干熱處理對(duì)西瓜種子活力及細(xì)菌性果斑病滅菌效果影響的研究

1、 干熱處理對(duì)西瓜種子活力及細(xì)菌性果斑病滅菌效果影響的研究摘要隨著農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化的加深，生產(chǎn)者對(duì)種子的質(zhì)量要求越來(lái)越高，維權(quán)意識(shí)也不斷增強(qiáng)。因此加強(qiáng)種子的安全生產(chǎn)對(duì)穩(wěn)定社會(huì)經(jīng)濟(jì)秩序、保障國(guó)民生產(chǎn)尤為重要。廣義的種子處理是指人們?cè)谵r(nóng)業(yè)生產(chǎn)過程中使用藥劑浸種、攔種或是曬種等方法來(lái)提高種子的播種品質(zhì)，保證種子發(fā)芽迅速整齊、幼苗生長(zhǎng)健壯，防治病蟲害，以此提高農(nóng)作物的產(chǎn)量及增強(qiáng)其品質(zhì)。狹義的種子處理就是在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過程中采用物理、化學(xué)、生物等方法保護(hù)種子，防治病蟲害，確保作物生長(zhǎng)健壯，從而達(dá)到高產(chǎn)、高質(zhì)。本文以含水量為7%左右的西瓜種子為研究材料，研究不同溫度預(yù)緩沖處理對(duì)干熱處理過程中種子活力的影響，以及干熱處

2、理對(duì)西瓜種子活力和細(xì)菌性果斑病滅菌效果的影響。以探索西瓜種子高溫干熱處理前最佳的溫度緩沖組合，及最佳的干熱處理組合。關(guān)鍵詞：干熱處理；西瓜；種子活力；細(xì)菌性果斑病目錄 TOC o 1-3 h z u HYPERLINK l _Toc482762251 摘要 PAGEREF _Toc482762251 h 1 HYPERLINK l _Toc482762252 一、引言 PAGEREF _Toc482762252 h 3 HYPERLINK l _Toc482762253 二、干熱處理對(duì)西瓜細(xì)菌性果斑病滅菌效果的影響 PAGEREF _Toc482762253 h 3 HYPERLINK l _

3、Toc482762254 （一）材料與方法 PAGEREF _Toc482762254 h 4 HYPERLINK l _Toc482762255 （二）結(jié)果與分析 PAGEREF _Toc482762255 h 6 HYPERLINK l _Toc482762256 （三）討論 PAGEREF _Toc482762256 h 10 HYPERLINK l _Toc482762257 三、不同緩沖處理對(duì)種子活力的影響 PAGEREF _Toc482762257 h 11 HYPERLINK l _Toc482762258 （一）試驗(yàn)材料 PAGEREF _Toc482762258 h 11 H

4、YPERLINK l _Toc482762259 （二）試驗(yàn)方法 PAGEREF _Toc482762259 h 11 HYPERLINK l _Toc482762260 （三）結(jié)果與分析 PAGEREF _Toc482762260 h 13 HYPERLINK l _Toc482762261 （四）討論 PAGEREF _Toc482762261 h 16 HYPERLINK l _Toc482762262 四、干熱處理對(duì)種子活力的影響 PAGEREF _Toc482762262 h 17 HYPERLINK l _Toc482762263 （一）試驗(yàn)材料 PAGEREF _Toc48276

5、2263 h 17 HYPERLINK l _Toc482762264 （二）試驗(yàn)方法 PAGEREF _Toc482762264 h 17 HYPERLINK l _Toc482762265 （三）結(jié)果與分析 PAGEREF _Toc482762265 h 20 HYPERLINK l _Toc482762266 （四）小結(jié) PAGEREF _Toc482762266 h 25 HYPERLINK l _Toc482762267 五、結(jié)論 PAGEREF _Toc482762267 h 25 HYPERLINK l _Toc482762268 參考文獻(xiàn) PAGEREF _Toc4827622

6、68 h 27 HYPERLINK l _Toc482762269 致謝 PAGEREF _Toc482762269 h 29一、引言全世界西瓜的種植面積很大，西瓜病害一直是嚴(yán)重影響西瓜生產(chǎn)的重要因素之一，細(xì)菌性果斑病作為典型的種傳性病害，從種子這個(gè)源頭上去防治病害的發(fā)生、傳播對(duì)西瓜安全生產(chǎn)尤其關(guān)鍵。干熱滅菌是目前農(nóng)業(yè)上應(yīng)用于種子生產(chǎn)加工的一種經(jīng)濟(jì)有效的方法，對(duì)殺死各種病原菌都有效。并且它不需經(jīng)液體浸泡種子或藥劑拌種，避免了藥劑殘留及毒性的問題，而且對(duì)種子生產(chǎn)加工來(lái)說節(jié)省了工序、成本。干熱處理研究主要分干熱處理對(duì)病原菌的滅菌效果和干熱處理對(duì)種子活力的影響兩部分，現(xiàn)有文獻(xiàn)針對(duì)西瓜細(xì)菌性果斑病的有

7、效干熱處理的溫度、時(shí)間組合研究較少，干熱處理過程中種子活力變化的研究大多局限在簡(jiǎn)單的發(fā)芽趨勢(shì)，而種子在不同溫度、時(shí)間干熱處理過程中，種子內(nèi)部生理活性及耐貯藏性的變化研究鮮有報(bào)道。并且在對(duì)種子抗逆性的研究中發(fā)現(xiàn)，在對(duì)種子進(jìn)行高溫處理前，對(duì)種子進(jìn)行一定溫度的緩沖能讓種子較好地適應(yīng)高溫，而緩沖方式也有待進(jìn)一步探索。因此本文旨在對(duì)以下三種進(jìn)行研究和完善:（1）干熱處理對(duì)種子內(nèi)在生理及耐貯藏性的影響。（2）干熱處理前不同緩沖預(yù)處理對(duì)種子活力的影響。（3）不同干熱處理對(duì)細(xì)菌性果斑病的滅菌效果。由此探索干熱處理與種子活力及滅菌效果的關(guān)系，從而對(duì)實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用提供理論依據(jù)。二、干熱處理對(duì)西瓜細(xì)菌性果斑病滅菌效果

