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文檔簡介
1、精選文檔精選文檔PAGEPAGE7精選文檔PAGE專題2細胞工程2.11植物細胞工程的基本技術(shù)教案一、學(xué)習(xí)目標(biāo)1、簡述植物組織培養(yǎng)和植物體細胞雜交技術(shù)。2、試試進行植物組織培養(yǎng)。學(xué)習(xí)重點1、植物組織培養(yǎng)的原理和過程2、植物體細胞雜交的原則學(xué)習(xí)難點植物組織培養(yǎng)的實驗二、學(xué)習(xí)過程(一)、細胞工程1觀點:應(yīng)用和作,依照人的意向來改變細胞內(nèi)的的原理和方法,經(jīng)過或獲取或上的操的一門綜合科學(xué)技術(shù)。2分類:依據(jù)操作對象不一樣,可分為、。(二)、植物細胞的全能性1、植物細胞的基本構(gòu)造包含、。2、植物細胞主要的增殖方式是,細胞分化是指,_原由是_。3、全能性是指,表現(xiàn)為全能性的原由是。4在理論上,生物的任何一個
2、細胞都,但在生物的生長發(fā)育過程中,細胞并不表現(xiàn),-而是分化成各樣。5特定的時間和空間條件下,細胞中的基因會有地表達出各樣,分化形成不一樣的細胞,從而組成生物體的不一樣。(三)、植物組織培養(yǎng)技術(shù)1原理:植物細胞擁有,擁有某種生物所有遺傳信息的任何一個細胞,都具有發(fā)育成的潛能。2過程脫分化_再分化幼根和芽或離體植物的組織發(fā)育胚狀體完好植株。3細胞脫分化:已的細胞經(jīng)過引誘后,失掉其獨有的而轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只毎倪^程。4植物組織培養(yǎng):在和的條件下,將的植物器官、組織、細胞,培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,賜予適合的培養(yǎng)條件,引誘其產(chǎn)生、叢芽,最后形成完好植株。(四)、胡蘿卜的組織培養(yǎng)1、實驗原理生物體細胞一般都
3、是由受精卵經(jīng)過有絲分裂形成的,因此都含有該生物的全套的遺傳信息,都擁有發(fā)育成完好個體的潛能。所以,植物體的根、莖、葉細胞都擁有,在必定的營養(yǎng)和激素條件下,能夠脫分化形成。將愈傷組織轉(zhuǎn)接到含有不一樣激素成分的培養(yǎng)基上,就能夠引誘其再分化生成胚狀體或叢芽,從而發(fā)育成。2、實驗步驟將用自來水充分洗凈,削去外皮,并切成段。用酒精棉球擦手。在超凈工作臺(或接種箱)大將胡蘿卜段用酒精溶液消毒30s后,立刻用沖洗23次,再用辦理30min后,立刻用無菌水沖洗23()次。用的濾紙吸去胡蘿卜段表面的水分。而后,在瓷磚上,用無菌的解剖刀將胡蘿卜段切成1cm厚的橫切片,再選用有的部位,切取1cm。左右的小塊。將接種
4、到培養(yǎng)基上,用錫箔紙封蓋瓶口,并用橡皮筋扎緊。而后,在培養(yǎng)瓶上貼上標(biāo)簽,寫明資料名稱、接種日期和小組號。將接種后的胡蘿卜組織塊,放在恒溫避光條件下培養(yǎng)。4d后,檢查培養(yǎng)資料的污染狀況;14d后,察看愈傷組織的生長狀況。而后,在恒溫箱中持續(xù)避光培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中,注意按期察看和記錄愈傷組織的生長狀況。培養(yǎng)一段時間后,將生長優(yōu)秀的轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上,培養(yǎng)一段時間后,胡蘿卜的愈傷組織就能夠引誘出。而后將試管苗移栽到大田,培養(yǎng)成。3、注意事項外植體的選擇與制備選擇外植體時,因為外植體的脫分化難易因植物種類、器官根源及生理狀況的不一樣而有很大差別,所以,選擇哪些作為外植體應(yīng)當(dāng)注意。一般來講,煙草、胡蘿卜
