植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室

1、植物組織培育實(shí)驗(yàn)室植物組織培育實(shí)驗(yàn)室植物組織培育實(shí)驗(yàn)室植物組織培育實(shí)驗(yàn)室(組培室)規(guī)劃設(shè)計(jì)一、要求理想的組織培育實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)成立在沉靜、潔凈、遠(yuǎn)離污染源的地方，最幸虧常年主風(fēng)向的上風(fēng)方向，盡量減少污染。規(guī)?；a(chǎn)的組織培育實(shí)驗(yàn)室最好建在交通方便的地方，便于培育產(chǎn)品的運(yùn)送。實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)均需考慮兩個(gè)方面的問(wèn)題：一是所從事的實(shí)驗(yàn)的性質(zhì)，即是生產(chǎn)性的仍是研究性的，是基本層次的仍是較高層次的；二是實(shí)驗(yàn)室的規(guī)模，規(guī)模主要取決于經(jīng)費(fèi)和實(shí)驗(yàn)性質(zhì)。不論實(shí)驗(yàn)室的性質(zhì)和規(guī)模怎樣，實(shí)驗(yàn)室設(shè)置的基本源則是：科學(xué)、高效、經(jīng)濟(jì)和合用。一個(gè)組織培育實(shí)驗(yàn)室必然知足3個(gè)基本的需要：實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備（培育基制備、器皿沖洗、培育基和培育器皿滅

2、菌）、無(wú)菌操作和控制培育。其余，還可依據(jù)從事的實(shí)驗(yàn)要求來(lái)考慮協(xié)助實(shí)驗(yàn)室及其各樣附帶設(shè)備，使實(shí)驗(yàn)室更為圓滿。在進(jìn)行植物組織培育工作以前，第一應(yīng)付工作中需要哪些最基本的設(shè)備條件有個(gè)全面的認(rèn)識(shí)，以便就地取材地利用現(xiàn)有房子，或新建、改建實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)室的大小取決于工作的目的和規(guī)模。以工廠化生產(chǎn)為目的，實(shí)驗(yàn)室規(guī)模太小，則會(huì)限制生產(chǎn)，影響效率。在設(shè)計(jì)組織培育實(shí)驗(yàn)室時(shí)，應(yīng)按組織培育程序來(lái)沒(méi)計(jì)，防備某些環(huán)節(jié)倒排，惹起此后工作紛亂。植物組織培育是在嚴(yán)格無(wú)菌的條件下進(jìn)行的。要做到無(wú)菌的條件，需要必然的設(shè)備、器材和器具，同時(shí)還需要人工控制溫度、光照、濕度等培育條件。二、實(shí)驗(yàn)室構(gòu)成（一）基本實(shí)驗(yàn)室基本實(shí)驗(yàn)室包含準(zhǔn)備室、

3、沖洗滅菌室、無(wú)菌操作室、培育室、緩沖間，是組織培育實(shí)驗(yàn)所必然具備的基本條件。如進(jìn)行工廠化生產(chǎn)，年產(chǎn)4萬(wàn)-20萬(wàn)，需3-4間實(shí)驗(yàn)用房，總面積60平方米。1、準(zhǔn)備室（化學(xué)實(shí)驗(yàn)室）1/9功能：又叫化學(xué)實(shí)驗(yàn)室，進(jìn)行全部與實(shí)驗(yàn)有關(guān)的準(zhǔn)備工作：達(dá)成所使用的各樣藥品的儲(chǔ)備、稱量、溶解、器皿沖洗、培育基配制與分裝、培育基和培育器皿的滅菌、培育資料的預(yù)辦理等。要求：最好有20平方米左右。要求廣闊光明、以便于擱置多個(gè)實(shí)驗(yàn)臺(tái)和有關(guān)設(shè)備，方便多人同時(shí)工作；同時(shí)要求通風(fēng)條件好，便于氣體互換；實(shí)驗(yàn)室地面應(yīng)便于潔凈，并應(yīng)進(jìn)行防滑辦理。分類：分體式-研究性質(zhì)實(shí)驗(yàn)室，分開(kāi)的若干房間將準(zhǔn)備室分解為藥品積蓄室、培育基配制與沖洗室和