8、的影響西瓜細(xì)菌性果斑病(Bacterial Fruit Blotch of watermelon，簡(jiǎn)稱BFB)，它的病原菌屬燕麥?zhǔn)伤峋鞴蟻喎N(Acidovorax avenge subsp .citrulli，Aac)，是葫蘆科植物上的一種嚴(yán)重的種傳性檢疫性病害，該病潛伏期長(zhǎng)，傳染力大，給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)帶來(lái)嚴(yán)重?fù)p失，在生產(chǎn)中該病一旦爆發(fā)后藥劑防治效果較差，目前還沒有能徹底殺滅該細(xì)菌且不影響種子或植株生長(zhǎng)的特效藥劑。因此，從種子這個(gè)源頭上去控制瓜類細(xì)菌性果斑的傳播與發(fā)生顯得尤其重要，干熱滅菌是目前農(nóng)業(yè)上應(yīng)用于種子生產(chǎn)加工的一種經(jīng)濟(jì)有效的方法，對(duì)殺死各種病原菌都有效，它不需經(jīng)液體浸泡種子或藥劑拌種，避

9、免了藥劑殘留及毒性的問題，并且對(duì)種子活力的影響也較小，是目前較為推崇的一種種子處理方法。本試驗(yàn)針對(duì)干熱處理對(duì)西瓜細(xì)菌性果斑病滅菌效果的影響進(jìn)行研究，探索出有效的干熱滅菌方法，從而對(duì)實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用提供理論依據(jù)。（一）材料與方法1、試驗(yàn)材料本文研究中的西瓜種子為黑媚娘、紅大(湖南省瓜類研究所提供)，供試菌株由湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)植保學(xué)院提供。2、試驗(yàn)試劑TaqDNA聚合酶、電泳緩沖液、dNTP, D2000 DNA Maker、DNA上下游引物，溟酚藍(lán)、buffeTris, EDTA, NaCI, NH4P04, KCI, MgS047H20,酵母提取物、硼酸、瓊脂、溴甲酚(bromcresol、亮藍(lán)R(

10、brilliant R)、乙醇、放線菌酮(Cycloheximide) ,硫代巴比妥酸(TBA、三氯乙酸、氫氧化鈉。西瓜細(xì)菌性果斑病試劑盒。3、試驗(yàn)儀器電子天平(島津ALTY220)凝膠成像分析系統(tǒng)(Gel Logic 212 PRO)PCR擴(kuò)增儀(BIO-RAD C1000TM Thermal Cycler )紫外分光光度計(jì)(YK75290176)光照培養(yǎng)箱(寧波海曙賽福PRX-450L)冰箱(ZANUSSI)超凈工作臺(tái)(SW-CJ-2D)干燥箱(上海培因DHG-9070A)高壓滅菌鍋(上海申安LDZX-30FBS )SelectPette移液器電泳儀4、試驗(yàn)方法（1）制備帶菌種子將繼代活化

11、的細(xì)菌性果斑病菌在LB平板培養(yǎng)基上劃線培養(yǎng)，翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)基，在33恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3d-4d，將平板上的菌落用無(wú)菌水洗下，并稀釋成濃度約108CFU/ml的菌懸液，即波長(zhǎng)為600nm下吸光度為0.4左右的細(xì)菌個(gè)數(shù)。將西瓜種子按1克種子:4m1菌懸液的比例浸泡，振蕩2h (28, 180rmp)，再35烘干備用。（2）干熱處理先將己接細(xì)菌性果斑病菌的種子烘干至7%左右的含水量，由于前期預(yù)備試驗(yàn)得出T2: 5012h為最好的預(yù)溫緩沖處理，為保證干熱滅菌條件的一致性，本章的滅菌效果試驗(yàn)均沿用T2: 5012h溫度預(yù)緩沖。種子在儀器內(nèi)進(jìn)行預(yù)溫緩沖處理后直接調(diào)至各溫度、時(shí)間干熱處理，對(duì)照為不進(jìn)行干熱處理的帶

12、菌種子。各干熱處理如下:處理完后將種子置于干凈的自封袋內(nèi)密封，對(duì)其進(jìn)行各項(xiàng)檢測(cè)。5、干熱處理滅菌效果的測(cè)定（1）EBB培養(yǎng)基配制:準(zhǔn)確稱取硼酸0.25g、酵母提取物0.3g,瓊脂16g, NH4PO41g、MgSO47H2O0.2g, KCl0.2g、將PH值調(diào)至5.4左右，加入600L 15mg/ml澳甲酚、1 ml 10mg/ml亮藍(lán)R，滅菌后冷至55，加10ml乙醇、2ml 250mg/ml放線菌酮，再倒入滅菌的培養(yǎng)皿中。每處理隨機(jī)取100粒待測(cè)西瓜種子，放入100mI錐形瓶中，加入50mI無(wú)菌水充分浸泡，26, 160rmp振蕩2h后，吸取1 ml菌懸液依次稀釋102倍。再?gòu)?02倍的

13、稀釋液中取100L在直徑為9cm的EBB平板培養(yǎng)基上涂板，每處理5皿，以未進(jìn)行干熱處理的帶菌種子為對(duì)照。在33的恒溫箱內(nèi)黑暗培養(yǎng)4d，記錄菌落數(shù)。（2）育苗基質(zhì)用160滅菌4h后，裝后50孔的育苗盤中備用。將待檢測(cè)的西瓜種子播入育苗盤中，每孔1粒，每處理播100粒，設(shè)三次重復(fù)，未進(jìn)行干熱處理的帶菌種子作為對(duì)照，置于28保濕盒內(nèi)培養(yǎng)。等子葉展開后，觀察葉片上有無(wú)油浸狀或水浸狀病斑出現(xiàn)，統(tǒng)計(jì)發(fā)病株數(shù)。（3）PCR檢測(cè)此方法主要是在育苗檢測(cè)及選擇性培養(yǎng)基檢測(cè)的基礎(chǔ)之上，對(duì)疑似細(xì)菌性果病病斑癥狀的病葉及特征性菌落作進(jìn)一步鑒定。引物序列：上游引物WFB 1: 5-GACCAGCCACACTGGGAC-3

