定量光導熒光技術(shù)評價含氟牙膏抑制早期齲損的效果

1、定量光導熒光技能評價含氟牙膏按捺早期齲損的結(jié)果【摘要】目的通過在體形狀成牙釉質(zhì)平滑面早期齲損的恒化器齲病模子,評價定量光導熒光技能反響平滑面早期齲損礦物質(zhì)含量變革的結(jié)果。要領(lǐng)將30個牙釉質(zhì)塊開窗后分為3組,別離利用氟含量1450g/L的氟化鈉牙膏、單氟磷酸鈉牙膏和無氟牙膏的處置懲罰液處置懲罰,并在體外恒化器齲病模子中舉行脫礦循環(huán),定量光導熒光技能(QLF)闡發(fā)病損脫礦后的面積、熒光喪失和總熒光喪失量,激光掃描共聚焦顯微鏡(LS)闡發(fā)脫礦后礦物質(zhì)含量變革。結(jié)果在體外恒化器齲病模子中,無氟組形成的病損面積較大,熒光喪失量較高,總熒光喪失量以10為底的對數(shù)值較大(P0.05),氟化鈉組和單氟磷酸鈉組

2、的差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);激光共聚焦顯微鏡不雅察表現(xiàn),脫礦循環(huán)中無氟組形成的病損在熒光面積、均勻熒光量和總熒光量3個參數(shù)上都顯著高于其他兩組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。QLF闡發(fā)與LS結(jié)果具有較好的相干性(r0.70)。結(jié)論2種氟濃度1450g/L的牙膏與無氟牙膏比力,具有顯著的按捺牙釉質(zhì)平滑面早期齲損脫礦的作用。QLF闡發(fā)結(jié)果可以或許客不雅的反響脫礦病損區(qū)礦物質(zhì)含量的變革?！娟P(guān)鍵詞】氟;牙膏;齲齒;牙釉質(zhì);熒光;顯微鏡查抄,共焦KEYRDS:fluride;tthpaste;dentalaries;dentalenael;fluresene;irpy,nfal含氟牙膏是如今天下

3、上利用最普及也是最重要的局部用氟防齲的要領(lǐng)。如今我國市售的含氟牙膏中利用的氟化物一樣平常為氟化鈉(NaF)和單氟磷酸鈉(FP)。筆者通過在恒化器齲病模子中形成平滑面早期齲損,利用2種含差異氟化物的牙膏對其脫礦歷程舉行干預,并接納定量光導熒光技能(QLF)和激光掃描共聚焦顯微鏡(LS)不雅察,評價QLF技能用于闡發(fā)早期齲損礦物質(zhì)含量變革的本領(lǐng)。1質(zhì)料與要領(lǐng)1.1質(zhì)料變形鏈球菌(Streptusutans)AT25175,由華西口腔醫(yī)學院口腔生物醫(yī)學工程重點實行室提供。八通道蠕動泵及分派器(BT00-600型,保定蘭格恒流泵);循環(huán)水浴箱(HX-1050型,北京博醫(yī)康技能公司);磁力加熱攪拌器(J

4、J-781型,江蘇金壇振興儀器廠);硬構(gòu)造切片機(丹麥Struers公司);LS(TS-SP2型,德國LEia公司);QLF體系(荷蘭Inspektr公司)。人工唾液:接納人工唾液配方為生物膜改進造就基B-51:2.50g/L型豬胃黏卵白(Type,美國Siga公司);2.00g/L肽胨、1.00g/L胰酶剖析的酪卵白胨(美國Fluka公司);1.00g/L酵母提取物(英國xid公司);0.10g/L半胱氨酸鹽酸鹽(美國Siga公司);2.50g/L氯化鉀;0.50g/L葡萄糖;0.114g/L磷酸氫二鉀;0.20g/L磷酸二氫鉀;8.5g/L蔗糖。以1l/LNaH溶液調(diào)解pH值至7.5,12

5、1,15Pa壓力下滅菌15in。含氟牙膏處置懲罰液:無氟、含NaF、含F(xiàn)P的牙膏(氟含量均為1450g/L)別離與去離子水按14混淆勻稱。1.2要領(lǐng)網(wǎng)絡奇怪拔除的人類無齲雙尖牙15顆,在體視顯微鏡下不雅察無齲損、裂紋、缺損和釉質(zhì)白斑。分散冠根,去除牙冠外貌約莫100的表層釉質(zhì),并使之成為平滑的平面。用硬構(gòu)造切片機將準備好的牙冠分為頰、舌兩部門。在每個牙體構(gòu)造塊的釉質(zhì)外貌用指甲油開窗,面積33。將上述構(gòu)造塊隨機分為3組,每組10個樣本,在齲病恒化器模子中別離接納無氟、含NaF和含F(xiàn)P的處置懲罰液舉行干預。將構(gòu)造塊置于含定量實行菌株的一連造就體系中,維持造就室內(nèi)必然的循環(huán)流速模擬口內(nèi)唾液的沖刷作用

6、,在體外環(huán)境下模擬平滑面早期齲損的形成2。變形鏈球菌經(jīng)清醒、傳代、生化斷定后接種到恒化器模子,由蠕動泵分派進入一連造就室中,同時按菌液與奇怪造就基19(v/v)比例賜與奇怪的人工唾液。24h后制止接種細菌,繼承賜與奇怪人工唾液。細菌生長到達不變后,將含NaF、FP和無氟的處置懲罰液別離中斷參加一連造就室中,天天3次,每次1h,由蠕動泵操縱,一連5d至實行停頓。體外恒化器模子見圖1。樣本經(jīng)丙酮洗濯,丙烯酸樹脂包埋,暴露開窗區(qū)。0.55Pa壓縮氣氛吹干標本30s,拍攝標本的熒光圖像,儲存于電腦,QLF200g軟件闡發(fā)圖像,闡發(fā)歷程接納盲法,設置Q(熒光喪失量)值變革5%為病損閾值。硬構(gòu)造切片機將牙

