1,3-β-D-葡聚糖檢測侵襲性真菌感染診斷中的影響因素分析

1、1,3- B -D葡聚糖（BG）在檢測侵襲性真菌感染診斷中的影響因素分析近20年來，由于大劑量廣譜抗生素、抗腫瘤藥物的長期應(yīng)用，器官移植及 造血干細(xì)胞移植等治療方法的完善，各種導(dǎo)管在體內(nèi)的介人以及惡性腫瘤、艾滋 病等免疫功能低下患者的不斷增加，侵襲性真菌感染的發(fā)病率明顯上升。侵襲性 真菌感染（IFI）臨床常無特異性，而真菌實(shí)驗(yàn)室診斷方法中鏡檢、培養(yǎng)、血清 學(xué)診斷、組織病理學(xué)檢查和分子生物學(xué)方法的檢出率較低，G試驗(yàn)檢測時間短其 為非侵人手段在臨床上廣受關(guān)注。目的及意義:分清1,3-B-D-葡聚糖檢測（G試驗(yàn)）干擾因素，提高準(zhǔn)確性。G試驗(yàn)是及激活試劑中鱟變形細(xì)胞裂解物中的凝固酶（G因子），形成凝固

2、 蛋白，根據(jù)反應(yīng)物的濃度變化對1,3-B-D葡聚糖濃度進(jìn)行定量檢測。G試驗(yàn)是 念珠菌感染的首選檢查方法，檢測速度快。G試驗(yàn)是新的真菌抗原檢測方法、念珠菌感染首選檢查方法，在深部真菌感 染早期診斷有重要意義，檢查結(jié)果作為方法學(xué)評價標(biāo)準(zhǔn)，彌補(bǔ)了傳統(tǒng)病理學(xué)及培 養(yǎng)的不足，提高IFI檢測率，縮短檢查時間，早期治療贏得時間為臨床合理用藥 提供幫助。G 試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)值：V 10pg/ml 為陰性，10pg/ml-20pg/ml 是觀察，20pg/ml 陽性。一般兩次及以上G試驗(yàn)陽性及臨床特征，并排除干擾因素就可以確定真 菌感染。BG升高原因：1, 3-B-D葡聚糖（1,3） -B-D-glucan,BG） 廣

3、泛存在于多 種真菌細(xì)胞壁中，是真菌的特有多糖成分，包括念珠菌、曲霉菌、鐮刀菌及卡氏 肺孢子菌占其干質(zhì)量的50以上，細(xì)菌、人和病毒都不含該成分,真菌菌絲生 長的過程中、進(jìn)入人體體液或深部組織后，經(jīng)吞噬細(xì)胞的吞噬、消化等處理后， 1，3-B-D葡聚糖可從細(xì)胞壁中釋放出來，使血液和體液（如尿、腦脊液，腹水， 胸水等）中1，3-B-D葡聚糖含量升高，故檢測血液中的BG可以協(xié)助侵襲性真菌 感染（IFI）的診斷，當(dāng)真菌在體內(nèi)含量減少時，機(jī)體免疫可迅速清除1,3-B-D- 葡聚糖。盡管目前BG檢測已成為與真菌培養(yǎng)聯(lián)合診斷IFI的重要方法，但是BG檢 測用于診斷IFI仍存在很多不能忽視的問題。高危因素的 16

4、78 例數(shù)據(jù)中, ，血液系統(tǒng)惡性疾病累計(jì)頻次 177 例，移植累 計(jì)頻次224 例，重癥感染累計(jì)頻次 274 例，自身免疫病累計(jì)頻次 137 例，腎功能 不全累計(jì)頻次 182 例，惡性腫瘤累計(jì)頻次 158 次，慢性呼吸系統(tǒng)疾病累計(jì)頻次 127 次，不同基礎(chǔ)疾病標(biāo)本G試驗(yàn)結(jié)果基礎(chǔ)疾病真陽性假陽性真陰性假陰性合計(jì)血液系統(tǒng)惡性疾病73311S19177移植176213213224重癥感染417811342274自身免疫性疾病16426SII137慢性腎功能不全27617517182惡性腫瘤16488348158糖尿病19288122150肝硬化92363S103慢性呼吸系統(tǒng)疾病7189012127從

5、上述試驗(yàn)可以看出高危因素病例中 G 試驗(yàn)檢測假陽性或假陰性幾率明顯， 尤其是重癥感染、器官移植及輸血狀態(tài)、腎功能不全、惡性種腫瘤、自身免疫疾 病患者中假陽性和假陰性率比一般患者明顯大。二、G試驗(yàn)的影響因素假陽性因素。（1）常見于同時合并細(xì)菌感染，包括革蘭陽性、革蘭陰性菌（如大部分球菌， 大腸埃希菌，銅綠假單胞菌等，可以產(chǎn)生1,3-B-D葡聚糖和1,6-B-D葡聚 糖類此物，可能會引起 G 試驗(yàn)交叉反應(yīng)。（2） 腎透析儀（人工腎，血液透析儀）、使用纖維濾膜洗滌液， （含葡聚糖的材料引起 BG 水平的升高）。 紗布棉球等材料，（含葡聚糖的材料引起B(yǎng)G水平的升高）。（4）輸入血漿、血液制品（白蛋白、

