冷浸法提取丹參脂溶性部位工藝研究

1、冷浸法提取丹參脂溶性部位工藝研究作者：林忠澤，劉東輝，關(guān)世俠【摘要】【目的】探討冷浸法提取丹參脂溶性部位的最佳工藝條件?！痉椒ā坎捎酶咝б合嗌V(HPLC)法為測(cè)定方法，以丹參酮A提取量為指標(biāo)，考察不同濃度乙醇和粉碎對(duì)丹參酮A提取率的影響，并用正交試驗(yàn)法進(jìn)一步優(yōu)選提取條件?！窘Y(jié)果】最佳提取工藝條件為采用8倍量體積分?jǐn)?shù)95%乙醇冷浸提取2次(每次3h)，在這種條件下，可獲得較高的丹參酮A提取率。【結(jié)論】此工藝條件簡(jiǎn)單、穩(wěn)定，提取率高?！娟P(guān)鍵詞】丹參/生產(chǎn)與制備;丹參/化學(xué);丹參酮A/分析;色譜法，高壓液相;正交試驗(yàn)丹參為唇形科植物丹參SalviamiltiorrhizaBge.的干燥根及根莖，具

2、有祛瘀止痛、活血通經(jīng)、清心除煩的功效1?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，丹參具有擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，增加冠狀動(dòng)脈血流量，防止心肌缺血和心肌梗死，加快微循環(huán)血流，促進(jìn)毛細(xì)血管網(wǎng)開(kāi)放，抑制心肌收縮，減少能量消耗，擴(kuò)張血管，降低膽固醇、血脂，抑制凝血，激活纖溶，穩(wěn)定紅細(xì)胞膜，提高缺氧耐受力，增加肝臟血流量，保護(hù)肝損傷細(xì)胞，抗肝纖維化，抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)以及消炎抗菌等作用2。其脂溶性成分具有抗菌、抗炎、抗氧化等藥理作用3。目前提取丹參脂溶性成分的方法主要有乙醇回流法和超臨界CO2萃取法4。丹參酮A是丹參脂溶性主要成分之一，丹參酮A對(duì)熱敏感，在提取制備過(guò)程中容易被破壞5，超臨界CO2萃取法成本較高。冷浸提取法工藝簡(jiǎn)單，可室溫下操

3、作且成本低。本文對(duì)冷浸法提取丹參中的脂溶性部位工藝進(jìn)行系統(tǒng)研究，旨在優(yōu)選最佳提取工藝條件，現(xiàn)報(bào)道如下。1儀器和試藥LC10AT高效液相色譜儀(日本島津);SPD10A紫外檢測(cè)器(日本島津);N2000工作站;丹參酮A對(duì)照品購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所(批號(hào)：0766200011);丹參購(gòu)自山東藥材市場(chǎng)，鑒定人為廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院關(guān)世俠副教授;甲醇為色譜純，購(gòu)自SIGMA公司;純水以雙蒸法自制。2方法與結(jié)果21對(duì)照品溶液的制備取丹參酮A對(duì)照品約10mg，精密稱(chēng)定，置25mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻;精密量取1mL，置25mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。22色譜條件色譜柱：Kroma

4、silC18柱(250mm46mm);流動(dòng)相：甲醇水(體積比為7525);流速：1mL/mim;檢測(cè)波長(zhǎng)：270nm。在此條件下測(cè)定丹參酮A對(duì)照品及丹參提取物。23標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)分別吸取對(duì)照溶液25、50、75、100、150、200L，注入液相色譜儀。以丹參酮A進(jìn)樣量(X)對(duì)峰面積(Y)進(jìn)行線(xiàn)性擬合，丹參酮A回歸方程為Y=4106X，r=09994。結(jié)果表明：丹參酮A在0039203136g范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好。24溶劑乙醇濃度選擇取8份丹參粉末(過(guò)3號(hào)篩)，每份約03g，精密稱(chēng)定后將每2份分成1組，分別精密加入10mL體積分?jǐn)?shù)為65%、75%、85%、95%的乙醇，冷浸5h，濾過(guò)，收集續(xù)濾液，精密量取1mL置10mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，分別精密吸取5L注入液相色譜儀進(jìn)行測(cè)定。計(jì)算藥材提取物中丹參酮A含量：p丹參酮A=m丹參酮A(g)/m藥材(g)100%。表1結(jié)果顯示，體積分?jǐn)?shù)85%乙醇提取丹參酮A含量比體積分?jǐn)?shù)95%乙醇提取丹參酮A含量低125%,故本實(shí)驗(yàn)選擇體積分?jǐn)?shù)95%乙醇作為提取溶劑。25粉碎提取試驗(yàn)取同一批丹參藥材，一份粉碎(過(guò)3號(hào)篩)，一份切碎，再分別稱(chēng)取3份，每份50g，加8倍量體積分?jǐn)?shù)95%乙醇冷浸過(guò)夜，濾過(guò)，精密吸取1mL置10mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