山大醫(yī)學細胞生物學課件05內(nèi)膜系統(tǒng)及囊泡轉運

1、第五章 內(nèi)膜系統(tǒng)及囊泡轉運內(nèi)膜系統(tǒng)的概念：細胞內(nèi)發(fā)生與功能相關的單層膜組成的細胞器。包括細胞的核膜、內(nèi)質網(wǎng)、高爾基體、溶酶體及細胞內(nèi)的轉運小泡，多數(shù)人把過氧化物酶體也歸于內(nèi)膜系統(tǒng)。本章要給大家講述的內(nèi)容分泌蛋白形成的過程膜蛋白形成的過程溶酶體的形成過程細胞內(nèi)膜的動態(tài)變化細胞內(nèi)的運載系統(tǒng)內(nèi)膜系統(tǒng)中內(nèi)質網(wǎng)、高爾基體及溶酶體結構功能的比較內(nèi)膜系統(tǒng)中特殊的細胞器（過氧化物酶體）內(nèi)膜系統(tǒng)與疾病本章要給大家講述的內(nèi)容分泌蛋白形成的過程膜蛋白形成的過程溶酶體的形成過程細胞內(nèi)膜的動態(tài)變化細胞內(nèi)的運載系統(tǒng)內(nèi)膜系統(tǒng)中內(nèi)質網(wǎng)、高爾基體及溶酶體結構功能的比較內(nèi)膜系統(tǒng)中特殊的細胞器（過氧化物酶體）內(nèi)膜系統(tǒng)與疾病分泌蛋白

2、的形成過程分泌蛋白、膜蛋白及溶酶體蛋白通過相近的途徑：合成于粗面內(nèi)質網(wǎng) （經(jīng)加工）以運輸小泡的形式轉運到 高爾基體（加工、分選）于高爾基體的反面離開高爾基體再以分泌小泡的形式運輸?shù)劫|膜，以外排的形式完成分泌。分泌蛋白的形成過程分泌蛋白、膜蛋白及溶酶體蛋白通過相近的途徑：合成于粗面內(nèi)質網(wǎng) （經(jīng)加工）以運輸小泡的形式轉運到 高爾基體（加工、分選）于高爾基體的反面離開高爾基體再以分泌小泡的形式運輸?shù)劫|膜，以外排的形式完成分泌。分泌蛋白形成的第一站：內(nèi)質網(wǎng)微粒體的概念標志酶：葡萄糖-6-磷酸酶內(nèi)質網(wǎng)的功能（一） 粗面內(nèi)質網(wǎng)與外輸性蛋白質的分泌合成、加工修飾及轉運過程密切相關1.作為核糖體附著的支架附著

3、核糖體合成的蛋白外輸性的或分泌性的蛋白質膜整合蛋白構成細胞器中駐留蛋白（內(nèi)質網(wǎng)，高爾基體）溶酶體蛋白信號肽學說核糖體是怎樣附著在內(nèi)質網(wǎng)上，新形成的肽是怎樣穿越內(nèi)質網(wǎng)的膜而進入內(nèi)質網(wǎng)腔的 ？SRP的結構特點信號肽引導新合成的肽進入內(nèi)質網(wǎng)腔的過程Translocator 的結構特點與功能2. 新生多肽鏈的折疊與裝配內(nèi)質網(wǎng)腔內(nèi)：GSSG , 附著與網(wǎng)內(nèi)腔的蛋白二硫鍵異構酶（protein disulfide isomerase, PDI),使得二硫鍵形成及多肽折疊加快內(nèi)質網(wǎng)中的重鏈結合蛋白（heavy-chain binding protein, Bip) ，識別折疊錯誤及未完成裝配的蛋白亞單位，并

4、滯留。Heat Shock protein 70, SHP70.“伴侶”蛋白（chaperone protein). 這類蛋白還有鈣網(wǎng)素（calreticulin), 葡萄糖調節(jié)蛋白94（glucose regulated protein 94, GRP94). 后者為內(nèi)質網(wǎng)標志性分子伴侶。- Lys-Asp-Glu-Leu (in short KDEL) 四氨基酸滯留信號肽（retention Signal peptide )endoplasmin 這些伴侶蛋白都有下列特殊序列作為滯留的信號3.蛋白質的糖基化（glycosylation)Asn N-linked glycosylationT

