基因工程(第一節(jié))復(fù)習(xí)

1、試卷第 頁(yè)，共7頁(yè)基因工程（第一節(jié)）復(fù)習(xí)一、單選題將外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞時(shí)，常用的載體不包括（）質(zhì)粒B.噬菌體C.動(dòng)植物病毒D.農(nóng)桿菌質(zhì)粒是細(xì)菌中的有機(jī)分子，卞列描述中正確的是質(zhì)粒能夠自主復(fù)制B.質(zhì)粒是基因工程的工具酶C.質(zhì)粒中含有兩個(gè)游離的磷酸基團(tuán)D.質(zhì)粒完全水解后最多可產(chǎn)生4種化合物若要使目的基因在受體細(xì)胞種表達(dá)，需要通過(guò)質(zhì)粒等載體導(dǎo)入受體細(xì)胞而不能直接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，其原因不包括（）目的基因無(wú)法插入受體細(xì)胞DNAB.目的基因無(wú)法完成復(fù)制C.目的基因無(wú)轉(zhuǎn)錄所需的啟動(dòng)部位D.目的基因與受體細(xì)胞遺傳信息傳遞方式不同4下列所示的黏性末端是由幾種限制性核酸內(nèi)切酶作用產(chǎn)生的（）AATTCI1

2、r11TTAACGA,1種B.2種C.3種D.4種-TCG5.關(guān)于下列黏性末端的描述，正確的是A-G-C-T-T-T-GYTT-A-AA,B.與的黏性末端相同，必定是由相同的限制性核酸內(nèi)切酶切出和是不同種限制性核酸內(nèi)切酶處理后得到的兩個(gè)DNA片段c.DNA連接酶與DNA聚合酶均能作用于上述黏性末端D.形成需要脫去2個(gè)水分子6下列有關(guān)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別的敘述，不正確的是（）從反應(yīng)類型來(lái)看，限制性核酸內(nèi)切酶催化的是一種水解反應(yīng)限制性核酸內(nèi)切酶的活性受溫度、pH的影響限制性核酸內(nèi)切酶能識(shí)別雙鏈DNA中某種特定的脫氧核甘酸序列限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越小卞列關(guān)于D

3、NA連接酶的作用敘述正確的是（）DNA連接酶的基本組成單位是脫氧核苛酸將單個(gè)脫氧核甘酸加到DNA片段的骨架上連接起來(lái)，重新形成磷酸二酯鍵連接DNA鏈上堿基之間的氫鍵將斷開(kāi)的兩個(gè)DNA片段的骨架連接起來(lái)，重新形成磷酸二酯鍵據(jù)圖所示，有關(guān)工具酶功能的敘述不正確的是（）bA限制性內(nèi)切酶可以切斷a處BDNA聚合酶可以連接a處C.解旋酶可以使b處解開(kāi)D.DNA連接酶可以連接c處卞圖是三種限制酶的脫氧核甘酸識(shí)別序列和切割位點(diǎn)示意圖（表示切點(diǎn)）。卜列相關(guān)分析正確的是（）限制酶1；GATC限制酶2；CcLcGG限制酶3；JgATCC這三種限制酶切割出的DNA片段的黏性末端長(zhǎng)度相同不同限制酶切割DNA所得的黏性

4、末端可能相同能被限制酶I切割的DNA也能被限制酶3切割同一個(gè)DNA經(jīng)限制酶I和限制酶3分別切割后所得片段數(shù)一定相等2020年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予兩位女科學(xué)家以表彰她們“開(kāi)發(fā)出一種基因組編輯方法”。CRISPR/Cas9基因組編輯系統(tǒng)工作原理如圖所示，關(guān)于此技術(shù)的解釋錯(cuò)誤的是（）Cas9為一種能使磷酸二酯鍵斷裂的酶DNA-RNA雜交區(qū)域不存在T-A堿基對(duì)在單鏈向?qū)NA中也存在堿基互補(bǔ)配對(duì)人為改變向?qū)NA的序列可實(shí)現(xiàn)對(duì)特定基因的切割下列關(guān)于DNA重組技術(shù)基本工具的說(shuō)法，正確的是（）DNA連接酶只能連接雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)含有的限制酶不能對(duì)自身的DNA進(jìn)行剪切限制酶切割DNA后一定

