心血管基因治療

1、關(guān)于心血管基因治療第一張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義臨床意義上的基因治療，是指通過特定的載體，將外源性DNA編碼的基因或者是對(duì)特定基因有修飾作用的DNA、RNA，可以直接導(dǎo)入特定的人體器官或特定部位（In Vivo），也可以先導(dǎo)入到體外培養(yǎng)的細(xì)胞中，再將細(xì)胞導(dǎo)入人體(Ex Vivo)，從而起到治療特定疾病的效應(yīng)。第二張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥

2、患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例腺苷脫氨酶（ADA）缺乏癥患者基因治療成功。 10年后， 在法國(guó)9例ADA缺乏癥患者接受治療， 3年后， 3例患淋巴細(xì)胞白血病和惡性骨髓瘤。 迄今為止， 1500多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)幾萬人接受了治療。第三張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月在中國(guó)，人們以碳水化合物為主，高甘油三酯血癥患者是高膽固醇血癥患者的4倍。近來發(fā)現(xiàn)高甘油三酯血癥可作為心血管疾病的獨(dú)立發(fā)病因子，得到廣泛重視和研究。圖為脂蛋白脂酶基因缺陷導(dǎo)致的高甘油三酯小鼠，血漿呈牛奶狀。小鼠

3、極度高甘油三酯血癥血漿中國(guó)山東病人極度高甘油三酯血癥血漿脂蛋白脂酶LPL缺陷的基因治療第四張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月三、基因治療的方法 （1）目的基因的制備 （2）靶細(xì)胞的選擇和培養(yǎng) （3）載體的選擇 （4）導(dǎo)入方法第一節(jié) 基因治療概論第五張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。目的基因的制備（基因治療的策略） 1.基因替代

4、（gene replacement） 針對(duì)整個(gè)病變基因，不考慮基因上的致病性突變位點(diǎn)，將整個(gè)正常基因?qū)爰?xì) 胞內(nèi)，使外源正?；蛟隗w內(nèi)表達(dá)，達(dá)到治病的效果。 2.基因修正（gene correction） 針對(duì)致病基因的突變堿基序列，設(shè)計(jì)特殊的修正序列，導(dǎo)入細(xì)胞后，將致病基 因的突變位點(diǎn)置換下來，達(dá)到治病的效果。 3.基因放大（ gene augmentation) 基因放大通常選擇和致病 （缺陷）基因有互補(bǔ)或相近功能的基因，將此基因 導(dǎo)入后高表達(dá)，其發(fā)揮的功能可以糾正缺陷的病變基因。LDL-R-/- VLDL-R 第六張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療

5、（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。4.基因失活 （gene inactivation） 反義技術(shù)（antisense technology） 反義核酸技術(shù)就是根據(jù)堿基互補(bǔ)原理，利用人工或生物合成特異互補(bǔ)的DNA 或RNA片段抑制或封閉基因表達(dá)的技術(shù)，包括反義寡核苷酸技術(shù)、反義RNA技術(shù)和核酶技術(shù)。（轉(zhuǎn)錄和翻譯水平，特異阻斷靶基因的表達(dá)） 基因敲除技術(shù)（gene knock-out）或條件敲除（conditi

6、onal KO） RNA干擾（RNA interference, gene knock-down） RNA (interference，RNAi）是由雙鏈RNA（double stranded RNA,dsRNA） 分子在mRNA水平關(guān)閉相應(yīng)序列基因表達(dá)或使其沉默的過程。第七張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。RNAi示意圖第八張，PP

7、T共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月四、基因治療的方法 （1）目的基因的制備 （2）靶細(xì)胞的選擇和培養(yǎng)（ex vivo) （3）載體的選擇 （4）導(dǎo)入方法第一節(jié) 基因治療概論第九張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。靶細(xì)胞的選擇和培養(yǎng) 體細(xì)胞和生殖細(xì)胞1.體細(xì)胞： (1)成纖維細(xì)胞： 優(yōu)點(diǎn)： 容易獲取或體外培養(yǎng)，也容易植回體內(nèi)； 易轉(zhuǎn)染，并

