同化激素類概述

1、同化激素類概述7.1 概述同化激素 亦稱蛋白同化激素，是一種能夠促進(jìn)細(xì)胞的生長與分化，使肌肉擴(kuò)增，增強(qiáng)骨頭的強(qiáng)度與大小的甾體激素。近年來人工合成的一些衍生物,其雄激素作用大為減弱,而同化作用則保留或增強(qiáng),這些衍生物稱同化激素。雄激素能明顯地促進(jìn)蛋白質(zhì)合成(同化作用),能使肌肉發(fā)達(dá),體重增加;同時氨基酸分解減少(異化作用),使尿素生成減少降低氮質(zhì)血癥。但使用雄激素?？沙霈F(xiàn)男性化現(xiàn)象,因而限制了它的應(yīng)用。同化激素主要用于蛋白質(zhì)同化或吸收不足、降低亢進(jìn)和損失過多等情況。畜牧業(yè)中使用同化激素,可以很快產(chǎn)生顯著和直接的經(jīng)濟(jì)效益,因此對生產(chǎn)者有很大的吸引力。17.2 性狀、藥動學(xué)及殘留情況17.2.1 內(nèi)

2、源性激素性激素是由性腺所分泌，腎上腺皮質(zhì)及胎盤也少有產(chǎn)生，他們屬類固醇激素，包括雄激素、雌激素及孕激素。睪酮、孕酮和雌二醇為最具活性的天然激素，在畜牧業(yè)中應(yīng)用主要作為生長促進(jìn)劑。（1） 雌二醇該品為白色或乳白色結(jié)晶性粉末；無臭。在二氧六環(huán)或丙酮中溶解，在乙醇中略溶，在水中不溶。內(nèi)服后胃腸道吸收快，經(jīng)肝臟首先代謝而失效。與血漿蛋白有廣泛結(jié)合，與蛋白質(zhì)結(jié)合少，主要與性甾體結(jié)合球蛋白。（2）孕酮白色或幾乎白色的結(jié)晶性粉末，無臭，在氯仿中極易溶解，在乙醇、乙醚或植物油中溶解，水中不溶。腸道吸收后迅速在肝臟內(nèi)失活。舌下、直腸、陰道給藥有效，肌肉注射吸收迅速，血中半衰期僅幾分鐘。動物經(jīng)孕酮處理后，可食組織

3、中殘留量極低。（3）睪酮白色或類白色結(jié)晶粉末，無臭，在氯仿中極易溶解，在乙醇或乙醚中易溶，在醋酸乙酯中溶解，在植物油中略溶，在水中不溶。17.2.2 外源性激素外源性激素是一類蛋白同化作用強(qiáng)、雄激素作用較弱的睪酮衍生物。藥理作用和不良反應(yīng)與雄激素有許多相同之處，促進(jìn)蛋白質(zhì)合成能力強(qiáng)，雄性化的不良影響較雄激素小。（1）去氫甲睪酮蛋白同化作用強(qiáng)于雄激素樣作用，孕激素樣活性小能促進(jìn)蛋白質(zhì)合成，抑制蛋白質(zhì)異生，增進(jìn)食欲，使肌肉生長，體重增加促進(jìn)鈣磷在骨中沉積，加速骨骼生長促進(jìn)組織新生和創(chuàng)傷修復(fù)降低血清膽固醇（2）司坦唑醇蛋白同化作用強(qiáng)，為甲睪酮的30倍，雄激素活性僅為其四分之一能促進(jìn)蛋白質(zhì)合成，抑制蛋

4、白質(zhì)異生降低血清膽固醇，甘油三酯水平促進(jìn)鈣磷在骨中沉積，減輕骨髓抑制男性不良反應(yīng)小主要用于預(yù)防遺傳性血管性水腫（3）醋酸甲羥孕酮作用與黃體酮相似,孕激素活性強(qiáng),無雌激素和雄激素活性,有抗雌激素作用。內(nèi)服、注射均有效。內(nèi)服在胃腸道吸收,在肝內(nèi)降解。肌內(nèi)注射后23天血藥濃度達(dá)到峰值。血藥峰值越高,藥物清除越快。肌注150mg后69個月血中才檢不出藥物。（4）去甲睪酮牛注射去甲睪酮后,脂肪中殘留能被檢出,并持續(xù)73天;尿中殘留低于1g/kg。內(nèi)服后脂肪中殘留未被檢出,但尿中殘留可檢出。（5）醋酸甲地孕酮本品為孕激素對垂體促性腺激素的釋放有一定的抑制作用,但比左炔諾孕酮和炔諾酮為弱。不具有雌激素和雄激

