微生物學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)培訓(xùn)教材

1、PAGE 第 PAGE 13頁 共 NUMPAGES 13頁微生物學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)第一章 微生物概述一. 什么是微生物微生物是一類肉眼不能直接看見，必須借助光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大幾百倍、幾千倍甚至幾萬倍才能觀察到的微小生物的總稱。微生物具有形體微小、結(jié)構(gòu)簡單；繁殖迅速、容易變異；種類繁多、分布廣泛等特點(diǎn)。 二. 微生物的分類：根據(jù)微生物有無細(xì)胞基本結(jié)構(gòu)、分化程度、化學(xué)組成等特點(diǎn)，可分為三大類。1. 非細(xì)胞型微生物 無細(xì)胞結(jié)構(gòu)，無產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng)，由單一核酸（DNA/RNA）和蛋白質(zhì)衣殼組成，必須在活細(xì)胞內(nèi)增殖。病毒屬于此類微生物。2. 原核細(xì)胞型微生物 細(xì)胞核分化程度低，只有DNA盤繞而成的擬核

2、，無核仁和核膜。這類微生物包括細(xì)菌、衣原體、支原體、立克次體、螺旋體和放線菌。3. 真核細(xì)胞型微生物 細(xì)胞核的分化程度高，有核膜、核仁和染色體，能進(jìn)行有絲分裂。如真菌、藻類等。三. 微生物的作用及危害1. 微生物的作用絕大多數(shù)微生物對(duì)人和動(dòng)物是有益的，已廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、食品、醫(yī)藥、釀造、化工、制革、石油等行業(yè)，發(fā)揮了越來越重要的作用。例如與我們?nèi)粘Ｉ蠲芮邢嚓P(guān)的如酸奶、酒類、抗生素、疫苗等。2. 微生物的危害微生物中也有一部分能引起人及動(dòng)、植物發(fā)生病害，這些具有致病性的微生物，稱為病原微生物。如人類的許多傳染?。ǜ忻?、傷寒、痢疾、結(jié)核、脊髄灰質(zhì)炎、病毒性肝炎等），均是由病原微生物引起的。 從藥

3、品生產(chǎn)的衛(wèi)生學(xué)而言，微生物對(duì)藥品的原料、生產(chǎn)環(huán)境和成品的污染是造成生產(chǎn)失敗、成品不合格的重要因素。 第二章 微生物的類群和形態(tài)結(jié)構(gòu)一. 細(xì)菌細(xì)菌是一類細(xì)胞細(xì)而短、結(jié)構(gòu)簡單、細(xì)胞壁堅(jiān)韌，以二分裂方式無性繁殖的原核微生物，分布廣泛。1. 細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)觀察細(xì)菌最常用的儀器是光學(xué)顯微鏡，其大小可以用測微尺在顯微鏡下測量，一般以微米為單位。細(xì)菌按其形態(tài)不同，主要分為球菌、桿菌和螺形菌三類。（1） 球菌 多數(shù)球菌直徑在1微米左右，外觀呈球形或近似球形。由于繁殖時(shí)分裂平面不同可形成不同的排列方式，分為雙球菌、鏈球菌、葡萄球菌等。（2） 桿菌 形態(tài)多數(shù)呈直桿狀，也有的菌體稍彎，多數(shù)呈分散存在，也有的呈鏈狀

4、排列，分為棒狀桿菌、鏈狀桿菌、球桿菌等。（3） 螺形菌 菌體彎曲，呈弧形或螺旋形。如幽門螺桿菌。細(xì)菌雖小，仍具有一定的細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和核質(zhì)等各種細(xì)菌都有，是細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)。2. 細(xì)菌的繁殖二分裂繁殖是細(xì)菌最普遍、最主要的繁殖方式。在分裂前先延長菌體，染色體復(fù)制為二，然后垂直于長軸分裂，細(xì)胞赤道附近的細(xì)胞質(zhì)膜凹陷生長，直至形成橫隔膜，同時(shí)形成橫隔壁，這樣便產(chǎn)生兩個(gè)子細(xì)胞。 細(xì)菌生長速度很快，一般約20min分裂一次。若按此速度計(jì)算，細(xì)菌群體將龐大到難以想象的程度。但事實(shí)上由于細(xì)菌繁殖中營養(yǎng)物質(zhì)的逐漸消耗，有害代謝產(chǎn)物的逐漸積累，細(xì)菌不可能始終保持高速度的無限繁殖。經(jīng)過一段