8、能穩(wěn)定地表達(dá)外源目的基因， 合成和分泌的蛋白質(zhì)可以通過血液供各種類型細(xì)胞使用； 回輸?shù)某衫w維細(xì)胞很容易被取出。 (2)造血干細(xì)胞： 優(yōu)點(diǎn)： 取材比較容易，并易于輸回體內(nèi)； 造血干細(xì)胞具有不斷分裂、分化成各種血細(xì)胞的潛能； 基因產(chǎn)物在骨髓細(xì)胞成熟后可以通過血液循環(huán)遍布全身。 缺點(diǎn): 骨髓造血干細(xì)胞在骨髓細(xì)胞中所占比例極少(0.1%)， 提高基因轉(zhuǎn)移效率，提高表達(dá)水平及延長(zhǎng)表達(dá)時(shí)間.第十張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治

9、療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。(3)成肌細(xì)胞： 優(yōu)點(diǎn)：成肌細(xì)胞來源于骨骼肌，易獲得； 成肌細(xì)胞易于體外培養(yǎng)； 成肌細(xì)胞具有增殖能力； 易于基因轉(zhuǎn)移，并易與原位肌纖維融合，血管豐富。(4)血管內(nèi)皮細(xì)胞：導(dǎo)管球囊攜帶DNA可成功地進(jìn)行血管基因轉(zhuǎn)移。 (5)淋巴細(xì)胞： 優(yōu)點(diǎn)：易提取，易體外培養(yǎng)并易于回輸入體內(nèi)； 基因轉(zhuǎn)移效率較高。 缺點(diǎn)：回輸體內(nèi)后淋巴細(xì)胞的壽命短，需要經(jīng)常輸入.第十一張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史

10、回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。2. 生殖細(xì)胞（主要用在動(dòng)物模型上）： transgenic and knock out animal model第十二張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月四、基因治療的方法 （1）目的基因的制備 （2）靶細(xì)胞的選擇和培養(yǎng) （3）載體的選擇第一節(jié) 基因治療概論第十三張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例A

11、DA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。載體的選擇病毒型載體和非病毒型載體 逆轉(zhuǎn)錄病毒（retrovirus，RV）載體 優(yōu)點(diǎn)： RNA反轉(zhuǎn)錄為DNA , 感染效率高，并穩(wěn)定持久地表達(dá)所帶的外源基因 缺點(diǎn)： 容量小，只能容納810kb的外源基因片段； 血清補(bǔ)體能使之失活； 病毒滴度低，低于治療大腫瘤需要的滴度； 病毒整合到DNA后，可能引起插入突變和激活癌基因的可能； 宿主范圍有限，只感染增殖細(xì)胞，故在應(yīng)用上有一定局限性。理想載體: 低毒， 高效， 大容量， 可調(diào)控的基因轉(zhuǎn)導(dǎo)。 第十四張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一

12、節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。2.腺病毒（adenovirus，Ad）載體 線性雙鏈DNA，36Kb 優(yōu)點(diǎn)：宿主領(lǐng)域廣（感染分裂期，非分裂期細(xì)胞） 可獲得高病毒效價(jià)，適用于臨床 可直接體內(nèi)注射 腺病毒顆粒比較穩(wěn)定 插入外源基因容量大 缺點(diǎn)： 免疫原性強(qiáng)，只適用于短期感染（2-3周） 缺乏靶向性 可能有致病性 第十五張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論

13、一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。3. 腺相關(guān)病毒（adeno-associated virus，AAV）載體 單鏈線性DNA，缺陷病毒，動(dòng)物病毒中最小的。 優(yōu)點(diǎn)：宿主范圍廣泛 介導(dǎo)長(zhǎng)期的基因表達(dá)，最有希望的病毒載體系統(tǒng)之一 插入突變的危險(xiǎn)性低，生物安全性高 缺點(diǎn)： 載體容量有限（5 kb），不適于較大基因片段的插入 可用于癌基因治療，但轉(zhuǎn)染能力不如腺病毒 第十六張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于20

14、22年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。4. 慢病毒（lentivirus，LV）載體 反轉(zhuǎn)錄病毒的一種 優(yōu)點(diǎn)： 既可感染分裂細(xì)胞又可感染非分裂細(xì)胞 轉(zhuǎn)移基因片段容量較大 目的基因表達(dá)時(shí)間長(zhǎng) 不易誘發(fā)免疫反應(yīng) 缺點(diǎn)：毒力恢復(fù)、垂直感染等安全問題 第十七張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相