14、下游引物WFB2: (5-CTGCCGTACTCCAGCGAT-3 ),用本引物PCR擴(kuò)增產(chǎn)生360bp特異性條帶。西瓜病葉總DNA使用CTAB法提取。檢測(cè)菌落時(shí)，直接用移液槍沾取用少量無(wú)菌水稀釋，稀釋液即為模板。擴(kuò)增體系：10*PCR緩沖液5.0l2.5mM dNTP2l10mM上下游引物各1lTaqDNA聚合酶1.0lDNA模板4.0l無(wú)菌超純水11l總體積為25l擴(kuò)增條件為:95預(yù)變性5min;95變性40s，65退火lmin, 72延伸40s，循環(huán)35次;72延伸5min; 12保存。（4）雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)從待檢西瓜種子中取50粒用20m1磷酸緩沖26、160rmp振

15、蕩2h后，取浸泡液2000r/min離心l0min，取上清液作為待檢樣品稀釋液。其余操作步驟參照BFB檢測(cè)試劑盒說明書。6、試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析軟件數(shù)據(jù)分析與軟件使用SPSS分析軟件，Excel WPS軟件。（二）結(jié)果與分析1、種子浸提液選擇性培養(yǎng)基檢測(cè)表2-1干熱處理對(duì)細(xì)菌性果斑病的滅菌效果由表2-1顯示兩個(gè)供試品種黑媚娘與紅大種子浸泡液經(jīng)稀釋103倍后，經(jīng)EBB選擇培養(yǎng)培養(yǎng)后，各干熱處理對(duì)種帶果斑病的滅菌效果明顯。隨著干熱處理溫度的升高及處理時(shí)間的延長(zhǎng)，滅菌率增長(zhǎng)明顯。70干熱處理?xiàng)l件下，各處理時(shí)間的滅菌率之間均有顯著性差異，7024h干熱處理?xiàng)l件下，媚娘與紅大的滅菌率分別達(dá)為53.2%和31.4

16、%，而隨著處理時(shí)間延長(zhǎng)到72h干熱處理?xiàng)l件下，黑媚娘與紅大的滅菌率分別達(dá)到了90.6%和89.5%，說明此溫度條件下，延長(zhǎng)滅菌時(shí)間對(duì)提高滅菌率效果非常明顯。80干熱處理?xiàng)l件下，隨處理時(shí)間的延長(zhǎng)，滅菌率變化不明顯，8024h干熱處理?xiàng)l件下，黑媚娘和紅大的滅菌率分別為93.7%和93.1%，8072h干熱處理?xiàng)l件下，滅菌率分別為100.0%和99.9%，因此在使用80干熱處理時(shí)，延長(zhǎng)處理時(shí)間對(duì)提高滅菌率效果不明顯，反而會(huì)大大降低了種子的活力。綜合上表，7072h、7572h和80處理是適宜選擇的干熱滅菌處理組合，兩試驗(yàn)品種滅菌率均達(dá)到了89.5%以上。圖2-1細(xì)菌性果斑病在EBB培養(yǎng)基中的菌落形態(tài)

17、2、育苗檢測(cè)表2-2是將各類試驗(yàn)種子放入溫室中，統(tǒng)計(jì)發(fā)病率結(jié)果。未經(jīng)干熱處理的帶菌種子的發(fā)病率較高，兩品種分別為33.0%和33.3%，隨著處理溫度的升高及處理時(shí)間的延長(zhǎng)，種苗發(fā)病率呈下降趨勢(shì)，并且各干熱處理之間差異明顯。7572h, 8048h, 8072h處理發(fā)病率最低，黑媚娘分別為8.7%, 4.0%和1.0%，紅大分別為11.3% , 8.7%和5.7%，與對(duì)照均有極顯著性差異，說明干熱處理對(duì)細(xì)菌性果斑病防治效果較好。表2-2干熱處理對(duì)細(xì)菌性果斑病的滅菌效果圖2-2發(fā)病西瓜苗圖2-3發(fā)病組織中提取的疑似感病植株葉片PCR鑒定結(jié)果3、酶聯(lián)免疫試劑盒檢測(cè)表2-3酶聯(lián)免疫檢測(cè)結(jié)果顯示，隨著處

18、理溫度的升高及處理時(shí)間的延長(zhǎng)，酶聯(lián)免疫檢測(cè)結(jié)果呈現(xiàn)逐漸由陽(yáng)性轉(zhuǎn)陰性。其中7572h, 8072h處理的酶聯(lián)免疫結(jié)果均為陰性，其它處理結(jié)果三重復(fù)中有兩個(gè)陽(yáng)性以上，7024h處理全為陽(yáng)性。說明干熱處理對(duì)果斑病滅菌效果顯著。表2-3干熱處理對(duì)細(xì)菌性果斑病的滅菌效果（三）討論帶菌種子浸提液半選擇性培養(yǎng)基檢測(cè)結(jié)果表明，不同組合干熱處理對(duì)種子表面帶菌的滅菌效果非常明顯。7024h對(duì)黑媚娘、紅大的滅菌率分別為53.2%, 31.4%，而8072h處理對(duì)種子的滅菌率分別高達(dá)100%, 99.9%。說明，干熱處理的滅菌效果明顯隨著處理溫度的升高及處理時(shí)間的延長(zhǎng)而增加。育苗檢測(cè)結(jié)果顯示，西瓜種子經(jīng)各干熱處理后，發(fā)

19、病率與對(duì)照相比基本都有極顯著性差異。并且各干熱處理組合之間發(fā)病率差異也顯著。因此各干熱處理對(duì)抵制果斑病的發(fā)病情況有較顯著的效果。酶聯(lián)免疫試劑盒檢測(cè)效果與半選擇性培養(yǎng)基的檢測(cè)結(jié)果具有較好的驗(yàn)證效果。在7572h, 8072h處理時(shí)，黑媚娘菌落數(shù)為最低，分別為1.7, 0.0個(gè)，而酶聯(lián)免疫結(jié)果均為陰性，紅大分別為4.7, 0.3,酶聯(lián)免疫結(jié)果也均為陰性。因此7572h, 8072h處理對(duì)細(xì)菌性果斑病有非常好的防治效果。三、不同緩沖處理對(duì)種子活力的影響在針對(duì)較耐高溫的細(xì)菌性果斑病進(jìn)行滅菌處理時(shí)，試驗(yàn)中所設(shè)置的干熱處理溫度也較高。從生物體對(duì)外界環(huán)境適應(yīng)的特征分析，在對(duì)種子進(jìn)行高溫干熱處理前，預(yù)先對(duì)種子

