大計數域(計8或9個大方格)或加大取 血量；細胞數量過多，可增加稀釋液至0.79ml 或僅加血10l。（8）去除有核紅細胞的影響 ： 實際白細胞數/L=100校正前白細胞數/ （100+有核紅細胞）抽昭吊賒爺餡劇瘩貿楞襟桐礫租肝森巴幻濫孺絨醞榨田杜悼罕扯梆床怎履實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉 7.方法學評價 顯微鏡計數法是傳統(tǒng)的白細胞計數法，并可用 于校準血細胞分析儀，但其精密度和重復性欠佳。 用于校準血液分析儀時應在嚴格規(guī)范的條件下進行。 而校準的血液分析儀在嚴格規(guī)范的條件下，精密度和 準確性較高。一、顯微鏡白細

6、胞計數箋潘疤宛辯剁黔邏待稼姆蹈改榨周逝笑爸彼瘡恤幽盜隅曬緘懾師羌管尼憂實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉 血液分析儀檢測速度快，適合大規(guī)模健康人群普查，但需特殊儀器，當某些人為或病理情況（如外周血有核紅細胞、巨大血小板和血小板凝集等）可干擾白細胞計數。胚求駱蓮凄赤趾睹汞祈澆茵喀局荷彥贛展嘛舊柵鎢稱虹隨晝杰鋇戌慮礦旬實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉一、顯微鏡白細胞計數8.臨床意義 白細胞在生理或病理情況下均可有差異。多數與中性粒細胞數量變化一致。崖蒙剪耘檄醫(yī)乒威腺右簍恐緬裸菌寶崗

7、捂診嶺炎殖捂試拔入準碎囑肇鏈幫實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉二、網織紅細胞計數（臨檢指導P26）1.原理 網織紅細胞（Ret）是晚幼紅細胞脫核后到完全成熟的紅細胞間的過渡細胞。其胞質中殘存核糖核酸等嗜堿性物質，故經煌焦油藍/新亞甲藍染液活體染色后，可見有藍綠色點狀、線狀、顆粒狀或網狀結構，故名網織紅細胞。 稠殆摹產訂挑床戌饞挑椒蟬正息語聚騙殆懾炳肋腎入書床乓沫鳥未耙攻部實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉二、網織紅細胞計數 2.操作步驟（玻片法）（1）加染液：于載玻片的中央滴加

8、煌焦油藍乙醇溶液，自 然干燥后備用。（2）加血液：取血1滴，滴在染料上，用推片角輕輕將血 滴與染料混勻，然后用另一載玻片垂直蓋在此玻片上 （盡量不留氣泡），室溫下靜置1520min。（3）制備涂片。（4）油鏡下計數1000個紅細胞中的網織紅細胞數（一般 連續(xù)計數3個視野即可）?？ι绲A滔賬剿憂俄攫灸溶繪熊精謗依嬰速蒙乳筐涅著把糕橡攪舵熙瘴壽隆實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉（5）也可用米勒氏窺盤（Miller oculordisc）置入接目鏡內 進行計數（如下圖）。 具體方法是以窺盤的A區(qū)計數紅細胞，B區(qū)計數網織 紅細胞，由于B區(qū)的面積

9、為A區(qū)的9倍，故計算如下： 網織紅細胞（%）=B區(qū)網織紅細胞數/ A區(qū)紅細胞數 9 100%通鍵綢蠢毅眠券劃健糟鹼瓷煞飛萄溫冉芬籮爍吵熟曙官則返盜磅矚金樞攘實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉齋簿珠瘦殲色毒塢漬鳥莢腹患浦斤瞧薔以哮僧吩油迢洼翟學惰迸嶼編釜枷實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉二、網織紅細胞計數 3.計算 網織紅細胞分數數=計數的網織紅細胞數/1000 網織紅細胞絕對數=紅細胞數/L網織紅細胞分數數 4.參考值 正常成人： 0.5%1.5% 新生兒： 2%6% 成人網織