5、能產(chǎn)生黏性末端D質(zhì)粒是基因工程中唯一的載體12圖甲表示某環(huán)型DNA分子經(jīng)限制性核酸內(nèi)切酶（EcoRl）完全酶切后的片段電泳結(jié)果，若改變條件使其酶切不充分就有可能獲得如圖乙所示的電泳結(jié)果（Kb即T個(gè)堿基對(duì)）。下列敘述錯(cuò)誤的是A該DNA分子全長(zhǎng)至少為7Kb該DNA分子中至少含有4個(gè)EcoRI酶切位點(diǎn)反應(yīng)時(shí)間越長(zhǎng)，得到圖甲結(jié)呆的可能性越人適當(dāng)增加EcoRI濃度，可得到圖乙的結(jié)果13.基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)操作的，在基因操作的基本步驟中，不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)的是（）A目的基因與載體的結(jié)合將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的表達(dá)D.目的基因的人工合成14下圖是基因文庫(kù)的構(gòu)建和獲取目的基因的示意圖

6、。提取某生物PR擴(kuò)增后，用限制.各種不同大小戟體連接一各種不同大小|的全部D、A性核酸內(nèi)切酵切割的DNA片段的矗組質(zhì)粒卜列敘述正確的是（）A通過(guò)該途徑獲得的目的基因，通常是序列己知的過(guò)程通常只用一種DNA酶切割全部DNA過(guò)程需用CaCl2處理，使人腸桿菌細(xì)胞壁的通透性增加過(guò)程可用相應(yīng)抗體，利用核酸分子雜交技術(shù)釣取目的基因蚯蚓富含金屬硫蛋白（MT）等重金屬結(jié)合蛋白，能選擇性吸收土壤中的鎘。利用基因工程技術(shù)將蚯蚓MT基因轉(zhuǎn)入煙草，流程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.過(guò)程需使用逆轉(zhuǎn)錄酶過(guò)程把重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌的主要目的是對(duì)MT基因進(jìn)行擴(kuò)增過(guò)程中攜帶有目的基因的T1質(zhì)粒進(jìn)入煙草愈傷組織細(xì)胞，并整合

7、到植物細(xì)胞的染色體上通過(guò)設(shè)計(jì)相關(guān)引物，可借助PCR技術(shù)鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體細(xì)胞天然的玫瑰沒(méi)有藍(lán)色花，這是由于缺少控制藍(lán)色色素合成的基因E而開(kāi)藍(lán)色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B?，F(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍(lán)玫瑰，卞列操作正確的是（）提取矮牽牛藍(lán)色花的mRNA,從而獲得互補(bǔ)DNA,再擴(kuò)增基因E利用DNA連接酶從開(kāi)藍(lán)色花矮牽牛的基因文庫(kù)中可以獲取基因B利用DNA聚合酶將基因B與質(zhì)粒連接后導(dǎo)入玫瑰細(xì)胞將基因E直接導(dǎo)入人腸桿菌，然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細(xì)胞17下列有關(guān)基因工程技術(shù)的正確敘述是（）重組DNA技術(shù)所用的工具酶是限制酶、DNA連接酶和運(yùn)載體一種限制酶只能識(shí)別一種特定來(lái)源的DNA選用細(xì)菌作為重組質(zhì)粒

8、的受體細(xì)胞是因?yàn)榧?xì)菌繁殖快通過(guò)標(biāo)記基因監(jiān)測(cè)到重組DNA進(jìn)入了受體細(xì)胞，標(biāo)志著成功實(shí)現(xiàn)表達(dá)18.植物基因工程可以改造農(nóng)作物性狀，使農(nóng)作物變得更加高產(chǎn)。如圖是培育良種水稻的有關(guān)原理和步驟，有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）圖中表達(dá)載體中的T-DNA插入外源基因后將失去作用B.圖中過(guò)程需要在無(wú)菌壞境卞用Ca-處理土壤農(nóng)桿菌C.需要用除草劑檢測(cè)轉(zhuǎn)基因植株是否具有抗除草劑性狀D.該過(guò)程需要用到固體和液體培養(yǎng)基A.19.卜列關(guān)于生物學(xué)實(shí)驗(yàn)及其研究方法的敘述，錯(cuò)誤的是（）探究DNA的復(fù)制方式密度梯度超速離心探究酵母菌細(xì)胞的呼吸方式相互對(duì)照檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)DNA分子雜交技術(shù)研究種群數(shù)量變化規(guī)律構(gòu)建數(shù)學(xué)模型下圖示

