微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備

1、微生物試驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第1頁2GB4789.1-總則：2.1環(huán)境與設(shè)施2.1.1試驗(yàn)室環(huán)境不應(yīng)影響檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性。2.1.2試驗(yàn)區(qū)域應(yīng)與辦公區(qū)域顯著分開。2.1.3試驗(yàn)室工作區(qū)域面積和總體布局應(yīng)能滿足從事檢測(cè)工作需求，試驗(yàn)室布局應(yīng)采取單方向工作流程，防止交叉污染。2.1.4試驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度、照度、噪聲和潔凈度等應(yīng)符合工作要求。2.1.5食品樣品檢驗(yàn)應(yīng)在潔凈區(qū)域進(jìn)行，潔凈區(qū)域應(yīng)有顯著標(biāo)示。2.1.6病原微生物分離判定工作應(yīng)在二級(jí)或以上生物安全試驗(yàn)室進(jìn)行。微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第2頁3普通分為以下區(qū)域:接樣室、樣品保留室、培養(yǎng)基配制室、潔凈室、生化室、培養(yǎng)室、儀

2、器室和洗刷消毒室，另外還有辦公室。微生物試驗(yàn)室分區(qū)微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第3頁4微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第4頁5試驗(yàn)室關(guān)鍵工作間照度不低于350 lx,其它區(qū)域照度不低于200 lx，宜采取吸頂式防水潔凈照明燈。試驗(yàn)室溫度宜控制1826范圍內(nèi)。試驗(yàn)室相對(duì)濕度宜控制30%70%范圍內(nèi)。在安全柜開啟情況下，關(guān)鍵工作間噪聲應(yīng)小于68 dB(A)。 -GB 19489- 試驗(yàn)室 生物安全通用要求微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第5頁6病原微生物分類國(guó)家依據(jù)病原微生物傳染性、感染后對(duì)個(gè)體或者群體危害程度，將病原微生物分為四類：第一類 指能夠引發(fā)人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病微生物，以及我國(guó)還未發(fā)覺或者已經(jīng)宣告

3、毀滅微生物。（天花病毒）第二類 指能夠引發(fā)人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較輕易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳輸微生物。（甲、乙型肝炎病毒）第三類 指能夠引發(fā)人類或者動(dòng)物疾病，但普通情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不組成嚴(yán)重危害，傳輸風(fēng)險(xiǎn)有限，試驗(yàn)室感染后極少引發(fā)嚴(yán)重疾病，而且具備有效治療和預(yù)防辦法微生物。（沙門氏菌）第四類 指在通常情況下不會(huì)引發(fā)人類或者動(dòng)物疾病微生物。微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第6頁7微生物試驗(yàn)室分級(jí) 依據(jù)對(duì)所操作生物因子采取防護(hù)辦法，將試驗(yàn)室安全防護(hù)水平（bio-safety level，BSL）分為14級(jí)，BSL-1防護(hù)水平最低。病原微生物試驗(yàn)室一類 四級(jí) 二類 三級(jí)三

4、類（食品致病菌） 二級(jí)四類 一級(jí) 二級(jí)生物安全柜三級(jí)微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第7頁8級(jí)別靜態(tài)潔凈度級(jí)別最小換氣次數(shù)(次/h)與室外大氣壓壓差值(Pa)與相鄰區(qū)域壓差值(Pa)溫度相對(duì)濕度%噪聲dB(A)最低照度lx一級(jí)_可開窗級(jí)_可開窗_1827307060300三級(jí)7或812或1530101825307060300四級(jí)7或812或1560251825307060300微生物試驗(yàn)室主要技術(shù)指標(biāo)-GB 50346- 生物安全試驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第8頁9BSL-2微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第9頁10潔凈室應(yīng)含有空氣除菌過濾單向流空氣裝置，操作區(qū)潔