6、免疫球蛋白）、脂肪乳。（含BG類似物會引起B(yǎng)G水平升高）。（5）抗腫瘤藥物中蘑菇聚糖、K多聚糖等成分也含有BG類似物會引起B(yǎng)G水平升高。（6）放化療造成的粘膜損傷導(dǎo)致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌經(jīng)胃腸道進(jìn)入血液也可能造成假陽性。（7）真菌作為原料制成的抗生素（如頭孢吡肟、磺胺類、厄他培南、阿莫西林/ 克拉維酸、哌拉西林/他唑巴坦）等會升高血清BG水平（還需進(jìn)一步證實(shí)）。國外檢測了美國常用的 44種抗生素靜脈制劑，在最大血漿濃度時無一檢測 到1,3-卩-D-glucan活性，他們認(rèn)為“使用抗生素會產(chǎn)生G試驗(yàn)假陽性”的結(jié)論需 進(jìn)一步證實(shí)。方慧，沈菊英,蔡惠萍探究菌血癥對G試驗(yàn)的干擾J.中國醫(yī)藥指南

7、,2017,15（18）。（8）另外使用污染的熱源的試管、槍頭等實(shí)驗(yàn)器材，（試管、槍頭和蒸餾水被環(huán) 境中細(xì)菌或真菌污染）。（9）蘑菇類食物，（分子結(jié)構(gòu)包含B-葡聚糖鍵）影響血清BG水平。（2）假陰性因素1、隱球菌屬和接合菌（毛霉、根霉）細(xì)胞壁不產(chǎn)BG,隱球菌細(xì)胞壁外有莢膜 包裹， 因此免疫缺陷患者體內(nèi)生長緩慢不易檢測到細(xì)胞壁上的抗原，但是在一 定條件下莢膜自身可釋放出極微量的 BG 到血清中， 但仍小于陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)， 而對于口腔和其他器官的真菌定植患者，BG值也較低。2、卡泊芬凈：為葡聚糖合成酶抑制劑，非競爭性地抑制真菌BG試驗(yàn)檢測 真菌會造成假陰性。三、提高G試驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性1、必須保證標(biāo)本的

8、正確采集及運(yùn)送，標(biāo)本最好是在6小時內(nèi)檢測，如不能 及時檢測應(yīng)保存于2-8C不超過24小時。2、應(yīng)在運(yùn)用抗菌藥前采集標(biāo)本，已經(jīng)用藥或者輸注了靜脈制劑由于病情要 求又不可停藥，需在下次用藥或輸注前采集，采集中避免接觸熱敏原如纖維素膜， 在盡量短的時間內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室檢測。3、動態(tài)監(jiān)測2次每周，評價療效。4、用藥前，在半衰期后抽血。四、總結(jié)在可能的含有侵襲性真菌感染的菌血癥患者中，如果G試驗(yàn)陽性，且細(xì)菌 感染，首先要排除假陽性可能。除了老年患者居多，多有基礎(chǔ)疾病且病情較重， 無法完全排除插管、血透，B-內(nèi)酰胺類藥物，靜脈輸注白蛋白制劑等治療手段的干擾,但是這并非說明所有接受上述治療措施的患者都可能會出現(xiàn)

9、假陽性的結(jié) 果,因此均應(yīng)與病人臨床上的資料、歷史檢查結(jié)果進(jìn)行對比，或者臨床醫(yī)師直接 向患者進(jìn)行溝通，了解病人近期是否有干擾 G 試驗(yàn)檢測的因素。如果檢測結(jié)果明 顯高于異常結(jié)合影像學(xué)，培養(yǎng)法檢查的結(jié)果分析，另外增加 G 試驗(yàn)的檢測頻率 且半乳甘露聚糖(GM)試驗(yàn)同時進(jìn)行，可以降低假陽性率，如果G試驗(yàn)陰性， 則可以排除深部真菌感染。G試驗(yàn)、GM試驗(yàn)鑒定范圍對比種屬G試驗(yàn)GM試驗(yàn)?zāi)钪榫鷮?鐮刀菌屬+隱球菌屬+曲霉菌屬+青霉/擬青霉+接合菌屬參考文獻(xiàn)黃云昆，史玉芹,朱雯梅，王佳，姚瑤血漿(1,3)-B-D葡聚糖檢測對深部真菌感染診斷的臨床評價J.檢 驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2013,10(5):520-521,523.方慧,沈菊英，蔡惠萍.探究菌血癥對G試驗(yàn)的干擾J.中國醫(yī)藥指南,2017,15(18)李方義，鄒子俊,李偉超，周林，鄭煜凱,何志捷.1, 3-B-D-葡聚糖和半乳甘露聚糖檢測在侵襲性真菌病診 治中的臨床意義研究J.轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)電子雜志,2016,3(6):64-