4、滅菌室等，功能明確，便于管理，但不適于大規(guī)模生產(chǎn)。通間式-規(guī)?；瘜?shí)驗(yàn)室，準(zhǔn)備室一般設(shè)計(jì)成大的通間，使試驗(yàn)操作的各個(gè)環(huán)節(jié)在同一房間內(nèi)按程序達(dá)成。準(zhǔn)備試驗(yàn)的過(guò)程在同一空間進(jìn)行，便于程序化操作與管理，試驗(yàn)中減少各環(huán)節(jié)間的連接時(shí)間，進(jìn)而提升工作效率。其余還便于培育基配制、分裝和滅菌的自動(dòng)化操作程序設(shè)計(jì)，進(jìn)而減少規(guī)?；a(chǎn)的人工勞動(dòng)，更便于無(wú)菌條件的控制和標(biāo)準(zhǔn)化操作系統(tǒng)的成立。設(shè)備：準(zhǔn)備室應(yīng)具備、藥品柜、水池、儀器、藥品、防塵櫥（擱置培育容器）、冰箱、天平、蒸餾水器、酸度計(jì)及常用的培育基配制用玻璃儀器等。2、沖洗滅菌室功能：達(dá)成各樣器具的沖洗、干燥、保留、培育基的滅菌等。要求：沖洗滅菌室依據(jù)工作量的大小

5、決定其大小，一般面積控制在30-502。在實(shí)驗(yàn)室的一側(cè)設(shè)置專用的沖洗水槽，用來(lái)沖洗玻璃器皿。中央實(shí)驗(yàn)臺(tái)還應(yīng)配置2個(gè)水槽，用于沖洗小型玻璃器皿。假如工作量大，可以購(gòu)買一臺(tái)洗瓶機(jī)。準(zhǔn)備1-2個(gè)洗液缸，專門用于沖洗對(duì)潔凈度要求很高的玻璃器皿，地面應(yīng)耐濕并排水優(yōu)秀。設(shè)備：水池、落水架、高壓滅菌鍋、超聲波沖洗器、干燥滅菌器（如烘箱）等。3、無(wú)菌操作室（接種室）2/9功能：也叫接種室，主要用于植物質(zhì)料的消毒、接種、培育物的轉(zhuǎn)移、試管苗的繼代、原生質(zhì)體的制備以及全部需要進(jìn)行無(wú)菌操作的技術(shù)程序，是植物離體培育研究或生產(chǎn)中最重點(diǎn)的一步。要求：接種室宜小不宜大，一般78平米（10-20平米）即可，其規(guī)模依據(jù)實(shí)驗(yàn)需

6、要和環(huán)境控制的難易程度而定。要求關(guān)閉性好，干爽沉靜，潔凈光明，能較長(zhǎng)時(shí)間保持無(wú)菌，所以不易設(shè)在簡(jiǎn)單受潮的地方；地面、天花板及四壁盡可能密閉圓滑，易于潔凈和消毒；配置拉動(dòng)門，以減少開(kāi)關(guān)門時(shí)的空氣擾動(dòng)；為便于消毒辦理，地面及內(nèi)墻壁都應(yīng)采納防水和耐腐化資料；為了保持潔凈，無(wú)菌室應(yīng)防備空氣對(duì)流。接種室要求在適合地點(diǎn)吊裝12盞紫外線滅菌燈，用以照耀滅菌。最好安裝一小型空調(diào)，使室溫可控，這樣可使門窗關(guān)閉，減少與外界空氣對(duì)流。一般新建實(shí)驗(yàn)室的無(wú)菌室在使用以前應(yīng)進(jìn)行滅菌辦理，辦理方法是甲醛和高錳酸鉀熏蒸，并需按期滅菌辦理，還可用紫外線照耀1-2h/周，或每次使用前照耀10-30min。設(shè)備：紫外燈、空調(diào)、解剖