15、關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。非病毒載體原理：非病毒載體主要通過與DNA結(jié)合成顆粒復(fù)合物，然后將DNA導(dǎo)入細(xì)胞進(jìn)而轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核。目前所應(yīng)用的非病毒載體方法包括裸質(zhì)粒直接應(yīng)用、脂質(zhì)體、陽離子多聚體(多聚賴氨酸PLL、聚乙烯亞胺PEI）、納米顆粒載體等。優(yōu)點(diǎn)：容量大、操作方便、安全和無免疫源性缺點(diǎn)：感染效率沒有病毒高，高濃度是有細(xì)胞毒性，有的在體內(nèi)不能降解。第十八張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月四、基因治療的方法 （1）目的基因的制備 （2）靶

16、細(xì)胞的選擇和培養(yǎng) （3）載體的選擇 （4）導(dǎo)入方法第一節(jié) 基因治療概論第十九張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。Ex Vivo，細(xì)胞介導(dǎo)的基因治療，首先將目的基因在體外導(dǎo)入到培養(yǎng)的細(xì)胞內(nèi)，再將細(xì)胞移植到機(jī)體的特定器官或部位發(fā)揮作用（主要是以造血干細(xì)胞為主）。In Vivo，組裝了目的基因的載體將直接導(dǎo)入到所需部位，有直接注射，如在肌肉中

17、表達(dá)的多點(diǎn)注射；缺血心肌直視下直接注射，靜脈注射（肝臟為靶器官），腫瘤部位的注射。導(dǎo)入方法第二十張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療?；蛑委煷嬖诘膯栴}及方向目的基因在宿主體內(nèi)表達(dá)不穩(wěn)定，時(shí)間短，限制了基因治療的療效；目的基因移植引起免疫系統(tǒng)對(duì)已識(shí)別過的外來物產(chǎn)生免疫增強(qiáng)， 使病人的治療難以重復(fù)；病毒載體對(duì)病人可能有各種潛在的危險(xiǎn)；許多疾

18、病是由多基因紊亂引起，無法用單基因糾正解決問題。目標(biāo)：高效性、靶向性、可調(diào)控性、安全性，尤其是在表達(dá)時(shí)間、部位、水平以及對(duì)各種信號(hào)反應(yīng)的可調(diào)控性方面能夠操控對(duì)單基因遺傳病、惡性腫瘤的術(shù)后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移、心血管病等，基因治療提供了一個(gè)全新的治療思路，為人類攻克這些不治之癥帶來了希望。第二十一張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。第二節(jié) 基因治療

19、在心血管疾病中的應(yīng)用研究動(dòng)脈粥樣硬化 （AS）第二十二張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。第二十三張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年，

20、 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。HDLSMCECVEGFAS的基因治療靶點(diǎn)FGFAPOA-ILCATABC-A1LDL第二十四張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。LDL-R1. LDL-R基因突變病人：血漿LDL增高,家族性高膽固醇血癥（發(fā)病率1/500）。 它汀類藥降低TC約30%左右。純合子病人：對(duì)藥物沒有

21、反應(yīng)，迅速發(fā)生AS。 基因治療在LDL-R -/-小鼠及兔，取得滿意效果。3. 臨床試驗(yàn)：逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的ex vivo LDL受體基因治療純合子病人， 患者血漿LDL膽固醇只降低了將近30。 由于基因治療過程的復(fù)雜性，該研究沒有繼續(xù)擴(kuò)大（肝臟組織 分離肝細(xì)胞 感染 回輸）。APOB100：反義DNA技術(shù)，（II期臨床，i.V.，降LDL40%），但GPT增高。 RNAi （III期臨床） AS的靶點(diǎn)LDL低密度脂蛋白第二十五張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧

22、1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。I期臨床試驗(yàn)：主要進(jìn)行兩方面的試驗(yàn)，一方面藥耐，另一方面是藥代。 受試者是健康人（20例）。II期臨床試驗(yàn)：安全性進(jìn)行評(píng)價(jià)?；颊邊⒓樱ù笥?00例）。III期臨床試驗(yàn)：治療作用與安全性進(jìn)行確認(rèn)（大于400-500人）。IV期臨床試驗(yàn)：國(guó)家規(guī)定一些新藥在批準(zhǔn)上市后，療效，不良反應(yīng)，藥劑型觀察等。臨床藥物試驗(yàn)分期第二十六張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因

23、治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。心力衰竭（heart failure，HF） 已成為發(fā)病率和死亡率最高的疾病之一。 藥物干預(yù)：-腎上腺素受體拮抗劑、血管緊張素II和醛固酮抑制劑 以及利尿劑等。 藥物干預(yù)能夠增加生存率，但是還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠理想， 因此很有必要發(fā)展一種新的治療策略。第二十七張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患

24、者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。心衰靶點(diǎn)第二十八張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。心衰靶點(diǎn)1 肌漿網(wǎng)Ca2+-ATPase 心衰時(shí)肌漿網(wǎng)SERCA2a活性的降低心衰大鼠，TAC（transaortic constriction）的模型后，進(jìn)行冠脈內(nèi) Adv-SERCA2a轉(zhuǎn)移

25、，發(fā)現(xiàn)心肌的收縮和舒張功能改善，生存率提高。由二尖瓣損傷造成心衰的豬時(shí)發(fā)現(xiàn)，冠狀動(dòng)脈灌注介導(dǎo)的 AAV1-SERCA2a兩個(gè)月后，左室收縮性能和心肌重塑都有明顯改善。臨床研究方面，美國(guó)匹茲堡大學(xué)醫(yī)學(xué)中心已經(jīng)獲準(zhǔn)進(jìn)行SERCA2a基因轉(zhuǎn)移治療晚期心力衰竭的I期臨床試驗(yàn)，結(jié)果令人期待。SERCA2a第二十九張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療

26、。心衰靶點(diǎn)2 去磷酸化的PLN時(shí)能夠與SERCA2a結(jié)合，從而抑制其活性； 反之，磷酸化的PLN對(duì)SERCA2a的抑制作用就會(huì)消失。 心衰時(shí)PLN活性增高，促進(jìn)心衰。 腺相關(guān)病毒介導(dǎo)的突變的PLN- S16E（一種PLN抑制劑）。 能夠防止罹患心肌病的倉(cāng)鼠以及心梗后心衰大鼠的心肌病變。 Watanabe A等人運(yùn)用siRNA，導(dǎo)入新生大鼠心肌細(xì)胞， 使心肌細(xì)胞鈣攝取功能得到恢復(fù)。運(yùn)用反義核苷酸技術(shù)降低PLN水平，改善人類衰竭的心肌細(xì)胞的 收縮性和鈣處理能力。 PLN第三十張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)

27、的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。 微小RNAs （micro-RNAs， miRs) miRs是體內(nèi)存在的非編碼的RNAs，約22個(gè)核苷酸序列。它們通過結(jié)合在靶基因的3非編碼區(qū)抑制蛋白的轉(zhuǎn)錄后翻譯過程，或者誘導(dǎo)mRNA降解來達(dá)到抑制基因表達(dá)的作用。 通過抑制miR195的表達(dá)，來達(dá)到減輕心肌肥大從而對(duì)抗心力衰竭的作用。 抑制miR-21能夠抑制血管緊張素II和去氧腎上腺素誘導(dǎo)心肌肥大以及胚胎基因的表達(dá)，也具有抗心肌肥大和抗心衰的作用心衰靶點(diǎn)3第三十一張，

28、PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。-腎上腺素受體（-adrenaline receptor）系統(tǒng)心衰靶點(diǎn)41. 1-AR2. 2-AR-AR第三十二張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例

29、ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。缺血性心臟病的血管新生療法1 Vale等對(duì)6 例慢性心肌缺血患者心內(nèi)膜下注射編碼phVEGF-2的裸質(zhì)粒，試驗(yàn)組心絞痛發(fā)作，硝酸甘油使用量明顯減少，1年后平均缺血面積顯著減少。 Reilly 等對(duì)30名加拿大心血管協(xié)會(huì)34 級(jí)難治性心絞痛患者進(jìn)行直接心肌內(nèi)注射編碼VEGF-2 基因的裸質(zhì)粒，1 例術(shù)中死亡。一年內(nèi)心絞痛得到明顯改善。一年后有4 例死亡、5 例心梗、7 例再手術(shù)，其他部位心肌缺血引起。 芬蘭的一個(gè)研究組通過血管成形術(shù)和支架術(shù)導(dǎo)管灌注實(shí)施了Kuopio 血管再生期臨床試驗(yàn)， h