5、arget sequences: Asn-X-Ser or Asn-X-Thr滑面內(nèi)質網(wǎng)的功能（插曲）1. 脂質合成2. 糖原代謝3. 解毒作用4. 胞內(nèi)鈣濃度調節(jié)5. 胃酸、膽汁的合成與分泌1. 脂質合成 包括磷脂、膽固醇、脂肪、皮質激素、糖脂等。滑面內(nèi)質網(wǎng)能合成脂類和膽固醇；含有合成膽固醇的全套酶系和能夠使膽固醇轉化為類固醇激素的酶類及脂類合成酶類，如磷脂酸合成酶等在分泌類固醇激素的細胞中， SER很發(fā)達。在生殖腺和腎上腺的內(nèi)分泌細胞中，SER參與甾體類激素的合成 。 脂質合成特點：ER合成細胞所需絕大多數(shù)膜脂（包括磷脂和膽固醇） 兩種例外： 鞘磷脂和糖脂（ER開始Golgi comple

6、x完成） Mit/Chl某些單一脂類是在它們的膜上合成的。 各種不同的細胞器具有明顯不同的脂類組成： phosphatidylcholine（PC）： ERGCPM（高低） phosphatidylserine（PS）： PMGCER（高低） 合成磷脂所需的三種酶均為ER膜上的整合蛋白： 脂?；D移酶 磷脂酸酶 膽堿磷酸轉移酶磷脂合成酶的活性部位在ER膜的細胞質側說明合成磷脂所需底物來源于細胞質基質基本過程：3步以卵磷脂（磷脂酰膽堿）的合成過程：新合成磷脂去向（三種）膜脂的翻轉：新合成磷脂最初位于內(nèi)質網(wǎng)膜的胞質側，部分磷脂在磷脂轉位因子（phospholipd translocator / f

7、lippase翻轉酶）的作用下，將其從胞質側翻轉至內(nèi)質網(wǎng)腔面。在RER中的磷脂反轉 運輸小泡的轉運：新合成磷脂或者以出芽形成小泡的形式運至高爾基體、溶酶體、質膜等。磷脂交換蛋白的作用在膜之間轉移磷脂: 在磷脂轉換蛋白（phospholipd exchange proteins ，PEP）的作用下完成。以形成復合物的形式自由擴散至細胞質基質，然后運至線粒體、過氧化物酶體等。磷脂轉換蛋白：水溶性載體蛋白，每一載體蛋白識別特殊類型的磷脂，且只與一個磷脂分子結合，成為水溶性復合物，觸到缺乏磷脂的線粒體和過氧化酶體便會釋放結合的磷脂分子，安插到該膜的脂雙層中。2. 糖原代謝參與糖原分解： 肝細胞滑面內(nèi)質

8、網(wǎng) (胞質面?) 糖原顆粒磷酸化酶催化1-磷酸葡萄糖 6-磷酸葡萄糖，SER膜上的葡萄糖-6-磷酸酶脫掉6-磷酸葡萄糖的磷酸根，葡萄糖轉移到內(nèi)質網(wǎng)腔中，最后被釋放到血液 。參與糖原的合成：2種不同觀點 3. 解毒作用 肝細胞中SER上細胞色素b5，細胞色素P450，NADPH-細胞色素C還原酶， NADH -細胞色素b5還原酶等電子傳遞酶系，具有羥化酶和氧化酶功能，即有解毒作用，通過氧化、羥化有毒物質，使毒性破壞、極性增強，代謝為水溶性物質排出體外。4. Ca2+貯存及調節(jié)肌細胞中的肌漿網(wǎng)特化的SER參與肌原纖維收縮中的鈣離子濃度調節(jié)儲存鈣離子，作為細胞內(nèi)信號物質。5. 胃酸、膽汁的合成與分泌