5、時(shí)間后，細(xì)菌繁殖速度逐漸減慢，死亡菌數(shù)增多，活菌增長率隨之下降并趨于停滯。3. 細(xì)菌的菌落單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌細(xì)胞生長繁殖后，會(huì)形成以母細(xì)胞為中心的一堆肉眼可見、有一定形態(tài)構(gòu)造的子細(xì)胞集團(tuán)，這就是菌落。細(xì)菌菌落常表現(xiàn)為濕潤、粘稠、光滑、較透明、易挑取、質(zhì)地均勻以及菌落正反面或邊緣與中央部位顏色一致等。二. 真菌真菌是一類有細(xì)胞壁，無葉綠素，以寄生或腐生方式生存，少數(shù)為單細(xì)胞，多數(shù)為多細(xì)胞，能進(jìn)行無性或有性繁殖的一類真核細(xì)胞型微生物。真菌包括單細(xì)胞與多細(xì)胞兩類。單細(xì)胞真菌呈圓形或卵圓形，稱為酵母菌；多細(xì)胞真菌由菌絲和孢子組成，并交織成團(tuán)，稱絲狀菌或霉菌。真菌生長的最適的溫度為2228，最適的pH值為4

6、6。其繁殖能力強(qiáng)，但生長速度比細(xì)菌慢，常需1-4周才形成菌落。真菌對(duì)熱的抵抗力不強(qiáng)，一般加熱6070 1小時(shí)即被殺死，但對(duì)干燥、日光、紫外線和一些化學(xué)消毒劑有抵抗力，但對(duì)2.5碘酒、10甲醛則較敏感。1. 霉菌霉菌是絲狀真菌的俗稱，意即發(fā)霉的真菌，它們往往能形成分枝繁茂的菌絲體，但又不象蘑菇那樣產(chǎn)生大型的子實(shí)體。（1）霉菌的形態(tài)、大小和結(jié)構(gòu)構(gòu)成霉菌營養(yǎng)體的基本單位是菌絲。菌絲是一種管狀的細(xì)絲，把它放在顯微鏡下觀察，很像一根透明膠管，它的直徑一般為3-10微米，比細(xì)菌的細(xì)胞約粗幾倍到幾十倍。菌絲可伸長并產(chǎn)生分枝，許多分枝的菌絲相互交織在一起，就叫菌絲體。（2）霉菌的繁殖霉菌有著極強(qiáng)的繁殖能力，而

7、且繁殖方式也是多種多樣的。在自然界中，霉菌主要依靠產(chǎn)生形形色色的孢子進(jìn)行繁殖。孢子有點(diǎn)像植物的種子，不過數(shù)量特別多，特別小。霉菌的孢子具有小、輕、干、多，以及形態(tài)色澤各異、休眠期長和抗逆性強(qiáng)等特點(diǎn)，每個(gè)個(gè)體所產(chǎn)生的孢子數(shù)，經(jīng)常是成千上萬的，有時(shí)竟達(dá)幾百億、幾千億甚至更多。這些特點(diǎn)有助于霉菌在自然界中隨處散播和繁殖。對(duì)人類的實(shí)踐來說，孢子的這些特點(diǎn)有利于接種、擴(kuò)大培養(yǎng)、菌種選育、保藏和鑒定等工作，對(duì)人類的不利之處則是易于造成污染、霉變和易于傳播動(dòng)植物的霉菌病害。 （3）霉菌的菌落由于霉菌的菌絲較粗而長，因而霉菌的菌落較大，有的霉菌的菌絲蔓延，沒有局限性。菌落質(zhì)地一般比較疏松，外觀干燥，不透明，呈

8、現(xiàn)或緊或松的蛛網(wǎng)狀、絨毛狀或棉絮狀；菌落與附著物的連接緊密，不易挑??；菌落正反面的顏色和邊緣與中心的顏色常不一致。 2. 酵母菌酵母菌在自然界中分布很廣，尤其喜歡在偏酸性且含糖較多的環(huán)境中生長，例如，在水果、蔬菜、花蜜的表面和在果園土壤中最為常見。 （1）酵母菌的形態(tài)、大小和結(jié)構(gòu)酵母菌是單細(xì)胞真核微生物。酵母菌細(xì)胞的形態(tài)通常有球形、卵圓形、臘腸形、橢圓形、檸檬形或藕節(jié)形等。比細(xì)菌的單細(xì)胞個(gè)體要大得多，一般為1-5微米5-30微米。酵母菌具有典型的真核細(xì)胞結(jié)構(gòu),有細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、液泡、線粒體等。（2）酵母菌的繁殖酵母菌有多種繁殖方式，包括無性繁殖和有性繁殖。有人把只進(jìn)行無性繁殖的

