微生物復(fù)習(xí)思考題

1、復(fù)習(xí)思考題1.什么是微生物？包括哪些主要類群？.微生物（microorganism）：是一切肉眼看不見或看不清的微小生物的總稱。（放線菌霉菌酵母菌藻類原生動(dòng)物。每畝耕作層土：細(xì)菌75kg、霉菌150kg、酵母菌7.5kg、藻類7.5kg、原生動(dòng)物15kg。59.我國飲用水標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定，自來水中細(xì)菌總數(shù)不得高于多少？大腸菌群數(shù)不得超過多少？答：自來水中細(xì)菌總數(shù)應(yīng)100個(gè)/mL,大腸菌群數(shù)不得超過3個(gè)/L.60.什么是正常菌群？試分析腸道正常菌群與人體的關(guān)系？答：生活在健康動(dòng)物各部位，數(shù)量大，種類較穩(wěn)定，一般能發(fā)揮有益作用的微生物群，稱為正常菌群。正常菌群與人體的關(guān)系：互生。生物拮抗作用；刺激免疫應(yīng)

2、答；合成維生素，降解食物殘?jiān)?1.在微生物的生物環(huán)境中存在著幾種關(guān)系？掌握概念，舉例說明。答：（1）互生：兩種可單獨(dú)生活的生物，當(dāng)它們在一起時(shí)，通過各自的代謝活動(dòng)而有利于對(duì)方，或偏利于一方的相互關(guān)系，稱為互生。這是一種“可分可合，合比分好”的松散的相互關(guān)系。例如人體腸道中正常菌群與人的互生，好氧性自生固氮菌與纖維素分解菌的互生等。共生：指兩種生物共居在一起，相互分工合作，相依為命，甚至形成獨(dú)特結(jié)構(gòu)，達(dá)到難分難解，合二為一的極其緊密的一種相互關(guān)系。例如根瘤菌與植物的共生，瘤胃微生物與反芻動(dòng)物的共生等。拮抗：指由某種生物所產(chǎn)生的特定代謝產(chǎn)物可抑制它種生物的生長發(fā)育甚至殺死它們的一種相互關(guān)系。例如

3、制作泡菜和牲畜青貯飼料的過程就存在拮抗作用。寄生：一般指一種小型生物生活在另一種較大型生物的體內(nèi)（包括細(xì)胞體）或體表，從中奪取營養(yǎng)并進(jìn)行生長繁殖，同時(shí)使后者蒙受損害甚至被殺死的一種相互關(guān)系。（5）捕食：一般指一種大型的生物直接捕捉，吞食另一種小型生物以滿足其營養(yǎng)需要的相互關(guān)系。62.試述微生物在碳、氮循環(huán)中的作用。答：微生物在碳素循環(huán)中的作用：碳是構(gòu)成各種生物體最基本的元素，是有機(jī)物和生物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)骨架，沒有碳就沒有生命。碳素循環(huán)包括：CO2的固定和CO2的再生。微生物在CO2的固定中的作用： 一些光能自養(yǎng)微生物，如藻類、光合細(xì)菌和藍(lán)細(xì)菌等可通過光合作用直接利用自然界中的CO2合成有機(jī)碳化物，

4、進(jìn)而轉(zhuǎn)化為各種有機(jī)物；化能自養(yǎng)菌能利用化學(xué)能同化CO2微生物合成的有機(jī)物在數(shù)量和規(guī)模雖遠(yuǎn)不及綠色植物，但在一些特殊環(huán)境(如植物難以生存的水域)中具有相當(dāng)重要的作用。（百度）63.什么是富營養(yǎng)化？污水處理的原理及常用方法有哪些？ BOD5和COD的定義答：富營養(yǎng)化是指水體中因氮、磷等元素含量過高而導(dǎo)致水體表面藍(lán)細(xì)菌和藻類過度生長繁殖的現(xiàn)象。BOD5是水體中有機(jī)物含量的一個(gè)間接指標(biāo)。一般指1L污水或待測水樣中所含的一部分易氧化的有機(jī)物，當(dāng)微生物對(duì)其氧化、分解時(shí)，所消耗的水中溶解氧毫克數(shù)（其單位為mg/L）。BOD的測定條件一般規(guī)定在20下5晝夜，故常用BOD5（5日生化需氧量）符號(hào)表示。COD是水