9、 胃壁腺上皮細胞中，參與胃酸形成 肝細胞中參與膽汁的合成與分泌分泌蛋白形成的第二站：高爾基體（一）形態(tài)類型 1.扁平囊泡： 3-8個,弓形排列(膜厚6-8nm，寬15-20nm，囊間距20 30nm ) 2.小囊泡（運輸囊泡）：（ 4080nm ） 3.大囊泡（分泌泡）：（ 100500nm）電鏡下： 光滑的膜組成的膜性細胞器，分為三個區(qū)室高爾基體的立體三維結構(極性)順面高爾基網(wǎng)狀結構（cis Golgi network,CGN ） 中間膜囊：糖基化等修飾 反面高爾基網(wǎng)狀結構（trans Golgi network,TGN） （三）分布形式形態(tài)、分布、生理狀態(tài)與細胞類型及功能有關；發(fā)達程度與

10、細胞分化程度呈正比；高爾基體與細胞骨架關系密切： 在非極性細胞中，高爾基體分布在MTOC(負端) 高爾基體的膜囊上存在微管的馬達蛋白（cytoplasmic dynein和kinesin）和微絲的馬達蛋白（myosin）。 二、高爾基復合體的化學組成脂類：膜脂成分介于內(nèi)質網(wǎng)和質膜間，40%； 蛋白質：60% 酶類：種類較多，如：糖基轉移酶、磷脂 酶、氧化還原酶(成熟面含酶多)；糖類：多糖分布從形成面到成熟面呈梯度 上升； 種類 功能糖基轉移酶 參與糖蛋白合成 （標志酶） 甘露糖轉移酶 N-乙酰半乳糖轉移酶 N-乙酰葡萄糖胺轉移酶 唾液酸轉移酶 半乳糖基轉移酶 巖藻糖轉移酶高爾基體中的糖基轉移酶

11、順面扁囊反面扁囊中間扁囊三、高爾基復合體的功能（一）參與細胞內(nèi)物質運輸和分泌 外分泌性蛋白、細胞膜 蛋白、溶酶體酶蛋白、細胞外基質蛋白等都通高爾基體修飾和轉運（二）胞內(nèi)物質加工合成的場所 1.糖蛋白的加工合成 糖蛋白的糖基化 糖脂的糖基化糖基化修飾的蛋白有兩種連接方式： N連接： N連接在ER腔內(nèi)完成，仍需在高爾基復合體內(nèi)進一步加工修飾（剪切和補加某些基團） O連接： O連接主要發(fā)生在Golgi complex-與Ser、Thr和Hyp的OH連接，連接的糖為半乳糖或N-乙酰半乳糖胺。 蛋白質糖基化類型(N-連接與O-連接的寡糖比較) 特 征 N-連接 O-連接1. 合成部位 粗面內(nèi)質網(wǎng)高爾基體

12、2. 合成方式 來自同一個 寡糖前體一個個單糖加上去3. 與之結合的 氨基酸殘基 天冬酰胺 絲氨酸、蘇氨酸、羥賴氨酸、羥脯氨酸4 最終長度 至少5個 糖殘基一般16個糖殘基，但ABO血型抗原較長5.第一個糖殘基N乙酰葡萄糖胺半乳糖, N乙酰半乳糖胺The core carbohydrate of N-linked oligosaccharides is assembled in the rER. Modifications to N-linked oligosaccharides are completed in the Golgi complex. O-linked oligosacchar

13、ides takes place in Golgi complex.高爾基復合體中的蛋白質糖鏈的加工修飾具有嚴格的順序性和區(qū)域性。RER溶酶體酶寡糖磷酸化去除甘露糖去除甘露糖、加上N-乙酰葡萄糖胺加上半乳糖加上唾液酸、糖蛋白分選溶酶體質膜分泌泡（3）高爾基體糖基化修飾的特點高爾基體的糖基化修飾加工酶都是整合膜蛋白；定位區(qū)域不同酶加工區(qū)室化；加工酶的活性部位面向高爾基體腔面；作用：切去或加上單糖基；（4）糖基化的作用：對蛋白質有保護作用,使蛋白質能夠抵抗消化酶的作用；賦予蛋白質運輸信號的功能；某些蛋白只有在糖基化之后才能正確折疊。參與形成細胞表面的糖被.(1)無生物活性的蛋白原高爾基體切除N-端

