高二生物 微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù) 習(xí)題

1、1.2.2 微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)習(xí)題 一、單選題以下有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐的敘述中，不正確的是( )A. 在酵母菌的分離和培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，劃線后蓋好培養(yǎng)皿，再將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)B. 分離土壤中的纖維素分解菌，一般先進(jìn)行選擇培養(yǎng)，增大細(xì)菌濃度C. 在釀酒生產(chǎn)上，常向發(fā)酵罐中加少量尿素，其目的是作為氮源，用于酵母菌合成蛋白質(zhì)和核酸D. 不能用稀釋涂布平板法來測定土壤溶液中某活菌數(shù)目【答案】D【解析】A.在大腸桿菌的分離和培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，劃線后蓋好培養(yǎng)皿，再將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)，A正確；B.分離某種細(xì)菌，一般先用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)，增大細(xì)菌濃度，B正確；C.在釀酒生產(chǎn)上，常向發(fā)酵罐中加少量尿素，其目的是作為氮源，

2、用于酵母菌合成蛋白質(zhì)和核酸，C正確；D.可用稀釋涂布平板法來測定土壤溶液中某活菌數(shù)目，D錯誤。下列有關(guān)微生物分離、純化及計數(shù)的敘述，錯誤的是( )A. 常用富含纖維素的培養(yǎng)基富集培養(yǎng)纖維素分解菌B. 平板劃線法通過連續(xù)劃線將聚集的菌種分散并計數(shù)C. 稀釋涂布平板法通過系列梯度稀釋可將微生物分散D. 用血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)微生物時，實(shí)驗(yàn)結(jié)果往往比稀釋涂布平板法得到的結(jié)果偏大【答案】B【解析】纖維素是纖維素分解菌的碳源，因此常用富含纖維素的培養(yǎng)基富集培養(yǎng)纖維素分解菌；平板劃線法通過連續(xù)劃線將聚集的菌種分散，但不能用于微生物的計數(shù)；稀釋涂布平板法通過系列梯度稀釋可將微生物分散并計數(shù)；用血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)微

3、生物時，會將死的微生物計數(shù)在內(nèi)，因此導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果往往偏大。下列關(guān)于微生物分離和培養(yǎng)的敘述，不正確的是A. 微生物培養(yǎng)基中加入牛肉膏和蛋白胨可同時提供碳源和氮源B. 測定土壤樣品中的活菌數(shù)目，常在固體培養(yǎng)基上用平板劃線法接種C. 以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可用于分離得到能分解尿素的細(xì)菌D. 經(jīng)剛果紅染色的以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基可用于相關(guān)菌種鑒定【答案】B【解析】A.牛肉膏能提供碳源、氮源、磷酸鹽、維生素，蛋白胨提供的是碳源、氮源、生長因子，所以微生物培養(yǎng)基中加入牛肉膏和蛋白胨可以同時提供碳源和氮源，A正確；B.測定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目，常用稀釋涂布平板法，而不用平板劃線法 ，平板劃線法常用于微

4、生物的分離、提純，B錯誤；C.以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基可以分離得到能分解尿素的細(xì)菌，C正確；D.經(jīng)剛果紅染色的以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基可用于鑒定纖維素分解菌，D正確。下列有關(guān)微生物分離、純化及計數(shù)的敘述中，錯誤的是A. 常用富含纖維素的培養(yǎng)基富集培養(yǎng)纖維素分解菌B. 平板劃線法通過連續(xù)劃線將聚集的菌種分散并計數(shù)C. 稀釋涂布平板法通過系列梯度稀釋可將微生物分散D. 用血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)微生物時，實(shí)驗(yàn)結(jié)果往往偏大【答案】B【解析】A.纖維素是纖維素分解菌的碳源，因此常用富含纖維素的培養(yǎng)基富集培養(yǎng)纖維素分解菌，A正確；B.平板劃線法通過連續(xù)劃線將聚集的菌種分散，但不能用于微生物的計數(shù)，B錯誤；C

