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文檔簡介
1、當歸補血湯有用部位指紋圖譜歸屬闡發(fā)王慶敏李曉寧王兵梁逸曾黃曄【關鍵詞】當歸補血湯單味藥有用部位指紋圖譜高效液相色譜中藥有用部位可以在保存原方治療長處的底子上進步中藥的作用強度、臨床藥效以及質(zhì)量操縱程度,改變傳統(tǒng)中藥大、黑、粗外不雅形象,是中藥研究的又一新的生長點1,是研發(fā)中藥二類新藥根據(jù)2,3,也是從中藥開拓新藥的第3條途徑4。王明軍等5表達了中藥有用部位研究的近況、要領和本領,并闡發(fā)用中藥指紋圖譜對中藥提取物舉行質(zhì)量操縱。1儀器與試藥Agilent1100系列高效液相色譜儀美國Agilent公司;G1315A型二極管陣列檢測器。當歸購自甘肅岷縣,黃芪購自長沙九之堂藥店,經(jīng)湖南省中醫(yī)藥研究院中
2、藥研究所斷定。阿魏酸與芒柄花素比較品中國藥品生物成品檢定所提供,甲醇為色譜純,水為二次去離子水,別的試劑為闡發(fā)純。2要領與效果2.2供試品溶液的制備復方有用部位的提?。簞e離稱取黃芪和當歸粉末過40目篩各20,4g,加8倍量和6倍量70%的乙醇,別離回流提取2h和1h,將所得醇提物蒸干,殘渣勻稱疏散于48l水中,使其含量為0.5g藥材/l,水溶液依次用同體積石油醚、氯仿、醋酸乙酯,正丁醇各萃取3次,各部位提取液蒸干,殘渣加甲醇溶解定容到10l,即為復方的石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇部位。單味藥的有用部位的提取:別離稱取黃芪、當歸粉末過40目篩各20,4g,同法操縱,制備單味藥黃芪,當歸的相應部
3、位。2.5不變性實行取同一復方供試液20l別離在0,6,12,24,48h進樣5次的,用“中藥指紋圖譜相似度盤算軟件盤算,所得相似度為0.9820,0.9929,0.9838,0.9967,0.9942,相似度極高,說明48h內(nèi)供試品溶液不變性較好。效果表白樣品指紋圖譜各色譜峰相對遷徙時間和峰面積根本同等,相似度較高,切合指紋圖譜研究的技能要求。2.6供試品溶液的檢測取上述樣品各20l,別離進樣,阿魏酸、芒柄花素、復方全方及復方單味藥各部位的HPL指紋圖譜見圖16。重要特性峰峰面積百分含量見表1。表1樣品重要特性峰峰面積相對百分含量3討論從圖2可以看出復方身分龐大,對相應值較大的21個峰編號闡
4、發(fā),經(jīng)阿魏酸與芒柄花素尺度品濃度均為500g/l比較,確認峰7為當歸中阿魏酸,峰18為黃芪中芒柄花素。別的,通過剖析得到的光譜與文獻13,14比較王平?黃芪當歸復方的指紋圖譜及對兔肝纖維化的藥理藥效研究?中南大學中藥當代化研究中央,對別的5個峰開端定性為:峰9:毛蕊異黃酮苷;峰14:毛蕊異黃酮;峰16:3R)-7,2-Dihydrxy-3,4-diethxyisflavan;峰19:Z-藁苯內(nèi)酯;峰20:E-藁苯內(nèi)酯。3.1對復方及單味藥的石油醚部位的譜圖闡發(fā)從圖3中可以看出復方的石油醚部位的9個特性峰,4個來自黃芪,5個來自當歸,即峰14,15,16,18來自黃芪,峰22,17,19,20,
5、21來自當歸,以20號峰當歸中E-藁苯內(nèi)酯峰值最大為重要特性,從表1看出其峰面積百分含量為54.61%,表白該部位提取出的是極性很小的脂溶性物質(zhì)。該部位中峰22在復方全方中沒尋到,大概是由于濃度緣故原由:提取復方全方時,取9.6g藥材提取液蒸干后,為包管殘渣的完全溶解,用甲醇溶解定容到25l;而在提取有用部位時,取24克藥材提取蒸干,石油醚萃取殘渣水溶液后,石油醚液蒸干,殘渣用甲醇溶解定容到10l,依此盤算石油醚部位濃度是全方的6.25倍,濃度的增大使復方全方中沒檢測到的峰22在石油醚部位中出現(xiàn)。3.2對復方及單味藥的氯仿部位的譜圖闡發(fā)從圖4可以看出,復方氯仿部位的9個特性峰,6個來自黃芪,3
6、個來自當歸,即峰3,9,14,15,16,18來自黃芪,峰7,11,12來自當歸。從表1中看出該部位是14號峰黃芪中毛蕊異黃酮和18號峰黃芪中芒柄花素峰值最大的部位,峰面積百分含量別離為41.19%和14.58%,表白該部位提取出的重要是黃芪中的黃酮類,異黃酮類物質(zhì),以黃芪中毛蕊異黃酮和芒柄花素峰值較高為重要特性。3.3復方及單味藥中醋酸乙酯部位的譜圖闡發(fā)從圖5可以看出,復方該部位的11個峰,7個同時來自當歸和黃芪,1個來自當歸,3個來自黃芪,即峰2,3,5,11,12,13,21同時來自當歸和黃芪,峰7來自當歸,峰9,14,18來自黃芪,以7號峰當歸中阿魏酸峰值最大為重要特性,其峰面積百分含