14、或兩端的序列成熟的 多肽; 如胰島素、胰高血糖素及血清白蛋白等。(2)含多個相同氨基酸的蛋白質前體高爾基體水解同種有活性的 多肽; 如神經(jīng)肽等。(3)在高爾基體中進行的肽鏈酪氨酸殘基的硫酸化作用 硫酸根轉移到酪氨酸羥基上蛋白聚糖； 2.蛋白質的水解加工胰島素的加工過程 蛋白質由RER合成、修飾后在高爾基體內(nèi)分選，后再由運輸小泡送往細胞的不同靶結構部位。分選基礎：糖蛋白的修飾具有方向性，使蛋白具有特異的分選標志；甘露糖基磷酸化也是分選的標簽。高爾基體作用：膜泡運輸?shù)闹匾獦屑~；（三）蛋白質的分選與胞內(nèi)膜泡運輸形式：形成運輸小泡或分泌小泡膜蛋白的形成過程分泌蛋白膜蛋白溶酶體的形成過程：溶酶體內(nèi)蛋白的

15、形成溶酶體結構功能特點 溶酶體 (lysosome) 它是單層膜圍繞、內(nèi)含多種酸性水解酶類的囊泡狀細胞器，其主要功能是進行細胞內(nèi)消化。 具有異質性（heterogenous），形態(tài)大小及內(nèi)含的水解酶種類都可能有很大的不同。 一、溶酶體的形態(tài)結構和化學組成大小多為0.20.8m, 可從0.05數(shù)m，有多種形態(tài)和名稱，因而有稱之異質性細胞器。（一）溶酶體的結構特征1.單層膜包裹的囊球狀小體，圓形或卵圓形。2. 溶酶體的主要成分： 含有多種水解酶，但沒有活性，只有當溶酶體破裂，或其它物質進入，才有酶活性。其水解酶已知60余種，這些酶均屬于酸性水解酶，反應的最適PH值為5.0左右。 溶酶體的標志酶：酸

16、性磷酸酶（acid phosphatase）小鼠腹腔巨噬細胞3. 溶酶體膜蛋白高度糖基化，可有利于防止自身膜蛋白的降解。如lgpA、lgpB4. 膜上嵌有質子泵，形成和維持溶酶體中酸性的內(nèi)環(huán)境； 并且具有多種載體蛋白，用于水解的產(chǎn)物向外轉運； （二）溶酶體膜糖蛋白家族的同源性溶酶體結合蛋白（lysosomal-associated membrane protein，LAMP） 溶酶體整合膜蛋白（lysosomal integral membrane protein，LIMP）結構組成 N-端信號肽序列 腔內(nèi)區(qū)（高度糖基化） 跨膜區(qū)（單次） C-端胞質尾區(qū)（10個AA組成，高度保守） 可能是蛋白

17、分選的識別信號二、溶酶體的類型（一）根據(jù)溶酶體的功能狀態(tài)分為三類 初級溶酶體（primary lysosome）次級溶酶體（secondary lysosome）三級溶酶體（tertiary lysosome） 后溶酶體（post- lysosome ） 殘留小體（residual body） 終末溶酶體（telolysosome ） 1.初級溶酶體（primary lysosome）直徑約0.20.5um，膜厚7.5nm， 內(nèi)含物均一，無明顯顆粒，PH為 5.0左右，是高爾基體 分泌形成的剛形成的成熟溶酶體， 不含底物。前溶酶體含有多種水解酶，但 沒有活性，只有當溶 酶體破裂，或其它物 質進