9、一項(xiàng)重要生物技術(shù)的關(guān)鍵步驟，字母X可能代表A不能合成胰島素的細(xì)菌細(xì)胞B.能合成抗體的人類細(xì)胞C.能合成人胰島素原的細(xì)菌細(xì)胞D.不能合成抗生素的人類細(xì)胞質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體，它存在于許多細(xì)菌體內(nèi)。某質(zhì)粒上的標(biāo)記基因如圖所示，通過(guò)標(biāo)記基因可以推知外源基因（目的基因）是否轉(zhuǎn)移成功。外源基因插入的位置不同，細(xì)菌在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況也不同，下表是外源基因插入位置（插入點(diǎn)有a、b、c）,請(qǐng)根據(jù)表中提供細(xì)菌的生長(zhǎng)情況，推測(cè)三種重組后細(xì)菌的外源基因插入勿抗青霉素棊內(nèi)抗四環(huán)素基因細(xì)菌在含青霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)情況細(xì)菌在含四壞素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)情況能生長(zhǎng)能生長(zhǎng)能生長(zhǎng)不能生長(zhǎng)不能生長(zhǎng)能生長(zhǎng)是c：是b：是aE.是a和

10、b：是a；是bC.是a和b；是b；是aD.是c：是a；是b農(nóng)桿菌能感染雙子葉植物而通常不感染單子葉植物，是因?yàn)槭軅碾p子葉植物能分泌某些酚類物質(zhì)誘導(dǎo)T1質(zhì)粒中的Vu-基因區(qū)段表達(dá)，該表達(dá)產(chǎn)物能誘導(dǎo)T1質(zhì)粒產(chǎn)生一條新的T-DNA單鏈分子。此單鏈分子可進(jìn)入植物細(xì)胞并整合到染色體。卞列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）可以通過(guò)在傷II施加相關(guān)酚類物質(zhì)而使單子葉植物也成為農(nóng)桿菌易感植物農(nóng)桿菌感染宿主細(xì)胞的原理與肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的原理類似使用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法時(shí)，目的基因應(yīng)插入T1質(zhì)粒的T-DNA中合成新的T-DNA單鏈需要的DNA連接酶與限制酶，均在宿主細(xì)胞內(nèi)合成在檢測(cè)抗蟲(chóng)棉培育是否成功的方法中，不屬于分子水平檢測(cè)的是

11、（）觀察害蟲(chóng)吃棉葉后是否死亡檢測(cè)目的基因片段與DNA探針能否形成雜交帶檢測(cè)目的基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA與DNA探針能否形成雜交帶檢測(cè)目的基因表達(dá)產(chǎn)物能否與特定抗體形成雜交帶據(jù)研究，新冠病毒表面的S蛋白是其主要的病毒抗原，在康復(fù)病人的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。如圖為某機(jī)構(gòu)研制新冠病毒疫苗的部分過(guò)程。卜列敘述中錯(cuò)誤的是KNADNA選擇性擴(kuò)增攜帶S基因的r導(dǎo)人培養(yǎng)細(xì)胞渡達(dá)的重組喪達(dá)載體幼物細(xì)胞S蠱白對(duì)發(fā)熱病人進(jìn)行核酸檢測(cè)可使用帶標(biāo)記的S基因做探針使用PCR選擇性擴(kuò)增的前提條件是掌握S基因的核苛酸序列過(guò)程通常是將s基因和質(zhì)粒連接以構(gòu)建重組表達(dá)載體S基因與培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞核DNA整合是其穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵我

12、國(guó)科學(xué)家利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將Bt毒蛋白基因轉(zhuǎn)入普通棉花，培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉，下列說(shuō)法正確的是（）可通過(guò)檢測(cè)該轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉對(duì)抗生素的抗性來(lái)確定其是否具有抗蟲(chóng)性狀只要將Bt毒蛋白基因整合到染色體上，所得植株即為穩(wěn)定遺傳的轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉理論上講，棉花體內(nèi)幾乎每一個(gè)生活細(xì)胞都可以作為重組DNA分子的受體細(xì)胞在培育過(guò)程中，需使用CaCl：處理棉花細(xì)胞，增人細(xì)胞壁的通透性以吸收重組質(zhì)粒下面是四種不同質(zhì)粒的示意圖，其中on為復(fù)制必需的序列，amp為氨節(jié)青霉素抗性基因，tet為四壞素抗性基因，箭頭表示同一種限制性內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)。下列有關(guān)敘述正確的是（）基因amp和tet是一對(duì)等位基因，常作為基因工程中的標(biāo)記基因