20、進(jìn)行階梯溫度緩沖，理論上有利于增強(qiáng)種子對(duì)高溫逆境的適應(yīng)性，從而減少高溫環(huán)境對(duì)種子活力的損傷。因此本試驗(yàn)以西瓜種子黑媚娘為材料，探究不同溫度預(yù)緩沖條件對(duì)種子活力的影響，以篩選出適宜于西瓜種子干熱處理的最佳緩沖條件。（一）試驗(yàn)材料1、試驗(yàn)種子試驗(yàn)西瓜品種為黑媚娘。2、試驗(yàn)試劑培養(yǎng)皿、鑷子、硫酸銅、硫代巴比妥酸(TBA)、三氯乙酸、氫氧化鈉、磷酸緩沖液、研缽、石英砂、油標(biāo)卡尺、發(fā)芽紙，過氧化氫酶、超氧化物歧化酶、過氧化物酶試劑盒。3、試驗(yàn)儀器高速臺(tái)式離心機(jī)(eppendorf 5415R )電子天平島津AUY220 )酶標(biāo)儀(DNM-9602A )紫外分光光度計(jì)(YK75290176)光照培養(yǎng)箱(寧

21、波海曙賽福PRX-450L )冰箱(ZANLTSSI )干燥箱(上海培因DHG-9070A )高壓滅菌鍋(上海申安LDZX-30FBS )恒溫水浴鍋（二）試驗(yàn)方法1、種子緩沖處理種子高溫千熱滅菌處理前溫度預(yù)緩沖處理分三種:T1: 500h(對(duì)照組)，T2：5012h, T3: 5024h。此緩沖處理的作用主要是及讓種子在進(jìn)行高溫干熱處理前經(jīng)歷階梯溫度緩沖，以增強(qiáng)種子的適應(yīng)能力。2、干熱處理種子進(jìn)行預(yù)溫緩沖處理后直接將烘箱溫度調(diào)到干熱滅菌處理設(shè)定溫度，進(jìn)行以下處理，種子原始含水量為7%左右，直接將其放入烘箱內(nèi)進(jìn)行不同溫度、時(shí)間干熱組合處理，CK為不進(jìn)行干熱處理的種子。各干熱處理組合A1-A9如下

22、:處理完后將種子在20室溫條件下置于飽合CaCl2溶液(RH=35%)的容器中回濕24h，再置于裝有飽合NH4Cl (RH=70%)的密閉容器中回濕24h，最后置于裝有水的密閉容器中回濕24h(RH=100% )，再對(duì)其進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)。3、試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析軟件數(shù)據(jù)分析與軟件使用SPSS分析軟件，Exce12003軟件。4、干熱處理后種子活力檢測(cè)指標(biāo)（1）發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽指數(shù)處理后的種子均在15d內(nèi)進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn)。隨機(jī)選取形態(tài)飽滿、發(fā)育良好的種子100粒，設(shè)4個(gè)重復(fù)，用1%硫酸銅消毒5分鐘。將種子均勻平鋪在墊有1層發(fā)芽紙的毛巾中，毛巾事先充分濕潤(rùn)擰到合適的濕度，蓋上一層濕潤(rùn)的發(fā)芽紙后合上毛巾，放置

23、在30恒溫箱中，每天計(jì)錄發(fā)芽數(shù)，直到第14d為止。計(jì)算:Dt發(fā)芽日數(shù)，Gt與Dt相對(duì)應(yīng)的每天發(fā)芽種子數(shù)與發(fā)芽日數(shù)。（2）種子抗老化特性的測(cè)定將西瓜種子置于溫度45、相對(duì)濕度(RH)100%的條件下老化3d，得到老化后的西瓜種子。具體做法參照鄭曉鷹:在玻璃干燥器底部盛入3cm深的水，中層的白磁板用塑料網(wǎng)格替代，在網(wǎng)格上鋪一層紗布，種子平攤于紗布上，然后蓋上干燥器蓋子。將干燥器置于45恒溫箱中進(jìn)行高溫高濕老化處理，3d后取出種子對(duì)其進(jìn)行活力測(cè)定。（三）結(jié)果與分析1、干熱處理對(duì)種子發(fā)芽特性的影響圖3-1不同緩沖處理對(duì)種子發(fā)芽率的影響由圖3-1可得，三種緩沖在70處理與7524h處理時(shí)，它的趨勢(shì)線基本

24、重合，并且各處理之間與對(duì)照無(wú)顯著性差異，說明在這幾種干熱處理?xiàng)l件下，幾種緩沖對(duì)種子發(fā)芽率影響不大。7548h時(shí)T2緩沖處理發(fā)芽率為96.1%，比T1, T3分別高6.8%,1.9%，8024h處理時(shí)，T2比T1高5.5%，相對(duì)其它各干熱處理?xiàng)l件，這兩個(gè)干熱處理組合下，不同溫度預(yù)緩沖對(duì)種子的發(fā)芽特性的影響差別相對(duì)較大，但也未達(dá)到顯著性差異。圖3-2不同緩沖處理對(duì)種子發(fā)芽勢(shì)的影響由圖3-2可知，三種不同緩沖處理對(duì)干熱處理后西瓜種子的發(fā)芽勢(shì)影響不同，T2緩沖處理總體發(fā)芽勢(shì)最高，其次為T3, T1。70處理、75處理及8024h條件下T2與T3兩種緩沖對(duì)其影響不大，與對(duì)照無(wú)顯著性差異。8048h處理?xiàng)l

25、件下T2比T1、T3分別高20.8%, 13.6%，并且T2與對(duì)照無(wú)顯著性差異，T1, T3與對(duì)照有顯著性差異。8072h干熱處理?xiàng)l件下，T2比T1、T3分別高14.1%, 12.5%，T2與對(duì)照無(wú)顯著性差異，T1, T3與對(duì)照有顯著性差異。圖3-3不同緩沖處理對(duì)種子發(fā)芽指數(shù)的影響由圖3-3可以看出，干熱處理在一定程度上能促進(jìn)種子的萌發(fā)速度，T2處理組的發(fā)芽指數(shù)均高于CK組，T1處理的發(fā)芽指數(shù)最低。T2緩沖時(shí)間比T1長(zhǎng)，不僅使種子在進(jìn)入高溫干熱處理前有個(gè)足夠的溫度適應(yīng)過程，還能讓種子自由水含量處于合理超干水平，這有助于增強(qiáng)植物個(gè)體的抗逆境能力。而T3處理比T2溫度緩沖時(shí)間更長(zhǎng)，而這一緩沖處理?xiàng)l

