動物性食品中氟喹諾酮類藥物殘留檢測高效液相色譜法

1、動物性食品中氟喹諾酮類藥物殘留檢測高效液相色譜法范圍本標(biāo)準(zhǔn)適用于豬的肌肉、脂肪、肝臟和腎臟，雞的肌肉、肝臟和腎臟組織中達(dá)氟沙星、 恩諾沙星、環(huán)丙沙星和沙拉沙星藥物殘留量檢測。2測定方法方法提要或原理用磷酸鹽緩沖溶液提取試料中的藥物，C 18柱凈化，流動相洗脫。以磷酸一乙腈為流動相。用高效液相色譜一熒光檢測法測定，外標(biāo)法定量。試劑和材料5mol/L氫氧化鈉溶液：取氫氧化鈉飽和液14mL，加水稀釋至50mL。0.03mol/L氫氧化鈉溶液：取5mol/L氫氧化鈉溶液0.6 mL，加水稀釋至100 mL。0.05mol/L磷酸一三乙胺溶液：取濃磷酸3.4 mL，用水稀釋至1000 mL。用三乙胺調(diào)節(jié)

2、 pH值至2.4 （以配4L溶液為例，取濃磷酸3.4 mLX4=13.6 mL，加水使成4000 mL，用三 乙胺調(diào)pH值至2.4）。磷酸鹽緩沖溶液（用于肌肉、脂肪組織）：取磷酸二氫鉀6.8g,加水使溶解并稀釋至500 mL，用5mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7.00磷酸鹽溶液（用于肝臟、腎臟組織）：取磷酸二氫鉀6.8g,加水使溶解并稀釋至500 mL， pH值為4.05.0。標(biāo)準(zhǔn)儲備液：分別取達(dá)氟沙星對照品約10mg，恩諾沙星、環(huán)丙沙星和沙拉沙星對照品各 約50mg，精密稱定，用0.03mol/L氫氧化鈉溶液溶解并稀釋成濃度為0.2mg/mL（達(dá)氟沙星）和 1 mg/mL （恩諾沙星、環(huán)

3、丙沙星和沙拉沙星）的標(biāo)準(zhǔn)工作液。置2C8C冰箱中保存，有效 期為1周。對照品溶液稀釋步驟（1）對照品儲備液濃度：1 mg/mL（2）最大殘留限量（100p g/kgf 100ng/g）上機濃度為0.05p g/kg：1 mg/mL X 1mL5020p g/mL20p g/mL X0.5mL200f0.05|J g/kg （此濃度對應(yīng)最大殘留限量濃度，因為20mL提取液只有5mL上柱）（3）陽性添加（100p g/kgf 100ng/g 樣品/2gf200ng/2g）20u g/mLX0.5mL10mLf 川 g/mL1p g/mLX0.2mLf200ng注：甲磺酸達(dá)氟沙星（C19H20FN3

4、O3CH4O3S）：C19H20FN3O3= 357.39 =78.81%C H FNO -CHOS453.4919 203 34 3鹽酸環(huán)丙沙星(C17H18FN3O3-Hcl) C17H18FN3O3.C17H18FN3O3HC1331.35367.8190.09%測定步驟試料的制備絞碎后的供試樣品、空白樣品、空白添加試料樣品提取?。?0.05g）試料，置50mL離心管中，加磷酸鹽緩沖溶液10.0mL，10000r/min 勻漿1min。勻漿液轉(zhuǎn)入離心管中，中速振蕩5min，離心（肌肉、脂肪10000r/min5min； 肝、腎15000r/min10min），取上清液，待用。用磷酸鹽緩沖

5、溶液10.0mL洗刀頭及勻 漿杯，轉(zhuǎn)入離心管，洗殘渣，混勻，中速振蕩5min，離心（肌肉、脂肪10000r/min5min； 肝、腎15000r/min10min）。合并兩次上清液，混勻，備用。凈化固相萃取柱先依次用甲醇、磷酸鹽緩沖溶液各2mL預(yù)洗。取上清液5.0mL過柱，用 水1mL淋洗，擠干。用流動相1.0mL洗脫，擠干，收集洗脫液。經(jīng)濾膜過濾后作為 試樣溶液，供高效液相色譜法測定。色譜條件流動相：0.05mol/L磷酸/三乙胺溶液一乙月青（82+18, v/v），使用前經(jīng)微孔濾膜過濾;流速：0.8mL/min；檢測波長：激發(fā)波長280nm；發(fā)射波長450nm；進(jìn)樣量:20p L3測定方法靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度3.1靈敏度達(dá)氟沙星、恩諾沙星、環(huán)丙沙星和沙拉沙星在雞和豬的肌肉、脂肪、肝臟及腎臟組織 中的檢測限為20p g/kg，最大殘留限量為1