城市污水中新型冠狀病毒樣品采集、運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范-編制說(shuō)明

1、上海市地方標(biāo)準(zhǔn)城市污水中新型冠狀病毒樣品采集、運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范編制說(shuō)明一、項(xiàng)目背景（一）任務(wù)來(lái)源 根據(jù)上海市市場(chǎng)監(jiān)督管理局下發(fā)文件上海市市場(chǎng)監(jiān)督管理局關(guān)于下達(dá)2022年度第二批上海市地方標(biāo)準(zhǔn)制修訂項(xiàng)目計(jì)劃的通知（滬市監(jiān)標(biāo)技2022200號(hào)）的通知要求，上海市疾病預(yù)防控制中心公共服務(wù)與健康安全評(píng)價(jià)所組織相關(guān)領(lǐng)域?qū)＜夜餐兄仆瓿闪顺鞘形鬯行滦凸跔畈《緲悠凡杉⑦\(yùn)輸規(guī)范（以下簡(jiǎn)稱“標(biāo)準(zhǔn)”）。標(biāo)準(zhǔn)制定背景新型冠狀病毒肺炎( COVID-19)被世界衛(wèi)生組織(WHO)界定為全球大流行病。截至2022年3月，全球已向世界衛(wèi)生組織報(bào)告超過(guò)4億例確診病例，人數(shù)不斷增加。當(dāng)前流行的SARS- CoV-2的Omic

2、ron變種感染者初期存在無(wú)癥狀現(xiàn)象，無(wú)癥狀階段實(shí)際已具有傳染性且難于早期發(fā)現(xiàn)。病毒的變異給COVID- 19疫情及時(shí)發(fā)現(xiàn)和管控帶來(lái)了困難和挑戰(zhàn)。 基于污水流行病學(xué)(WBE)手段開展污水中新冠病毒監(jiān)測(cè)可用于評(píng)估監(jiān)測(cè)區(qū)域感染跡象、在一定范圍內(nèi)進(jìn)行感染群體追蹤，為疫情防控提供有力保障。新冠疫情發(fā)生初期，中國(guó)疾病預(yù)防控制中心在武漢華南海鮮市場(chǎng)的下水道污水中檢出新冠病毒片段；為更好更快追蹤病毒，現(xiàn)行的國(guó)家新型冠狀病毒肺炎防控方案（第九版）和上海市新型冠狀病毒疫情防控方案（2021）均要求對(duì)大型進(jìn)口冷凍物品加工處理場(chǎng)所定期開展污水監(jiān)測(cè)，上海防控方案還要求對(duì)農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)污水等進(jìn)行采樣檢測(cè)，并根據(jù)疫情發(fā)展及時(shí)調(diào)整

3、采樣頻次。開展污水中新冠病毒監(jiān)測(cè)需要持續(xù)收集污水樣本，采樣布點(diǎn)的科學(xué)合理性直接影響監(jiān)測(cè)和預(yù)警的結(jié)果；污水采樣、保存和運(yùn)輸過(guò)程會(huì)增加人體接觸新冠病毒的機(jī)會(huì)，采樣運(yùn)輸人員的安全防護(hù)需要得到保障；樣本的運(yùn)輸和保存方式也亟需規(guī)范。而對(duì)城市污水中新冠病毒的采集、運(yùn)輸和保存目前國(guó)內(nèi)還缺乏針對(duì)性的標(biāo)準(zhǔn)，現(xiàn)有新冠病毒檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)主要針對(duì)生物樣本中新冠病毒，而現(xiàn)有污水的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)主要是針對(duì)理化指標(biāo)，相關(guān)信息分散且不統(tǒng)一，實(shí)踐指導(dǎo)性不足，且存在風(fēng)險(xiǎn)隱患。污水中新冠病毒監(jiān)測(cè)采樣點(diǎn)的設(shè)置、樣品運(yùn)輸和保存都有其特殊的要求，如采樣容器、保存溫度、保存劑、保存箱、保存期等都會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。因此，針對(duì)可能含有新冠病毒的污水進(jìn)行采集