9、酵母菌稱作假酵母，而把進(jìn)行有性繁殖的酵母菌稱作真酵母。（3）酵母菌的菌落大多數(shù)酵母菌的菌落特征與細(xì)菌相似，但比細(xì)菌菌落大而厚，菌落表面光滑、濕潤、粘稠，容易挑起，菌落質(zhì)地均勻，正反面和邊緣、中央部位的顏色都很均一，菌落多為乳白色，少數(shù)為紅色，個(gè)別為黑色。 三. 病毒病毒屬非細(xì)胞型微生物，在自然界分布非常廣泛，可在人、動(dòng)物、植物、真菌和細(xì)菌中寄居并引起感染。病毒是體積最小、結(jié)構(gòu)最簡單的微生物，它僅有一種核酸（DNA或RNA）作其遺傳物質(zhì)。病毒必須在宿主活細(xì)胞內(nèi)寄生，依靠細(xì)胞提供的能量、營養(yǎng)物質(zhì)及生物大分子合成機(jī)制，完成病毒的復(fù)制過程。病毒與人類的關(guān)系極為密切，人類的傳染病約75是由病毒引起的。有

10、些病毒傳染性強(qiáng)，可引起世界大流行（如流感、艾滋病等）。1. 病毒的大小、形態(tài)和結(jié)構(gòu)病毒體積微小，大多數(shù)病毒只有采用電子顯微鏡將其放大數(shù)千、數(shù)萬倍才能看見。病毒的形態(tài)不一，基本可歸納為三種：桿狀、球狀和這兩種形態(tài)結(jié)合的復(fù)合型。病毒沒有細(xì)胞構(gòu)造，病毒粒子的主要成分是核酸和蛋白質(zhì)，在宿主細(xì)胞協(xié)助下，通過核酸的復(fù)制和核酸蛋白裝配的形式進(jìn)行增殖。病毒的結(jié)構(gòu)通常有螺旋對(duì)稱型、20面體立體對(duì)稱型和復(fù)合對(duì)稱型。2. 病毒的增殖病毒只有在宿主的活細(xì)胞里才能進(jìn)行增殖。病毒的增殖不是二分裂方式，而是以其基因組為模板，藉DNA多聚酶或RNA多聚酶以及其它必要因素，經(jīng)過復(fù)雜的生化合成過程，復(fù)制出病毒的基因組。此時(shí)宿主細(xì)

11、胞的生化合成受到抑制，病毒基因則經(jīng)過轉(zhuǎn)錄、翻譯等過程，產(chǎn)生大量病毒蛋白質(zhì)，再經(jīng)過裝配，最終釋放出子代病毒。病毒這種以核酸分子為模板進(jìn)行增殖的方式稱為自我復(fù)制。3. 理化因素對(duì)病毒的影響（1）物理因素溫度 多數(shù)病毒耐冷不耐熱。在干冰溫度（-70）和液氮溫度（-196）下，病毒感染性可保持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。在5060 30分鐘，100幾秒鐘即可滅活。pH 多數(shù)病毒在pH59范圍內(nèi)穩(wěn)定，強(qiáng)酸或強(qiáng)堿條件下可被滅活。射線 X射線、射線和紫外線都能滅活病毒。（2）化學(xué)因素主要有化學(xué)消毒劑、抗生素及中草藥等。除強(qiáng)酸、強(qiáng)堿消毒劑外，酚類、氧化劑、鹵素類、醇類等對(duì)病毒均有滅活作用。例如2003年非典時(shí)期，大家都用8