7、鏡、消毒器、酒精燈、接種器材（接種鑷子、剪刀、解剖刀、接種針），、和擱架，還有超凈工作臺(tái)和整套滅菌接種儀器、藥品等。4、培育室功能：對(duì)接種到培育瓶等器皿中的植物離體資料進(jìn)行控制條件下的培育，不論是研究性實(shí)驗(yàn)室仍是生產(chǎn)性實(shí)驗(yàn)資料進(jìn)行培育的場(chǎng)所。要求：約需10-20平方米左右，培育室的大小可依據(jù)需要培育架的大小、數(shù)量、及其余隸屬設(shè)備而定，其設(shè)計(jì)以充分利用空間和節(jié)儉能源為原則。基本要求是可以控制光照和溫度，并保持相對(duì)的無(wú)菌環(huán)境，所以，培育室應(yīng)保持潔凈和適合干燥；為知足植物培育資料生長(zhǎng)對(duì)氣體的需要，還應(yīng)安裝排風(fēng)窗和換氣扇等培育室的換氣裝置；為節(jié)儉能源和空間，應(yīng)配置適合的培育架，并安裝日光燈照明。研究用

8、實(shí)驗(yàn)室，平?？梢罁?jù)光照時(shí)間設(shè)置成長(zhǎng)日照、中日照、短日照培育室，也可以依據(jù)溫度設(shè)置成高平和低溫培育室，每一個(gè)培育室的空間不宜過(guò)大，3/9便于對(duì)條件的平均控制。進(jìn)行精良培育種類如細(xì)胞培育和原生質(zhì)體培育，可采納光照培育箱或人工天氣箱取代培育室。為了控制培育室的溫度和光照時(shí)間及其強(qiáng)度，培育室的房間不要窗戶，但應(yīng)當(dāng)留一個(gè)通氣窗，并安上排氣扇。室內(nèi)溫度由空調(diào)控制，光照由日光燈控制。天花板和內(nèi)墻最好用塑料鋼板裝飾，地面用水磨石或瓷磚鋪設(shè)，一般要分兩間，一為光照培育室，一為暗培育室。培育室外應(yīng)有一預(yù)備間或走廊。培育資料放在培育架上培育。培育架大多由金屬制成，一般設(shè)5層，最低一層離地高約lOcm，其余每層間隔3

9、0cm左右，培育架即高17m左右。培育架長(zhǎng)度都是依據(jù)日光燈的長(zhǎng)度而設(shè)計(jì)，如采納40W日光燈，則長(zhǎng)I3m，30W的長(zhǎng)lm，寬度一般為60cm。日光燈一般用40W，固定在培育架的側(cè)面或擱板的下邊，每層有兩支日光燈，距離在20cm，光照強(qiáng)度為2000-3000lx。培育室最重要的因子是溫度，一般保持在2027左右，具備產(chǎn)熱裝置，并安裝窗式或立式空調(diào)機(jī)。因?yàn)闊釒е参锖秃畮е参锏炔灰粯訕臃N類要求不一樣樣溫度，最好不一樣樣種類有不一樣樣的培育室。室內(nèi)濕度也要求恒定，相對(duì)濕度以保持在70%80%為好，可安裝加濕器?？刂乒庹諘r(shí)間可安裝準(zhǔn)時(shí)開(kāi)關(guān)鐘，一般需要每日光照10-16h，也有的需要連續(xù)照明。短日照植物需要

10、短日照條件，長(zhǎng)日照植物需要長(zhǎng)日照條件?，F(xiàn)代組培實(shí)驗(yàn)室大多設(shè)計(jì)為采納天然太陽(yáng)光照作為主要能源，這樣不單好夠節(jié)儉能源，并且組培苗接受太陽(yáng)光生長(zhǎng)優(yōu)秀，馴化易成活。在陰雨天可用燈光作增補(bǔ)。設(shè)備：培育架（控溫控光控濕）、搖床、轉(zhuǎn)床、自動(dòng)控時(shí)器、紫外燈、光照培育箱或人工天氣箱、生化培育箱、邊臺(tái)實(shí)驗(yàn)臺(tái)用于拍攝培育物生長(zhǎng)情況，除濕機(jī)、顯微鏡、溫濕度計(jì)、空調(diào)等。5、緩沖間功能：是進(jìn)入無(wú)菌室前的一個(gè)緩沖場(chǎng)所，減少人體從外界帶入的塵埃等污染物。工作人員在此換上工作服、拖鞋，戴上口罩，才能進(jìn)入無(wú)菌室和培育室。進(jìn)入無(wú)菌操作室前在此換衣?lián)Q鞋，以減少出入時(shí)帶入接種室雜菌。4/9要求：緩沖間需3-5平方米，可建在準(zhǔn)備室外或無(wú)