4、、保存和運(yùn)輸應(yīng)根據(jù)病毒特點(diǎn)、人員安全防護(hù)需求單獨(dú)制定，是開展污水監(jiān)測(cè)的首要關(guān)鍵點(diǎn)，只有科學(xué)的選擇采樣點(diǎn)、采樣模式以及正確的保存和運(yùn)輸，才能保障監(jiān)測(cè)合理、檢測(cè)結(jié)果正確，為疫情預(yù)警提供可信數(shù)據(jù)。上海自2022年3月發(fā)生新冠疫情以來(lái)，累計(jì)感染者超過(guò)60萬(wàn)例，其中死亡300余例，已超過(guò)2020年武漢的感染人數(shù)，成為我國(guó)新冠病毒感染人數(shù)最多的地區(qū)?；诖吮尘伴_展新冠病毒污水監(jiān)測(cè)具有極高必要性。我國(guó)已發(fā)布污水中新冠病毒檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)（WS/T7992022）為污水研究和監(jiān)測(cè)提供了技術(shù)支持，在此基礎(chǔ)上，亟需針對(duì)新冠病毒檢測(cè)的污水樣品采集、保存和運(yùn)輸?shù)臉?biāo)準(zhǔn)及技術(shù)規(guī)范出臺(tái)。為了使城市污水中新冠病毒采樣工作更加準(zhǔn)確、規(guī)

5、范和可靠，擬整合相關(guān)指南和規(guī)范，參考國(guó)際、國(guó)內(nèi)相關(guān)技術(shù)規(guī)范，制定本市地方標(biāo)準(zhǔn)城市污水中新型冠狀病毒樣品采集、運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范作為現(xiàn)有檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的配套補(bǔ)充標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)為今后污水監(jiān)測(cè)的開展和疫情管控提供技術(shù)支持。主要起草單位情況為確保標(biāo)準(zhǔn)制定工作的順利推進(jìn)，上海市疾病預(yù)防控制中心組織成立了標(biāo)準(zhǔn)制定起草組，邀請(qǐng)上海市環(huán)境科學(xué)研究院和上海華大基因科技有限公司等單位參與。二、標(biāo)準(zhǔn)編制原則（一）堅(jiān)持實(shí)踐性的原則，注重標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)用價(jià)值本標(biāo)準(zhǔn)制訂承擔(dān)單位為上海市疾病預(yù)防控制中心，其常規(guī)工作內(nèi)容涵蓋對(duì)疫源地、重點(diǎn)場(chǎng)所及相關(guān)環(huán)境的新冠病毒采樣工作技術(shù)指導(dǎo)職責(zé)，在新冠疫情期間對(duì)各類場(chǎng)所和相關(guān)環(huán)境的采樣實(shí)踐、指導(dǎo)或監(jiān)督過(guò)程中積

6、累了大量貼合實(shí)際的工作經(jīng)驗(yàn)。標(biāo)準(zhǔn)制訂的過(guò)程中，起草組成員依據(jù)國(guó)家和上海地方有關(guān)文件要求，參考相關(guān)文獻(xiàn)、指南中經(jīng)實(shí)踐證明行之有效的技術(shù)要求，以及城市污水中新冠病毒采樣工作具體實(shí)際，充分討論了城市污水中新冠病毒樣本采集的采樣耗材、采樣人員、采樣點(diǎn)位、采樣方法、采樣記錄、質(zhì)量控制、樣本運(yùn)輸及保存等要求，以使本標(biāo)準(zhǔn)在符合技術(shù)要求和城市污水采樣實(shí)際情況的基礎(chǔ)上具備可操作性。堅(jiān)持問(wèn)題導(dǎo)向原則，注重標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容的全面完整針對(duì)本市城市污水實(shí)際現(xiàn)狀，標(biāo)準(zhǔn)起草組對(duì)具有代表性、普遍性的問(wèn)題進(jìn)行廣泛的調(diào)查和針對(duì)性分析，通過(guò)會(huì)議、訪談等形式，尋求解決方案。一方面對(duì)污水種類和相關(guān)環(huán)境場(chǎng)景進(jìn)行梳理，另一方面對(duì)采樣操作的全過(guò)程（