12、4、過氧乙酸等來消毒，84的主要成分就是次氯酸鈉，就是剛才所說的鹵素類消毒劑，而過氧乙酸的就是冰醋酸和過氧化氫按一定比例混合制成的，屬于強(qiáng)酸加氧化。第三章 微生物的營養(yǎng)一. 微生物的營養(yǎng)要求微生物生長繁殖所需的營養(yǎng)物質(zhì)主要有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽和生長因子等。1. 水水是各種生物細(xì)胞必需的。水是良好的溶劑，微生物的新陳代謝過程中的一切生化反應(yīng)都離不開水的作用。2. 碳源碳源是合成菌體成分的原料，也是微生物獲取能量的主要來源。整體上看來，微生物可以利用的碳源范圍極廣，分為有機(jī)碳源和無機(jī)碳源兩大類。凡必須利用有機(jī)碳源的微生物就是異養(yǎng)微生物，凡能利用無機(jī)碳源的微生物就是自養(yǎng)微生物。糖類是最廣泛利用的

13、碳源。3. 氮源氮源主要是供給合成菌體結(jié)構(gòu)的原料，很少作為能源利用。與碳源相似，微生物作為一個(gè)整體來說，能利用的碳源種類十分廣泛。某些微生物（如固氮菌）能利用空氣中分子態(tài)的氮或利用無機(jī)氮化物如銨鹽、硝酸鹽合成有機(jī)氮化物。4. 無機(jī)鹽類無機(jī)鹽主要可為微生物提供除碳、氮以外的各種重要元素。微生物需要的無機(jī)鹽類很多，主要有P、S、K、Na、Ca、Mg、Fe等，其主要功能為構(gòu)成菌體成分；調(diào)節(jié)滲透壓；作為某些酶的成分，并能激活酶的活性等。5. 生長因子有些微生物雖然供給它適合的碳源氮源和無機(jī)鹽類，仍不能生長，還要供給一定量的所謂“生長因子”。其種類很多，主要是B族維生素的化合物等。生長因子可以從酵母浸出

14、液、血液或血清中獲得。二. 微生物的營養(yǎng)類型根據(jù)微生物對(duì)碳源的要求不同，可將其分為自養(yǎng)菌和異養(yǎng)菌兩大營養(yǎng)類型。凡能利用無機(jī)碳合成菌體內(nèi)有機(jī)碳化物的，叫自養(yǎng)菌；不能利用無機(jī)碳而需要有機(jī)碳才能合成菌體內(nèi)有機(jī)碳化物的，為異養(yǎng)菌。根據(jù)其生命活動(dòng)所需能量的來源不同，可分為光能營養(yǎng)菌和化能營養(yǎng)菌。前者是從光線中獲得能量，后者則從化學(xué)物質(zhì)氧化中取得能量。因此，根據(jù)微生物所需的碳源和能源不同，可將微生物分為光能自養(yǎng)菌、光能異養(yǎng)菌、化能自養(yǎng)菌、化能異養(yǎng)菌等四類。第四章 消毒與滅菌下列術(shù)語常用于表示物理或化學(xué)方法對(duì)微生物的殺滅程度。消毒：殺死物體上病原微生物的方法,并不一定能殺死含細(xì)菌的芽胞。消毒所用的試劑稱為消

15、毒劑。滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法。滅菌比消毒要求高，包括殺滅細(xì)菌芽孢在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。抑菌：抑制體內(nèi)或體外細(xì)菌的生長繁殖。常用的抑菌劑為各種抗生素，可抑制細(xì)菌的繁殖。防腐：防止或抑制體外細(xì)菌生長繁殖的方法，細(xì)菌一般不死亡。同一種化學(xué)藥品在高濃度時(shí)為消毒劑，低濃度時(shí)常為防腐劑。消毒與滅菌的方法一般可分為物理學(xué)方法和化學(xué)方法兩大類。一. 物理消毒滅菌法用于消毒滅菌的物理因素有熱力、輻射、過濾等。1. 熱力滅菌法高溫對(duì)細(xì)菌具有明顯的致死作用，因此最常用于消毒與滅菌。多數(shù)無芽孢的細(xì)菌經(jīng)5560作用3060分鐘后死亡。經(jīng)80濕熱510分鐘可殺死所有細(xì)菌繁殖體、真菌和酵母菌。細(xì)菌芽