13、質(zhì)粒指細(xì)菌細(xì)胞中能自我復(fù)制的小型環(huán)狀的DNA和動(dòng)植物病毒的DNA限制性核酸內(nèi)切酶的作用部位是DNA分子中特定的兩個(gè)核甘酸之間的氫鍵用質(zhì)粒4將目的基因?qū)肴四c桿菌，該菌不能在含四壞素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)二簡(jiǎn)答題器官移植來(lái)源可來(lái)自異種動(dòng)物器官，例如轉(zhuǎn)11CD46基因（能夠干擾受體免疫細(xì)胞的抗原識(shí)別，發(fā)揮抑制免疫排斥反應(yīng)的作用）的豬，請(qǐng)利用以下關(guān)鍵詞，可自行補(bǔ)充,簡(jiǎn)單畫(huà)出構(gòu)建轉(zhuǎn)11CD46基因小豬的流程圖。獲得hCD46基因胚胎干細(xì)胞構(gòu)建重組DNA載體胚胎體外培養(yǎng)導(dǎo)入受精卵體細(xì)胞核移植細(xì)胞融合檢測(cè)目的基因表達(dá)代孕母胚胎移植篩選受體細(xì)胞答案第 頁(yè)，共13頁(yè)參考答案D【分析】基因工程的工具包扌舌限制酶、DNA

14、連接酶和運(yùn)載體?！驹斀狻繉⑼庠椿?qū)胧荏w細(xì)胞，常常需要將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合構(gòu)建基因基因表達(dá)載體，常用的載體有質(zhì)粒、噬菌體和動(dòng)植物病毒，農(nóng)桿菌可以作為受體細(xì)胞，不能作為載體。綜上所述，ABC不符合題意，D符合題意。故選D?！军c(diǎn)睛】A【分析】本題考查基因工程中的運(yùn)載體一質(zhì)粒。質(zhì)粒存在于許多細(xì)菌以及酵母菌等生物的細(xì)胞中，是擬核或細(xì)胞核外能夠自主復(fù)制的很小的壞狀DNA分子?！驹斀狻緼、質(zhì)粒是小型壞狀DNA,可以自主復(fù)制，A正確；B、質(zhì)粒是基因工程中的運(yùn)載體，E錯(cuò)誤；C、質(zhì)粒是小型壞狀DNA,沒(méi)有游離的磷酸基團(tuán)，C錯(cuò)誤；D、質(zhì)粒是小型壞狀DNA,完全水解后可以得到磷酸、脫氧核糖、4種含氮堿基等共6種

15、化合物，D錯(cuò)誤。故選AoDC【分析】限制酶主要從原核生物中分離純化出來(lái)，并且具有特異性：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核甘酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核甘酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種?！驹斀狻客N限制性內(nèi)切核酸酶切出相同的黏性末端，具有相同的切割位點(diǎn)。根據(jù)圖中所示的粘性末端可推知相應(yīng)的限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)依次是GAATTC（在G和A之間切開(kāi)）、CAATTG（在C和A之間切開(kāi)）、GTTAAC（在G和T之間切開(kāi)），顯然圖中所示的黏性末端應(yīng)該分別是由3種限制性內(nèi)切核酸酶作用產(chǎn)生的，即C正確。故選C?！军c(diǎn)睛】B【解析】試題分析：不同限制酶切割生成的粘性末端也會(huì)相同

16、，A錯(cuò)；同一種限制酶切割的粘性末端一定相同，B對(duì)；DNA聚合酶無(wú)法作用于粘性末端，它是在DNA復(fù)制時(shí)連接游離的脫氧核苛酸，C錯(cuò)；形成需要脫去4個(gè)水分子，因?yàn)橐粭l鏈上有5個(gè)脫氧核苛酸，D錯(cuò)?？键c(diǎn)：本題考查基因工程的工具酶相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力和識(shí)圖能力。D【分析】基因的“剪刀”-限制性核酸內(nèi)切酶（簡(jiǎn)稱限制酶）分布：主要存在于原核生物中。特性：一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苛酸序列，并在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子。切割結(jié)果：產(chǎn)生兩個(gè)帶有黏牲末端或平末端的DNA片段。作用：基因工程中重要的切割工具，通常能將外來(lái)的DNA切斷，對(duì)自己的DNA無(wú)損害。實(shí)例：