7、齒標本切成約300厚的牙片,37、奇怪配制的羅丹明B(0.1l/L)染色1h,吹干,中性甘油封固,LS不雅察牙體構(gòu)造的熒光引發(fā)環(huán)境。1.3統(tǒng)計學處置懲罰闡發(fā)QLF200g軟件和Laserpix軟件得出3組病損的熒光面積、熒光喪失和總熒光喪失量的差異,盤算QLF闡發(fā)結(jié)果與LS參數(shù)的相干性,評價QLF的診斷效能。設查驗水準0.05。由于Q的漫衍呈顯著的偏態(tài)漫衍,統(tǒng)計時將其舉行以10為底的對數(shù)轉(zhuǎn)換。2結(jié)果2.1肉眼不雅察無氟組釉質(zhì)外貌的開窗區(qū)失去光芒,出現(xiàn)白堊色病變,涂布指甲油地區(qū)釉質(zhì)外貌有光芒,未見顏色或形態(tài)的改變;別的兩組樣本釉質(zhì)外貌開窗區(qū)和涂布指甲油的地區(qū)釉質(zhì)未見顯著的顏色或形態(tài)改變。2.2Q

8、LF熒光照片及結(jié)果闡發(fā)一連造就5d后,3組牙釉質(zhì)塊外貌在體外恒化器齲病模子中均形成差異程度的脫礦病損,在QLF熒光照片中表示為病損區(qū)熒光強度的喪失(圖2)。無氟組牙釉質(zhì)外貌形成的病損面積較大,熒光喪失較嚴峻。在體外恒化器齲病模子中,3組標本外貌均形成了差異程度的早期齲病損。此中無氟組病損與其他兩組比力,病損面積較大,熒光喪失值較高,總熒光喪失量的對數(shù)值較大。3組差異有統(tǒng)計學意義,但NaF和FP組差異無統(tǒng)計學意義(P0.05,表1)。表13組病損面積、均勻熒光喪失和LgQ值略2.3LS不雅察及軟件闡發(fā)NaF組和FP組在體外模子中形成的病損經(jīng)羅丹明B染色后引發(fā)的熒光強度較無氟組顯著較弱,熒光范疇也

9、顯著較無氟組小(圖3)。無氟組形成病損在熒光面積、均勻熒光量和總熒光量3個參數(shù)上都顯著高于其他2組,差異有統(tǒng)計學意義,而NaF組和FP組在熒光面積、均勻熒光量和總熒光量3個方面的差異無統(tǒng)計學意義(P0.05,表2)。表23組在模子中形成的脫礦病損的LS丈量參數(shù)略2.4QLF與LS結(jié)果的相干性闡發(fā)3討論3.1恒化器齲病模子的長處恒化器模子能在體形狀成一種與體內(nèi)近似的口腔生態(tài)環(huán)境,調(diào)控細菌的生長代謝條件,使之既具有與天然環(huán)境的同等性,又具有尺度化和可調(diào)控性的明顯長處3，不但可用于研究種種致齲因素的作用和齲病病變的特性,還可用于斷定防齲藥物的效能。黃正蔚等利用與本實行雷同的恒化器模子在體外環(huán)境中形成

10、了相似于天然釉質(zhì)齲損的病變,并充實證實白該模子的不變性和重復性4。3.2QLF及其上風QLF是比年來國際上研究開拓的一種診斷早期齲損的便攜式技能裝備,其技能底子源于熒光技能。牙體構(gòu)造在單色光的照耀下可以或許被引發(fā)出差異光譜的熒光,而正常牙體構(gòu)造和早期脫礦牙體構(gòu)造在誘導熒光強度方面存在著較大的差異5。在QLF熒光照片中,正常的釉質(zhì)表示為高亮度的黃綠色熒光,而包羅齲損區(qū)在內(nèi)的脫礦地區(qū)那么表示為顯著的暗區(qū)。牙體脫礦越顯著,那么該區(qū)發(fā)出的熒光強度越弱,其相干系數(shù)r=0.730.866。如今可以或許對平滑面早期齲損礦物質(zhì)含量舉行定量或半定量的要擁有偏光顯微鏡法、顯微硬度法、激光掃描共聚焦顯微鏡法和橫斷顯

11、微放射照相技能等7-8。固然這些要領(lǐng)都可以較為正確的對礦物質(zhì)的喪失量舉行定量,但是都要求制備標本,然后用特別的儀器舉行不雅察,因此只能在體外試驗大概原位實行中才氣實現(xiàn)。對付口腔內(nèi)的天然病損來說,那么必要象QLF這種無創(chuàng)并可以或許對病損區(qū)礦物質(zhì)含量舉行縱向監(jiān)測的技能。3.3QLF用于評價含氟牙膏按捺早期齲的結(jié)果在本研究中,3組牙釉質(zhì)塊開窗區(qū)在體外恒化器模子中均形成必然程度的平滑面早期齲損,但3個處置懲罰組形成病損的嚴峻程度不一。在QLF,LS的熒光圖像中均表示為無氟牙膏組形成的病損顯著較含氟牙膏組形成的病損嚴峻,說明氟含量為1450g/L的含氟牙膏的干預有較為顯著的按捺模子中平滑面早期齲損形成的作用。而含差異氟化物