16、孢對(duì)高溫有很強(qiáng)的抵抗力，例如炭疽芽孢桿菌的芽孢，耐受515分鐘的煮沸，而肉毒梭菌的芽孢則需煮沸35小時(shí)才死亡。熱力滅菌法分干熱滅菌和濕熱滅菌兩大類，相同溫度下，后者的滅菌效力比前者大。2. 輻射滅菌法（1）紫外線 作用于DNA，使細(xì)菌DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄受到干擾，導(dǎo)致細(xì)菌變異或死亡。常用于室內(nèi)的空氣消毒。（2）電離輻射 對(duì)各種細(xì)菌均有致死作用。常用于大量一次性醫(yī)用塑料制品的消毒和食品的消毒。（3）微波 是一種波長為1mm1m的電磁波，可穿透玻璃、塑料薄膜及陶瓷等物質(zhì)，但不能穿透金屬表面。多用于檢驗(yàn)室用品、無菌室的用具的消毒。3. 濾過除菌法用物理阻留的方法將液體或空氣中的細(xì)菌除去,以達(dá)到除菌目的

17、。濾菌器含有微細(xì)小孔0.22微米,只允許液體或氣體通過,而大于孔徑的細(xì)菌等顆粒不能通過 。適用范圍：血清、毒素、抗生素以及空氣等的除菌。二. 化學(xué)消毒滅菌法許多化學(xué)藥物能影響微生物的化學(xué)組成、物理結(jié)構(gòu)和生理活性，從而發(fā)揮防腐、消毒及滅菌的作用。潔凈室(區(qū))應(yīng)定期消毒，使用的消毒劑不得對(duì)設(shè)備、物料和成品產(chǎn)生污染。消毒劑品種應(yīng)定期更換，防止產(chǎn)生耐藥菌株。影響消毒劑活性的因素1溫度：消毒過程的速度一般可隨溫度的提高而加快。溫度影響主要是菌體的表面和酶系統(tǒng)的活性。以及消毒劑的分子運(yùn)動(dòng)，使消毒劑與細(xì)胞接觸的機(jī)會(huì)增加，從而使消毒的時(shí)間縮短。2濃度：一般說，在一定的條件下，消毒劑濃度低，效果好。提高或降低藥

18、劑的濃度，均可顯著影響消毒效果。同時(shí)，消毒劑濃度的稀釋，往往要延長消毒時(shí)間。3酸堿度：酸堿度對(duì)消毒劑作用的影響，是復(fù)雜、多方面的。4微生物的種類和數(shù)量：不同種類的微生物對(duì)消毒劑的耐受力是不同的，微生物污染量高時(shí)，則須加長消毒時(shí)間或提高消毒劑的濃度。5有機(jī)物質(zhì)：消毒作用的環(huán)境中存在著有機(jī)物質(zhì)，可影響消毒劑的效果。都有不同程度降低消毒劑的作用。常用消毒劑的種類和用途品名作用機(jī)制常用劑量性質(zhì)與用途乙醇蛋白質(zhì)變性、溶解細(xì)胞。7075%能迅速殺死細(xì)菌繁殖體，對(duì)一般病毒有一定的作用。一般用95%乙醇稀釋成7075%的乙醇溶液，常用于皮膚消毒。市售或自配的乙醇溶液并非無菌。甲醛阻抑菌細(xì)核蛋白質(zhì)合成?？諝庀?/p>

19、：每立方米空間用40%甲醛溶液40ml。又稱蟻酸，分子式HCHO，常溫下固態(tài)，高溫下氣態(tài)。能破壞細(xì)菌繁殖體及許多芽胞、真菌和病毒。室溫20，室內(nèi)濕度達(dá)70%以上，用甲醛，緊閉門窗16小時(shí)可達(dá)消毒。甲醛加高錳酸甲或漂白粉，產(chǎn)生大量甲醛氣體，可使室內(nèi)消毒。市售甲醛濃度為3740%水溶液，又稱福爾馬林，常用于保存動(dòng)物標(biāo)本。甲醛有揮發(fā)性，對(duì)眼睛、皮膚有刺激性，引起皮膚硬化或皺褶，不宜皮膚消毒。甲酚皂損傷細(xì)胞膜。2%溶于水，呈堿性反應(yīng)，有除垢作用，3%水溶液能殺死大多數(shù)致病菌繁殖體，包括結(jié)核桿菌，對(duì)芽胞作用較弱。5%水溶液作玻片、器械、衣物消毒，但不能消毒與食品、藥品有關(guān)的容器、工具及生產(chǎn)場所。2%水溶