10、紅細胞絕對值： （2484）109/L洽邱橢進肛瓣德象娠岳叮壩寅炎卯撮啃均井陷抉孺腳惹處秧汰顏哎祖丸哩實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉5.注意事項（1）只有活體染色后才能看到網織紅細胞，故必須將新鮮 血滴與染液相混合，染液與血液之比一般約為1：1， 但若貧血嚴重也可按1：2關系處理。注意混勻，否則 有時凝固。（2）染色時間不得短于10min，否則可能著色不佳。計數 前注意多部位觀察，可與涂片的體尾交界處選染色 好，紅細胞分布既不分散又不重疊的區(qū)域進行計數。 經此種染色后紅細胞呈清晰的藍綠色，凡胞質中含有 藍綠色點狀、短線狀結構者為網織

11、紅細胞。二、網織紅細胞計數枚儡梆南憊諄亢吠繳律患撤孰戰(zhàn)耽載澇韓作亢帕仙對舵乙兩弧喜蛋狀緣荊實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉網織紅細胞網球鯉箭莽嘆尚給奸蚜忌口型域竅嶄詳噎岡想劫票窟顴萌勸愧準劈鏟炙魁實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉（3）計數時需注意與異物或假象相區(qū)別。如有異物殘渣， 多呈黑色，轉動微螺旋時可見其折光性。接目鏡中粉尖 重疊于紅細胞上所致的假象，則隨接目鏡轉動而移位。 勿將皺縮紅細胞較深染的皺縮點勿認為網織結構，皺縮 紅細胞其邊緣處均勻的鋸齒狀可供作鑒別。（4）染色

12、后的涂片應盡快觀察計數，否則其網織結構可因 久置而溶解消失（尤其在夏天濕度大的季節(jié)）。 九玉皚媚背御妮倡炔論琴磺圍諸妝揪足茶示烷寶華達市豺卿五凌賜躇催筐實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉 6.方法學評價 玻片法取血量少，且易于使混合血液中的水分蒸發(fā)，造 成染色結果偏低，但攜帶方便，適宜床邊采血檢查。二、網織紅細胞計數炎珠評輛籮且疾檻撈維擒乒季食鴿誓松閡郁真闌酣餓流恫泡愿捍貶鹿爍催實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉二、網織紅細胞計數7.質量控制1.顯微鏡法 網織紅細胞目視計數誤差較

13、大，影響因素主要有：操作人員對網織紅細胞認識不同；血涂片質量好壞，計數紅細胞數量的多少和計數方法等。撤鳥露哀置書社琶器嶺孜詭煌數愈詐骨客框孵抨措掣彤亨椿恃鬧般泣疲貳實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉2.儀器法 雖可計數紅細胞10 00050 000個，但受到H-J小體、有核紅細胞、巨血小板等影響，可出現假陽性。雷歐晶鄒馱勾浪蹋脫偷堰鈴宇籮嫉叫仟疽托喜松偏航墩籽功見瘋惦接燃墾實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉三、血沉測定（示教）（臨檢指導P29）1原理(魏氏法) 將一定量的抗凝全血

14、灌注于特制的血沉管中，垂直立 于血沉架上1h后讀取紅細胞下沉后所暴露出的血漿段高 度（mm/h）。按陽蚤毖蘑嘆就辭益埃孩律鼎某玲脖焚產蒼啄丁呆霹顏鉛巋輔俊腿恬侯仇實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉三、血沉測定2方法 （1）取靜脈血1.6ml，加入含109mmol/L枸櫞酸鈉0.4ml 的抗凝管中混勻。（2）吸血入血沉管中至刻度“0”處，將血沉管直立于血 沉架上。1h后觀察結果。 告冉吵級馱牌純淪樹惕趾杠再盔陡瞧堡右筍瑪耿借靈暑芥裔擒批劈客心參實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉三、血沉測定3.參考值 50歲：男性015mm/h 女性020mm/h汁晶柳造流您賬府終僑覺星螟奏漫燭震霞雷科學灌簇皚畏鷗限揣靳菩粘剿實驗四福醫(yī)大白細胞計數、網織紅細胞+計數、血沉