26、件下，種子的發(fā)芽指數(shù)相較T2有所降低，這可能是由于50緩沖時(shí)間過長(zhǎng)，對(duì)種子產(chǎn)生了不良影響。2、干熱處理對(duì)種子抗老化特性的影響高溫高濕人工老化種子的方法，老化中控制的條件比較接近于自然條件，其老化機(jī)理與自然老化機(jī)理相似，兩者之間的差別在于劣變速度不同。種子人工老化能預(yù)測(cè)種子耐貯藏性的這一特征，在多種類型的種子上也得到了試驗(yàn)證明。圖3-4不同緩沖對(duì)種子抗老化性的影響圖3-5不同緩沖對(duì)種子抗老化性的影響圖3-6不同緩沖對(duì)種子抗老化性的影響由圖3-4,圖3-5和圖3-6可知，三種緩沖處理對(duì)種子發(fā)芽特性的差異較大，其中T2種子發(fā)芽特性最好，其次T3, T1。7024h, 7048h處理，各緩沖對(duì)其影響差

27、異不大，并且發(fā)芽率與對(duì)照無(wú)顯著性差異。隨著處理溫度的升高及處理時(shí)間的延長(zhǎng)，各緩沖處理之間的差異呈增長(zhǎng)趨勢(shì)。7072h處理?xiàng)l件下，發(fā)芽勢(shì)T2比T3高16.9%，T2比T1高28.9%，發(fā)芽指數(shù)T2比T3高5.5 , T2比T1高11.32。75 48h與72h時(shí)，發(fā)芽勢(shì)T2比TI, T3分別高39.8%, 37.4%。（四）討論1、不同預(yù)緩沖處理對(duì)種子干熱處理后發(fā)芽特性的影響三種不同緩沖T2最有利于保持種子活力。不同緩沖處理對(duì)種子發(fā)芽率的影響主要體現(xiàn)在80高溫處理時(shí)，8024h處理時(shí)，T2比T1發(fā)芽率高5.5%，T3比T1高5.2%。三種緩沖對(duì)種子發(fā)芽勢(shì)的影響比較明顯，各個(gè)干熱處理?xiàng)l件下，T2與

28、T3都明顯好于T1處理。而T2與T3之間在70, 75及8024h處理時(shí)，發(fā)芽勢(shì)基本持平，說明在此干熱處理?xiàng)l件下，T2, T3緩沖對(duì)其種子發(fā)芽勢(shì)的影響無(wú)區(qū)別。8048h, 72h處理時(shí)，不同緩沖處理對(duì)其發(fā)芽勢(shì)的影響都比較大。種子發(fā)芽指數(shù)結(jié)果顯示，75, 80條件下，T2與T3緩沖處理對(duì)種子的發(fā)芽指數(shù)影響區(qū)別較大，T2發(fā)芽指數(shù)明顯高于T3。2、不同預(yù)緩沖處理對(duì)種子干熱處理后抗老化特性的影響用種子人工老化來(lái)預(yù)測(cè)種子的耐貯藏性是被廣泛應(yīng)用的研究方法。從老化后的種子發(fā)芽狀況來(lái)看，三種不同緩沖對(duì)其各個(gè)溫度的干熱處理活力影響區(qū)別都很大，方差分析結(jié)果顯示不同緩沖對(duì)其種子老化后的發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)及發(fā)芽指數(shù)均有極

29、顯著性差異。T2緩沖處理后的種發(fā)芽狀況最好，依次為T3, T1。但是不管何種緩沖處理的種子，老化后對(duì)其發(fā)芽狀況的影響都很大，與對(duì)照差異明顯，說明干熱處理后的種子耐貯藏性受到了嚴(yán)重影響。四、干熱處理對(duì)種子活力的影響第二章的試驗(yàn)結(jié)果證明，試驗(yàn)所設(shè)置的干熱處理?xiàng)l件對(duì)種帶細(xì)菌性果斑病有明顯的滅菌效果，第三章的試驗(yàn)結(jié)果在前人的基礎(chǔ)上探索出適宜于種子干熱處理的溫度緩沖條件。為了使干熱處理安全、有效地應(yīng)用于實(shí)踐生產(chǎn)，并且全面掌握干熱處理?xiàng)l件與種子活力的關(guān)系，本試驗(yàn)對(duì)不同溫度、時(shí)間干熱處理過程中，種子內(nèi)部生理活性及耐貯藏性的變化進(jìn)行探索。（一）試驗(yàn)材料1、試驗(yàn)種子試驗(yàn)西瓜品種為黑媚娘。2、試驗(yàn)試劑培養(yǎng)皿、鑷子

30、、硫酸銅、硫代巴比妥酸(TBA、三氯乙酸、氫氧化鈉、磷酸緩沖液、研缽、石英砂、油標(biāo)卡尺、發(fā)芽紙，超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶(POD),過氧化氫酶(CAT)試劑盒。3、試驗(yàn)儀器高速臺(tái)式離心機(jī)(eppendorf 5415R)電子天平(島津AUY220 )酶標(biāo)儀(DNM-9602A )紫外分光光度計(jì)(YK75290176 )光照培養(yǎng)箱(寧波海曙賽福PRX-450L )冰箱(ZANUSSI )干燥箱(上海培因DHG-9070A )高壓滅菌鍋(上海申安LDZX-30FBS )恒溫水浴鍋（二）試驗(yàn)方法1、種子緩沖處理由前期試驗(yàn)得出T2: 50處理12h為最好的預(yù)緩沖處理，因此本章對(duì)比高溫干熱處

