4血紅蛋白及意義

1、1.了解血紅蛋白的結(jié)構(gòu)及種類。 2.掌握氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法測(cè)定 血紅蛋白。 3.掌握血紅蛋白測(cè)定的參考值。 4.掌握紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白測(cè)定的 臨床意義。5.了解血紅蛋白測(cè)定的其它幾種方法。1 亞鐵血紅素 亞鐵血紅素 珠蛋白 亞鐵血紅素 亞鐵血紅素血紅蛋白結(jié)構(gòu)示意圖（原卟啉、Fe2+） （原卟啉、Fe2+）（原卟啉、Fe2+） （原卟啉、Fe2+）（Hemoglobin，Hb或HGB）2 珠Pr N N Fe N N （O2） 亞鐵血紅素結(jié)構(gòu)示意圖3HbA： 22 成人占90%以上正常血紅蛋白的種類HbA2： 22 成人約占23%HbF(胎兒Hb)：22 成人2%以下4HbO2(氧合血紅蛋

2、白)根據(jù)鐵原子第六配位鍵的結(jié)合情況，血紅蛋白可分為Hbred(還原血紅蛋白)HbCO(碳氧血紅蛋白)Hi (高鐵血紅蛋白)SHb(硫化血紅蛋白)主要成分少量與氧結(jié)合空著與CO結(jié)合Fe2Fe3與S結(jié)合5氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法（HiCN法）堿羥高鐵血紅素法（AHD575法）十二烷基硫酸鈉血紅蛋白法(SDS-Hb法)比色法血紅蛋白測(cè)定方法沙利(Sahli)法(縣及縣以上醫(yī)院已淘汰)6一. 原理HbCN氧化HiCN為棕紅色，最大吸收峰540nm。根據(jù)標(biāo)本的吸光度可知Hb濃度。HiCNHi氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法(HiCN法)注：硫化血紅蛋白(SHb)不能被轉(zhuǎn)化7氰化鉀 0.05g高鐵氰化鉀 0.2g磷酸

3、二氫鉀 0.14g非離子表面活性劑 1.0ml蒸餾水 加至1000ml二. 試劑HiCN轉(zhuǎn)化液(文齊液)調(diào)pH7.07.4，置棕色玻璃瓶中密封保存。氧化調(diào)節(jié)pH促溶,防混濁氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法(HiCN法)提供CN-8三. 方法氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法4.實(shí)際工作中，可用HiCN參考液，按生化方 法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，或求出K值后計(jì)算。 KHb（g）/A 1. 5.0 ml Hb轉(zhuǎn)化液血20ul,混勻,靜置5min。2.分光光度計(jì)比色，波長(zhǎng)540nm，以空白轉(zhuǎn)化 液調(diào)零，測(cè)定吸光度“A”。3.如用符合WHO標(biāo)準(zhǔn)的光度計(jì)，則可據(jù)“A”直 接計(jì)算Hb濃度。Hb(g/L)A540 /44000644582

4、51A367.79Hb(g/L) A 50 0.128 100 0.265 150 0.385 200 0.523K=Hb/A = 500/1.301 = 384.32Hb=K A氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法101.KCN為劇毒藥品，防污染。2.Hb轉(zhuǎn)化液不能存于塑料瓶中。 否則CN-下降，結(jié)果偏低。3.分光光度計(jì)應(yīng)校正后使用。4.標(biāo)準(zhǔn)曲線或K值應(yīng)定期校正。四. 注意事項(xiàng)氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法11方法學(xué)評(píng)價(jià)HiCN法SDS-Hb法優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單；結(jié)果穩(wěn)定。缺點(diǎn)：氰化鉀有劇毒； 高白細(xì)胞或高球蛋白血癥可致渾濁； HbCO轉(zhuǎn)化較慢。 推薦方法優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單；結(jié)果穩(wěn)定；無公害。缺點(diǎn)：摩爾消光系數(shù)未確定；

5、SDS本身質(zhì)量差異較大； 破壞白細(xì)胞。次選方法12如何采用SDS-Hb法進(jìn)行血紅蛋白測(cè)定？1.HiCN法標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制2.SDS-Hb法標(biāo)準(zhǔn)工作曲線繪制1)取4份不同濃度抗凝血或溶血液用HiCN 法測(cè)定吸光度，并求出其Hb濃度。2)再用SDS-Hb法測(cè)定4份標(biāo)本的吸光度。3)以4份標(biāo)本Hb濃度為橫坐標(biāo)，SDS-Hb法測(cè)得 的吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。3.SDS-Hb法測(cè)定待測(cè)標(biāo)本13成男： 120160g/L成女： 110150g/L新生兒：170200g/L血紅蛋白參考值14RBC和Hb生理性變化一. 年齡與性別的差異二. 精神因素激動(dòng)、恐懼、冷水浴使三. 劇烈體力運(yùn)動(dòng)和勞動(dòng)缺氧，使四

6、. 氣壓降低缺氧，使五. 妊娠中、后期血液稀釋，使6個(gè)月2歲嬰幼兒造血原料不足，使某些老人造血功能減退，使新生兒母體內(nèi)相對(duì)缺氧，使1516一. 相對(duì)性增多二. 絕對(duì)性增多2. 繼發(fā)性紅細(xì)胞增多1. 原發(fā)性紅細(xì)胞增多RBC和Hb病理性增多血液濃縮常見于：心血管疾病、肺部疾病、 異常血紅蛋白病等常見于真性紅細(xì)胞增多癥等17見于各種貧血貧血的病因分類RBC和Hb病理性減少RBC、Hb和Hct低于參考值下限。 貧血：1.紅細(xì)胞生成障礙2.紅細(xì)胞破壞過多3.紅細(xì)胞丟失過多造血原料不足骨髓造血功能減退見于各種溶貧見于各種出血18貧血時(shí)RBC和Hb減少程度可不一致正色素性貧血：二者成比例減少小細(xì)胞低色素性貧血：RBC，Hb大細(xì)胞性貧血：RBC，Hb191.說出氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法的原理。 2.紅細(xì)胞和血紅蛋白在何種情況下增多？ 3.紅細(xì)胞和血紅蛋白濃度是否越高越健康？4.選擇題(1)HiCN法中哪種血紅蛋白不能被轉(zhuǎn)化為 氰化高鐵血紅蛋白 A、HbO2 B、Hbred C、SHb D、HbCO E、HbS復(fù)習(xí)思考題20(2)HiC