18、入，才有酶活性。小鼠脾臟巨噬細胞中的溶酶體用電鏡細胞化學技術顯示其中含有的酸性磷酸酶。 M：線粒體，L：溶酶體（樸英杰）2.次級溶酶體由初級溶酶體融入來自細胞外或細胞內(nèi)消化底物而形成，是將要或正在進行消化作用的溶酶體，內(nèi)含水解酶和相應的底物。分類： （1）根據(jù)與其融合的底物性質的不同分為： 吞噬溶酶體（phagolysosome） 由初級溶酶體和吞噬體融合而成。 多泡小體（multivesicular body） 初級溶酶體和吞飲體融合而成。（2）根據(jù)其消化底物的來源不同又分為 自噬溶酶體(autophagic lysosome) 初級溶酶體與自噬體融合形成的次級溶酶體， 消化細胞自身的組分或

19、衰老、破碎的細胞器 （自噬體+初級溶酶體） 異噬溶酶體(heterophagic lysosome) 初級溶酶體與吞噬體或吞飲體融合形成， 消化來源于細胞外的物質 （吞噬體/吞飲體+ 初級溶酶體）Phagocytosis and Autophagy3.三級溶酶體（tertiary lysosome）又稱后溶酶體（post-lysosome），已失去酶活性也為殘余小體或終末溶酶體（telolysosome）脂褐質、含鐵小體、多泡體、髓樣結構1）脂褐色素(lipofusion)內(nèi)含脂滴，外被單位膜，形狀不規(guī)則。常見于神經(jīng)細胞和心肌細胞隨細胞生存時間的延長，數(shù)量增多，而使神經(jīng)細胞等功能急劇下降2）含

20、鐵小體 內(nèi)部充滿鐵顆粒，外被單位膜攝入鐵過量時形成?？梢姼文I等器官出現(xiàn)許多含鐵小體。 3）多泡體 內(nèi)含許多小泡在神經(jīng)細胞、卵母細胞中可見。 4）髓樣結構內(nèi)含膜性成分，呈同心層狀、板狀、指紋狀排列。常見于巨噬細胞、腫瘤細胞及病毒感染的細胞。肝細胞中的脂褐質溶酶體內(nèi)的蛋白是怎樣形成的，又是怎樣轉運的？溶酶體蛋白膜蛋白（高度糖基化的蛋白，防止溶酶體的酶破壞膜結構）形成的過程與細胞外膜的蛋白相近溶酶體內(nèi)的酶蛋白（在酸性環(huán)境pH5.0,被活化） 形成過程與分泌蛋白相近，分選信號M-6-P（一）溶酶體水解酶的形成從反面高爾基體以出芽方式形成的過程 甘露糖-6-磷酸發(fā)生途徑1. 溶酶體酶蛋白的N-糖基化與內(nèi)

21、質網(wǎng)轉運 粗面內(nèi)質網(wǎng)中酶蛋白合成，進行N-連接糖基化，然后轉運小泡運輸?shù)礁郀柣w的形成面。2. 溶酶體酶蛋白在高爾基體內(nèi)的加工與轉移 （糖基化與磷酸化） 在順面高爾基網(wǎng)處作標記：甘露糖-6-磷酸(mannose-6-phosphate,M6P)甘露糖-6-磷酸化 N-乙酰葡萄糖胺磷酸轉移酶 (N-acetyglucosamine phosphotransferase) N-乙酰葡萄糖胺磷酸糖苷酶溶酶體酶的加工 3. 酶蛋白的分選與轉運在反面高爾基網(wǎng)有受體識別、結合M-6-P，出芽，以有被小泡形式脫離高爾基體。4. 前溶酶體的形成無被小泡與晚期內(nèi)體結合而成5. 溶酶體的成熟 在酸性環(huán)境下，溶酶體

22、酶去磷酸化；膜M-6-P受體重回到高爾基體trans面高爾基體cis膜囊寡糖鏈上的甘露糖殘基磷酸化M-6-PN-乙酰葡萄糖胺磷酸轉移酶高爾基體trans-膜囊和TGN膜（M-6-P受體）溶酶體酶分選與局部濃縮以出芽的方式轉運到晚期內(nèi)體磷酸葡萄糖苷酶磷酸化識別信號：信號斑溶酶體酶的合成及N-連接的糖基化修飾（RER） 發(fā)生途徑M-6-P與受體分離去磷酸化溶酶體酶內(nèi)體性溶酶體形成受體循環(huán)出芽酸性環(huán)境The recognition of a lysosomal hydrolase. The GlcNAc phosphotransferase enzyme that recognizes lysoso