5、凈度100級(jí)或放置同等級(jí)別超凈工作臺(tái)室內(nèi)溫度控1826，相對(duì)濕度45%65%緩沖間及操作室內(nèi)均應(yīng)設(shè)置能到達(dá)空氣消毒效果紫外燈或其它適宜消毒裝置，空氣潔凈級(jí)別不一樣相鄰房間之間靜壓差應(yīng)大于5Pa，潔凈室（區(qū)）與室外大氣靜壓差大于10Pa。無菌室內(nèi)照明燈應(yīng)嵌裝在天花板內(nèi)，室內(nèi)光照應(yīng)分布均勻，光照度不低于300lx。 -中國(guó)藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第10頁11潔凈室分級(jí)-GB 50346- 生物安全試驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范潔凈度級(jí)別 塵粒最大允許數(shù)/立方米 0.5m塵粒數(shù)5m塵粒數(shù)微生物最大允許數(shù)浮游菌/立方米沉降菌/皿100級(jí)3,50005110,000級(jí)350,0002,0001

6、003100,000級(jí)3,500,00020,00050010300,000級(jí)10,500,00060,000100015微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第11頁12無菌室管理無菌室在使用前和使用后應(yīng)進(jìn)行有效消毒。無菌室消毒效果應(yīng)最少每?jī)芍茯?yàn)證一次。應(yīng)制訂清潔、消毒、滅菌、使用和應(yīng)急處理程序。應(yīng)建立環(huán)境監(jiān)測(cè)結(jié)果，并歸檔保留。不符合要求時(shí)應(yīng)馬上停頓使用。微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第12頁13微生物試驗(yàn)室消毒處理方法 1 紫外線消毒在室溫2025時(shí)，220V 30W 波長(zhǎng)253.7nm紫外線輻射強(qiáng)度應(yīng)70W/cm2，低于此值時(shí)應(yīng)更換。適當(dāng)數(shù)量紫外燈，確保平均每立方米應(yīng)不少于1.5W。紫外線消毒時(shí)，無菌室

7、內(nèi)應(yīng)保持清潔干燥。在無人條件下，可采取紫外線消毒，作用時(shí)間應(yīng)30min，室內(nèi)溫度20或40、相對(duì)濕度60%時(shí)，應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)照射時(shí)間。用紫外線消毒物品表面時(shí)，應(yīng)使照射表面受到紫外線直接照射，且應(yīng)到達(dá)足夠照射劑量。人員在關(guān)閉紫外燈后最少30min方可入內(nèi)操作。按照ISO18953要求，評(píng)價(jià)紫外線消毒與殺菌效果。微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第13頁14微生物試驗(yàn)室消毒處理方法 2 無菌室臭氧消毒封閉無菌室內(nèi)，無人條件下，采取20mg/m3濃度臭氧，作用時(shí)間應(yīng)30min。消毒后臭氧濃度0.2mg/m3時(shí)方可入內(nèi)操作。按照GB/T18202要求，檢測(cè)室內(nèi)臭氧濃度。微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第14頁15微生物

8、試驗(yàn)室消毒處理方法 3 甲醛熏蒸 40%甲醛溶液加高錳酸鉀。配制量：每m3需甲醛10ml，高錳酸鉀5g。最好條件是溫度為2440,濕度在65%以上。房間熏蒸消毒時(shí)間為12小時(shí)以上，消毒結(jié)束后打開門窗通風(fēng)。對(duì)居民住房要求甲醛含量小于0.1mg/m3，可對(duì)熏蒸后空間進(jìn)行檢測(cè)。微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第15頁16GB4789.1-總則：2.3 試驗(yàn)設(shè)備2.3.1試驗(yàn)設(shè)備應(yīng)滿足檢驗(yàn)工作需要，常見設(shè)備見A.1。2.3.2試驗(yàn)設(shè)備應(yīng)放置于適宜環(huán)境條件下，便于維護(hù)、清潔、消毒與校準(zhǔn)，并保持整齊與良好工作狀態(tài)。2.3.3試驗(yàn)設(shè)備應(yīng)定時(shí)進(jìn)行檢驗(yàn)和/或檢定（加貼標(biāo)識(shí)）、維護(hù)和保養(yǎng)，以確保工作性能和操作安全。2.