7、例如采樣耗材、采樣人員、采樣點(diǎn)位、采樣方法、采樣記錄、質(zhì)量控制、樣本運(yùn)輸及保存等）進(jìn)行了詳細(xì)的規(guī)定，確保不同機(jī)構(gòu)進(jìn)行城市污水中新冠病毒樣本采集實(shí)施、指導(dǎo)或監(jiān)管時(shí)的規(guī)范化與標(biāo)準(zhǔn)化。堅(jiān)持與時(shí)俱進(jìn)的原則，符合國(guó)家、地方文件要求標(biāo)準(zhǔn)制訂過(guò)程中，吸收國(guó)家及地方有關(guān)冷鏈?zhǔn)称芳跋嚓P(guān)環(huán)境表面新冠病毒樣本采集或疫情防控的文件和標(biāo)準(zhǔn)的要求，包括：新型冠狀病毒肺炎防控方案、上海市新型冠狀病毒疫情防控方案、GB 18466-2005醫(yī)療機(jī)構(gòu)水污染物排放標(biāo)準(zhǔn)、GB 18918-2002城鎮(zhèn)污水處理廠污染物排放標(biāo)準(zhǔn)、HJ 91.1-2019污水監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范、WS/T 697-2020新冠肺炎疫情期間特定人群個(gè)人防護(hù)指南、

8、WS/T 776-2021農(nóng)貿(mào)（集貿(mào)）市場(chǎng)新型冠狀病毒環(huán)境監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范、WS/T 799-2022污水中新型冠狀病毒富集濃縮和核酸檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)等，細(xì)化了樣本采集的采樣耗材、采樣人員、采樣點(diǎn)位、采樣方法、采樣記錄、質(zhì)量控制、樣本運(yùn)輸及保存等內(nèi)容。三、標(biāo)準(zhǔn)編制過(guò)程（一）啟動(dòng)階段2022年4月，上海市疾病預(yù)防控制中心組建標(biāo)準(zhǔn)起草組，啟動(dòng)標(biāo)準(zhǔn)修訂工作，建立會(huì)商、討論機(jī)制。收集標(biāo)準(zhǔn)文獻(xiàn)、開展調(diào)研討論，形成討論稿標(biāo)準(zhǔn)制定前，標(biāo)準(zhǔn)起草組收集了有關(guān)污水新冠病毒樣本采集與運(yùn)輸?shù)奈募蜆?biāo)準(zhǔn)，根據(jù)工作需要定期召開標(biāo)準(zhǔn)制定工作會(huì)，協(xié)調(diào)解決標(biāo)準(zhǔn)編制過(guò)程中出現(xiàn)的問(wèn)題，結(jié)合實(shí)踐工作中發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題及解決方案，形成了標(biāo)準(zhǔn)討論稿。

9、廣泛征求意見，形成標(biāo)準(zhǔn)征求意見稿在標(biāo)準(zhǔn)的研制過(guò)程中，針對(duì)性地對(duì)相關(guān)機(jī)構(gòu)開展了深入的調(diào)研，廣泛征求意見，標(biāo)準(zhǔn)起草組對(duì)各方意見匯總后逐一討論，進(jìn)一步細(xì)化標(biāo)準(zhǔn)條款，形成標(biāo)準(zhǔn)征求意見稿。四、標(biāo)準(zhǔn)主要結(jié)構(gòu)與關(guān)鍵技術(shù)內(nèi)容說(shuō)明（一）標(biāo)準(zhǔn)主要結(jié)構(gòu)本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了城市污水中新型冠狀病毒樣品采集、運(yùn)輸和保存方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于城市污水中新型冠狀病毒樣品采集、運(yùn)輸和保存。1.耗材本章規(guī)定了樣本采集前應(yīng)做的相關(guān)耗材準(zhǔn)備工作,包括個(gè)人防護(hù)用品的要求及相關(guān)采樣耗材的準(zhǔn)備。2.樣本采集本章主要包括采樣人員、采樣點(diǎn)位、采樣方法、采樣記錄。（1）采樣人員：包括對(duì)采樣人員的技術(shù)要求、人員數(shù)量、防護(hù)要求。 （2）采樣點(diǎn)位：規(guī)定了根據(jù)排水