17、EcoRl限制酶能專一識(shí)別CAATTC序列，并在G和A之間將這段序列切開(kāi)?！驹斀狻緼、限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核甘酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核甘酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，即催化的是一種水解反應(yīng)，A正確；B、限制性內(nèi)切酶的活性受溫度、pH的影響，在最適宜的溫度和pH條件卜，酶的活性最高；溫度和pH偏高或偏低，酶的活性都會(huì)明顯降低；在過(guò)酸、過(guò)堿或溫度過(guò)高條件卜酶會(huì)變性失活，而在低溫條件下酶的活性降低，但不會(huì)失活，E正確；C、限制性內(nèi)切酶能識(shí)別雙鏈DNA中某種特定的脫氧核甘酸序列，并在特定的位點(diǎn)切割磷酸二酯鍵，說(shuō)明酶專一性，C正確；D、限制性內(nèi)切酶識(shí)別序列越短，則該序列在DN

18、A中出現(xiàn)的幾率就越人，D錯(cuò)誤。故選D【點(diǎn)睛】D【分析】DNA連接酶和DNA聚合酶的區(qū)別：DNA連接酶是在兩個(gè)DNA片段之間形成磷酸二酯鍵，而DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核甘酸加到已有的核廿酸片段上，形成磷酸二酯鍵；DNA連接酶是同時(shí)連接雙鏈的切II,而DNA聚合酶只是在單鏈上將一個(gè)個(gè)脫氧核背酸連接起來(lái)：DNA連接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板。【詳解】A、DNA連接酶的基本組成單位是氨基酸，A錯(cuò)誤；B、DNA聚合酶能將單個(gè)的脫氧核廿酸連接到主鏈上，E錯(cuò)誤；C、DNA連接酶連接的是黏性末端兩條鏈主鏈上的磷酸和脫氧核糖，C錯(cuò)誤；D、DNA連接酶能將斷開(kāi)的兩個(gè)DNA片段的骨架連接起來(lái)，重新形成磷

19、酸二酯鍵，D正確。故選D。【點(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的操作工具，尤其是DNA連接酶的種類及作用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)作出準(zhǔn)確的判斷。D【分析】分析題圖：圖示為某DNA分子一個(gè)片段，其中a為磷酸二酯鍵，b為氫鍵，c為脫氧核苛酸內(nèi)部的磷酸鍵?！驹斀狻緼、限制酶可以切斷脫氧核苛酸之間的磷酸二酯鍵，即a處，A正確；B、DNA聚合酶町以連接脫氧核苛酸形成磷酸二酯鍵，即a處，B正確：C、解旋酶可以使氫鍵斷裂，即b處，C正確；D、DNA連接酶可以連接DNA片段形成磷酸二酯鍵，即a處，D錯(cuò)誤。故選DB【分析】由圖可知，三種限制酶的識(shí)別序列均不同，但限制酶1和3切割后產(chǎn)生的黏性末端相同

20、?！驹斀狻緼B、據(jù)圖可知，這三種限制酶切割出的DNA片段的黏性末端長(zhǎng)度不同，DNA經(jīng)限制酶1和限制酶3分別切割，所得的DNA片段黏性末端相同，A錯(cuò)誤，E正確；CD、能被限制酶3切割的DNA也能被限制酶1切割，但能被限制酶1切割的DNA不一定能被限制酶3切害9,故同一個(gè)DNA經(jīng)限制酶【和限制酶3分別切割后所得片段數(shù)不一定相等，C、D錯(cuò)誤。故選B。B【分析】根據(jù)題意分析可知：CRISPRCas9系統(tǒng)基因編輯技術(shù)是利用該基因表達(dá)系統(tǒng)中的向?qū)NA能識(shí)別并結(jié)合特定的DNA序列，從而引導(dǎo)Cas9蛋白結(jié)合到相應(yīng)位置并剪切DNA,最終實(shí)現(xiàn)對(duì)靶基因序列的編輯。由于其他DNA序列也含有與向?qū)NA互補(bǔ)配對(duì)的序列

21、，所以會(huì)造成向?qū)NA錯(cuò)誤結(jié)合而出現(xiàn)脫靶現(xiàn)彖?！驹斀狻緼、Cas9能在特定位置切割DNA,為一種能使磷酸二酯鍵斷裂的酶，A正確：B、DNA上含有A、T、G、C四種堿基，RNA中存在A、U、G、C四種堿基，DNA中的T可與RNA中的A互補(bǔ)配對(duì)，所以DNA-RNA雜交區(qū)域存在T-A堿基對(duì)，E錯(cuò)誤：C、在單鏈向?qū)NA中也存在部分堿基互補(bǔ)配對(duì)，C正確：D、根據(jù)圖示可知“向?qū)NA能識(shí)別并結(jié)合特定的DNA序列，從而引導(dǎo)Cas9蛋白結(jié)合到相應(yīng)位置并剪切DNA”，所以人為改變向?qū)NA的序列可實(shí)現(xiàn)對(duì)特定基因的切割，D正確。故選B。B【分析】基因工程的工具：（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核甘