9、3.4試驗(yàn)設(shè)備應(yīng)有日常監(jiān)控統(tǒng)計(jì)或使用統(tǒng)計(jì)。微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第16頁17天平最大量程：100g、120g等可讀性精度：0.1mg微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第17頁18精密電子稀釋儀 樣品量：0.5-1000g（依靠系數(shù)調(diào)整）稀釋系數(shù)：2-1000液流速度：950ml/min重量誤差精度：1%能夠準(zhǔn)確釋放稀釋液重量。借助經(jīng)過消毒均質(zhì)袋，可對(duì)樣本進(jìn)行準(zhǔn)確稀釋，最大程度地降低手工接觸操作，防止樣品污染。微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第18頁19均質(zhì)機(jī)將樣品和稀釋液加入到無菌均質(zhì)袋中 ，然后將均質(zhì)袋放入拍擊式均質(zhì)器 中，關(guān)上門即開始和完成樣品處理。拍擊時(shí)間：0.199分鐘。拍擊速度：312次/秒實(shí)

10、際拍擊次數(shù)顯示，系統(tǒng)自動(dòng)調(diào)整拍擊速度。微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第19頁20電熱鼓風(fēng)干燥箱RT+10250；均勻度1% 溫度波動(dòng)0.5。用于玻璃器皿等耐熱物品烤干和滅菌。玻璃器皿等物滅菌，溫度160165，滅菌2小時(shí)。微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第20頁21高壓滅菌鍋樣式大小分為手提式高壓滅菌器、立式壓力蒸汽滅菌器、臥式高壓蒸汽滅菌器等。手提式高壓滅菌器為18L、24L、30L立式高壓蒸汽滅菌器從30L200L用于器皿、培養(yǎng)基和廢氣污染物滅菌。微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第21頁22滅菌鍋使用首先，檢驗(yàn)鍋內(nèi)蒸餾水量是否充分，第二，檢驗(yàn)個(gè)個(gè)閥門及開關(guān)是否工作正常。第三，將待滅菌物品用一層牛皮紙或兩層

11、報(bào)紙包好，一定要包完整！放入鍋內(nèi)，物與物之間一定要有空隙。第四，蓋好鍋蓋，螺母對(duì)稱擰緊，打開放氣閥，關(guān)閉閥門。第五，打開電源觀察放氣閥是否有蒸汽流出，確定后關(guān)閉放氣閥，待壓力表抵達(dá)0.1-0.15kpa（溫度121左右）時(shí)計(jì)時(shí)，15-30分鐘，關(guān)閉開關(guān)。第六，待壓力表指針歸零后，打開放氣閥，按對(duì)稱方式打開鍋蓋，取出物品。注意事項(xiàng): 1.鍋內(nèi)水必須用蒸餾水或純化水。 2.鍋蓋螺母必須對(duì)稱擰緊。 3.一定要在放氣閥出大量蒸汽在關(guān)閉 。微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第22頁23恒溫水浴鍋RT+599 恒溫波動(dòng)度 0.5 用于試驗(yàn)備用培養(yǎng)基或試劑保溫。常配置：37、42、56各一個(gè)。微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器

12、設(shè)備第23頁24恒溫培養(yǎng)箱控溫范圍：室溫+565溫度波動(dòng)度：0.2定時(shí)范圍：0999分鐘用于細(xì)菌、霉菌和酵母菌培養(yǎng)常配置：28、36、42、56各一個(gè)。微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第24頁25 超凈工作臺(tái)和生物安全柜最大區(qū)分在于送風(fēng)方式。 生物安全柜是一個(gè)負(fù)壓凈化工作臺(tái)，正確操作生物安全柜，能夠完全保護(hù)工作人員、受試樣品并預(yù)防交叉污染發(fā)生；而超凈工作臺(tái)只是保護(hù)操作對(duì)象而不保護(hù)工作人員和試驗(yàn)室環(huán)境潔凈工作臺(tái)。超凈工作臺(tái)和生物安全柜（二級(jí)A2型）微生物實(shí)驗(yàn)室布局及儀器設(shè)備第25頁26電子顯微鏡以顯微原理分類分為偏光顯微鏡、光學(xué)顯微鏡與電子顯微鏡和數(shù)碼顯微鏡。慣用物鏡可按放大率分為低倍(4)、中倍(10或20)、高倍(40)和油浸物鏡(100)。用于觀察微生物形態(tài)，便于菌