新教材高中生物第1章發(fā)酵工程第2節(jié)發(fā)酵工程的無菌技術第2課時微生物的接種分離純化與計數課后素養(yǎng)落實蘇教版選擇性必修

1、 微生物的接種、分離、純化與計數(建議用時：40分鐘)題組一微生物接種和傳代的無菌技術1下列關于菌種的接種和傳代的說法錯誤的是()A低溫、干燥、真空是菌種保存的重要條件B好氧微生物常用穿刺接種的方法C斜面接種是常用的菌種傳代和低溫下保存的方法D菌種的保存中要讓微生物生長繁殖受抑制而不死亡B穿刺接種可將厭氧菌保護在培養(yǎng)基中，使其在培養(yǎng)基深處的厭氧環(huán)境下生長。2將接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基都放入37 恒溫箱的目的是()A對比觀察培養(yǎng)基有沒有被微生物利用B對比分析培養(yǎng)基是否被雜菌污染C沒必要放入未接種的培養(yǎng)基D為了下次接種時再使用B對未接種的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，起到對照作用，可用來確定培養(yǎng)基是否

2、被雜菌污染。題組二微生物分離、純化和培養(yǎng)的無菌技術3下列關于平板劃線操作的敘述，錯誤的是()A每次劃線前都要灼燒接種環(huán)B灼燒接種環(huán)后，要立即用接種環(huán)接種，防止雜菌污染接種環(huán)C要在酒精燈火焰旁進行D接種前，要將菌種試管口通過火焰B灼燒接種環(huán)后，將接種環(huán)伸入管內，讓環(huán)端先接觸培養(yǎng)基上未長菌的部位，使其冷卻，然后輕輕挑取少量菌體，再進行接種。灼燒接種環(huán)后，不可立即用接種環(huán)接種，以免接種環(huán)溫度過高，將菌種殺死。4在培養(yǎng)基上將細菌稀釋或分散成單個細胞，使其長成單個的菌落，這個菌落就是一個純化的細菌菌落。實驗基本步驟如下：eq x(配制培養(yǎng)基)eq x(滅菌、倒平板)eq x(培養(yǎng))eq x(觀察)請回答

3、下列有關問題：(1)配制培養(yǎng)基時，各成分含量確定的原則是_。不論何種培養(yǎng)基，在各種成分都溶化后分裝前，要進行的是_。(2)倒平板的適宜溫度是50 左右，原因是_。待平板冷凝后，要將平板倒置，這樣既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可防止_。(3)純化菌株時，若使用稀釋涂布平板法進行接種，應選擇的涂布工具是圖中的_；若使用平板劃線法進行接種，應選擇的接種工具是圖中的_。ABCD(4)劃線的某個平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有_。(5)若用大腸桿菌進行實驗，使用過的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經過_處理

4、后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散。解析(1)培養(yǎng)基中各成分含量要根據微生物的生長需要來確定。微生物生長需要一定的pH，所以培養(yǎng)基裝瓶前需要調節(jié)pH。(3)由圖可知，A為接種環(huán)，B為涂布器，C為膠頭滴管，D為接種針，故稀釋平板法應選擇的涂布工具是B，平板劃線法應選擇的接種工具是A。(4)由題意分析可知，造成此現(xiàn)象的原因可能有兩個：一是接種環(huán)灼燒后未冷卻，菌種接觸到高溫的接種環(huán)而死亡；二是劃第二劃線區(qū)域第一條線時未從第一區(qū)域末端開始。(5)有的大腸桿菌會釋放一種強烈的毒素，因此，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經過滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散。答案(1)所培養(yǎng)微生物對各營養(yǎng)成分的需要量調節(jié)pH

5、(2)溫度過高會燙手，過低培養(yǎng)基又會凝固皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染(3)BA(4)接種環(huán)灼燒后未冷卻；劃線未從第一區(qū)域末端開始(5)滅菌題組三土壤中分解尿素的細菌的分離與計數5分離土壤中分解尿素的細菌，對培養(yǎng)基的要求是()加尿素不加尿素加瓊脂不加瓊脂加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸鹽不加硝酸鹽ABCDC尿素和硝酸鹽都能作為氮源，而培養(yǎng)尿素分解菌的培養(yǎng)基應是以尿素為唯一氮源的固體培養(yǎng)基，因此培養(yǎng)基中應不加硝酸鹽，加入尿素和瓊脂。葡萄糖作為碳源，也需要加入。6分離土壤中分解尿素菌的實驗操作中，對于獲得純化的尿素分解菌的單菌落影響最大的是()A制備浸出液的土壤取自土壤的表層B涂布前涂布器未在酒精燈外焰