5、.稀釋涂布平板法通過系列梯度稀釋可將微生物分散并計數(shù)，C正確；D.用血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)微生物時，會將死的微生物計數(shù)在內(nèi)，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果往往偏大，D正確。下圖中甲是稀釋涂布平板法中的部分操作，乙是平板劃線法的操作結(jié)果。 下列敘述中錯誤的是 （ ）A. 甲中涂布前要將涂布器灼燒，冷卻后才能涂布菌液B. 對于濃度較高的菌液，如甲中的稀釋倍數(shù)僅為102，則所得的菌落不一定是由單一的細(xì)胞或孢子繁殖而成C. 乙培養(yǎng)皿中所得的菌落都是目的菌落，無需進(jìn)行進(jìn)一步的鑒定篩選D. 乙中的連續(xù)劃線的起點(diǎn)是上一次劃線的末端【答案】C【解析】A.甲中涂布前要將涂布器灼燒，冷卻后才能進(jìn)行涂布操作，否則會殺死菌種，A正確；B.對

6、于濃度較高的菌液，如甲中的稀釋倍數(shù)僅為102，則由于稀釋倍數(shù)不夠，所得菌落也有可能是多個菌連在一起，會導(dǎo)致所得的菌落不一定是由單一的細(xì)胞或孢子繁殖而成，B正確；C.乙中所得菌落不一定都是目的菌落，需要進(jìn)行進(jìn)一步的鑒定篩選，C錯誤；D.在劃線時，每次劃線應(yīng)該從上一次劃線的末端開始，D正確。下列有關(guān)微生物培養(yǎng)或純化的敘述，錯誤的是A. 微生物在培養(yǎng)前要先對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理再接種B. 培養(yǎng)液中溶氧量的變化會影響酵母菌的繁殖和代謝途徑C. 分離自養(yǎng)型微生物的方法是用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)D. 分離純化微生物的常用方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法【答案】C【解析】A.微生物在培養(yǎng)前要先對培

7、養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理再接種，防止其他微生物混入，A正確；B.酵母菌是兼性厭氧的，因此培養(yǎng)液中溶氧量的變化會影響酵母菌的繁殖和代謝途徑，B正確；C.用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基是用來分離纖維素分解菌的，分離自養(yǎng)型微生物要用不加有機(jī)碳源的培養(yǎng)基，C錯誤；D.分離純化微生物的常用方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，D正確。 下列關(guān)于微生物培養(yǎng)和利用的敘述，錯誤的是A. 接種前要了解固體培養(yǎng)基是否被污染可接種蒸餾水來培育檢測B. 接種時連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌體逐步稀釋獲得單個菌落C. 以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌D. 利用剛果紅培養(yǎng)基上是否形成透明圈可篩選纖維素分解菌【答案】A

8、【解析】A.檢測培養(yǎng)基被污染的方法是：將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生，A錯誤； B.接種換上的菌液經(jīng)過連續(xù)劃線，菌液中的菌體越來越少，最后容易形成單菌落，B正確； C.鑒定尿素分解菌培養(yǎng)基不是無氮，有唯一氮源尿素，尿素分解菌分解尿素形成了氨氣，氨氣會使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，用酚紅試劑即可鑒定出，C正確； D.當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，可通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌，D正確。下列有關(guān)微生物實(shí)驗(yàn)的敘述，不正確的是A. 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染B. 平板劃線法可用于微

9、生物的計數(shù)C. 分離不同的微生物要采用不同的稀釋度D. 觀察菌落的特征可以用來進(jìn)行菌種的鑒定【答案】B【解析】A.微生物培養(yǎng)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染，A正確；B.稀釋涂布平板法可用于微生物的計數(shù)，B錯誤；C.分離微生物時涂布接種需要對培養(yǎng)液進(jìn)行梯度稀釋，分離不同的微生物要采用不同的稀釋度，C正確；D.不同的微生物具有不同的菌落特征，觀察菌落的特征可以用來進(jìn)行菌種的鑒定，D正確。在自然環(huán)境中常常是多種微生物混雜在一起，要對其中的某種微生物進(jìn)行研究，就必需獲得其純化培養(yǎng)物，以排除其他微生物的干擾。下列關(guān)于微生物純化培養(yǎng)的敘述中，不正確的：A. 分離能分解尿素的細(xì)菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯

10、一的氮源B. 平板劃線法和稀釋涂布平板法是常用的兩種方法C. 分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度D. 平板劃線法可以采取連續(xù)劃線的方法使微生物均勻分布【答案】D尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能更好地被植物利用。下列有關(guān)土壤中尿素分解菌的分離和培養(yǎng)的敘述，正確的是（ ）A. 培養(yǎng)基中加入尿素作為唯一碳源，該培養(yǎng)基是鑒別培養(yǎng)基B. 測定土壤中分解尿素的細(xì)菌數(shù)量和測定土壤中其他細(xì)菌的數(shù)量可采用相同的稀釋度C. 細(xì)菌合成的脲酶能將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高D. 利用稀釋涂布平板法可以直接完成土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離計數(shù)和純化鑒定【答案】C【解析】A、培

11、養(yǎng)基中加入尿素作為唯一碳源，該培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，A錯誤；B、因?yàn)橥寥乐懈黝愇⑸锏臄?shù)量不同，故為獲得不同類型的微生物，要按不同的稀釋倍數(shù)進(jìn)行分離，B錯誤；C、細(xì)菌合成的脲酶能將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高，可加入酚紅指示劑進(jìn)行檢測，C正確；D、鑒定分解尿素的細(xì)菌應(yīng)該用加酚紅的鑒別培養(yǎng)基，D錯誤。如圖甲為纖維單胞菌（能產(chǎn)生纖維素酶）的獲取過程。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A. 培養(yǎng)基都應(yīng)以纖維素為唯一碳源B. 圖中所用培養(yǎng)基滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌C. 所用的接種方法可對培養(yǎng)的微生物進(jìn)行計數(shù)D. 可用剛果紅染料鑒定，看菌落周圍是否出現(xiàn)透明圈【答案】C【解析】A.要篩選纖維素酶

12、高產(chǎn)菌株，平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基和錐形瓶中的液體培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素作為唯一碳源，A正確；B.對培養(yǎng)基的滅菌利用的是高壓蒸汽滅菌法，對接種環(huán)采用火焰灼燒法進(jìn)行滅菌，B正確；C.圖采用的接種方法是平板劃線法，而對培養(yǎng)的微生物進(jìn)行計數(shù)采用稀釋涂布平板法，C錯誤；D.剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌，D正確。從某污水處理系統(tǒng)中分離出多種細(xì)菌，經(jīng)進(jìn)一步篩選獲得具有高效降低污水中有機(jī)污染物（COD為有機(jī)污染物分解時化學(xué)需氧量）能力的菌株，過程如圖所示。下列相關(guān)說法錯誤的是（ ）A. 牛肉

13、膏蛋白胨培養(yǎng)基可用高壓蒸汽滅菌法滅菌B. 為確定接種時菌液的最佳稀釋倍數(shù)可先用顯微鏡直接計數(shù)法統(tǒng)計菌液中的細(xì)菌數(shù)目C. 圖中平板劃線法獲得的菌落具有不同的菌落特征D. 挑取單菌落后接種到液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，目的是擴(kuò)大化培養(yǎng)菌株【答案】C【解析】A.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌，A正確；B.用顯微鏡直接計數(shù)法統(tǒng)計菌液中的細(xì)菌數(shù)目，可以幫助估算接種時的稀釋倍數(shù)，B正確；C.根據(jù)平板中菌落分布情況可以判斷接種采用的是稀釋涂布平板法，C錯誤；D.挑取單菌落后接種到液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)目的是擴(kuò)大化培養(yǎng)菌株，D正確。用稀釋涂布平板法測定微生物數(shù)量時，下列統(tǒng)計菌落數(shù)的方法，最合理的是：A. 培