11、菌操作室外，應(yīng)保持潔凈無(wú)菌；備有鞋架和衣帽掛鉤，并有潔凈的實(shí)驗(yàn)用拖鞋、已滅菌過(guò)的工作服；墻中用1-2盞紫外燈準(zhǔn)時(shí)照耀，對(duì)衣物進(jìn)行滅菌。緩沖間最好也安一盞紫外線滅菌燈，用以照耀滅菌。緩沖間的門應(yīng)當(dāng)與接種室的門錯(cuò)開(kāi)，兩個(gè)門也不要同時(shí)開(kāi)啟，以保證無(wú)菌室不因開(kāi)門和人的出入帶進(jìn)雜菌。設(shè)備：1-2盞紫外燈、水槽、鞋帽架、柜子、滅菌后的工作服、拖鞋、口罩。（二）協(xié)助依據(jù)研究或生產(chǎn)的需要而配套設(shè)置的專門實(shí)驗(yàn)室，主要用于細(xì)胞學(xué)察看和生理生化分析等。1、細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室功能：用于對(duì)培育物的察看分析與培育物的計(jì)數(shù)，對(duì)培育資料進(jìn)行細(xì)胞學(xué)判斷和研究，由制片室和顯微察看室構(gòu)成。制片是獲得顯微察看數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)，裝備有切片機(jī)、磨刀

12、機(jī)、溫箱及樣品辦理和切片染色的設(shè)備。應(yīng)有通風(fēng)櫥和廢液辦理設(shè)備。顯微察看室主假如顯微鏡和圖像拍攝、辦理設(shè)備。要求：光明、潔凈、干燥、防備濕潤(rùn)和塵埃污染。設(shè)備：雙筒實(shí)體顯微鏡、顯微鏡、倒置顯微鏡等。2、生化分析實(shí)驗(yàn)室功能：培育細(xì)胞產(chǎn)物為主要目的的實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)成立相應(yīng)的分析化驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室，隨時(shí)對(duì)培育物成分進(jìn)行取樣檢查。大型次生代謝物生產(chǎn)，還需有效分別實(shí)驗(yàn)室。三、儀器設(shè)備和器皿器具一、基本設(shè)備配置（一）常例設(shè)備1、天平5/9組織培育實(shí)驗(yàn)室需要2-3臺(tái)不一樣樣精度的天平。感量0.001g的天平（分析天平）和感量0.0001g的天平（電子天平）用于稱量微量元素和一些較高精準(zhǔn)度的實(shí)驗(yàn)用品。感量0.01g和0.1g

13、的天平，用于大批元素母液配制和一些用量較大的藥品的稱量。2、冰箱各樣維生素和激素類藥品以及培育基母液均需低溫報(bào)存，某些試驗(yàn)還需植物質(zhì)料進(jìn)行低溫辦理，一般一般冰箱即可。3、酸度計(jì)用于測(cè)定培育基及其余溶液的pH，一般要求可測(cè)定pH范圍1-14之間，精0.01即可。4、離心計(jì)用于細(xì)胞、原生質(zhì)體等活細(xì)胞分別，亦用于培育細(xì)胞的細(xì)胞器、核酸以及蛋白質(zhì)的分別提取。依據(jù)分別物質(zhì)不一樣樣配置不一樣樣種類的離心計(jì)。細(xì)胞、原生質(zhì)體等活細(xì)胞的分別用低速離心計(jì)；核酸、蛋白質(zhì)分別用高速冷凍離心計(jì)；規(guī)?；a(chǎn)次生產(chǎn)物，還需選擇大型離心分別系統(tǒng)。5、加熱器用于培育基的配制。研究性實(shí)驗(yàn)室一般采納帶磁力攪拌功能的加熱器，規(guī)?；?/p>