23、mal hydrolases in the Golgi apparatus has separate catalytic and recognition sites. The catalytic site binds both high-mannose N-linked oligosaccharides and UDP-GlcNAc. The recognition site binds to a signal patch that is present only on the surface of lysosomal hydrolases. 溶酶體分選的信號斑溶酶體的形成過程 從反面高爾基體

24、以出芽方式形成過程：溶酶體酶的分選信號是甘露糖-6-磷酸(M-6-P)在反面高爾基復合體含有識別M-6-P的膜結合蛋白受體從RER合成的含有M-6-P的酶與反面高爾基復合體膜上 M-6-P受體特異結合、包裝，從反面高爾基復合體以出芽方式形成有被小泡。有被小泡離開高爾基復合體后立即脫去衣被，成為無被運輸小泡。運輸小泡與內(nèi)體（PH=6）融合成為內(nèi)體性溶酶體。M-6-P去P后與受體分離，受體返回Golgi再循環(huán)，內(nèi)體性溶酶體PH值進一步下降成為成熟的溶酶體。四、溶酶體的功能（一） 作為細胞內(nèi)的消化“器官”: 分解細胞內(nèi)物質，清除衰老、損壞的細胞器，以維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，并為細胞提供營養(yǎng) 如血清脂蛋白（

25、膽固醇）（二） 防御保護功能（病原體感染刺激單核細胞分化成巨噬細胞而吞噬、消化） 過程： phagocytosis phagosomeendocytosis early endosome late endosomelysosome autophagy autophagosomeDigestion of bacteria or virus （三） 參與某些激素的形成 某些分泌腺細胞中，溶酶體攝入分泌顆粒參與分泌過程的調節(jié) 如甲狀腺素、粒溶（分泌性自噬）；濾泡腔甲狀腺球蛋白I2溶酶體甲狀腺素甲狀腺濾泡上皮細胞（四） 在個體發(fā)生、發(fā)育過程起重要作用 參與清除贅生組織或退行性變化的細胞；骨骼發(fā)生中骨質

26、更新哺乳類動物子宮內(nèi)膜的周期性萎縮 受精過程中的精子的頂體（acrosome）反應細胞膜的動態(tài)變化：細胞內(nèi)的運載系統(tǒng)（囊泡運輸）有被囊泡的種類及定向轉運92 常見的三種類型包被1. 網(wǎng)格蛋白包被小泡2. COPII包被小泡3. COPI包被小泡網(wǎng)格蛋白有被囊泡(clathrin-coated vesicle)網(wǎng)格蛋白+銜接蛋白（不同種類決定運轉情況）銜接蛋白： 目前至少發(fā)現(xiàn)4種不同類型，可分別結合不同類型的受體， 形成不同性質的轉運小泡，如 AP1：高爾基體內(nèi)體的運輸 AP2：質膜內(nèi)體的運輸 AP3：高爾基體溶酶體的運輸。95Selective transport by clathrin co

27、ated vesicles96衣被小泡的形成與分離過程 97（二）COP包被小泡 (COP coated vesicles)負責從內(nèi)質網(wǎng)高爾基體的物質運輸（順向運輸）； COP包被蛋白由5種亞基組成，有sec12p、 sec24p、sec23p、sec13p、sec31p； 包被蛋白的裝配受Sar蛋白控制；COP包被小泡對轉運物質具有選擇性并使之濃縮。 原因： a. COP蛋白能識別并結合跨內(nèi)質網(wǎng)膜蛋白胞質面一端的信號序列； b. 跨膜內(nèi)質網(wǎng)蛋白腔面一端作為受體與ER腔中的可溶性蛋白結合。 COP包被成熟折疊蛋白的衣被小泡從內(nèi)質網(wǎng)的過渡成分（無核糖體）出芽。運輸小泡一旦形成， COP 衣被便消