22、酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核甘酸之間的磷酸二酯鍵斷裂.形成黏性末端和平末端兩種。（2）DNA連接酶：據(jù)酶的來(lái)源不同分為兩類：E.coliDNA連接酶、TDNA連接酶.這二者都能連接黏性末端，此外TDNA連接酶還可以連接平末端，但連接平末端時(shí)的效率比較低。（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒?！驹斀狻緼、DNA連接酶能連接雙鏈DNA片段的黏性末端或平末端，A錯(cuò)誤；B、細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)含有的限制酶不會(huì)對(duì)自身DNA進(jìn)行剪切，E正確；C、限制酶切割DNA后能產(chǎn)生黏性末端或平末端，C錯(cuò)誤；D、基因工程中常用的載體包扌舌質(zhì)粒、動(dòng)植物病毒、噬菌體的衍生物等，D錯(cuò)誤。故選【點(diǎn)睛】

23、D【解析】試題分析：題干信息，DNA分子是環(huán)型的，經(jīng)限制性核酸內(nèi)切酶（EcoR【）完全酶切后得到圖甲的4個(gè)片段，至少含有4個(gè)EcoRI酶切位點(diǎn)，長(zhǎng)度至少是7Kbo圖乙是改變條件使酶切不充分獲得的，可能是改變了酶促反應(yīng)的溫度或者Ph,也可能是反應(yīng)時(shí)間，但是不會(huì)使酶濃度，因?yàn)槊妇哂懈咝?，D錯(cuò)誤?？键c(diǎn)：本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力。B【分析】基本操作步驟主要包括四步：目的基因的獲取，基因表達(dá)載體的構(gòu)建，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，目的基因的檢測(cè)與鑒定?！驹斀狻緼、目的基因與運(yùn)

24、載體結(jié)合時(shí)，進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)，與題意不符，A錯(cuò)誤；B、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時(shí)，不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)，E正確；C、目的基因的表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯過(guò)程，該過(guò)程中需要進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)，與題意不符,C錯(cuò)誤；答案第 頁(yè)，共13頁(yè)16.A答案第 頁(yè)，共13頁(yè)D、人工合成目的基因的方法需要進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)，如逆轉(zhuǎn)錄法，與題意不符，D錯(cuò)誤。故選C【分析】基因文庫(kù)指將含有某種生物不同基因的許多DNA片段，導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同的基因。【詳解】A、題中的目的基因序列未知，是從基因文庫(kù)中分離出來(lái)的，A錯(cuò)誤；B、過(guò)程使用限制性核酸內(nèi)切酶，其識(shí)別并切割DNA分子上特定的核甘酸序列，E錯(cuò)誤

25、：C、轉(zhuǎn)化前用CaCl2處理人腸桿菌，可使其細(xì)胞壁的通透性增人，C正確；D、過(guò)程可用特定的基因探針，利用核酸分子雜交技術(shù)釣取目的基因，D錯(cuò)誤。故選C?！军c(diǎn)睛】常用鈣離子處理法將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞，用顯微注射法將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞。C【分析】基因工程的四個(gè)步驟是：獲取目的基因，構(gòu)建基因表達(dá)載體，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，目的基因的檢測(cè)與鑒定。根據(jù)題意和圖示分析可知：圖中過(guò)程表示通過(guò)反轉(zhuǎn)錄法合成相應(yīng)的DNA：過(guò)程表示利用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增：過(guò)程表示將目的基因?qū)氪竽c桿菌；過(guò)程表示用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胫参镉鷤M織細(xì)胞?！驹斀狻緼、過(guò)程以mRNA為模板合成DNA,需使用逆轉(zhuǎn)錄酶，

26、A正確；B、過(guò)程把重組質(zhì)粒導(dǎo)入人腸桿菌的主要目的是對(duì)MT基因進(jìn)行擴(kuò)増，E正確；C、過(guò)程表示用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胫参镉鷤M織細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、通過(guò)設(shè)計(jì)相關(guān)引物，可借助PCR技術(shù)鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體細(xì)胞，D正確。故選C。【點(diǎn)睛】【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成：（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等：（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣.將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法：將目的基因?qū)雱?dòng)