31、理對(duì)種子活力影響的試驗(yàn)均采用T2: 50處理12h溫度預(yù)緩沖。2、干熱處理種子進(jìn)行預(yù)備處理后處理后直接將烘箱溫度調(diào)到各高溫干熱滅菌處理設(shè)定溫度，進(jìn)行以下處理，不處理的種子本身含水量為7%左右，直接將其放入烘箱內(nèi)進(jìn)行不同溫度、時(shí)間干熱處理組合，CK為不經(jīng)過干熱處理的種子。各干熱處理組合A1-A9如下:處理完后將種子置于干凈的自封袋內(nèi)密封，對(duì)其進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定。3、試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析軟件數(shù)據(jù)分析與軟件使用SPSS分析軟件，Exce12003軟件。4、干熱處理后種子活力檢測(cè)指標(biāo)（1）發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽指數(shù)方法參考第二章。（2）種子抗老化特性的測(cè)定方法參考第二章。（3）電導(dǎo)率的測(cè)定選取大小一致剝殼了并且無(wú)

32、機(jī)械損傷的種子40粒，取50ml玻璃容量，用去離子水清洗干凈，侄置涼干。將種子放入玻璃容器中，加入20ml去離子水，測(cè)定浸泡初始值A(chǔ)1。容器口用薄膜蓋好，以防灰塵污染和減少蒸發(fā)。再將容器置于28下放置2h,6h, 8h, 12h，分別用電導(dǎo)儀測(cè)定其不同時(shí)間段的電導(dǎo)率A2，各時(shí)間段測(cè)定完后，將容器置于100水浴30min，冷卻至室溫后測(cè)定A3。測(cè)定時(shí)將容器中溶液稍微振蕩，并且手放置于容器口，以免影響測(cè)定值。（4）MDA丙二醛采用硫代巴比妥酸法進(jìn)行丙二醛的測(cè)定。取0.6g種仁加10ml 5%三氯乙酸(TCA)和少量石英砂研磨成勻漿，8000r、4條件下離心10min，取上清液4m1加0.67%硫代

33、巴比妥酸(TBA) 4ml混合后100水浴15min冷卻，再6000r離心1 0min，對(duì)照加4ml三氯乙酸代替上清液，取上清夜分別在532nm, 600nm和450nm下測(cè)定吸光值。MDA-TBA反應(yīng)產(chǎn)物在532nm有最大吸收峰值，TBA可溶性糖反應(yīng)產(chǎn)物的最大吸收峰值在450nm。計(jì)算MDA的濃度:（5）SOD超氧化物歧化酶采用氮蘭四(NBT)法測(cè)定SOD活性。稱取0.6g剝了殼的西瓜種仁，按重量(g):(ml) =1: 9的比例，加入9倍體積的磷酸緩沖液(0.1ml/L PH7.4)及少量石英砂冰浴研磨成勻漿，再5000r/min離心l0min，取上清液再次離心，再稀釋成合適的濃度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)

34、，實(shí)驗(yàn)方法參照試劑盒說明書操作。37反應(yīng)20分鐘后，取反應(yīng)液在450nm處讀數(shù)。計(jì)算公式：（6）POD過氧化物酶采用愈創(chuàng)木酚法進(jìn)行測(cè)定。稱取0.6g剝了殼的西瓜種仁，按重量(g): (ml) =1:9的比例，加入9倍體積的磷酸緩沖液(0.1 ml/L PH7.4 )及少量石英砂冰浴研磨成勻漿，再5000r/min，離心l0min，取100L上清，按試劑盒說明書操作表進(jìn)行操作，37水浴反應(yīng)30min，反應(yīng)完成后，混勻再離心，取上清液于470nm處，測(cè)定OD值。計(jì)算公式：（7）CAT過氧化氫酶采用鑰酸按法進(jìn)行測(cè)定。稱取0.6g剝了殼的西瓜種仁，按重量(g): (ml)=1:9的比例，加入9倍體積的

35、磷酸緩沖液(0.1 ml/L PH7.4 )及少量石英砂冰浴研磨成勻漿，再5000r/min，離心l0min，取上清液再次離心，試驗(yàn)操作完成后取反應(yīng)液于405nm處，雙蒸水調(diào)零，測(cè)定各管吸光度。計(jì)算公式：（三）結(jié)果與分析1、干熱處理對(duì)種子當(dāng)下發(fā)芽特性的影響表4-1為種子干熱處理后15天內(nèi)進(jìn)行的發(fā)芽試驗(yàn)結(jié)果。由上圖可知各干熱處理對(duì)種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽指數(shù)與對(duì)照相比無(wú)顯著性差異，說明本試驗(yàn)的干熱處理溫度、時(shí)間對(duì)種子當(dāng)下的發(fā)芽特性并無(wú)影響。這可能由于種子在萌發(fā)過程中具有極強(qiáng)的自我修復(fù)能力，并且種子隨時(shí)間劣變的程度并不深，因此當(dāng)下對(duì)其進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn)后，種子并未表現(xiàn)出明顯的活力受損跡象。表4-1干熱

36、處理對(duì)種子發(fā)芽的影響2、干熱處理對(duì)種子抗老化特性的影響高溫高濕人工老化種子的方法，老化中控制的條件比較接近于自然條件，其老化機(jī)理與自然老化機(jī)理相似，兩者之間的差別在于劣變速度不同。種子人工老化能預(yù)測(cè)種子耐貯藏性的這一特征，在多種類型的種子上也得到了試驗(yàn)證明。表4-2結(jié)果表明，隨著干熱處理溫度的升高及處理時(shí)間的延長(zhǎng)，西瓜種子種子人工老化后的各項(xiàng)發(fā)芽指標(biāo)明顯呈下降趨勢(shì)，80處理下降速度最快。7548h, 72h和80處理的發(fā)芽率與對(duì)照有顯著性差異，并且8048h, 72h處理與對(duì)照91.0%相比發(fā)芽率分別下降19.4%, 28.5%，達(dá)極顯著性差異。7572h和8048h, 72h處理的發(fā)芽勢(shì)與對(duì)

37、照87.3%相比分別下降22%, 26.2%和33.5%，達(dá)極顯著性差異。各干熱處理發(fā)芽指數(shù)下降幅度非常明顯，除7048h, 7072h外與對(duì)照均達(dá)極顯著性差異。7572h與8072h處理分別比對(duì)照發(fā)芽指數(shù)降低14.5(34.4%) , 19.9(47.6%)。70和80不同處理時(shí)間之間發(fā)芽特性無(wú)顯著性差異，8072h處理與24h和48h處理間有極顯著性差異，說明當(dāng)80干熱處理時(shí)間延長(zhǎng)到72h時(shí)，對(duì)種子活力的損傷非常大。表4-2干熱處理后的種子老化3d后對(duì)種子發(fā)芽特性的影響3、干熱處理對(duì)種子浸出液電導(dǎo)率的影響圖4-1干熱處理對(duì)種子浸出液電導(dǎo)率的影響圖4-2干熱處理對(duì)種子浸出液電導(dǎo)率的影響種子受