6、上灼燒滅菌C牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中添加尿素作為氮源D接種操作者的雙手未用酒精棉進行消毒C制備浸出液的土壤取自土壤的表層對純化的尿素分解菌的單菌落影響不大，A不符合題意；涂布器未在酒精燈外焰上灼燒滅菌可能會造成污染，但對純化的尿素分解菌的單菌落影響不大，B不符合題意；該培養(yǎng)基必須以尿素為唯一的氮源，不能使用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基或在其中添加尿素作為氮源，該操作對實驗影響最大，C符合題意；接種操作者的雙手未用酒精棉進行消毒，可能會造成污染，但對純化的尿素分解菌的單菌落影響不大，D不符合題意。7土壤有“微生物的天然培養(yǎng)基”之稱。下圖是某同學分離和培養(yǎng)土壤中微生物的部分操作步驟和實驗結果示意圖?；卮鹣铝袉栴}

7、：(1)利用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)土壤中的微生物時，除考慮各種營養(yǎng)條件外，還需要控制的培養(yǎng)條件有_(至少寫兩點)等。接種前應該先檢測固體培養(yǎng)基是否被污染，檢測的具體方法是_。(2)圖示中用平板劃線法接種的操作順序是AB_；以上操作步驟中存在明顯錯誤的是_(用字母表示)，該操作的正確方法是_。解析(1)若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)土壤中的微生物，除考慮各種營養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、pH、氧氣、無菌和滲透壓等條件。檢測固體培養(yǎng)基是否被污染的方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的環(huán)境中放置一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產生。(2)圖示是平板劃線法接種操作示意圖，其操作順序是ABEDCF；為了防止雜菌污染，接種應該在酒精燈的火

8、焰旁進行，因此以上操作中存在錯誤的步驟是C。答案(1)溫度、pH、氧氣、無菌將未接種的培養(yǎng)基在適宜的環(huán)境中放置一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產生(2)EDCFC在酒精燈的火焰旁劃線8(2021山東煙臺一模)分解尿素的細菌廣泛存在于農田等土壤中，某生物實驗小組嘗試對分解尿素的細菌進行分離與計數，請回答下列問題：(1)分解尿素的細菌含有的酶是_，為篩選出能分解尿素的細菌，配制培養(yǎng)基時應以_作為唯一氮源，因此該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)常用來統(tǒng)計樣品中活菌數目的方法是_。(3)該小組對分解尿素的細菌進行計數時，在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先培養(yǎng)一段時間，這樣做的目的是_。將1 mL樣液稀釋

9、104倍，在3個平板上分別涂布0.1 mL稀釋液；經適當培養(yǎng)后，統(tǒng)計活菌數目，每隔一個“時間間隔”統(tǒng)計一次菌落數目，最后選取_作為結果。如果3個平板的菌落數分別為39、42和45，據此可得出每毫升樣液中活菌數為_。解析(1)分解尿素的細菌含有脲酶，要篩選出能分解尿素的細菌，應該用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基。(2)接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布平板法可用于微生物計數。(3)該小組在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先培養(yǎng)一段時間，用于檢測平板滅菌是否徹底。經適當培養(yǎng)后，統(tǒng)計活菌數目，每隔一個“時間間隔”統(tǒng)計一次菌落數目，最后選取菌落數目穩(wěn)定時的記錄作為結果。3個平板的菌落分別為39、42和45，據此可得出每毫升樣液中活菌數(394245)30.11044.2106。答案(1)脲酶尿素選擇(2)稀釋涂布平板法(3)檢驗平板滅菌是否徹底菌落數目穩(wěn)定時的記錄4.2106對微生物培養(yǎng)的接種步驟弄不清9下列有關平板劃線操作的敘述，不正確的是()A第一次操作前灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物B每次劃線前，灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結束后接種環(huán)上殘留的菌種C在第二區(qū)域內劃線時