27、物細(xì)胞最冇效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因-DNA分子雜交技術(shù)：檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)：檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)-抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻緼、提取矮牽牛藍(lán)色花的mRNA,逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA,然后擴(kuò)增，可獲得大量的基因E,A正確；B、基因文庫(kù)中保存的是各基因片段，從基因文庫(kù)中獲取基因E時(shí)，不需要使用DNA連接酶，E錯(cuò)誤；C、目的基因與質(zhì)粒連接用的是DNA連接酶，而DNA聚合酶是在DNA復(fù)制中

28、用到的酶,C錯(cuò)誤；D、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞時(shí)，常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，即將基因E先導(dǎo)入農(nóng)桿菌，然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細(xì)胞，D錯(cuò)誤。故選A?！军c(diǎn)睛】C【分析】DNA重組技術(shù)至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體。常用的運(yùn)載體有質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核甘酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核背酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種?！驹斀狻緼、基因工程中常用的工具酶有DNA連接酶、限制性核酸內(nèi)切酶，運(yùn)載體不屬于工具酶，A錯(cuò)誤；B、一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核甘酸序列，具有特異性，B錯(cuò)誤；C、選用細(xì)菌作為重組質(zhì)粒的

29、受體細(xì)胞是因?yàn)榧?xì)菌繁殖快、易培養(yǎng)、遺傳物質(zhì)少，C正確；D、目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)能否表達(dá)還需要檢測(cè)和鑒定，因?yàn)槌晒?dǎo)入的目的基因不一定能成功實(shí)現(xiàn)表達(dá)，D錯(cuò)誤。故選C。A【分析】1、基因表達(dá)載體包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子和終止子。標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。2、將目的基因?qū)胛⑸矬w內(nèi)，常采用的方法是用一定濃度CaCl2溶液處理微生物，提高細(xì)胞攝取外源治理DNA的能力，該方法為感受態(tài)細(xì)胞法。3、圖中代表構(gòu)建基因表達(dá)載體，代表將含有目的基因的T1質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌，代表用農(nóng)桿菌侵染植物愈傷組織細(xì)胞，代表再分化，代表植物生長(zhǎng)發(fā)育為植株的過(guò)程。

30、【詳解】A、T-DNA4將T-DNA之間的DNA序列轉(zhuǎn)移并整合至受體細(xì)胞的染色體DNA上，使目的基因能夠穩(wěn)定遺傳，故T-DNA插入外源基因后不會(huì)失去作用，A錯(cuò)誤；B、用Ca處理農(nóng)桿菌，使農(nóng)桿菌處于感受態(tài)，利于農(nóng)桿菌吸收目的基因完成轉(zhuǎn)化過(guò)程，故圖中將載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌過(guò)程需要在無(wú)菌壞境卞用Ca”處理土壤農(nóng)桿菌，B正確；C、為從個(gè)體水平上檢測(cè)圖中植株是否具有抗除草劑性狀，可采用的方法是用相應(yīng)除草劑噴灑待測(cè)植株，C正確；D、篩選含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌時(shí)用的是固體培養(yǎng)基，擴(kuò)人培養(yǎng)時(shí)應(yīng)該用液體培養(yǎng)基，故該過(guò)程需要用到固體和液體培養(yǎng)基，D正確。故選Ao【點(diǎn)睛】C【分析】基因工程技術(shù)的操作程序：1、目的基因的獲?。?/p>

31、方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。2、基因表達(dá)載體構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包扌舌目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣：將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。4、目的基因的檢測(cè)與鑒定：（1）分子水平上的檢測(cè)：檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因DNA分子雜交技術(shù)。檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA分子雜交技術(shù)。檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗原-抗體雜交技術(shù)。（2）個(gè)體

32、水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定等?！驹斀狻緼、探究DNA的復(fù)制方式的實(shí)驗(yàn)中，用密度梯度離心技術(shù)將不同密度的DNA分子分離，最終證實(shí)了DNA為半保留復(fù)制，A正確：B、探究酵母菌細(xì)胞的呼吸方式的實(shí)驗(yàn)中，有氧和無(wú)氧條件卜均為實(shí)驗(yàn)組，兩組實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行相互對(duì)照，E正確；C、檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，應(yīng)該采用抗原-抗體雜交技術(shù)，C錯(cuò)誤；D、研究種群數(shù)量變化規(guī)律時(shí)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，用適當(dāng)?shù)臄?shù)據(jù)表達(dá)式，對(duì)種群數(shù)量變化進(jìn)行表達(dá)，構(gòu)建了數(shù)學(xué)模型，D正確。故選C。C【詳解】BD、因受體細(xì)胞是細(xì)菌，故X不口I能是能合成抗體的人類細(xì)胞及合成抗生素的人類細(xì)胞,BD錯(cuò)：AC、通過(guò)基因工程將目的基因?qū)氲绞荏w細(xì)胞，因此X能

