微生物的計數(shù)

1、微生物的計數(shù)1微生物的計數(shù)血球計數(shù)法平板活菌計數(shù)法計繁殖數(shù)法只適宜于單細胞狀態(tài)的微生物或絲狀微生物產(chǎn)生的孢子2血球計數(shù)法一、實驗原理血球計數(shù)器是一特制的厚載玻片，上面刻有一定面積的方格，將蓋玻片蓋上后，由于兩者之間存在著距離使之形成一定容積的小室。滴入待測樣品后，使樣品均勻充滿小室，在顯微鏡下計算小室內(nèi)的菌數(shù)，換算成單位體積的樣品中所含的菌數(shù)。3血球計數(shù)法二、血球計數(shù)器的構(gòu)造蓋玻片0.1mm1/400mm2計數(shù)室體積25*161mm1mm=(110.1)mm3= 10-4cm34血球計數(shù)板5血球計數(shù)法三、血球計數(shù)法的步驟1、取待測啤酒酵母菌液，搖勻。并做適當稀釋（以每個中格內(nèi)20左右為宜）。2

2、、取潔凈干燥的血球計數(shù)器，蓋上蓋玻片，用滴管吸取少量菌液沿蓋玻片邊緣滴入一小滴，菌液自行滲入計數(shù)室，靜止片刻，使菌液均勻充滿每小室。6血球計數(shù)法示范動作7血球計數(shù)法3、先在低倍鏡下找到計數(shù)室，注意光線不能太亮，再轉(zhuǎn)到高倍鏡下，取5個中格進行計數(shù)（每個中格取4個小格）。計數(shù)時注意調(diào)節(jié)焦距，使不同焦距的菌體都計入，在線上的菌，數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右。8血球計數(shù)法4、菌液濃度計算菌液濃度（菌數(shù)/ml)=N25104稀釋倍數(shù)其中N為每中格內(nèi)菌數(shù)的平均值。9平板活菌計數(shù)法一、實驗原理微生物在固體培養(yǎng)基上形成的單菌落，一般認為是由一個細胞繁殖而來，及一個菌落代表一個細胞。計數(shù)時，將待測菌樣做一系列稀釋，再

3、取一定稀釋度一定量的稀釋液接種到平板上，使其均勻分布。經(jīng)培養(yǎng)后，生長成單菌落，由菌落數(shù)推算出單位體積菌液的活菌數(shù)。10平板活菌計數(shù)法二、平板活菌技術(shù)的步驟0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml菌懸液 10-110-210-310-410-510-6每皿約倒入15ml0.2ml0.2ml0.2ml沙保培養(yǎng)基11平板活菌計數(shù)法待凝后倒置于28恒溫培養(yǎng)48h后計數(shù)。（選擇菌落數(shù)在50100個左右的平板計數(shù)）菌液濃度計算菌液濃度（菌數(shù)/ml) =菌落數(shù)稀釋倍數(shù)5注：只數(shù)濃度合適的兩個平板取平均值122.3.4.5.注意事項1.過程的無菌操作稀釋分離法中熔化后的培養(yǎng)基倒平板前溫度控制稀釋法中用吸管取試管中液體的順序從稀到濃取樣前注意搖勻待測菌液取樣時都要無菌操作。注意取菌液時移液管不要碰到火焰，以免燒死菌體6. 血球計數(shù)器要潔凈干燥，滴入菌液時在蓋玻片與載玻片間不能有氣泡7. 血球計數(shù)時顯微鏡光線不宜太亮13思考題.從兩種方法計數(shù)得出的菌液濃度是否一致？分析誤差產(chǎn)生的原