30、VEGF-Ad或hVEGF- P /L。6個(gè)月后未見明顯副作用，心肌灌注，有明顯改善。VEGF第三十三張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。缺血性心血管病的血管新生療法2FGFGrine在60例穩(wěn)定型心絞痛患者中冠脈內(nèi)注射Ad-FGF-4，F(xiàn)GF4 可提高患者的運(yùn)動(dòng)耐力、減少心絞痛發(fā)作。 E2F： 細(xì)胞周期中主要轉(zhuǎn)錄因子，利用反義核苷酸技

31、術(shù)，導(dǎo)入細(xì)胞后， 與轉(zhuǎn)錄因子E2F特異性結(jié)合，從而使轉(zhuǎn)錄因子喪失活化細(xì)胞周期的功能。 冠脈搭橋用的大隱靜脈壁，增厚大大減輕 (III期臨床)E2F第三十四張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。高血壓的治療靶點(diǎn)增強(qiáng)舒血管基因，即將正常舒血管基因DNA 序列導(dǎo)入細(xì)胞， 使血管舒張基因過表達(dá)；抑制縮血管基因，即將反義DNA 序列或RNAi技術(shù)，

32、 抑制血管收縮基因表達(dá)。第三十五張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。誘導(dǎo)基因表達(dá)：正義療法（sense approach）： 通過正義療法在不同的高血壓實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭羞^表達(dá)血管擴(kuò)張劑,腎上腺髓質(zhì)素，心房利鈉肽，內(nèi)皮型一氧化氮，血管緊張素II受體2型受體（AT2R） 第三十六張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基

33、因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。降低基因表達(dá)：反義療法（antisense approach）： 即根據(jù)靶基因的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)設(shè)計(jì)反義寡核苷酸（antisense oligodeoxynucleotide，ASODN）分子，通過靜脈注射或靶組織局部注射，將能與靶基因結(jié)合的ASODN直接導(dǎo)入或以病毒為載體轉(zhuǎn)染到體內(nèi)，抑制收縮血管相關(guān)基因表達(dá)，減少縮血管物質(zhì)的生成。AGT、ACE、AT1R，1 AR，C-fo

34、s，羧肽酶Y為靶基因RNAi：MR，TRPC3 （瞬時(shí)Ca 通道）第三十七張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。心律失常靶點(diǎn) 目前，心律失常的分子遺傳學(xué)研究主要集中于單基因遺傳性疾病。至少明確8個(gè)基因的突變可引起心肌細(xì)胞離子通道的功能異常而導(dǎo)致心律失常，包括鉀通道基因KCNQ1、KCNE1、HEGR、KCNE2和KCNJ 2；鈉通道基因S

35、CN5A；鈣釋放通道基因RYR2，錨蛋白B基因（Ankyrin B）和起搏電流通道基因HCN4。第三十八張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療。 心臟移植 基因治療來解決器官移植排斥有著獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)：器官移植是把一個(gè)個(gè)體的組織或器官切取下來移植給另一個(gè)個(gè)體，這就為我們提供了一個(gè)在體外使用轉(zhuǎn)基因載體改造供體器官或組織的時(shí)機(jī)。在局部表達(dá)免疫移植抑制分子，讓受者免于全身使用免疫抑制劑，而且有望達(dá)到抗原特異性耐受的狀態(tài)。第三十九張，PPT共四十五頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 基因治療概論一、基因治療（gene therapy）的定義 是糾正疾病相關(guān)的缺陷基因的一種技術(shù)。二、基因治療的歷史回顧 1990年，在美國(guó)首例ADA缺乏癥患者基因治療成功。 截止2000年， 400多個(gè)臨床方案被實(shí)施，累計(jì)3500多個(gè)人接受了治療?；蛑委熖岣咭浦参锎婊畹膬蓷l