14、養(yǎng)至有菌落出現(xiàn)時進(jìn)行統(tǒng)計并作為結(jié)果B. 培養(yǎng)至不再有新菌落出現(xiàn)時進(jìn)行統(tǒng)計并作為結(jié)果C. 培養(yǎng)后每隔一段時間統(tǒng)計一次，取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的數(shù)值作為結(jié)果D. 培養(yǎng)后每隔一段時間統(tǒng)計一次，取連續(xù)且最接近的三個數(shù)值的平均值作為結(jié)果【答案】C關(guān)于土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)實(shí)驗(yàn)的敘述，不正確的是A. 除活菌計數(shù)法外,顯微鏡直接計數(shù)也是測定微生物數(shù)量的常用方法B. 對土壤中分解尿素的細(xì)菌計數(shù)，應(yīng)直接對土壤溶液進(jìn)行稀釋涂布平板C. 選擇菌落數(shù)在30300間的所有平板進(jìn)行計數(shù)，以平均數(shù)為實(shí)驗(yàn)結(jié)果D. 應(yīng)該設(shè)置對照以排除非測試因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾，提高可信度【答案】C【解析】A.除活菌計數(shù)法外，顯微鏡直接計數(shù)

15、也是測定微生物數(shù)量的常用方法，A正確；B.對土壤中分解尿素的細(xì)菌計數(shù)，應(yīng)直接對土壤溶液進(jìn)行稀釋涂布平板，B正確；C.由于稀釋倍數(shù)不同，計算時不能簡單相加，應(yīng)乘上相應(yīng)稀釋倍數(shù)再取平均值，C錯誤；D.應(yīng)該設(shè)置對照以排除非測試因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾，提高可信度，D正確。如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計數(shù)”實(shí)驗(yàn)中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析正確的是（ ）A. 3號試管中的菌落稀釋倍數(shù)為103倍B. 4號中稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)得到的菌落平均數(shù)可能是5號的10倍C. 5號試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7107個D. 該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計得到的結(jié)果往往會比實(shí)際活菌數(shù)目要高【答案】B【解析】A.3號試管是稀釋

16、104倍，A錯誤；B.4號中稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)，稀釋倍數(shù)比5號的低10倍，如果稀釋倍數(shù)適當(dāng)，得到的菌落平均數(shù)可能是5號的10倍，B正確；C.5號試管進(jìn)行稀釋涂布平板法計數(shù)的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為（168+175+167）310610101.7108個，C錯誤；D.稀釋涂布平板得到的菌落可能存在兩個或多個細(xì)菌細(xì)胞長成一個菌落，使該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計得到的結(jié)果往往會比實(shí)際活菌數(shù)目要低，D錯誤。用紙片擴(kuò)散法測定某病原菌對各種抗生素敏感性的實(shí)驗(yàn)，是在某病原菌均勻分布的平板上，鋪設(shè)含有不同種抗生素的紙片后進(jìn)行培養(yǎng)。圖示為培養(yǎng)的結(jié)果，其中抑菌圈是在紙片周圍出現(xiàn)的透明區(qū)域。下列分析正確的是A. 在圖示固體培

17、養(yǎng)基上可用平板劃線法或涂布法接種病原菌B. 未出現(xiàn)抑菌圈可能是病原菌與抗生素接觸后發(fā)生抗性變異C. 形成的抑菌圈較小的原因可能是微生物對藥物較敏感D. 不同抗生素在平板上的擴(kuò)散速度不同會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響【答案】D【解析】A.據(jù)圖中菌落的分布狀況，在圖示固體培養(yǎng)基上采用的是涂布法接種病原菌，A錯誤；B.不是因?yàn)椴≡c抗生素接觸后發(fā)生抗性變異，變異是不定向的，在未與抗生素接觸之前，病原菌種群中就已經(jīng)存在有抗性變異個體，B錯誤；C.形成的抑菌圈較小的原因可能是微生物對藥物較不敏感，C錯誤；D.不同抗生素在平板上的擴(kuò)散速度不同會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響，D正確。下列是關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的

