江蘇省2021屆高三二輪復(fù)習(xí)生物：基因工程和細(xì)胞工程練習(xí)

1、MarkerR緩沖液菌處理染色體加負(fù)極bp1000800600MarkerR緩沖液菌處理染色體加負(fù)極bp1000800600400亠200專題十五：基因工程和細(xì)胞工程一、選擇題1下列關(guān)于“基因探針”的敘述，錯(cuò)誤的是()基因探針既可以檢測(cè)某一特定的DNA，也可檢測(cè)RNA基因探針是一小段具有特定核苷酸序列的DNA基因探針既可以檢測(cè)核酸分子，又可以檢測(cè)特定的蛋白質(zhì)基因探針以單鏈形式發(fā)揮作用，其放射性和熒光標(biāo)記便于檢測(cè)2.在基因工程操作中，科研人員利用識(shí)別兩種不同序列的限制酶(R和R)處理基因載體，進(jìn)行瓊脂糖12凝膠電泳檢測(cè)，結(jié)果如圖所示。以下相關(guān)敘述中，不()該載體最可能為環(huán)狀DNA分子兩種限制酶在

2、載體上各有一個(gè)酶切位點(diǎn)C限制酶A】與A?的切點(diǎn)最短相距約20bPD.限制酶作用位點(diǎn)會(huì)導(dǎo)致氫鍵和肽鍵斷裂3下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是()對(duì)外植體需要消毒處理，對(duì)培養(yǎng)基需要高壓蒸汽滅在愈傷組織培養(yǎng)中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑，可獲得倍的細(xì)胞愈傷組織是細(xì)胞脫分化的結(jié)果，受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控用莖尖等分生組織培養(yǎng)能得到脫毒植株花粉植株的過(guò)程示意圖，有關(guān)敘述正確的是()觀察處于分裂中期的四季柑橘花粉植株根尖細(xì)胞，可觀察到18條染色體過(guò)程是細(xì)胞再分化，誘導(dǎo)叢芽產(chǎn)生時(shí)應(yīng)適當(dāng)提高生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素的比例四種培養(yǎng)基均為固體培養(yǎng)基，過(guò)程除培養(yǎng)基成分與含量不同外，其他條件相同花粉植株培育的原理是花粉粒細(xì)胞具有全

3、能性，其技術(shù)是植物組織培養(yǎng)我國(guó)新疆地區(qū)由于光照時(shí)間長(zhǎng)，晝夜溫差大，特別適合棉花的種植。新疆棉花以色澤好，品級(jí)高、纖維長(zhǎng)、產(chǎn)量高而著稱，是世界上最好的棉花之一。我國(guó)科學(xué)家培育出一種具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉，利用幼胚離體培養(yǎng)、單倍體育種等技術(shù)獲得大量的植株，同時(shí)對(duì)其進(jìn)行轉(zhuǎn)基因效果評(píng)估。下列敘述錯(cuò)誤的是()新疆的自然條件有利于植株光合產(chǎn)物的積累，有助于提升棉花品質(zhì)棉花幼胚組織脫分化和再分化培養(yǎng)基中植物激素的比例不同利用雜合的抗蟲(chóng)棉進(jìn)行單倍體育種得到的后代性狀基本一致培育出的抗蟲(chóng)棉需從分子水平以及個(gè)體生物學(xué)水平進(jìn)行效果評(píng)估PC-1基因表達(dá)能誘導(dǎo)正常鼠成纖維細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化。在PC-1分子N端(氨基