38、到高溫逆境傷害時(shí)，細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能受到破壞，膜透性增加，從而會(huì)向溶液中滲透出較多的電解質(zhì)。因此，通過測(cè)定種子浸出液的相對(duì)電導(dǎo)率，能反應(yīng)出種子活力的高低，并且，電導(dǎo)率與種子活力負(fù)相關(guān)。圖4-1, 4-2結(jié)果表明，隨著干熱處理溫度的的升高及處理時(shí)間的延長(zhǎng)，種子浸出液相對(duì)電導(dǎo)率呈升高的趨勢(shì)。8072h處理的的相對(duì)電導(dǎo)率明顯高于其它各處理，說明膜受到的損傷最大。接著電導(dǎo)率較高的為7048h, 7072h, 7572h, 8048h，這四個(gè)處理相對(duì)電導(dǎo)率相差不大，后三個(gè)處理趨勢(shì)線幾乎重合。7024h, 7524h及對(duì)照趨勢(shì)線在最底層，相對(duì)電導(dǎo)率最低，并且隨著浸泡的延長(zhǎng)，相對(duì)電導(dǎo)率緩慢上升，坡度較小，說

39、明其膜的完整性保持得較好。種子浸泡2h, 4h和6h時(shí)，除8072h外，其它各處理之間的電導(dǎo)率相差很小，隨著浸泡時(shí)間的延長(zhǎng)，各處理之間的相對(duì)電導(dǎo)率值相差越來(lái)越大，并且處理溫度越高、處理時(shí)間越長(zhǎng)的組合，趨勢(shì)線坡度越陡，說明種子浸出液中細(xì)胞的內(nèi)含物質(zhì)外滲量增加，種子內(nèi)部細(xì)胞膜損傷越厲害。4、干熱處理對(duì)種子超氧化物歧化酶(SOD)的影響圖4-3表明，西瓜種子在70, 75溫度干熱處理時(shí)，隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，SOD酶呈增長(zhǎng)趨勢(shì)，并且各處理組合酶活性均高于對(duì)照，7072h與7524h, 48h, 72h處理的的酶活性與對(duì)照1225.5U/ml相比，分別升高26.2%. 20.8%, 22.0%和39.3

40、%均達(dá)顯著性差異。8048h處理比24h處理SOD酶活性增長(zhǎng)18.7%，有顯著性差異。8048h處理與72h處理SOD酶活性趨于平衡，分別為1480.9U/mgprot和1437.1U/mgprot，與對(duì)照相比分別上升20.8%和17.3%，并且與對(duì)照達(dá)顯著性差異。圖4-3干熱處理對(duì)種子SOD酶的影響西瓜種子由于高溫的影響，脂質(zhì)過氧化作用逐漸增強(qiáng)，種子內(nèi)部生理機(jī)能為抵抗高溫對(duì)種子的傷害，通過提高自身的SOD酶活性來(lái)催化超氧物陰離子自由基發(fā)生的歧化反應(yīng)，生成H2O2和O2，從而消除O2-，降低對(duì)種子的傷害。因此在70, 75和80處理時(shí)，隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，SOD酶活性都呈現(xiàn)了上升的趨勢(shì)。這與娜

41、荷雅的結(jié)論一致。5、干熱處理對(duì)種子過氧化物酶(POD)活性的影響圖4-4干熱處理對(duì)種子POD酶的影響由4-4圖可知，隨著干熱處理溫度的升高和干熱處理時(shí)間的延長(zhǎng)，POD酶活性總體呈現(xiàn)先上升后下降的過程，70和75各處理組合間，酶活性基本維持在一個(gè)比較平衡的水平，與對(duì)照806.7U/mgprot無(wú)顯著性差異，8024h, 48h處理POD酶含量較高，分別為922.2U/mgprot, 917.8U/mgprot，與對(duì)照相比分別上升了14.3%. 13.8%。當(dāng)80處理時(shí)間延長(zhǎng)到72h時(shí)，POD酶活性突然下降到 602.2 U/mgprot，與8048h處理相比，下降了34.4%，并且兩者之間有極顯

42、著性差異。西瓜種子內(nèi)部的脂質(zhì)過氧化作用隨著處理溫度的升和處理時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸增強(qiáng)，種子內(nèi)部生理機(jī)能通過提高自身的POD酶活性來(lái)清除H2O2，降低對(duì)種子的傷害。隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，使得種子內(nèi)活性氧產(chǎn)生和消除的平衡被破壞，有害物質(zhì)積累。導(dǎo)致POD抗氧化酶活性減弱含量降低，因此在8072h時(shí)，POD酶活性突然下降。6、干熱處理對(duì)種子過氧化氫酶(CAT)活性的影響CAT是過氧化物酶體的標(biāo)志酶，它可促使H2O2分解為O2和H2O，清除體內(nèi)的過氧化氫，從而使細(xì)胞免于遭受H2O2的毒害，是生物防御體系的關(guān)鍵酶之一。由圖4-5可知，70,75干熱處理隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，CAT酶含量總體呈上升趨勢(shì)，80干熱處理

43、，CAT酶活性隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)先上升后下降。7048h與72hCAT酶含量基本一致，并且與7024h處理有顯著性差異。75各處理時(shí)間之間無(wú)顯著性差異，8024h, 48h和72h處理之間CAT酶活性有顯著性差異，依次為2428.5mgprot/ml,3185.7mgprot/ml和2834.4mgprot/ml，CAT酶活性先升高后降低，可能是由于種子受到逆境傷害時(shí)，種子內(nèi)部生理機(jī)能通過提高自身的CAT酶活性來(lái)清除H2O2等物質(zhì)，隨著逆境傷害的持續(xù)加深，使得種子內(nèi)活性氧的產(chǎn)生和消除平衡被破壞，有害物質(zhì)積累。導(dǎo)致CAT抗氧化酶活性減弱含量降低，因此在8072h時(shí)，CAT酶活性突然下降。圖4-5