18、敘述，其中錯誤的是（ ）A. 用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B. 取10、104、105倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1mL，分別涂布于各組平板上C. 將實(shí)驗(yàn)組和對照組平板倒置，37恒溫培養(yǎng)2448小時D. 確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在30300的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計數(shù)【答案】B【解析】A.首先要進(jìn)行培養(yǎng)基的制備、用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板，A正確； B.培養(yǎng)細(xì)菌時，應(yīng)取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1mL，分別涂布于各組平板上，B錯誤；C.將實(shí)驗(yàn)組和對照組平板倒置，37恒溫培養(yǎng)2448小時，C正確；D.確定對照組無菌后，

19、選擇菌落數(shù)在30300的進(jìn)行計數(shù)，求平均值，再通過計算得出土壤中細(xì)菌總數(shù)，D正確。 下列屬于涂布分離法和劃線分離法共同點(diǎn)的是（）A. 接種工具需保存在70%酒精中B. 接種前需對菌液進(jìn)行不同濃度稀釋C. 可用于單菌落的分離D. 可以對樣液中的細(xì)菌進(jìn)行計數(shù)【答案】C【解析】A.接種環(huán)滅菌一般用灼燒法，A錯誤；B.涂布分離法接種前需配制不同濃度稀釋液，劃線分離法不需要，B錯誤；C.涂布分離法和劃線分離法都可用于單菌落的分離，C正確；D.劃線分離法不能用于計數(shù)活菌，只能用于分離菌種，涂布分離法可以用來計數(shù)活菌，D錯誤。二、識圖作答題下列是與細(xì)菌培養(yǎng)有關(guān)的問題，請回答：（1）細(xì)菌培養(yǎng)前需要制備培養(yǎng)基。

20、某培養(yǎng)基的配方有：NaNO3、KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、H2O，若此培養(yǎng)基用于培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌，則應(yīng)除去上述_成分，并加入_，以補(bǔ)充_源。（2）對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，通常采用的方法是_法。（ 3）下圖是利用_法進(jìn)行菌種接種，把聚集的菌種逐步_分散到培養(yǎng)基的表面。（4）若要測定某培養(yǎng)液中選定菌種的菌體數(shù)，既可在顯微鏡下用_直接計數(shù)，也可選用_法統(tǒng)計活菌數(shù)目，一般前者得到的結(jié)果 _（填“”、“=”或“【解析】（1）微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。題干所給的培養(yǎng)基配方中缺少碳源，氮源是NaNO3，若此培養(yǎng)基

21、用于培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌，則應(yīng)該使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，同時尿素分解菌屬于異養(yǎng)型生物，需加入葡萄糖作為碳源。（2）對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，通常采用的方法是高壓蒸汽滅菌法。（3）由圖可知，其采取的是平板劃線法，該方法能把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。（4）若要測定培養(yǎng)液中選定菌種的菌體數(shù)，既可在顯微鏡下用血細(xì)胞計數(shù)板直接計數(shù)，也可選用稀釋涂布平板法統(tǒng)計活菌數(shù)目。前者計數(shù)包括培養(yǎng)液中的死亡的細(xì)胞，后者是活菌計數(shù)，且菌落可能是由2個或多個細(xì)胞形成，所以前者得到的結(jié)果偏大。酵母的蛋白質(zhì)含量可達(dá)自身干重的一半，可作為飼料蛋白的來源。有些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進(jìn)行培養(yǎng)，這樣既可減少污染又可降低生產(chǎn)成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類酵母，并進(jìn)行大量培養(yǎng)。下圖所示為操作流程，請回答下列問題： （1）配制培養(yǎng)基時，按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱量各組分，將其溶解、定容后，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的_，及時對培養(yǎng)基進(jìn)行分裝，并進(jìn)行溫度為_的 _滅