5、體中有機(jī)物含量的一個(gè)簡便的間接指標(biāo)。指1L污水中所含的有機(jī)物在用強(qiáng)氧化劑將它氧化后，所消耗氧的毫克數(shù)（其單位為mg/L）。64.什么是大腸菌群？答：一群能在37，24h發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的G-，桿狀，無芽孢，兼性厭氧的腸道細(xì)菌。65.什么是免疫、類毒素、單克隆抗體、生物制品、疫苗？答：免疫：機(jī)體識(shí)別和排除抗原性異物的一種保護(hù)性功能。類毒素：用0.3%0.4%甲醛溶液對(duì)外毒素進(jìn)行脫毒處理，可獲得失去毒性但仍保留其原有免疫原性（抗原性）的生物制品。單克隆抗體：由一純系淋巴細(xì)胞克隆經(jīng)分化、增殖后的漿細(xì)胞所產(chǎn)生的單一成分、單一特異性的免疫球蛋白分子。生物制品：在人工免疫中，可作為預(yù)防、治療和診斷用的來自

6、生物體的各種制劑。疫苗：用于預(yù)防傳染病的抗原制劑。66.外毒素與內(nèi)毒素有可不同？答：外毒素是在病原細(xì)菌在生長過程中不斷向外界環(huán)境分泌的一類毒性蛋白，內(nèi)毒素在活細(xì)胞中不分泌到體外，僅在細(xì)胞死亡后自溶或人工裂解時(shí)才釋放。外毒素毒性比內(nèi)毒素毒性高。67.決定傳染結(jié)局的三因素是什么？68.什么是干擾素？其作用機(jī)制是什么？69.什么是抗原？有何特性？決定抗原免疫原性因素有哪些？抗原特異性由什么來決定？70.什么是抗體？分幾類？各有何特性？（IgG、M、A）71.抗原與抗體反應(yīng)的一般規(guī)律是什么？答：特異性可逆性定比性階段性條件依賴性72.什么是補(bǔ)體？有何特性？答：補(bǔ)體是存在于正常人高等動(dòng)物血清與中的一組非

7、特異性血蛋白（主要成分是球蛋白）。在免疫反應(yīng)中，由于它具有能擴(kuò)大和增強(qiáng)抗體的“補(bǔ)助”功能，故稱補(bǔ)體。補(bǔ)體本質(zhì)是一類酶原，能被任何抗原-抗體的復(fù)合物激活，激活后的補(bǔ)體就能參與破壞或清除已被抗體結(jié)合的抗原或細(xì)胞，發(fā)揮其溶胞作用、病毒滅活、促進(jìn)吞噬細(xì)胞的吞噬和釋放組胺等免疫功能。73.什么是補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)？其基本原理是什么？答：一種有補(bǔ)體參與，并以綿羊紅細(xì)胞和溶血素（紅細(xì)胞的特異抗體）是否發(fā)生溶血放映作為指示的一種高靈敏度的抗原與抗體結(jié)合反應(yīng)補(bǔ)體可與任何抗體和抗原復(fù)合物相結(jié)合； 指示系統(tǒng)（由綿羊紅細(xì)胞和溶血素組成）遇未被抗原核抗體復(fù)合物所結(jié)合的游離補(bǔ)體（豚鼠的新鮮血清）時(shí)，就會(huì)發(fā)生肉眼可見的溶血反應(yīng)。

8、74.微生物分類學(xué)有哪幾項(xiàng)具體任務(wù)？答：分類、鑒定、命名75.什么是學(xué)名？雙名法？答：76.什么是菌株？它如何表示？答：77.何謂三域?qū)W說？提出此學(xué)說的根據(jù)是什么？答：78.用于微生物鑒定的經(jīng)典指標(biāo)有哪些？ DNA堿基比例的測定79.微生物分類鑒定中的現(xiàn)代方法有哪些？ 核酸分子雜交法通過核酸分析鑒定微生物遺傳型 rRNA寡核苷酸編目分析微生物全基因組序列的測定 細(xì)胞壁的化學(xué)成分 全細(xì)胞水解液的糖型細(xì)胞化學(xué)成分用作鑒定指標(biāo) 磷酸類脂成分的分析 枝菌酸的分析 醌類的分析 氣相色譜技術(shù)用于微生物鑒定數(shù)值分類法 80.熟記下列一些最基本的微生物學(xué)名或?qū)倜?Bacillus subtilis 枯草芽孢