20、液可用于皮膚消毒，消毒后手有麻木感。苯扎溴銨破壞細(xì)胞膜，使蛋白質(zhì)變性。0.050.1%季胺類化合物，陽離子表面活性劑。抗菌譜較窄，對(duì)革蘭陽性菌有較強(qiáng)作用，對(duì)革蘭陰性桿菌，特別是銅綠假單胞菌不敏感，在中性和弱堿性溶液中效果最佳。0.1%水溶液對(duì)皮膚、黏膜、創(chuàng)傷和器械具有清潔和消毒的雙重作用。對(duì)皮膚的刺激性小，與肥皂或其他合成洗滌劑、有機(jī)物接觸時(shí)活性大減。乳酸具有很強(qiáng)的殺菌作用，適用于空氣消毒，以11.5ml/m3的濃度，熏蒸房間作空氣消毒，或與苯酚等合用，熏蒸時(shí)密閉12小時(shí)。高錳酸鉀氧化作用1%水溶液強(qiáng)氧化劑，穩(wěn)定，使蛋白質(zhì)、酶氧化變性。做皮膚、尿道、蔬菜、水果、碗筷等消毒。在有機(jī)物存在時(shí)，可被

21、還原成二氧化錳而降低殺菌效果，故用高錳酸鉀消毒時(shí)，其表面應(yīng)先清洗干凈。氯和次氯酸鹽氧化作用漂白粉1020%水溶液作為無滲透設(shè)備的表面消毒。次氯酸鈉或鉀的水溶液廣泛用于消毒和清洗傷口等，可迅速殺死細(xì)菌繁殖體，對(duì)真菌、病毒均有作用。氯有刺激性和毒性。次氯酸鹽對(duì)金屬有腐蝕性，有機(jī)物存在時(shí)，活性明顯降低。第五章 GMP與微生物一. 藥品生產(chǎn)中微生物的生態(tài)學(xué)分布在藥品生產(chǎn)中，由于受到各種要素（制藥廠房環(huán)境的空氣、制藥用水、操作人員、物料、設(shè)備等）的影響，都可能導(dǎo)致藥品的微生物污染。因此，GMP對(duì)各種要素都提出了防止污染的基本要求。中國藥典微生物限度檢查法規(guī)定的檢查項(xiàng)目包括細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌數(shù)和控制菌

22、檢查。1. 空氣中的微生物空氣本身并不產(chǎn)生污染，因?yàn)榭諝獠缓匾乃趾蜖I養(yǎng)，不是適合微生物生長繁殖的天然環(huán)境，但是一般的大氣環(huán)境仍含有不少的細(xì)菌、霉菌和酵母菌?？諝庵械奈⑸飦碜曰覊m微粒（自然因素如風(fēng)，人為因素如車），來自人的皮膚與衣服，以及談話、咳嗽、打噴嚏等造成的飛沫?？諝庵形⑸飻?shù)量取決于灰塵量和活動(dòng)狀況，例如，有活躍人群的地方微生物多，不清潔的房間比清潔的房間多，潮濕的地方比干燥的地方多。因此，空氣是侵襲我們產(chǎn)品的污染物的主要媒介。因此保持空氣潔凈是極為重要的。在藥品生產(chǎn)中，減少空氣中微生物數(shù)量的方法有多種，常用的有以下3種方法： 空氣潔凈技術(shù)采用的過濾方法 過濾是最常用的方法。過濾

23、介質(zhì)種類很多，例如：纖維素、玻璃棉或人造纖維等?？諝鈨艋b置可用于整個(gè)房間如無菌操作室，也可只限于操作區(qū)域局部如超凈工作臺(tái)。 化學(xué)消毒方法 采用消毒劑作用于室內(nèi)空氣和物體表面。 紫外線照射方法 采用紫外線對(duì)室內(nèi)空氣進(jìn)行照射。2. 制藥用水中的微生物在生產(chǎn)過程中，水是應(yīng)用最廣泛的原料之一。從理論上來講，微生物在純水中是不能生長的。但是，所有的各類水不管怎樣仔細(xì)蒸溜或過濾，總會(huì)含有一定量的可溶性有機(jī)物和鹽類。正是這些可溶性的物質(zhì)被微生物利用作為它們生長的養(yǎng)料源泉。工藝用水在制藥企業(yè)防止污染及作為制藥用水方面至關(guān)重要。因?yàn)樗粌H直接用于產(chǎn)品的生產(chǎn)，而且也用于清洗設(shè)備和用于冷卻。藥品微生物污染的關(guān)鍵環(huán)