5、,植物的花和幼嫩的組織脫分化相對較易,而植物的莖、葉和成熟的老組織則較難。制備外植體第一要消毒,其次要選用有形成層的部分,因形成層細胞易脫分化。植物組織培養(yǎng)注意的重點培養(yǎng)基包含所有操作工具都應(yīng)進行消毒和滅菌,提防雜菌污染。需在無菌條件下操作。接種,繼代培養(yǎng)的轉(zhuǎn)移都應(yīng)在接種箱內(nèi)進行。關(guān)于植物組織培養(yǎng)來說,光照條件特別重要,包含光照強度、時間和波長。但在由高度分化的組織形成愈傷組織的引誘階段常常要暗培養(yǎng),而在分化形成試管苗的重生的過程中一定要有光照。引誘形成愈傷組織階段的暗培養(yǎng)有益于細胞的脫分化產(chǎn)生愈傷組織,假如在光照條件下簡單分化產(chǎn)生維管等組織,不利于產(chǎn)生大批的愈傷組織。由愈傷組織經(jīng)細胞有絲分裂
6、和分化形成試管苗的過程中需要光照,原由是葉中葉綠素的合成需要光照條件。(五)、植物體細胞雜交技術(shù)1觀點:不一樣栽種物的,在必定條件下交融成,并把雜種細胞培養(yǎng)成新的的技術(shù)。2過程纖維素酶人工引誘離體的細胞果膠酶不一樣細胞原生質(zhì)體原生質(zhì)體交融雜種細胞雜栽種株。3植物體細胞雜交步驟:去掉細胞壁,分別出有活力的原生質(zhì)體,當(dāng)前最常用的去細胞壁的方法是酶解法,也就是在平和條件下用纖維素酶、果膠酶去除植物細胞的細胞壁。不一樣植物體細胞原生質(zhì)體交融,一定經(jīng)過物理法和化學(xué)法來引誘交融。物理方法有:離心、振動、電激等促進原生質(zhì)體交融?;瘜W(xué)法是用聚乙二醇(PEG)作為引誘劑來引誘交融。交融后重生出細胞壁。用植物組織
7、培養(yǎng)方法進行培養(yǎng),可獲取雜栽種株。如圖在此過程中需要注意的問題有:植物體細胞雜交過程中,植物細胞交融所依照的生物學(xué)原理是細胞膜的流動性;植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是細胞的全能性。體細胞交融成功以后,既有AB型雜種細胞,還可以形成AA型和BB型兩種交融細胞,但只有AB型細胞是植物體細胞雜交所形成的雜種細胞,所以在雜種細胞形成后還應(yīng)有一個挑選過程。當(dāng)前常用的去除細胞壁的方法是酶解法,保證了原生質(zhì)體活性。植物體細胞雜交達成的標(biāo)記是新細胞壁的形成。植物體細胞雜交過程仍以植物組織培養(yǎng)為前提,經(jīng)過植物組織培養(yǎng)達成雜栽種株的培養(yǎng)過程。植物體細胞雜交的最大打破是戰(zhàn)勝遠緣雜交不親和的阻礙,可是當(dāng)前仍有很多理論和技術(shù)
8、問題沒有解決,離推行應(yīng)用仍有必定距離。三、反省總結(jié).本節(jié)學(xué)習(xí)了植物組織培養(yǎng)和植物體細胞雜交技術(shù)并試試進行植物組織培養(yǎng)。本節(jié)課的講堂上師生主要解決植物組織培養(yǎng)、植物體細胞雜交技術(shù)的過程、特色、以及學(xué)生學(xué)習(xí)過程中易忘、易混點等,最后進行當(dāng)堂檢測,課后進行延長拓展,以達到提升講堂效率的目的。四、當(dāng)堂檢測、相關(guān)全能性的表達,不正確的選項是A受精卵在自然條件下能使后輩細胞形成完好個體,所以全能性最高B生物體內(nèi)細胞因為分化,全能性不可以表達C卵細胞與受精卵同樣,細胞未分化,全能性很高D植物細胞離體培養(yǎng)在必定條件下能表現(xiàn)出全能性2、在生物體內(nèi),細胞沒有表現(xiàn)出全能性,而是分化為不一樣的組織、器官,是因為A基因
9、的表達有選擇性B不一樣的細胞內(nèi)基因不完好同樣C細胞喪失了全能性D在個體發(fā)育的不一樣時期,細胞內(nèi)的基因發(fā)生了變化3、植物體細胞交融達成的標(biāo)記是()A產(chǎn)生新的細胞壁C細胞質(zhì)發(fā)生交融B細胞膜發(fā)生交融D細胞核發(fā)生交融4、用不一樣栽種物的兩個體細胞交融成一個雜種細胞的過程。該過程是指()A不一樣植物的精子和卵細胞的交融B不一樣植物的原生質(zhì)體的交融C完好的兩個體細胞的交融D植物花粉細胞的兩兩交融課后練習(xí)與提升1、以下細胞的全能性最高的是()A、植物的卵細胞C、被子植物的受精卵B、植物的花粉D、被子植物的葉肉細胞2以下屬于組織培養(yǎng)的是(A花粉培養(yǎng)成單倍體植株B芽發(fā)育成枝條C根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū)D未受精的卵
