HIV篩查實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理與控制課件

1、HIV篩查實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理與控制第1頁，共34頁。質(zhì)量保證第2頁，共34頁。一、人員培訓(xùn)人員要求3名以上技術(shù)人員至少1人具有中級(jí)職稱、2年以上血清學(xué)檢驗(yàn)工作經(jīng)驗(yàn)上崗要求上崗前必須接受技術(shù)培訓(xùn)并獲得合格證書每年接受復(fù)訓(xùn)一次培訓(xùn)內(nèi)容HIV檢測相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)、檢測技術(shù)及管理要求、實(shí)驗(yàn)操作、質(zhì)量管理與控制、生物安全。第3頁，共34頁。使用新方法前對(duì)人員進(jìn)行培訓(xùn)獲得資格開展相應(yīng)工作檢驗(yàn)人員檢測人復(fù)核人簽發(fā)人不能一人同時(shí)承擔(dān)多個(gè)角色！第4頁，共34頁。二、環(huán)境條件HIV篩查實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)室或檢測區(qū)域應(yīng)分為清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)，應(yīng)符合二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）要求。配備開展HIV抗體檢測所需的設(shè)備：生物

2、安全柜、酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、恒溫孵育箱、離心機(jī)、加樣器、冰箱等。第5頁，共34頁。三、樣品的采集和保存盡量避免溶血細(xì)菌污染抗凝不完全假陽性內(nèi)源性HRP紅細(xì)胞破裂釋放活性物纖維蛋白原干擾注：血清置4冰箱5天內(nèi)完成檢測第6頁，共34頁。四、檢測方法和試劑選擇試劑必須是HIV-1/2混合型，并且經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊批準(zhǔn)、批檢合格、在有效期內(nèi)，經(jīng)臨床質(zhì)量評(píng)估敏感性和特異性高。更換試劑批號(hào)時(shí)應(yīng)進(jìn)行平行實(shí)驗(yàn)。檢測方法使用可靠的檢測方法，常用：ELISA和快速檢測。第7頁，共34頁。五、設(shè)備維護(hù)與校準(zhǔn)酶標(biāo)儀/洗板機(jī)加樣器溫度計(jì)高壓鍋國家法定部門定期校準(zhǔn)（每年至少1次）精密儀器生產(chǎn)廠家校準(zhǔn)（每年至少1次）

3、均須做好日常維護(hù)及使用記錄蛋白印跡儀流式細(xì)胞儀病載儀第8頁，共34頁。六、文件和文件管理1.標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）至少建立以下SOP樣品的接收、登記、處理和保存檢測方法和步驟試劑使用和保存儀器的使用、維護(hù)和校準(zhǔn)質(zhì)量控制要求及程序結(jié)果解釋與報(bào)告保密程序?qū)嶒?yàn)室數(shù)據(jù)、相關(guān)文件記錄與保存不確定樣品追蹤和處理實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)、清理及消毒第9頁，共34頁。SOP應(yīng)包括的內(nèi)容標(biāo)題和編號(hào)編寫和修訂日期編寫和修訂人員姓名方法、目的和應(yīng)用范圍檢測設(shè)備試劑及有效期安全防護(hù)相關(guān)步驟結(jié)果的解釋和報(bào)告附錄每年修訂一次第10頁，共34頁。2.實(shí)驗(yàn)原始記錄原始記錄表試劑廠家測定方法試劑批號(hào)試劑效期操作人員姓名復(fù)核人員姓名檢測日

4、期第11頁，共34頁。3.結(jié)果報(bào)告試劑盒質(zhì)控品外部質(zhì)控品滿足要求不滿足要求分析結(jié)果重新檢測復(fù)核人簽字簽發(fā)人簽字第12頁，共34頁。4.HIV標(biāo)本的保存記錄標(biāo)本保存記錄標(biāo)本類型貯存量貯存溫度貯存起始時(shí)間標(biāo)本保管人標(biāo)本復(fù)核人第13頁，共34頁。5.樣品登記和保存收樣建立唯一編碼登記相關(guān)信息保存姓名、性別、年齡、檢測日期第14頁，共34頁。6.文件存檔 實(shí)驗(yàn)原始記錄、打印數(shù)據(jù)、WB試驗(yàn)的反應(yīng)條帶或照片、樣品登記表、樣品保存記錄表等應(yīng)妥善存檔保存10年以上。第15頁，共34頁。質(zhì)量控制第16頁，共34頁。一、實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的定義 為達(dá)到質(zhì)量要求所采取的作業(yè)技術(shù)和活動(dòng)。定義第17頁，共34頁。二、酶免或