4、端)有46個(gè)氨基酸組成的特異序列，這是許多轉(zhuǎn)錄因子激活靶基因轉(zhuǎn)錄所具有的共同序列特征；在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中驗(yàn)證了PC-1的轉(zhuǎn)錄激活作用，通過(guò)缺失突變的基因改造，發(fā)現(xiàn)該作用存在于該分子N端的46個(gè)氨基酸組成的特異序列區(qū)域，說(shuō)明PC-1全長(zhǎng)分子極大部分的特異功能均由N端的此區(qū)域表達(dá)，為制備特異性更高的抗PC-1-46單克隆抗體提供了依據(jù)。下列說(shuō)法正確的是()PC-1分子通過(guò)激活靶基因轉(zhuǎn)錄誘導(dǎo)鼠成纖維細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化擴(kuò)增PC-1基因只需用此特異性序列所對(duì)應(yīng)的核苷酸序列作引物用哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)基因的方法驗(yàn)證PC-1的轉(zhuǎn)錄激活作用時(shí)，必須用受精卵做受體細(xì)胞可將PC-1基因?qū)牍撬枇黾?xì)胞制備抗PC-1-46單克隆

5、抗體7細(xì)胞毒素可有效殺傷腫瘤細(xì)胞，但沒(méi)有特異性，在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)還會(huì)對(duì)健康細(xì)胞造成傷害。下圖是特異性殺死腫瘤細(xì)胞的過(guò)程，圖中抗體是利用單克隆抗體技術(shù)制備的。下列敘述正確的是（）單克隆抗體制備過(guò)程中需要使用Taq酶抗體與細(xì)胞毒素結(jié)合增加了細(xì)胞毒素的殺傷力細(xì)胞毒素具有與腫瘤細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生特異性結(jié)合的能力溶酶體破裂導(dǎo)致其中的蛋白酶及其它水解酶釋放，加速了腫瘤細(xì)胞凋亡（多選題）8.科學(xué)家將c-Mye、KIf4、Sox2和Oct-3/4這四個(gè)關(guān)鍵基因轉(zhuǎn)入高度分化的小鼠成纖維細(xì)胞內(nèi)，細(xì)胞在一定某件下轉(zhuǎn)變成iPS細(xì)胞，在適當(dāng)條件誘導(dǎo)下，iPS細(xì)胞可以定向分化成各種細(xì)胞。下列敘述錯(cuò)誤的是（）丹細(xì)胞呻

6、冊(cè)川胞成纖維細(xì)胞肌細(xì)胞成骨自|胞e-MycKI弭丹細(xì)胞呻冊(cè)川胞成纖維細(xì)胞肌細(xì)胞成骨自|胞e-MycKI弭R7TffOct-3/4Sox2小鼠的成纖維細(xì)胞1圖示過(guò)程運(yùn)用了轉(zhuǎn)基因技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)iPS細(xì)胞分化成各種組織細(xì)胞過(guò)程中DNA序列有不同的改變iPS細(xì)胞的分裂、分化能力比造血干細(xì)胞弱小鼠成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)變成iPS細(xì)胞與植物組織培養(yǎng)的脫分化過(guò)程類似（多選題）9.某實(shí)驗(yàn)小組為了探究四倍體馬鈴薯原生質(zhì)體的培養(yǎng)條件和再生能力，進(jìn)行了原生質(zhì)體的獲取和培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖所示。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）懸浮原生質(zhì)體愈傷組織叢生芽u過(guò)程要在清水中用纖維素酶和果膠酶處理植物細(xì)胞過(guò)程培育愈傷組織時(shí)須提供無(wú)菌

7、環(huán)境和適宜溫度等條件過(guò)程一般需要光照處理，過(guò)程則需要遮光處理過(guò)程與培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素用量的比例不同二、非選擇題10為了準(zhǔn)確篩選沒(méi)有明顯表型特征的某種微生物，我國(guó)科研人員采用了如圖1所示的流程。獲得基因圖1衣達(dá)抗原膜蛋白）10為了準(zhǔn)確篩選沒(méi)有明顯表型特征的某種微生物，我國(guó)科研人員采用了如圖1所示的流程。獲得基因圖1衣達(dá)抗原膜蛋白）熒冊(cè)記注射占亙克隆抗休，亠（1）據(jù)圖分析，科研人員利用目標(biāo)微生物編碼膜蛋白的，構(gòu)建表達(dá)載體，并導(dǎo)入用處理的大腸桿菌細(xì)胞中，獲取大量膜蛋白。（2）用獲取的膜蛋白作為抗原，利用兔子制備單克隆抗體的具體流程是：。（3）將上述帶有熒光的單克隆抗體與待分離微生物群體混合，