44、干熱處理對(duì)種子CAT酶的影響7、干熱處理對(duì)種子丙二醛(MDA)含量的影響種子在遭受高溫逆境傷害時(shí)，細(xì)胞的脂質(zhì)氧化程度加深，膜脂過氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量增加，因此可通過種子內(nèi)丙二醛的含量來(lái)指示種子內(nèi)膜脂過氧化程度。MDA能強(qiáng)烈地與細(xì)胞內(nèi)各種成分發(fā)生反應(yīng)，從而引起對(duì)酶和膜的嚴(yán)重?fù)p傷，最終導(dǎo)致了膜的結(jié)構(gòu)及生理完整性的破壞。圖4-6干熱處理對(duì)種子MDA的影響隨著干熱處理溫度的升高及處理時(shí)間的延長(zhǎng)，MDA含量呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，對(duì)照MDA含量最低。7072h與24h, 48h有顯著性差異，分別比24h, 48h高38.3%, 31.7%。75和80處理對(duì)種子內(nèi)部MDA含量與對(duì)照均有顯著性差異。75各處理

45、之間無(wú)顯著性差異，依次分別為0.147umol/L, 0.151umol/L和0.155umol/L。80各處理對(duì)種子MDA含量的影響差異較大，72h分別比24h, 48h處理高 35.8%, 17.0%，說明在此溫度條件下，處理時(shí)間對(duì)種子活力的影響的差異非常明顯。48h條件下，70, 75和80處理的MDA含量分別為0.126umol/L, 0.151umol/L和0.188umol/L, 70, 75之間無(wú)顯著性差異，70, 75與80處理之間有顯著性差異，說明相較其它兩溫度處理，80處理對(duì)種子的損傷的非常大。（四）小結(jié)種子酶活性的這一變化與種子當(dāng)下及老化后的發(fā)芽特性規(guī)律有所不同。各干熱處

46、理組合種子當(dāng)下的發(fā)芽狀況與對(duì)照相比均無(wú)顯著性差異，這可能由于種子在萌發(fā)過程中具有極強(qiáng)的自我修復(fù)能力，并且種子隨時(shí)間劣變的程度并不深，因此在對(duì)其進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn)后，種子并未表現(xiàn)出明顯的活力受損跡象。而種子老化后的萌發(fā)狀況，隨著處理溫度的升高及處理時(shí)間的延長(zhǎng)呈現(xiàn)明顯下降趨勢(shì)，這由于老化過程將種子自身微小的生理機(jī)能缺陷累積放大，因此老化后各千熱處理組合能呈現(xiàn)明顯的差異性。五、結(jié)論1、干熱處理對(duì)種帶細(xì)菌性果斑病滅菌效果的影響干熱處理對(duì)種子表面帶菌的滅菌效果非常明顯。隨著處理溫度的升高及處理時(shí)間的延長(zhǎng)，滅菌效果明顯增強(qiáng)，酶聯(lián)免疫結(jié)果逐漸由陽(yáng)轉(zhuǎn)陰，細(xì)菌性果斑病的發(fā)病率也呈明顯降低的趨勢(shì)，黑媚娘西瓜種子在707

47、2h、7072h和8072h處理對(duì)種子表面的滅菌率分別高達(dá)90.6%, 99.4%和100%。2、不同緩沖處理對(duì)西瓜種子發(fā)芽特性和抗老化能力的影響以含水量為7%左右的黑媚娘西瓜種子為試驗(yàn)材料，探索種子干熱處理前最佳的緩沖處理?xiàng)l件。結(jié)果表明:5012h緩沖處理的種子發(fā)芽特性及抗老化能力比5024h和500h明顯要好，說明5012h是適宜用于種子干熱處理前最佳的溫度緩沖處理組合。3、干熱處理對(duì)西瓜種子活力的影響70、75干熱處理?xiàng)l件下，隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，抗氧化酶活性、MDA含量及種子浸出液相對(duì)電導(dǎo)率呈逐漸上升的趨勢(shì)。80在各處理時(shí)間條件下CAT, POD活性分別呈現(xiàn)先上升后下降、緩慢下降的趨勢(shì)，

48、可能80干熱處理時(shí)，高溫脅迫程度深，種子首先能通過提高自身抗氧化酶來(lái)清除氧化物質(zhì)的傷害，而隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，逆境肋、迫程度的進(jìn)一步增加，并且抗氧化酶系統(tǒng)長(zhǎng)期處于消耗狀態(tài)，因此其活性又逐漸降低。70, 75和80干熱處理后的種子內(nèi)在生理的一系列變化并未影響到種子的發(fā)芽特性，在同一時(shí)期(種子干熱處理后15天內(nèi))對(duì)種子進(jìn)行的發(fā)芽試驗(yàn)表明，各干熱處理組合對(duì)種子發(fā)芽特性均無(wú)影響，與對(duì)照相比均無(wú)顯著性差異，可能由于種子在萌發(fā)過程中有較強(qiáng)的自我修復(fù)能力，因此，種子的發(fā)芽特性并未呈現(xiàn)出差異性。而干熱處理后種子的抗老化試驗(yàn)結(jié)果表明，隨著干熱處理溫度的升高及處理時(shí)間的延長(zhǎng)，種子老化后的萌發(fā)活力隨之也降低，70各

49、時(shí)間處理及7524h處理降低幅度較小，與對(duì)照相比發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)均無(wú)顯著性差異，80各時(shí)間處理及75 48h. 72h處理的種子萌發(fā)活力受到嚴(yán)重影響，與對(duì)照均有顯著性差異。說明干熱處理影響了種子的耐.貯藏性，因此不宜久放，需當(dāng)年種植。因此綜合分析干熱處理對(duì)種子活力及滅菌效果的影響，7072h處理是適宜于西瓜種子細(xì)菌性果斑病干熱滅菌處理的最佳組合。本試驗(yàn)結(jié)果為干熱處理廣泛應(yīng)用于實(shí)踐提供了理論依據(jù)。參考文獻(xiàn)1 牛慶偉,孔秋生,黃遠(yuǎn),別之龍. 不同藥劑處理對(duì)西瓜細(xì)菌性果斑病帶菌種子的影響J. 長(zhǎng)江蔬菜. 2012(22) 2 宋順華,吳萍,鄭曉鷹,丁海鳳. 干熱處理對(duì)蔬菜種子質(zhì)量的影響及其殺菌效果研究

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