10、系統(tǒng)分布，選擇關(guān)鍵位置對(duì)未經(jīng)處理的污水進(jìn)行采樣。（3）采樣方法：對(duì)采樣方式、過(guò)程技術(shù)要求、采樣量、個(gè)人防護(hù)等提出要求。（4）采樣記錄：對(duì)樣本信息記錄要求進(jìn)行了規(guī)定。3.采樣質(zhì)量控制本章主要包括對(duì)采樣的全程序空白樣品進(jìn)行了規(guī)定。4.樣本運(yùn)輸為保證樣本的有效性、準(zhǔn)確性及安全性，本章對(duì)樣本封裝及樣本運(yùn)輸進(jìn)行了規(guī)定。包括運(yùn)輸人員要求與采樣后對(duì)樣本運(yùn)輸相關(guān)要求。5.樣本保存本章主要包括對(duì)樣品的保存要求進(jìn)行了規(guī)定。關(guān)鍵技術(shù)內(nèi)容說(shuō)明1. 標(biāo)準(zhǔn)名稱和范圍標(biāo)準(zhǔn)名稱為“城市污水中新型冠狀病毒樣品采集、運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范”，主要針對(duì)“樣本采集的采樣耗材、采樣人員、采樣點(diǎn)位、采樣方法、采樣記錄、質(zhì)量控制、樣本運(yùn)輸及保存”等

11、內(nèi)容進(jìn)行規(guī)定。2. 術(shù)語(yǔ)3.2“城市污水”的定義參考GB 18918-2002城鎮(zhèn)污水處理廠污染物排放標(biāo)準(zhǔn)3.1“指城市居民生活污水，機(jī)關(guān)、學(xué)校、醫(yī)院、商業(yè)服務(wù)機(jī)構(gòu)、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)及各種公共設(shè)施排水，以及允許排入城市污水收集系統(tǒng)的含工業(yè)廢水和初期雨水的污水等”。3. 術(shù)語(yǔ)3.3“瞬時(shí)水樣”的定義引用HJ 91.1-2019污水監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范3.2“瞬時(shí)水樣”定義。術(shù)語(yǔ)3.4“混合水樣”的定義參考HJ 91.1-2019污水監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范3.3“等時(shí)混合水樣”、3.4“等比例混合水樣”，綜合定義為“在某一時(shí)段內(nèi)，在同一采樣點(diǎn)位按等時(shí)間間隔所采等體積水樣的混合水樣”。術(shù)語(yǔ)3.5“全程序空白樣品”的定義引用H

12、J 91.1-2019污水監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范3.6“全程序空白樣品”定義。條款4.1 “個(gè)人防護(hù)用品”的依據(jù)個(gè)人防護(hù)是保護(hù)采樣操作人員在工作中免受新冠病毒感染的預(yù)防措施，不同場(chǎng)所和環(huán)境的新冠病毒感染風(fēng)險(xiǎn)不同，因此一般采用分級(jí)防護(hù)，參照上海市新型冠狀病毒肺炎防控方案與WS/T 697-2020新冠肺炎疫情期間特定人群個(gè)人防護(hù)指南，對(duì)城市污水進(jìn)行采樣時(shí)，采樣人員采取二級(jí)防護(hù)，穿醫(yī)用連體防護(hù)服、戴醫(yī)用無(wú)紡布帽、N95及以上防護(hù)口罩、護(hù)目鏡或一次性防護(hù)面罩、戴乳膠手套、穿防水靴套。條款5.3 “采集方法”的依據(jù)針對(duì)城市污水樣本特點(diǎn)，參照WS/T7762021農(nóng)貿(mào)(集貿(mào))市場(chǎng)新型冠狀病毒環(huán)境監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范，對(duì)城

13、市污水樣本的采集方法進(jìn)行了詳細(xì)的規(guī)定，具體流程為“根據(jù)現(xiàn)場(chǎng)條件和監(jiān)測(cè)需求，可采用瞬時(shí)水樣或混合水樣；采樣前進(jìn)行手部消毒；采樣時(shí)應(yīng)去除水面的雜物、垃圾等漂浮物，不可攪動(dòng)水底部的沉積物；使用無(wú)菌聚乙烯瓶采集污水樣本，采樣體積不低于300ml；采樣后用75%酒精對(duì)采樣瓶外表面進(jìn)行消毒，然后將采樣瓶貼好樣本標(biāo)簽，裝入密封采樣袋中，對(duì)密封采樣袋外表面再次進(jìn)行消毒。”其中“采樣體積不低于300ml”與WS/T 799-2022污水中新型冠狀病毒富集濃縮和核酸檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)中樣品量要求相一致。條款6 “樣本質(zhì)量控制”的依據(jù)為保證分析結(jié)果的準(zhǔn)確性，掌握全過(guò)程操作步驟和環(huán)境條件對(duì)樣品的影響，參考HJ 91.1-2