24、節(jié)在于工藝用水，因?yàn)樗俏⑸锷L代謝的一個(gè)必要成分。中國藥典收載了純化水和注射用水的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。常用的對(duì)水消毒的方法，與空氣消毒的方法一樣，也是化學(xué)消毒劑、過濾與紫外線照射3種。 化學(xué)消毒劑方法 對(duì)水的消毒以化學(xué)消毒劑方法較常用，效果也最好。常使用次氯酸鈉或通氯氣。在使用中，應(yīng)注意到水系統(tǒng)中不能留有消毒不到的“死角”。 膜過濾法 適用于水系統(tǒng)的連續(xù)循環(huán)處理。 紫外線照射法 在水系統(tǒng)中應(yīng)用紫外線照射消毒，適用于需要特殊處理的水（如光學(xué)透明度要求高），一般在末端之前。這種方法因處理過的水無臭無味，而優(yōu)于化學(xué)消毒劑方法；因不產(chǎn)生微生物移居濾器的現(xiàn)象，而優(yōu)于膜濾器。在水系統(tǒng)中，這3種方法綜合應(yīng)用，設(shè)計(jì)

25、安裝在適當(dāng)?shù)奈恢谩?. 廠房建筑與設(shè)備表面的微生物廠房建筑物的內(nèi)表面，以及設(shè)備表面、容器內(nèi)外表面等，都可以是微生物寄生存的地方。由于空氣中的濕度，所有表面都包上一層含水的薄膜。這層薄膜由于靜電吸引而飽含塵埃微粒，有很多時(shí)候，表面還覆蓋一層油狀物質(zhì)，此層油膜易受到塵粒污染。表面因塵埃微粒和微生物由空氣傳播的回降而受到污染。 請(qǐng)記?。阂粋€(gè)表面看起來很干凈，而實(shí)際上已經(jīng)被千百萬個(gè)微生物所污染，除非已經(jīng)做了正確的消毒滅菌。制藥企業(yè)生產(chǎn)車間的廠房，庫房及實(shí)驗(yàn)室都必須清潔整齊。建筑物表面不透水，光滑平整、無裂縫、接口嚴(yán)密、無顆粒物脫落，并能耐受清洗和消毒。設(shè)備、管道應(yīng)易于拆卸、結(jié)構(gòu)簡單，便于清潔消毒。特別

26、是藥品生產(chǎn)過程中使用的容器，包括內(nèi)包裝容器，都應(yīng)進(jìn)行清洗和消毒。4. 人體的微生物微生物廣泛分布于自然界，人體與自然環(huán)境接觸，當(dāng)然也不能例外。凡是人體體表皮膚與外界相通的腔道如口腔、鼻腔、腸道、眼結(jié)膜、泌尿生殖道等均存在不同種類的微生物，其中有些微生物可以長期寄居在人的體表、皮膚和黏膜上。以下舉出一些人員污染的途徑和方式：人的頭發(fā)和皮膚、水滴、衣著、化妝品和珠寶手飾生產(chǎn)過程中人們所引起的混雜和誤差(1) 人的頭發(fā)和皮膚 每分鐘從人類皮膚中要散發(fā)出約10,000個(gè)微生物。我們的手上，也擁有大量的微生物。此外，在人們正常的日常活動(dòng)中都接觸大量微生物。皮膚上經(jīng)常存在白色葡萄球菌、枯草桿菌、類白喉?xiàng)U菌

27、、大腸桿菌等，有時(shí)還有非致病性的抗酸菌、真菌等。(2) 水滴呼吸和咳嗽將產(chǎn)生出大量水滴，這種水滴既含有塵粒污染也含有微生物污染。口腔是對(duì)污染最為敏感的地區(qū)，常見的微生物有白色葡萄球菌、類白喉?xiàng)U菌、乳酸桿菌、放線菌、真菌、螺旋體等。呼吸道常存在空氣中的細(xì)菌，如葡萄球菌、類白喉?xiàng)U菌；在鼻咽部還有鏈球菌、奈氏菌屬。一次咳嗽或噴嚏將把千百萬個(gè)微生物引入工作環(huán)境內(nèi)。 (3) 衣著從可洗滌的紡織物中，可能散發(fā)出棉絨和淀粉粒。而從羊毛、開士米和其它松軟的針紡織物中也可能散落出纖維和磨損下的微粒。污染也可能通過我們的鞋子進(jìn)入工作場所。 (4) 化妝品和珠寶手飾 發(fā)膠、香水、睫毛膏、香粉等，為微生物污染提供了極