28、失，小泡運輸?shù)巾樏娓郀柣鶑秃象w并將內(nèi)容物釋放。98COPII包被小泡的裝配Sar-GTP與內(nèi)質網(wǎng)膜的結合起始COPII亞基的裝配，形成小泡的包被并出芽，跨膜受體在腔面捕獲并富集被轉運的可溶性蛋白 COP II衣被小泡形成于內(nèi)質網(wǎng)的特殊部位，稱為內(nèi)質網(wǎng)出口（exit sites），這些部位沒有核糖體，由交織在一起的管道和囊泡組成網(wǎng)絡結構。99（三）COP包被小泡 (COPcoated vesicles)負責回收、轉運內(nèi)質網(wǎng)逃逸蛋白 (escaped proteins） ER。（如分子伴侶） （逆向運輸） 高爾基體膜內(nèi)蛋白的逆向運輸 COP包被含有8種蛋白亞基， 包被蛋白復合物的裝配與去裝 配依賴

29、于ARF (GTP-binding protein)； 裝配過程100COPI衣被小泡101細胞器中保留及回收蛋白質的兩種機制： a.轉運泡將應被保留的駐留蛋白排斥在外，防止出芽轉運； b.通過識別駐留蛋白C-端的回收信號(lys-asp-glu-leu,KDEL)的特異性受體，以COP包被小泡的形式捕獲逃逸蛋白。 內(nèi)質網(wǎng)的膜蛋白（如SRP受體）在C端有一個不同的回收信號，通常是Lys-Lys-X-X（KKXX，X-任意氨基酸），同樣可保證它們的回收。 COP包被小泡在批量運輸( bulk flow)中行使功能, 負責 RER Golgi SV PM。COP包被小泡除行使 GolgiER逆行轉

30、運外， 也可行使順行轉運功能, ERER-Golgi ICGolgi。 102內(nèi)質網(wǎng)駐留蛋白的回收圖解103衣被小泡的類型與功能內(nèi)質網(wǎng)高爾基體Sec23/Sec24復合體，Sec 13/31復合體， Sec 12Sar 1COP II高爾基體內(nèi)質網(wǎng)COPARFCOP I質膜內(nèi)體高爾基體內(nèi)體高爾基體溶酶體高爾基體植物液泡Clathrin重鏈與輕鏈，AP2Clathrin重鏈與輕鏈，AP1Clathrin重鏈與輕鏈，AP3ARFclathrin運輸方向組成與銜接蛋白 GTP結合蛋白衣被類型104特異性識別融合是囊泡物質定向轉運和準確卸載的基本保證特異性識別與融合。包被小泡沿著細胞內(nèi)的“軌道”被運輸

31、到靶細胞器，馬達蛋白水解ATP提供運輸?shù)膭恿Α８黝愡\輸小泡之所以能夠被準確地與靶膜融合，是因為運輸小泡表面的標志蛋白能被靶膜上的受體識別，其中涉及識別過程的兩類關鍵性的蛋白質是SNAREs（soluble NSF attachment protein receptor）：介導運輸小泡特異性停泊和融合Rabs（targeting GTPase）：其作用是使運輸小泡靠近靶膜，催化融合的發(fā)生。1051.SNAREs （1）功能：介導運輸小泡與靶膜的融合。（2）類型：動物細胞中已發(fā)現(xiàn)20多種SNAREs， 分別分布于特定的膜上。v-SNAREs：運輸小泡膜上（囊泡相關膜蛋白）t-SNAREs：靶膜上（聯(lián)接蛋白）106（3）結構：具有一個螺旋結構域，相互纏繞形成跨膜SNAREs復合體，將小泡與靶膜拉在一起，實現(xiàn)運輸小泡特異性停泊和融合。（4）活性變化：在SNAREs接到新一輪的運輸小泡停泊之前，SNAREs必須以分離的狀態(tài)存在，NSF催化 SNAREs的分離。 NSF是一種類似分子伴侶的ATP酶，能夠利用ATP作為能量通過插入幾個適配蛋白（adaptor protein）將SNAREs復合體的螺旋纏繞分開。107SNAREs in vesicle transport（ T-SNARE ， V-SNARE ）108SNARE復合體的解離內(nèi)膜系統(tǒng)中特殊的細胞器（過氧化物酶體）過氧化物