9、桿菌， Escherichia coli 大腸桿菌 Bacillus thuringiensis 蘇云金芽孢桿菌，Staphylococcus aureus金黃色葡萄球菌Halobacterium 鹽桿菌屬， Streptomyces griseus 灰色鏈霉菌Saccharomyces cerevisiae 釀酒酵母， Aspergillus flavus 黃曲霉Aspergillus niger 黑曲霉， Penicillium chrysogenum 產(chǎn)黃青霉Rhizopus oryzae 米根霉81.掌握從土壤中分離某類微生物的方法模式題：例：從土壤中分離產(chǎn)生放線菌采集土樣（去除肥沃土

10、壤的表層土，取離地面5-20cm土層）；土壤稀釋液的制備（10倍梯度稀釋法）；高氏1號(hào)培養(yǎng)基的制備；倒平板；取適當(dāng)稀釋的土壤稀釋液涂布到高氏1號(hào)平板上；于28的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5-6天；根據(jù)放線菌的菌落特征挑取放線菌菌落在平板或試管斜面上劃線培養(yǎng)，并結(jié)合鏡檢確定是否為純培養(yǎng)； 利用打孔法將帶有培養(yǎng)基的放線菌培養(yǎng)物接到涂有敏感菌的平板上，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；根據(jù)是否有抑菌圈，確定該放線菌是否具有產(chǎn)生抗生素的能力；將能產(chǎn)生抗生素的放線菌接種到試管斜面上，培養(yǎng)好后于冰箱中保藏。82.實(shí)驗(yàn)的原理、主要步驟、注意事項(xiàng)、成敗的關(guān)鍵及思考題。（僅供參考，具體見自己的實(shí)驗(yàn)書和實(shí)驗(yàn)報(bào)告） 實(shí)驗(yàn)名稱 實(shí)驗(yàn)原理 注意事項(xiàng)成

11、敗的關(guān)鍵思考題培養(yǎng)基的制備P16細(xì)菌-牛肉膏蛋白胨（應(yīng)用廣泛的天然培養(yǎng)基）；放線菌-高氏1號(hào)；真菌-馬丁氏培養(yǎng)基蛋白胨很易吸濕，在稱取時(shí)動(dòng)作要迅速P20平板分離技術(shù)與活菌計(jì)數(shù)平板分離法主要有：平板劃線分離法，；稀釋涂布平板法（有效分離純化微生物，測定樣品中活菌數(shù)量）平板菌落計(jì)數(shù)法是將待測菌落經(jīng)適當(dāng)稀釋，涂布在平板上，經(jīng)過培養(yǎng)后在平板上形成肉眼可見的菌落。稀釋涂布平板法：菌懸液細(xì)胞密度適宜；涂布均勻，培養(yǎng)后菌落在整個(gè)平板表面分布均勻。平板劃線分離法：快速，接種環(huán)在平板上迅速滑動(dòng)；平行線之間的距離小，使劃線次數(shù)增加；及時(shí)灼燒接種環(huán)上剩余的菌體P34普通光學(xué)顯微鏡的使用及微生物形態(tài)的觀察在顯微鏡的光

12、學(xué)系統(tǒng)中，物鏡的性能最為關(guān)鍵，它直接影響著顯微鏡的分辨率。其中，油鏡的放大倍數(shù)最大，使用時(shí)，需在載玻片和鏡頭之間加滴鏡油（即香柏油）（作用：增加透光強(qiáng)度，增加分辨率）。最小可分辨距離=不可將高倍鏡轉(zhuǎn)動(dòng)經(jīng)過加有鏡油的區(qū)域；二甲苯等清潔劑會(huì)對(duì)鏡頭造成損傷，不要使用過量的清潔劑或讓其在鏡頭上停留時(shí)間過長或有殘留；不要用手或其他紙擦拭鏡頭，以免使鏡頭粘上汗?jié)n、油污或產(chǎn)生劃痕，影響觀察。先用低倍鏡搜尋、聚焦樣品，確定待觀察目標(biāo)的大致位置后再轉(zhuǎn)換到高倍鏡或油鏡P47顯微鏡直接計(jì)數(shù)和懸滴觀察法顯微計(jì)數(shù)法的優(yōu)點(diǎn)：直接、快速、操作簡單，缺點(diǎn)：所測的結(jié)果通常是死菌體和活菌體的總和，且難以對(duì)運(yùn)動(dòng)性強(qiáng)的活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)；