5、發(fā)光法抗體檢測的室內(nèi)質(zhì)量控制 1、室內(nèi)質(zhì)量控制的質(zhì)控品試劑盒內(nèi)部對(duì)照判斷試驗(yàn)有效性，但不能作為室內(nèi)質(zhì)控品。室內(nèi)質(zhì)控品監(jiān)控檢測的重復(fù)性?？芍辉O(shè)弱陽性質(zhì)控，以試劑盒臨界值的23倍為宜。第18頁，共34頁。3、室內(nèi)質(zhì)控血清的制備收集陽性血清（無溶血、黃疸、脂肪）56、30min滅活3000r/min離心15min正常人血清或10%小牛血清PBS溶液稀釋測量值分裝，-20 凍存第19頁，共34頁。4、質(zhì)量控制方法Levey-Jennings質(zhì)控圖 使用累積和技術(shù)或趨勢分析技術(shù)的圖形提供系統(tǒng)偏移和漂移的狀況。第20頁，共34頁。質(zhì)控圖參數(shù)在不同的批次檢測取得的至少20個(gè)數(shù)據(jù)至少做5個(gè)批次的檢測，每個(gè)批次

6、中不少于4個(gè)質(zhì)控品檢測結(jié)果平均值標(biāo)準(zhǔn)差變異系數(shù)控制限樣本量足夠樣本量較少第21頁，共34頁。質(zhì)控的規(guī)定和使用 目前很多質(zhì)控規(guī)則已被采用，最常用的是12S和13S規(guī)則。第22頁，共34頁。告警（12S）：當(dāng)外部對(duì)照的S/CO值超過2S范圍時(shí)，系統(tǒng)處于告警狀態(tài)，應(yīng)予注意，是否可以繼續(xù)檢測需要進(jìn)一步觀察。若將12S做失控標(biāo)準(zhǔn)，有較高的假失控概率，所以一般不采用。警告:12S規(guī)則違背第23頁，共34頁。失控（13S）：當(dāng)外部對(duì)照的S/CO值超過3S范圍時(shí)，系統(tǒng)處于失控狀態(tài)，本次結(jié)果不能被接受。失控:13S規(guī)則違背第24頁，共34頁。位移：連續(xù)幾次（3-5次）外部質(zhì)控都落在均值的一側(cè)。提示試驗(yàn)條件發(fā)生了

7、較大改變。發(fā)生位移第25頁，共34頁。出現(xiàn)以下情況也應(yīng)該應(yīng)該暫停實(shí)驗(yàn)，找出原因。連續(xù)兩次同一方向超出2S第26頁，共34頁。連續(xù)四次同一方向超出1S第27頁，共34頁。失控原因的處理和分析處理出現(xiàn)數(shù)據(jù)違背控制規(guī)則填寫失控報(bào)告單上交實(shí)驗(yàn)室主管是否發(fā)出檢驗(yàn)報(bào)告決定第28頁，共34頁。失控原因的分析立即重新測定同一質(zhì)控品用新的質(zhì)控品重測失控項(xiàng)目檢查儀器狀態(tài)檢查試劑聯(lián)系儀器廠家排除人為或偶然誤差排除質(zhì)控品變質(zhì)或污染失控失控失控失控第29頁，共34頁?！凹纯谭ā辟|(zhì)控 樣本量較少，無法繪制“L-J”質(zhì)控圖時(shí)，前20個(gè)數(shù)據(jù)可采用“即刻法”。該方法只需3個(gè)測定值即可開始進(jìn)行質(zhì)控。第30頁，共34頁。先將測定值從小到大排列，X1最小，Xn最大；計(jì)算X和S；計(jì)算SI上限值和SI下限值。 SI上限=（X最大- X）/S，SI下限=（ X - X最?。?S；對(duì)照SI值表，檢查是否失控。第31頁，共34頁。SI值表nn3sn2snn3sn2s31.161.15122.552.2941.491.46132.612.3351.751.67142.662.3761.941.82152.712.4172.101.94162.752.4482.222.03172.792.4792.322.11182.822.50102.412.18192.8