10、細胞發(fā)育成個體3組織培養(yǎng)的理論依據(jù)是(A培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)全面B細胞的全能性C細胞的分裂D細胞的分化4愈傷組織細胞在一種包含所有必要物質(zhì)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)了幾個小時,此中一種化合物擁有放射性(氚標(biāo)記)。當(dāng)這些細胞被固定后鏡檢利用放射自顯影技術(shù)發(fā)現(xiàn)放射性物質(zhì)集中)于細胞核、線粒體和葉綠體。能夠必定標(biāo)記的化合物是()A一種氨基酸B尿嘧啶核苷酸C胸腺嘧啶脫氧核苷酸D葡萄糖5為獲取純合高蔓抗病番茄植株,采納了以下圖所示的方法:圖中兩對相對性狀獨立遺傳。據(jù)圖剖析,不正確的選項是A過程的自交代數(shù)越多,純合高蔓抗病植株的比率越高B過程能夠取任一植株的適合花藥作培養(yǎng)資料C過程包含脫分化和再分化兩個過程D圖中挑選過程
11、不改變抗病基因頻次6植物M與N有性雜交不親和,但科學(xué)家想法獲取了二者的雜栽種株??茖W(xué)家最可能使用的方法是()A將M嫁接到N上,或?qū)嫁接到M上利用植物體細胞雜交工程技術(shù)手段,培養(yǎng)成一個雜栽種株C將M的花粉授給N,再將所得種子培養(yǎng)成植株D將M和N的花粉分別進行離體培養(yǎng)獲取單倍體植株,將獲取的種子培養(yǎng)成植株再讓兩種單倍體植株互相授粉,7在不損害高等植物細胞內(nèi)部構(gòu)造的狀況下,以下哪一種物質(zhì)合適于除掉細胞壁()A蛋白酶B鹽酸C淀粉酶D纖維素酶和果膠酶8、在植物細胞工程中,當(dāng)原生質(zhì)體交融成一個細胞后,需要引誘產(chǎn)生細胞壁,參加這一過程的細胞器是()A、葉綠體、高爾基體C、葉綠體、線粒體B、線粒體、高爾基體
12、D、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)9植物體細胞雜交還沒有解決的問題有()去掉細胞壁,分別出有活力的原生質(zhì)體將雜種細胞培養(yǎng)成植株C讓雜栽種物依照人們的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)秀性狀還沒有培養(yǎng)出雜栽種物10、與傳統(tǒng)的有性雜交法對比,植物體細胞雜交的最大長處是()、可使兩個親本的優(yōu)秀性狀組合到一同、能夠戰(zhàn)勝遠緣雜交不親和的阻礙、能夠降低生成成本,提升救濟效益11植物體細胞雜交能解決不一樣栽種物之間因為生殖隔絕而不可以進行有性雜交的問題。植物體細胞雜交過程不波及()A使用限制性內(nèi)切酶B使用纖維素酶和果膠酶C引誘兩種不一樣的細胞交融D選擇利于雜種細胞分裂和分化的培養(yǎng)基12、由基因型為Aa植株的花粉和基因型為Bb植株的花粉,除
13、掉細胞壁后,進行原生質(zhì)體交融,能夠獲取多少種基因型不一樣的細胞(僅考慮兩個細胞交融)A、6種B、8種C、10種D、12種13、以下過程中,不發(fā)生細胞交融的是()A、植物體細胞雜交C、氧進入細胞中的線粒體B、受精過程D、制備單克隆抗體14、要將胡蘿卜韌皮部細胞培養(yǎng)成完好植株,不需要A、擁有完好細胞核的細胞B、離體狀態(tài)C、導(dǎo)入外源基因D、必定的營養(yǎng)物()質(zhì)和激素15、如圖為兩個種間植物細胞交融和重生植株表示圖。請據(jù)圖回答:(一八表示各主要步驟)(1)從步驟一到步驟二是植物細胞形成的階段,其重點是使用酶去掉。(2)從步驟二到步驟三一般要用作為促融劑。(3)步驟四為過程。(4)在形成重生植株的過程中與組織培養(yǎng)有相像之處的步驟是,原由是。(5)步驟八表示選擇體細胞雜栽種株,雜栽種株不單在形態(tài)上表現(xiàn)為在等方面發(fā)生了顯然的重組現(xiàn)象。16、以下圖為植物體細胞雜交過程表示圖,據(jù)圖回答:,并且(1)步驟是去掉,使植物細胞成為,最常用的方法是。(2)步驟一般常用的化學(xué)試劑是,目的是。(3)在利用雜種細胞培養(yǎng)成為雜栽
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