28、好的源泉。耳環(huán)、戒指、項(xiàng)鏈、手鏈能傳播微生物污染。如果，一小片珠寶碎片落入一批產(chǎn)品中，則可能引起嚴(yán)重的塵粒污染。 (5) 生產(chǎn)過程中人們所引起的混雜和誤差由人引起的污染也可能來自于生產(chǎn)過程中出現(xiàn)的混雜和誤差。例如，當(dāng)員工沒有按照SOP進(jìn)行工作時(shí)，車間的污染程度增加。讓裝產(chǎn)品的容器不加蓋存放，將導(dǎo)致產(chǎn)品污染。由于人體攜帶有不同種類的微生物，因此在藥品生產(chǎn)的全過程中，每個(gè)工序都有可能發(fā)生由人體攜帶的微生物導(dǎo)致藥品污染的危險(xiǎn)。例如，用未經(jīng)清潔消毒的手直接接觸藥品使其污染，通過談話、咳嗽等方式引起藥品的污染。人體不同部位所帶細(xì)菌數(shù)量部位細(xì)菌數(shù)量部位細(xì)菌數(shù)量手部1001000/ cm2糞便710億/ g

29、前額1000100000/ cm2唾液約10億/ g頭皮約100萬/ cm2鼻腔分泌物約1000萬/ g腋窩約1000萬/ g5. 物料的微生物物料系指原料、輔料和包裝材料等。原輔料可能將大量的微生物帶入到藥物制劑中。因此，選用符合標(biāo)準(zhǔn)的原輔料，將有利于控制藥品和環(huán)境的污染水平。來源于動(dòng)物的原料藥或輔料（如明膠），有可能被動(dòng)物病原體所污染；來源于植物的原料藥或輔料（如淀粉）則可能被多種細(xì)菌、霉菌、酵母菌所污染。原輔料的處理方法因藥物類型而異，許多原輔料需進(jìn)行消毒或滅菌處理。植物藥材可用晾曬、烘烤方法使之充分干燥，以減少微生物繁殖。原輔料在儲(chǔ)藏過程中必須注意環(huán)境條件。包裝材料，特別是內(nèi)包裝材料，

30、一方面包裝藥品，另一方面防止外界微生物進(jìn)入藥中。若處理不當(dāng)，在藥品儲(chǔ)藏和運(yùn)輸過程中，極易引起污染，造成嚴(yán)重后果?？傊?，包裝材料應(yīng)考慮不同需要加以清潔或消毒處理進(jìn)行合理封裝。原則是盡量減少微生物數(shù)量，預(yù)防發(fā)生污染。二. 微生物污染導(dǎo)致藥物變質(zhì)的因素藥品的生產(chǎn)、儲(chǔ)存、使用的全過程，都有因微生物污染而導(dǎo)致藥物變質(zhì)的因素。而藥物變質(zhì)，一般需要很高的微生物污染程度。也就是說，微生物面廣、量大的繁殖才出現(xiàn)顯著的易被覺察的損壞現(xiàn)象。微生物污染導(dǎo)致藥物變質(zhì)的因素有以下幾個(gè)方面：1. 微生物污染數(shù)量在藥品生產(chǎn)中應(yīng)將微生物污染數(shù)量控制在最低限度，這就需要采取綜合措施。2. 微生物生長的營養(yǎng)因素許多藥物成分，都有微生物生長所需的碳源、氮源或無機(jī)鹽類。生產(chǎn)用水（純化水、注射用水）亦能支持微生物生長。3. pH值pH值為中性時(shí)最適合微生物生長。某些微生物在pH3.5或pH8.09.5仍能生長。4. 溫度對(duì)于微生物污染引起藥物變質(zhì)的溫度，不同的微生物有不同的最適溫度。根據(jù)微生物生長的最適溫度不同，可以將微生物分為嗜冷、兼性嗜冷、嗜溫、嗜熱和超嗜熱等五種不同的類型。對(duì)嗜溫微生物來說，可將藥物儲(chǔ)藏在陰冷、干燥處。三. 防止微生物污染的原則1. 了解污染源對(duì)藥品生產(chǎn)全過程可能造成污染的來源，進(jìn)行深入的了解研究，從而設(shè)計(jì)一個(gè)完好的生產(chǎn)工藝，制定規(guī)章制度和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，