8、目的是目標(biāo)微生物。用流式細(xì)胞儀分離不同熒光強(qiáng)度的細(xì)胞，結(jié)果如圖2所示。對(duì)結(jié)果進(jìn)行比較，應(yīng)從區(qū)域（選填圖中數(shù)字）的細(xì)胞中篩選目標(biāo)微生物。細(xì)胞大小相對(duì)值相對(duì)熒光強(qiáng)度相對(duì)熒光強(qiáng)Mfa細(xì)胞大小相對(duì)值相對(duì)熒光強(qiáng)度相對(duì)熒光強(qiáng)Mfai,3託LOo4ooom11111（4）為及時(shí)確診新冠病毒感染引起的呼吸道傳染病，科學(xué)家研制了基因檢測(cè)試劑盒，其機(jī)理為：分離待測(cè)個(gè)體細(xì)胞的總RNA，在酶的作用下得到相應(yīng)的DNA，再利用技術(shù)擴(kuò)增將樣本中微量的病毒信息放大，最后以熒光的方式讀取信號(hào)。這種方法也會(huì)出現(xiàn)假陰性現(xiàn)象，請(qǐng)分析其中的原因（答出1點(diǎn)即可）。中國(guó)甜柿的自然脫澀與乙醛代謝關(guān)鍵酶基因（PDC）密切相關(guān)，推測(cè)澀味程度可能

9、與PDC基因的表達(dá)情況有關(guān)。（1）啟動(dòng)子位于基因首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，同時(shí)啟動(dòng)子區(qū)域還存在著許多調(diào)控蛋白的結(jié)合位點(diǎn)，RNA聚合酶和調(diào)控蛋白共同影響了基因的。（2）為篩選PDC基因的調(diào)控蛋白，科研人員進(jìn)行了下列實(shí)驗(yàn)。PDC基因的啟動(dòng)子序列未知,為獲得大量該基因啟動(dòng)子所在片段，可利用限制酶將基因組DNA進(jìn)行酶切，然后在的作用下將已知序列信息的接頭片段連接在PDC基因的上游，根據(jù)和PDC基因編碼序列設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR.利用質(zhì)粒A（圖1）構(gòu)建含有PDC基因啟動(dòng)子片段的重組質(zhì)粒并導(dǎo)入代謝缺陷型酵母菌，用不含的培養(yǎng)基可篩選出成功轉(zhuǎn)化的酵母菌Y1H。質(zhì)粒G(圖2)上的AD基因表達(dá)出的AD蛋白

10、與啟動(dòng)子足夠靠近時(shí)，能夠激活后續(xù)基因轉(zhuǎn)錄，因此需獲得待測(cè)蛋白與AD蛋白的融合蛋白用于后續(xù)篩選?？蒲腥藛T從中國(guó)甜柿中提取RNA，將逆轉(zhuǎn)錄形成的各種cDNA與質(zhì)粒G連接后導(dǎo)入酵母菌，此時(shí)應(yīng)選擇質(zhì)粒G中的位點(diǎn)(填序號(hào)15)作為cDNA的插入位點(diǎn)，最終獲得攜帶不同cDNA片段的酵母菌群Y187。重組酵母Y187與Y1H能夠進(jìn)行接合生殖，形成的接合子含有兩種酵母菌質(zhì)粒上的所有基因。若接合子能在含有金擔(dān)子素的培養(yǎng)基中生存，則推測(cè)待測(cè)蛋白是PDC基因的調(diào)控蛋白，請(qǐng)結(jié)合圖示闡述作出該推測(cè)的理由。122020年世界性的新型冠狀病毒肺炎大流行，為了能更好地對(duì)病毒展開(kāi)相關(guān)研究。I.科學(xué)家需要分離和培養(yǎng)病毒。如圖是其