7、量為30.3%。復方醋酸乙酯部位中峰18芒柄花素在黃芪中的該部位中沒有尋到,大概是黃芪中的身分比復方少許多,單味藥黃芪中芒柄花素在用氯仿提取時已完全提取出,而復方中身分較多,大概復方中其他組分的影響倒霉于芒柄花素的提取,用氯仿沒有完全提取出,因此在復方醋酸乙酯部位中另有少量。同時當歸中峰20即E-藁苯內(nèi)酯在復方醋酸乙酯部位中沒有,卻有少量在當歸此部位,大概是黃芪中的某組分能促進E-藁苯內(nèi)酯的提取,使其在復方的氯仿部位中已完全提取出,因此在復方醋酸乙酯部位中沒有出現(xiàn)。3.4復方及單味藥中正丁醇部位的譜圖闡發(fā)為了明晰地表現(xiàn)該部位的峰,取色譜峰流出的時間段,如圖5所示,該部位提取的物質(zhì)除峰9,14外
8、,別的物質(zhì)會合在保存時間段015in流出,表白該部位提取的重要是極性較強的物質(zhì),以2號峰峰值最大為重要特性,其峰面積百分含量為31.38%。該部位重要有7個峰,6個同時來自當歸和黃芪,1個峰來自黃芪,即峰1,2,3,4,5,6同時來自于當歸和黃芪,峰9來自黃芪,在黃芪的正丁醇部位峰14即毛蕊異黃酮,在復方中該部位中沒有,緣故原由大概雷同于“3.3中E-藁苯內(nèi)酯的溶出環(huán)境。從表1可以看出,當歸中阿魏酸在復方全方,復方氯仿,復方醋酸乙酯部位中均存在,其含量別離為7.76%,16.96%,30.3%,石油醚及正丁醇部位中卻沒有,斷定阿魏酸必定不溶于石油醚,用氯仿萃取時,大概由于阿魏酸在氯仿中的溶解度
9、較小,大概復方其他物質(zhì)的影響,倒霉于阿魏酸的完全溶出,縱然用同體積的氯仿萃取了3次照舊沒能把它完全提取出,醋酸乙酯萃取時,該物質(zhì)完全萃取出了。表白阿魏酸重要會合在醋酸乙酯部位,該部位那么是與阿魏酸藥效最相干的部位。除了阿魏酸另有其他物質(zhì)出如今差異的有用部位,其含量卻有較大差異,這種征象大概是由于用有機試劑萃取全方時難以完全把該物質(zhì)萃取出,大概有機試劑之間有影響,同一物質(zhì)能溶于所選的差異試劑,但溶解環(huán)境有較大差異,差異部位提取出的重要物質(zhì)差異,將有差異的臨床療效。【參考文獻】1吳文博,魏晨玲,齊俊英.對中藥復方差異提取部位的相干研究之思索J.醫(yī)學與哲學(人文社會醫(yī)學版),2022,28(3):7
10、6.2劉璐.中藥二類新藥有用部位及有用部位群開拓明狀及思索J.中藥新藥與臨床藥理,2000,11(6):323.3呂圭源,陳素紅.關于中藥有用部位新藥研究的幾點思索J.天下科學技能-中醫(yī)藥當代化,2022,65:17.4吳文博,董占軍,齊俊英.論從中藥中開拓新藥的第三條途徑J.醫(yī)學與哲學,2022,26(11):66.5王明軍,高莉莉.中藥及其方劑有用部位研究之新思索J.中國中醫(yī)藥信息雜志,2022,13(12):5.6LingYi,Lian-enQi,PingLi,etal.SiultaneusdeterinatinfbiativenstituentsinDangguiBuxueTangfr
11、qualityntrlbyHPLupledithadidearraydetetr,anevaprativelightsatteringdetetrandassspetretryJ.AnalBianalhe2022,389:571.7黃月純,黃水清,劉東輝,等.當歸補血湯湯劑中揮發(fā)油身分的G-S闡發(fā)J.中成藥,2022,278:892.8危建安,黃兆勝,吳利.當歸補血湯補血成果及其物質(zhì)底子研究一J.中藥藥理與臨床,2022,192:8.9黃兆勝,危建安,吳利.當歸補血湯補血成果及其物質(zhì)底子研究二J.中藥藥理與臨床,2022,19(5:10.10黃月純,黃水清,劉東輝,等.當歸補血湯煎劑中醋酸乙酯
12、部位的重要化學身分闡發(fā)J.中國藥房,2022,16(26):1275.11黃月純,魏剛,黃水清,等.當歸補血湯湯劑正丁醇部位中黃芪的HPL指紋開端闡發(fā)J.中成藥,2022,28(2):165.12劉東輝,黃水清,黃月純,等.當歸補血湯皂苷類身分HPL指紋圖譜研究J.中藥材,2022,29(8):844.13YA-LIANG.YIZENGLIANGandBEN-EiHEN.High-perfraneLiquidhratgraphyithAtspheriPressureheialInizatinandEletrsprayInizatinassSpetretryfrAnalysisfAngeliasinensisJ.PhytheialAnalys
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