13、計(jì)數(shù)時(shí)，通常數(shù)5個(gè)中方格的總菌數(shù)，設(shè)5個(gè)中方格中的總菌數(shù)為A,菌液稀釋倍數(shù)為B(取100)，則：1mL菌液中的總菌數(shù)(其中，B取100)用接種環(huán)在培養(yǎng)下面上刮取時(shí)動(dòng)作要輕，不要將瓊脂培養(yǎng)基一起刮起；計(jì)數(shù)板上的計(jì)數(shù)室的刻度非常精細(xì)，清洗時(shí)切勿使用刷子等硬物，也不可用酒精燈火焰烘烤計(jì)數(shù)板；取樣時(shí)先要搖勻菌液，加樣時(shí)計(jì)數(shù)室不可有氣泡產(chǎn)生?；罴?xì)胞是透明的，因此在顯微計(jì)數(shù)或懸滴法觀察時(shí)均應(yīng)適當(dāng)減低視野亮度，以增大反差；進(jìn)行顯微計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)先在低倍鏡下尋找大方格的位置，找到計(jì)數(shù)室后將其移至視野中央，再換高倍鏡觀察和計(jì)數(shù)P56細(xì)菌的制片及簡單那染色對(duì)個(gè)體較小的細(xì)菌進(jìn)行制片時(shí)采用涂片法；利用單一染料對(duì)菌體進(jìn)行染色

14、的方法為簡單染色法；常用的微生物細(xì)胞染料都是鹽，分堿性染料和酸性染料，前者包括美藍(lán)（亞甲藍(lán)）、結(jié)晶紫、堿性復(fù)紅及孔雀綠等，后者包括酸性復(fù)紅及剛果紅等。通常用堿性染料進(jìn)行簡單染色，因?yàn)槲⑸锛?xì)胞在堿性、中性及弱酸性溶液中通常帶負(fù)電荷，而染料電離后染色部分帶正電荷，很容易與細(xì)胞結(jié)合使其著色；當(dāng)細(xì)胞處于酸性條件下所帶正電荷增加時(shí)，可采用酸性染料著色；革蘭氏染色法可將細(xì)菌分成G+ 和G 兩種類型，這是由這兩種細(xì)菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)和組成的差異所決定的。G+細(xì)胞壁肽聚糖含量高，G細(xì)胞壁肽聚糖含量低。選用活躍生長期菌種染色，老齡的G+會(huì)被染成紅色而造成假陽性；涂片不宜過厚，以免脫色不完全造成假陽性；脫色過度造成假

15、陰性。P75、76、84放線菌和霉菌的制片及形態(tài)觀察放線菌制片時(shí)，不采用涂片法，以免破壞細(xì)胞及菌絲體形態(tài)。通常采用插片法或玻璃紙法并結(jié)合菌絲體簡單染色進(jìn)行觀察。對(duì)霉菌可以采取直接制片和透明膠帶法觀察。在印片過程中，用力要輕，且不要錯(cuò)動(dòng)，染色水洗時(shí)水流要緩，以免破壞孢子形態(tài)。在直接制片法觀察中，用鑷子取菌和用解剖針分散菌絲時(shí)要細(xì)心，盡量減少菌絲斷裂及形態(tài)被破壞，蓋蓋玻片時(shí)避免氣泡產(chǎn)生。無環(huán)境因素對(duì)微生物生長的影響物理、化學(xué)、生物及營養(yǎng)等不同環(huán)境因素影響微生物生長繁殖的機(jī)制不盡相同，而不同類型微生物對(duì)同一環(huán)境因素的適應(yīng)能力也有差別。低濃度染料可抑制細(xì)菌生長，G+ 比G 對(duì)染料更加敏感制備平板厚度均勻，濾紙