11、流程示意圖。樣*接種加3弄怵系900pL用于后續(xù)研究V嚅胖蔽廠/樣*接種加3弄怵系900pL用于后續(xù)研究V嚅胖蔽廠/900口V陳障液(1卜爲(wèi)條桃岬叫LlOOuL10D|iLIOOjaLAAA純化將采集到的病毒樣本進(jìn)行稀釋，如圖1所示，用吸取1OOuL的病毒樣本，注入到中，使樣本與稀釋液充分混勻，依次操作后，號(hào)試管中病毒濃度是樣本的倍。根據(jù)病毒的特征，培養(yǎng)體系A(chǔ)中必須含有，病毒才能復(fù)制增殖。為鑒定B是目的病毒，需進(jìn)行檢測(cè)或抗原抗體檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)所有廢棄物必須進(jìn)行嚴(yán)格的處理。II.2020年3月16日，中國(guó)科學(xué)家陳薇院士團(tuán)隊(duì)研制的重組新冠疫苗通過(guò)臨床研究注冊(cè)審評(píng)，獲批進(jìn)入臨床試驗(yàn)。重組新冠疫

12、苗的制備流程如圖。人5型腺病Ad5)八新胞融狀橋滝17T7777重組新冠疫苗CSARS-CnV-?)RNAcDNAS魚(yú)白嘿因的栓測(cè)與鑒定步驟需要酶，作為原料。步驟需要酶。人s型腺病毒的作用是。其上具有識(shí)別和結(jié)合的部位，是s蛋白基因在受體細(xì)胞中啟動(dòng)表達(dá)的關(guān)鍵。通過(guò)PCR技術(shù)可對(duì)s蛋白基因進(jìn)行專一性擴(kuò)增，需要設(shè)計(jì)種引物，引物是一小段。為了便于擴(kuò)增的s蛋白基因與表達(dá)載體連接，需在引物的端加上限制酶的酶切位點(diǎn)，且常在兩引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制酶的酶切位點(diǎn)，主要目的是。在設(shè)計(jì)引物時(shí)應(yīng)滿足的要求有：引物只能與結(jié)合；引物自身不能存在，原因是避免引物自身通過(guò)折疊形成雙鏈區(qū)；兩種引物之間也不能堿基互補(bǔ)配對(duì)，原因

13、是防止引物之間結(jié)合形成雙鏈，避免降低了。PCR反應(yīng)一般分為94C變性、溫度降到55C復(fù)性(引物和模板配對(duì))、溫度上升到72C三個(gè)步驟，經(jīng)過(guò)多次循環(huán)完成。第三階段選用72C是綜合考慮了兩個(gè)因素，這兩個(gè)因素是防止DNA變性和重組疫苗注入志愿者體內(nèi)后，S蛋白基因指導(dǎo)合成的S蛋白作為，刺激機(jī)體產(chǎn)生能與之相結(jié)合的抗體，抗體的分泌量可作為檢測(cè)疫苗對(duì)志愿者免疫效果的指標(biāo)。參加臨床試驗(yàn)的志愿者需要滿足的條件之一是件之一是(填“有”或“無(wú)”)SARS-CoV-2感染史。參考答案1-5.CDBDC6-9.ADBCAC10.1)基因(序列)CaCl2(2)用膜蛋白作為抗原免疫兔子，取脾臟中的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選得到單個(gè)分泌抗膜蛋白抗體的雜交瘤細(xì)胞，進(jìn)行克隆培養(yǎng)標(biāo)記逆轉(zhuǎn)錄PCR擴(kuò)增后的DNA含量較低、試劑盒靈敏度不夠高11.(1)轉(zhuǎn)錄水平(2)DNA連接酶接頭片段尿嘧啶4接合子中待測(cè)蛋白與AD蛋白形成了融合蛋白，如果待測(cè)蛋白是PDC基因的調(diào)控蛋白，它就能與PDC基因啟動(dòng)子