離子交換色譜展示

1、關(guān)于離子交換色譜展示第一張，PPT共二十一頁，創(chuàng)作于2022年6月基本原理：離子交換色譜（ion exchange chromatography，IEC） 以離子交換樹脂作為固定相，樹脂上具有固定離子基團及可交換的離子基團。當(dāng)流動相帶著組分電離生成的離子通過固定相時，組分離子與樹脂上可交換的離子基團進(jìn)行可逆變換。根據(jù)組分離子對樹脂親合力不同而得到分離。 第二張，PPT共二十一頁，創(chuàng)作于2022年6月主要用于分離離子或可離解的化合物，包括氨基酸，多肽，核酸，核苷等各種生物大分子。離子交換色譜的運用：第三張，PPT共二十一頁，創(chuàng)作于2022年6月分離純化生物大分子Po+ZDo=Pb+ZDb重視Po

2、:流動相中溶質(zhì)的濃度；Pb:填料表面上被吸附的溶質(zhì)濃度;Do:流動相中洗脫劑的濃度；Db:填料表面上洗脫劑的濃度；Z:蛋白質(zhì)在吸附過程中從填料表面上 被置換的洗脫劑的數(shù)目；第四張，PPT共二十一頁，創(chuàng)作于2022年6月以離子交換色譜快速純化 8 一淀粉酶為例研究探討離子交換色譜第五張，PPT共二十一頁，創(chuàng)作于2022年6月本研究利用合成的強陰離子交換柱很好地分離了a- 淀粉酶粗品,其活性 回收率高達(dá)96%,比活性達(dá)388ug/mg蛋白質(zhì)純度提高30倍。此法的研究成功 為大規(guī)模制備高純度 a- 淀粉酶提供了一個新工藝路線。 高純度的 8 一淀粉酶可作為酶試劑 ,研究生物作用的特性、酶反應(yīng)機理,測

3、定 生化反應(yīng)的平衡常數(shù)。1.0 摘要：第六張，PPT共二十一頁，創(chuàng)作于2022年6月2.0實驗部分 2.1標(biāo)準(zhǔn)酶液配制 用微量天平準(zhǔn)確稱取5mg高純度的 a-淀粉酶試劑,于小離心 試管中,準(zhǔn)確加1.0ml水,溶解后 ,在1300r/min的高速離心機上離心5min,小心轉(zhuǎn)移上部清液于另一離心試管中,此液相當(dāng)于1062u/ml活力.第七張，PPT共二十一頁，創(chuàng)作于2022年6月第八張，PPT共二十一頁，創(chuàng)作于2022年6月第九張，PPT共二十一頁，創(chuàng)作于2022年6月第十張，PPT共二十一頁，創(chuàng)作于2022年6月3.0結(jié)果與討論 3.1 洗脫劑 為獲得高的洗脫效率,本實驗選用0.02mol/L

4、Tris-2mol/LNacl(PH6.0)體系作為洗脫劑.（Tris-指三羥甲基氨基甲烷 ）第十一張，PPT共二十一頁，創(chuàng)作于2022年6月第十二張，PPT共二十一頁，創(chuàng)作于2022年6月第十三張，PPT共二十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 由圖2可知 ,在 2.0mol/L以下,隨鹽濃度的增加 ,洗脫能力增大,活性回收率提高。洗脫液中離子強度對洗脫效率的影 響可歸結(jié)為離子交換平衡的移動,這種色譜行為表明該固定相具有典型的陰離子交換特性 ,符合離子交換色譜的洗脫規(guī)律。但在2.0mol/L以上 ,隨鹽濃 度增 加洗脫 能力下降。這種反?，F(xiàn)象,可能是由于離子交換柱的多功能特性引起。第十四張，PPT共

5、二十一頁，創(chuàng)作于2022年6月實驗證明,離子交換柱不僅有離子交換的作用 ,而且還表現(xiàn)一定的疏水作用的。并且這種疏水作用 ,隨溶液離子強度發(fā)生變化 。當(dāng)洗脫劑 濃度大于 2.0mol/L時,由于溶液的表面張力過大 ,離子交換劑的疏水作用變得明顯,對蛋白質(zhì)疏水締合作用增強 ,故被吸附 的蛋白質(zhì)難以洗脫,因而 活性回收率下降。 所以選擇抓Nacl濃度為2.0mol/L. 第十五張，PPT共二十一頁，創(chuàng)作于2022年6月3.3 PH對活性回收率的影響第十六張，PPT共二十一頁，創(chuàng)作于2022年6月第十七張，PPT共二十一頁，創(chuàng)作于2022年6月第十八張，PPT共二十一頁，創(chuàng)作于2022年6月第十九張，PPT共二十一頁，創(chuàng)作于2022年6月總結(jié) 凡在溶液中能夠電離的物質(zhì)通常都可以用離子交換色譜法進(jìn)行分離。它不僅適用于無機離子混合物的分離，亦可用于有機物的分離，例如氨基酸、蛋白質(zhì)等生物大分子，因此應(yīng)用