14、019污水監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范規(guī)定了每批次水樣均應(yīng)采集全程序空白樣品，與水樣一起送實(shí)驗(yàn)室分析。條款7.2 “樣本運(yùn)輸”的依據(jù)參考WS/T 799-2022污水中新型冠狀病毒富集濃縮和核酸檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)5“水樣的采集、運(yùn)輸及保存”，規(guī)定運(yùn)輸過(guò)程中確保04條件下冷藏運(yùn)輸。并細(xì)化規(guī)定“如需要長(zhǎng)途運(yùn)輸，應(yīng)采用干冰等制冷方式進(jìn)行保藏；樣本運(yùn)送期間應(yīng)避免反復(fù)凍融。”10.條款8 “樣本保存”的依據(jù)參考WS/T 799-2022污水中新型冠狀病毒富集濃縮和核酸檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)5“水樣的采集、運(yùn)輸及保存”及HJ 91.1-2019污水監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范7.1.3“樣本保存”，綜合規(guī)定了“24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)的樣本可置于04保存； 24

15、小時(shí)內(nèi)無(wú)法檢測(cè)的樣本應(yīng)置于-70或以下保存（若無(wú)-70保存條件，應(yīng)置于-20冰箱保存）”。標(biāo)準(zhǔn)修訂的主要內(nèi)容本標(biāo)準(zhǔn)為首次制定。與現(xiàn)行法律、法規(guī)、文件和標(biāo)準(zhǔn)相關(guān)情況的說(shuō)明目前，國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織（International Organization for Standardization，ISO）正在研制標(biāo)準(zhǔn)ISO/AWI 7014 Water quality Detection and quantification of SARS-CoV-2 in wastewater，擬提供一種檢測(cè)廢水中SARS-CoV-2及其變種以及其他病毒的方法。2022年我國(guó)發(fā)布的WS/T7992022污水中新型冠狀病毒

16、富集濃縮和核酸檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)為污水中新型冠狀病毒富集濃縮和核酸檢測(cè)提供了技術(shù)支持，但以上兩項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)均側(cè)重于對(duì)廢水中SARS-CoV-2的檢測(cè)。另一方面，國(guó)外針對(duì)新型冠狀病毒污水樣品采集，保存和運(yùn)輸要求主要基于國(guó)外疫情需要和當(dāng)?shù)貙?shí)際情況，而我國(guó)目前的污水樣品采集保存和運(yùn)輸標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容不全面，且針對(duì)性不足，因此有必要基于我國(guó)疫情防控現(xiàn)狀以及上海市實(shí)際疫情和污水分布情況，制定具有針對(duì)性、操作性的標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)規(guī)范。此外，新型冠狀病毒肺炎防控方案、上海市新型冠狀病毒疫情防控方案、GB 18466-2005醫(yī)療機(jī)構(gòu)水污染物排放標(biāo)準(zhǔn)、HJ 91.1-2019污水監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范、WS/T 776-2021農(nóng)貿(mào)（集貿(mào)）市場(chǎng)

17、新型冠狀病毒環(huán)境監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范等文件對(duì)于污水的采樣檢測(cè)工作也提出了相關(guān)要求，本標(biāo)準(zhǔn)在制定時(shí)在保持一致的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步細(xì)化了城市污水新冠病毒樣本采集的采樣耗材、采樣人員、采樣點(diǎn)位、采樣方法、采樣記錄、質(zhì)量控制、樣本運(yùn)輸及保存等內(nèi)容。目前，國(guó)內(nèi)尚無(wú)專門針對(duì)城市污水中新冠病毒樣本采集相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或技術(shù)規(guī)范。六、重大分歧意見的處理結(jié)果及理由本標(biāo)準(zhǔn)起草過(guò)程中無(wú)重大分歧意見。七、標(biāo)準(zhǔn)宣貫實(shí)施的建議本標(biāo)準(zhǔn)在制訂過(guò)程中征詢了疾病預(yù)防控制、衛(wèi)生監(jiān)督、環(huán)保、水務(wù)等相關(guān)單位的意見，并經(jīng)過(guò)多次討論、反復(fù)修改形成，符合本市現(xiàn)階段對(duì)城市污水新冠病毒樣本采集的要求。特別是當(dāng)今新冠疫情在全球暴發(fā)流行之際，規(guī)范化開展樣本采集工作是保證檢測(cè)結(jié)