5、素樣活性,但有明顯抗雌激素作用。與雌激素合用,抑制排卵。動物致畸試驗表明對家兔具有死胎率增加和致畸作用。（6）醋酸美侖孕酮內(nèi)服時孕激素作用約為黃體酮的75倍,無雌激素和雄激素活性,具有顯著排卵抑制作用。小母牛用藥后,母藥和代謝物主要由糞便排出。停藥6h,肝、脂肪、腎和肌肉組織中的殘留量分別為915g/kg、78g/kg、1.21.8g/kg和0.51g/kg。脂肪、肝、腎和肌肉中母藥殘留量分別占總殘留的80%、37%、30%和45%。美國FDA規(guī)定休藥期48h,但歐盟禁止使用。17.3 樣品處理17.3.1 提取液體樣品(奶、血液、尿液)提取前需要脫脂肪,通常在4 、7000g離心,除去浮在上

6、層的脂肪，用水或磷酸鹽緩沖液稀釋。半固體樣品(肌肉、肝、腎)先要用切碎機(jī)或勻漿器進(jìn)行組織破碎，提取均質(zhì)，40-60 下加熱，使脂肪融化成液體。粗提取液的凈化方法包括液-液萃取、固相萃取法、液相色譜、免疫親和色譜和超臨界流體色譜等。為了達(dá)到更好的純化效果,可將幾種方法結(jié)合應(yīng)用。液-液萃取大多是去除水溶性提取液中的脂肪,例如,乙腈或甲醇提取液中加入正己烷或異辛烷,可脫去脂類物質(zhì)。17.3.2 凈化固相萃取法固相萃取法具有簡便、快速、經(jīng)濟(jì)等優(yōu)點(diǎn),已廣泛應(yīng)用于激素類藥物的凈化。正相柱常用硅膠、氧化鋁、氰基型和氨基型吸附劑,反相柱常用C18和C8吸附劑。固相萃取柱的凈化效果有時并不能滿足質(zhì)譜檢測的要求,

7、因此有人將固相萃取法與色譜法相結(jié)合,對樣品提取液作更高的純化。17.4 分析方法 生物樣品中同化激素類的分析主要采用色譜法,包括薄層色譜法、氣相色譜法和液相色譜法。17.4.1 薄層色譜法薄層色譜法具有快速、經(jīng)濟(jì)等優(yōu)點(diǎn),適合殘留分析的初篩。為了提高薄層色譜分析的靈敏度和選擇性,在顯色劑研究上做了大量的工作,一些與雌酮、雌二醇、己烯雌酚、玉米赤霉醇和玉米赤霉烯醇發(fā)生顯色反應(yīng)的染料被相繼報道。重氮基染料與雌激素反應(yīng),形成重氮基衍生物、酚基和二羥基苯甲酸內(nèi)酯類的雌激素衍生物,它們的色澤強(qiáng)度各不相同。此外,科林斯紅和快藍(lán)BB與激素反應(yīng)成鹽后,具有很強(qiáng)的色澤。17.4.2 氣相色譜法20世紀(jì)80年代出現(xiàn)

8、的毛細(xì)管GC使GC-MS結(jié)構(gòu)簡化、儀器成本下降。毛細(xì)管GC和SIM檢測方式使GC-MS發(fā)展成為一種成熟的、集高效分離、高靈敏度檢測和結(jié)構(gòu)鑒定為一體的分析技術(shù)。同化激素及其代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)中含有多個羥基或酮基等極性基團(tuán),為高極性、難揮發(fā)、熱穩(wěn)定差的化合物,GC法難以直接分析,因此需衍生化使形成易揮發(fā)、熱穩(wěn)定性好的衍生物,以提高其色譜性能。17.4.3 液相色譜法HPLC比GC更常用于激素的分析。分析極性較大的雌激素結(jié)合物常采用陰離子交換色譜法或反相離子對色譜法,尤其是后者分離效果更好。環(huán)糊精色譜也被用于雌激素的分析,該法能有效地分離結(jié)構(gòu)異構(gòu)的雌激素結(jié)合物。雌二醇和雌三醇在200nm處有一中等強(qiáng)度的

9、較尖的紫外吸收峰,在280nm處有一較寬的弱吸收峰。孕酮和睪酮在240nm處有較強(qiáng)紫外吸收,紫外檢測RP-HPLC法是分析生物樣品的主要方法。一般紫外檢測可獲得足夠的靈敏度,但熒光檢測更適合于組織樣品的測定。RP-HPLC和NP-HPLC均被用于雄激素的分析。體液中睪酮含量較高時,可采用紫外檢測;否則,可將睪酮與衍生化試劑反應(yīng)制備成熒光衍生物后再用紫外檢測,或采用高靈敏度的熒光檢測器進(jìn)行檢測。Lagana等報道LC法檢測雞肉、牛肉和牛肝中9種同化激素(群勃龍、睪酮、孕酮、雌二醇、己烯雌酚、左環(huán)十四酮酚、玉米赤霉烯醇、玉米赤霉烯酮、玉米赤霉醇)殘留。Andresen等報道了LC法測定脂肪中醋酸美侖孕酮、醋酸甲地孕酮和醋酸氯地孕酮的殘留量。萬美梅等采用LC-電化學(xué)檢測法測定動物組織中己烯雌酚殘留量。Davoli等報道了在線萃取液相色譜/快