14、型實(shí)驗(yàn)室用大功率加熱和電動(dòng)攪拌系統(tǒng)。6、其余純水器、分裝設(shè)備（二）滅菌設(shè)備保持相對(duì)得無(wú)菌環(huán)境是組織培育實(shí)驗(yàn)室的基本要求。6/91、高壓滅菌鍋用于培育基、玻璃器皿以及其余可高溫滅菌用品的滅菌，依據(jù)規(guī)模大小有手提式、立式、臥式等不一樣樣規(guī)格。2、干熱消毒柜用于金屬工具如鑷子、剪刀、解剖刀，以及玻璃器皿的滅菌。一般采納200左右的一般或遠(yuǎn)紅外消毒柜。3、過(guò)濾滅菌器用于一些酶制劑、激素以及某些維生素等不可以高壓滅菌試劑的滅菌，主要有真空抽濾式和注射器式4、紫外燈方便經(jīng)濟(jì)的控制無(wú)菌環(huán)境的裝置，緩沖間、接種室和培育室必備。（三）無(wú)菌操作設(shè)備1、接種箱是使用較早的最簡(jiǎn)單的無(wú)菌裝置，主體為玻璃箱罩、進(jìn)口有袖罩

15、，內(nèi)裝紫外燈和日光燈，使用時(shí)對(duì)無(wú)菌室要求較高。2、凈化工作臺(tái)其操作臺(tái)面是半開(kāi)放區(qū)，具方便、操作暢快長(zhǎng)處，經(jīng)過(guò)過(guò)濾的空氣連續(xù)不停吹出，大于0.03um直徑的微生物很難在工作臺(tái)的操作空間逗留，保持了較好的無(wú)菌環(huán)境。因?yàn)檫^(guò)濾器吸附微生物，使用一段時(shí)間后過(guò)濾網(wǎng)易擁擠，所以應(yīng)按期改換。（四）培育設(shè)備培育設(shè)備是指依據(jù)需要所采納的不一樣樣規(guī)格和控制精度的用于植物細(xì)胞、組織和器官培育的設(shè)備和設(shè)備。7/91、培育架當(dāng)前全部植物組織培育實(shí)驗(yàn)室植株生殖培育的通用設(shè)備。成本低、設(shè)計(jì)靈巧、可充分利用培育空間，以操作方便、最大限度利用培育空間為原則。一般4-5層，層間間隔40-50cm，光照強(qiáng)度可依據(jù)培育植物特色來(lái)確立，

16、一般每架上裝備2-4盞日光燈。2、培育箱細(xì)胞培育、原生質(zhì)體培育等要求精準(zhǔn)培育的實(shí)驗(yàn)，可用光照培育箱、CO2培育箱、濕度控制培育箱等培育。3、搖床進(jìn)行液體培育時(shí)，為改良通氣情況，可用振蕩培育箱或搖床。4、生物反響器進(jìn)行植物細(xì)胞生產(chǎn)次生產(chǎn)物的實(shí)驗(yàn)室，還需生物反響器。（五）其余設(shè)備可安裝時(shí)間程序控制器、溫度控制系統(tǒng)或空調(diào)；實(shí)體顯微鏡、倒置式生物顯微鏡及配套的拍照、錄像和圖像辦理設(shè)備；電泳儀、萃取和層析設(shè)備、紫外分光光度計(jì)、高效液相色譜儀、氣相色譜儀、酶聯(lián)免疫測(cè)定系統(tǒng)。四、培育容器與器具培育容器指盛有培育基并供給培育物生長(zhǎng)空間的無(wú)菌置，培育器具指培育物接種封口所用的各樣金屬或塑料制品，實(shí)驗(yàn)室必備。（一）培育容器包含各樣規(guī)格