33、夠代表能合成胰島素的細(xì)菌細(xì)胞、能合成人胰島素原的細(xì)菌細(xì)胞，A錯(cuò)、C正確。故本題選C。A【分析】由題和圖分析可知，a是抗青霉素基因，如果外源基因插入到a中，會(huì)破壞此基因結(jié)構(gòu)，使細(xì)菌在含青霉素的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)：b是抗四環(huán)素基因，如果外源基因插入到匕中，會(huì)破壞此基因結(jié)構(gòu)，使細(xì)菌在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)?！驹斀狻考?xì)菌能在含青霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，說(shuō)明抗青霉素基因沒(méi)有被破壞。細(xì)菌也能在含四壞素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，說(shuō)明抗四壞素基因也沒(méi)有被破壞，由此可知，外源基因插入的位置不是a.b,而是c；細(xì)菌能在含青霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，說(shuō)明抗青霉素基因沒(méi)有被破壞。細(xì)菌不能在含四壞素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，說(shuō)明抗四環(huán)素基因被破壞

34、，由此可知，外源基因插入的位置是b,不是a；細(xì)菌不能在含青霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，說(shuō)明抗青霉素基因被破壞。細(xì)菌能在含四壞素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，說(shuō)明抗四壞素基因沒(méi)有被破壞，由此可知，外源基因插入的位置是紜不是b。故選AoD【分析】農(nóng)桿菌特點(diǎn)：易感染雙子葉植物和裸子植物，對(duì)單子葉植物沒(méi)有感染力.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理:農(nóng)桿菌中的T1質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，如果將目的基因插入到T1質(zhì)粒的T-DNA上，通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上?！驹斀狻緼、農(nóng)桿菌易感染雙子葉植物和裸子植物，對(duì)單子葉植物沒(méi)有感染力，原

35、因是多數(shù)單子葉植物細(xì)胞不能合成酚類化合物，可以通過(guò)在傷II施加相關(guān)酚類物質(zhì)而使單子葉植物也成為農(nóng)桿菌易感植物，A正確：B、農(nóng)桿菌感染宿主細(xì)胞是把它的T-DNA上,通過(guò)轉(zhuǎn)化作用，整合到植物細(xì)胞染色體的DNA上，其原理與肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的原理類似，都是基因重組，B正確：C、使用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法時(shí)，T-DNA可將插入T1質(zhì)粒的T-DNA中的目的基因轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中，并能整合到染色體DNA上，C正確：D、T1質(zhì)粒中的處基因區(qū)段在宿主細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)產(chǎn)物能誘導(dǎo)T1質(zhì)粒產(chǎn)生一條新的T-DNA單鏈分子，而合成新的T-DNA單鏈不需要限制酶，需要DNA聚合酶、DNA連接酶等，因?yàn)橄拗泼傅淖饔檬亲R(shí)別DNA中的堿基序列

36、，并在特定位點(diǎn)切割DNA分子，D錯(cuò)誤。故選D?！军c(diǎn)睛】A【分析】目的基因的檢測(cè)與鑒定：（1）分子水平上的檢測(cè)：檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因-DNA分子雜交技術(shù)；檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)；檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)-抗原-抗體雜交技術(shù)。（2）個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻緼、通過(guò)觀察害蟲(chóng)吃棉葉是否死亡，屬于個(gè)體水平上的鑒定，A符合題意；B、檢測(cè)目的基因片段與DNA探針能否形成雜交帶，采用的是DNA分子雜交技術(shù)，屬于分子水平上的檢測(cè)，B不符合題意；C、檢測(cè)目的基因轉(zhuǎn)錄形成的niRNA與DNA探針能否形成雜交帶，采用的是分子雜交技術(shù)，屬于分子水平上的檢測(cè)，C不符合題意；D、檢測(cè)目的基因表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)能否與特定抗體形成雜交帶，采用的是抗原-抗體雜交技術(shù),屬于分子水平上的檢測(cè)，D不符合題意。故選AoB【分析】圖為逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，以病毒的RNA為模板合成D